细胞产品种类
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实验室常用细胞株简介说明:以上数据来源于ATCC,建议使用以上推荐的培养基。
如果不使用相应的培养基会产生几方面的后果:1.细胞营养不良影响细胞生长;2.细胞分化导致的基因表达变化;3.细胞休克、死亡;无菌操作基本技术1、实验进行前,无菌室及无菌操作台(laminar flow) 以紫外灯照射30-60 分钟灭菌,以70%ethanol 擦拭无菌操作抬面,并开启无菌操作台风扇运转10 分钟后,才开始实验操作。
每次操作只处理一株细胞株,且即使培养基相同亦不共享培养基,以避免失误混淆或细胞间污染。
实验完毕后,将实验物品带出工作台,以70 % ethanol 擦拭无菌操作抬面。
操作间隔应让无菌操作台运转10 分钟以上后,再进行下一个细胞株之操作。
2、无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞,必要物品,例如试管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暂时放置,其它实验用品用完即应移出,以利于气流之流通。
实验用品以70 % ethanol 擦拭后才带入无菌操作台内。
实验操作应在抬面之中央无菌区域,勿在边缘之非无菌区域操作。
3、小心取用无菌之实验物品,避免造成污染。
勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口,亦不要在打开之容器正上方操作实验。
容器打开后,以手夹住瓶盖并握住瓶身,倾斜约45°角取用,尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。
4、工作人员应注意自身之安全,须穿戴实验衣及手套后才进行实验。
对于来自人类或是病毒感染之细胞株应特别小心操作,并选择适当等级之无菌操作台(至少Class II)。
操作过程中,应避免引起aerosol 之产生,小心毒性药品,例如DMSO 及TPA 等,并避免尖锐针头之伤害等。
5、定期检测下列项目:5.1 CO2 钢瓶之CO2 压力5.2 CO2 培养箱之CO2 浓度、温度、及水盘是否有污染(水盘的水用无菌水,每周更换)。
5.3 无菌操作台内之airflow 压力,定期更换紫外线灯管及HEPA 过滤膜,预滤网(300小时/预滤网,3000 小时/HEPA)。
基因治疗产品的分类
1、干扰素类:干扰素是一类糖蛋白,具有高度的种属特异性,还具有抗病毒、抑制细胞增殖、调节免疫,以及抗肿瘤作用;
2、白细胞介素类:白细胞介素是指在白细胞或免疫细胞间相互作用的淋巴因子,它和血细胞生长因子同属细胞因子。
两者相互协调,相互作用,共同完成造血和免疫调节功能;
3、促红细胞生成素:促红细胞生成素是一种人体内源性糖蛋白激素,可刺激红细胞生成。
用于治疗肾功能不全合并的贫血、获得性免疫缺陷综合征或治疗引起的贫血、恶性肿瘤伴发的贫血及风湿病贫血等多种贫血;
4、碱性成纤维细胞生长因子:碱性成纤维细胞生长因子可以由内皮细胞、平滑肌细胞、巨噬细胞分泌。
能够促进内皮细胞的游走和平滑肌细胞的增殖,还能够促进新血管形成、修复损害的内皮细胞。
基础细胞培养基通常指基础合成培养基,主要成分为氨基酸、维生素、碳水化合物、无机盐、辅助物质(核酸降解物、氧化还原剂等)。
据不同细胞和研究目的,选用合适培养基,•还可补加新成分。
•如杂交瘤中常用DMEM加丙酮酸钠、2-巯基乙醇(相当于胎牛血清可透析组分的作用)。
合成培养基使用时加5-30%血清。
1. 199细胞培养基及其改良品种1950年Morgan等设计,除BSS外,含有53种成分,为全面培养基,广用于各类细胞培养,广泛用于病毒学、疫苗生产。
2. BME细胞培养基基础Eagle培养基(Basal Medium Eagle),1955年Eagle设计,BSS+12种氨基酸+谷氨酰胺+8种维生素。
简单、便于添加,适于各种传代细胞系和特殊研究用,在此基础上改良的细胞培养基品种有MEM、DMEM、IMEM等。
3. MEM细胞培养基低限量Eagle培养基(Minimal Essential Medium),1959年修改,删去赖氨酸、生物素,氨基酸浓度增加,适合多种细胞单层生长,有可高压灭菌品种,是一种最基本、试用范围最广的培养基,但因其营养成分所限,针对生产之特定细胞培养与表达时,并不一定是使用效果最佳或者最经济的培养基。
4. DMEM细胞培养基及其改良品种DMEM由Dulbecco改良的Eagle培养基,各成份量加倍,分低糖(1000mg/L)、高糖(4500mg/L)。
生长快,附着稍差肿瘤细胞、克隆培养用高糖效果较好,常用杂交瘤的骨髓瘤细胞和DNA转染的转化细胞培养。
例如CHO细胞表达生产乙肝疫苗、CHO细胞表达EPO。
5. IMEM细胞培养基IMEM由Iscove's改良的Eagle培养基,增加了几种氨基酸和胱氨酸量。
6. RPMI-1640细胞培养基Moore等人于1967年在Roswell Park Memorial Institute研制,针对淋巴细胞培养设计,BSS+21种氨基酸+维生素11种等,广泛适于许多种正常细胞和肿瘤细胞,也用做悬浮细胞培养7.Fischer’s细胞培养基用于白血病微粒细胞培养。
派真生物HEK-293T/ACE2 细胞稳转株使用说明书HEK-293T/ACE2 细胞稳转株HEK-293T/ACE2 细胞稳转株ACE2即血管紧张素转化酶II(Angiotensin-converting enzyme2)是一种Ⅰ型膜蛋白,其包括一个N端肽酶结构域( peptidasedomain,PD)和一个C端 Collectrin样结构域(Collectrin-ikedomain,CLD)。
ACE2的PD为冠状病毒的S蛋白提供了直接结合位点。
冠状病毒因其病毒脂质层外由棘突蛋白) spike protein,S蛋白)构成的冠状突起而得名。
冠状病毒通过S蛋白与靶细胞表面特定受体结合,然后进入细胞复制并引起宿主感染。
冠状病毒的S蛋白包含S1及S2两个亚单位,其中S1包含受体结合域(RBD),RBD直接与血管紧张素转换酶2(ACE2)结合,S2负责与宿主细胞膜融合。
当S1与宿主受体ACE2结合时,S2上的裂解位点暴露并被宿主蛋白酶切断,此过程对于病毒感染十分重要。
本细胞系是将ACE2过表达慢病毒感染293T细胞并筛选得到的稳定株。
HEK-293T/ACE2 细胞稳转株产品描述产品名称:中文名称:包装规格:特性蛋白:HEK-293T/ACE2过表达人源 ACE2 的人肾上皮细胞2管(细胞数1E+7个/管)过表达人的血管紧张素转化酶 2 蛋白(ACE2)建议第一次 1:2 传代。
2 天换液10%DMSO +90%完全培养基Puro 嘌呤抗性传代方法: 传代情况:冻存条件:备 注:检测报告:提供感染滴度数据、293T /hACE2感染图片或荧光素酶表达量结果派真生物复苏细胞:将含有2mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入 5mL 培养基混合均匀。
在 1000rpm 条件下离心 5 分钟,弃去上清液,补加 4-6mL 完全培养基后吹匀。
然后将所有细胞悬液加入 10cm 皿中培养过夜,培养过夜。
细胞培养基种类及用途1. DMEM(Dulbecco's Modified Eagle Medium):DMEM 是最常用的无血清培养基之一,是以鹰的鸟胚为基础改进而来的,含有大量氨基酸、糖类、维生素和一些重要的生长因子。
适用于大多数哺乳动物细胞的培养,具有优良的细胞增殖和生长效果。
2.RPMI1640:RPMI1640是一种由罗斯韦尔公立医院制备的细胞培养基,主要用于淋巴细胞、淋巴瘤和骨髓细胞的培养。
它具有高浓度的氨基酸和维生素,适合长期的培养以及体外细胞繁殖实验。
3. MEM(Minimum Essential Medium):MEM 是一种最简单的细胞培养基,含有大量的必需氨基酸、维生素和果糖。
它广泛用于原代细胞和肿瘤细胞的培养,具有适应性强、成本低的优势。
4. FBS(Fetal Bovine Serum):FBS 不是一种细胞培养基,而是培养基中添加的血清。
FBS 富含细胞生长因子、激素和营养物质,可提供所需的细胞补体和血浆蛋白。
它被广泛用于细胞培养中,可以促进细胞的增殖和生长。
5. StemPro MSC SFM:StemPro MSC SFM 是一种专门设计用于人类间充质干细胞(MSC)培养的无血清培养基。
它富含生长因子和维生素,可以维持 MSC 的干性状态,有利于其增殖和多向分化。
6. Neurobasal medium:Neurobasal 是一种特殊的神经元细胞培养基,用于神经元细胞的培养。
它含有许多神经营养因子和激素,能够促进神经细胞的生长和分化。
7.DMEM/F12:DMEM/F12是一种混合型细胞培养基,是DMEM和HAMF12培养基的混合产物。
它具有增强细胞的生存能力和增殖速度的优势,适用于许多类型的肿瘤细胞和原代细胞的培养。
细胞培养基的选择要根据具体实验目的和细胞类型来确定。
不同种类的细胞培养基在细胞生长、增殖和分化方面有不同的影响,因此合理的选择细胞培养基可以提高实验效果和数据可靠性。
生物制品的种类生物制品是指利用生物技术和生物材料生产的各种产品。
生物制品的种类繁多,涵盖了医药、食品、化妆品、农业等多个领域。
下面将逐一介绍几种常见的生物制品。
一、生物制药品生物制药品是指利用生物技术生产的药品,主要包括蛋白质药物、基因工程药物和细胞疗法药物。
蛋白质药物是通过利用基因重组技术生产的,如重组人胰岛素、重组人生长激素等。
基因工程药物是通过改造和转移基因,使其在细胞内表达出具有治疗作用的蛋白质,如基因工程抗体药物。
细胞疗法药物是通过利用细胞培养和修复技术,将修复后的细胞注射到患者体内进行治疗,如干细胞治疗。
二、生物工程食品生物工程食品是指利用生物技术改良和改造食物的生产过程,以提高食物的品质、营养价值和安全性。
常见的生物工程食品有转基因农产品、生物酶制剂和发酵食品等。
转基因农产品是通过转基因技术将外源基因导入农作物中,使其具有抗虫、抗病、耐逆性等特点,如转基因大豆、转基因玉米等。
生物酶制剂是通过利用微生物制备的酶来加工和改良食品,如纺织品酶、乳品酶等。
发酵食品是利用微生物发酵过程来生产的食品,如酸奶、豆豉等。
三、生物材料生物材料是指利用生物技术生产的用于医疗、工业和环境等领域的材料。
常见的生物材料有生物降解材料、生物粘合剂和生物传感器等。
生物降解材料是指能够在生物环境中降解和吸收的材料,如生物降解塑料、生物降解支架等。
生物粘合剂是利用生物体内的物质制备的粘合剂,具有良好的生物相容性和可降解性,如生物胶水、生物缝合线等。
生物传感器是利用生物体内的生物分子和生物反应来检测和测量生物体内的各种成分和参数,如血糖仪、DNA测序仪等。
四、生物化妆品生物化妆品是指利用天然植物提取物、微生物发酵产物等生物材料制造的化妆品。
生物化妆品以其安全、天然、有效的特点受到越来越多的关注和青睐。
常见的生物化妆品有植物精华液、微生物发酵产物、天然色素等。
植物精华液是通过提取植物的有效成分制成的化妆品,如芦荟胶、薰衣草精油等。
Meilun Cell Counting Kit-8细胞增殖及毒性检测试剂盒(CCK-8),增强型产品编号:MA0218规格:100T/ 500T/ 10000T/ 1000T/ 5000T产品内容产品简介Cell Counting Kit-8(简称CCK-8),是一种基于WST-8而广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速、高灵敏度检测的试剂盒。
CCK-8试剂中含有WST-8(化学名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐)是一种类似于MTT 的化合物,它在电子耦合试剂1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯(1-Methoxy PMS )存在条件下,可以被线粒体内的脱氢酶还原为具有高度水溶性的橙黄色甲瓒产物Formazan (参考图1),生成的Formazan 数量与活细胞的数量成正比。
因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析,细胞增殖越多越快,则颜色越深;细胞毒性越大,则颜色越浅。
图1. CCK-8检测原理图 (EC=electron coupling reagent ,即电子耦合试剂)CCK-8与以往的增殖/毒性测定试剂相比,具有明显优点(参考表1)。
美仑CCK-8试剂盒具有灵敏度高、反应时间短、线性范围宽、数据可靠、重现性好等特点,可以广泛应用于药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验。
CCK-8增强型溶液 1 ml 5 ml 10 ml×10 10 ml×1 5 ml ×10说明书1 份1 份1 份1 份1 份表1. 增殖/毒性测定试剂的比较MTT法XTT法WST-1法CCK-8法甲瓒产物的水溶性差(需加有机溶剂溶解)好好好检测灵敏度高很高很高最高检测时间较长较短较短最短检测波长560-600nm 420-480nm 420-480nm 430-490nm细胞毒性高,细胞形态完全消失很低,细胞形态不变很低,细胞形态不变很低,细胞形态不变试剂稳定性一般较差一般很好批量样品检测可以非常适合非常适合非常适合便捷程度一般便捷便捷非常便捷操作步骤制作标准曲线(测定细胞具体数量时)1. 制备细胞悬液:细胞计数。
鲜活细胞产品介绍西安瀚得生物科技公司尼汉斯医生的学生——齐格弗里德·布洛克博士(Siegfried Block),他跟随尼汉斯夫妇学习多年,并于50年前在德国上巴伐利亚创建了世界第一家鲜活细胞研究中心——布洛克鲜活细胞研究中心[⑴注],开始应用他的鲜活细胞疗法。
最初他研究脱水细胞和冷冻细胞多年,也就是现在瑞士流行的羊胎素,但是尼汉斯教授鼓励他使用自己独创的鲜活细胞疗法,多年来布洛克博士对这一疗法不断进行完善,出版著作多达十六部。
随着技术的成熟和科技的高速发展,而今德国布洛克鲜活细胞研究中心承继并超越了瑞士传统细胞疗法,研制提炼出的全器官活性细胞是目前最为尖端有效的活性细胞治疗产品,可以使得人体各部分器官得到全面修复,而不是只针对某个身体机能的提升。
在布洛克博士将研究中心交给他的女儿佩特拉之前的许多年里,他一直是女儿严厉的导师。
在布洛克博士去世之后佩特拉一直成为中心的主治医师,时至今日,德国鲜活细胞的提取技术仍是德国的国家机密,德国也是世界上唯一经批准开展鲜活细胞疗法的国家。
德国是世界上公认医疗科技,医疗设备最好的国家,这跟德国人严谨的态度与对品质的追求不无关系。
同时德国也是世界上唯一批准可以开展鲜活细胞疗法的国家,也是当今唯一继承了保罗尼汉斯医生鲜活细胞提取技术的国家。
鲜活细胞疗法是一项技术含量极高的疗法。
必须保证供体羊群的品质与绝对健康,还必须保证鲜活细胞提取后120分钟之内注射进体内。
在德国,对兽医的监管,羊群的检测及实验室的监控均有非常严格的规范与条例。
所使用的羊胚胎鲜活细胞来源于一种从生长在海拔4000米以上的经过近百年纯种繁殖的阿尔卑斯高山杂色黑山羊母体内约3—4月左右的胚胎羊,这种杂色黑山羊,体格健壮、免疫力极强,基因纯种性更好,生物活性更高,而且采用的是全封闭性养殖,养殖地点位于完全无污染,空气质量近乎完美的德国阿尔卑斯山脉国家自然保护区,羊群不与外界接触,从而保证了它的纯正及安全性。
细胞程序性坏死诱导试剂盒(TSZ 法)产品编号 产品名称包装 C1058S 细胞程序性坏死诱导试剂盒(TSZ 法) 100次 C1058M细胞程序性坏死诱导试剂盒(TSZ 法)500次产品简介:细胞程序性坏死诱导试剂盒(TSZ 法) (Necroptosis Inducer Kit with TSZ)是由TNF-α、SM-164和Z-V AD-FMK (简称TSZ)按一定的比例混合而成,可以非常有效地诱导细胞程序性坏死。
本产品可以非常有效地诱导L-929、HT-29等细胞的程序性坏死。
使用本产品诱导L-929细胞程序性坏死的效果图参考图1。
图1. 本产品诱导L-929细胞程序性坏死的效果图。
本产品处理L-929细胞4-5小时,并用碧云天的Annexin V-FITC 细胞凋亡检测试剂盒(C1062)进行凋亡和坏死检测。
绿色荧光为Annexin V-FITC 染色,是凋亡或坏死阳性细胞;红色荧光是PI 染色,是坏死阳性细胞;绿色荧光和红色荧光重叠的是坏死细胞;仅绿色荧光的是凋亡细胞。
细胞死亡包括凋亡(apoptosis)、坏死(necrosis)、焦亡(pyroptosis)等多种形式。
其中受调控的细胞死亡被称为程序性细胞死亡(programmed cell death, PCD),而不受调控的细胞死亡被称为坏死。
程序性细胞死亡包括凋亡、细胞程序性坏死(programmed necrosis)或坏死性凋亡(necroptosis)和焦亡等。
细胞凋亡是生物体发育等生命过程中普遍存在的、由基因决定的细胞主动有序的死亡方式。
当细胞遇到内、外环境因子刺激时,启动基因调控的自杀保护措施,去除体内非必需细胞或即将发生特化的细胞。
在这一过程中,细胞脱落离体或裂解为若干凋亡小体,并迅速被巨噬细胞或邻近细胞清除,不会导致炎症反应,这是一种由基因控制、高度有序的细胞自主死亡,包含一系列信号事件组成的通路。
细胞凋亡的主要特征包括细胞膜保持完整、细胞膜磷脂酰丝氨酸外翻(Annexin V 染色阳性)、基因组DNA 片段化(DNA fragmentation)(即产生DNA ladder 并且TUNEL 染色阳性)、电镜或荧光染色时细胞核碎裂或致密浓染、Caspase 3等激活、线粒体膜电位下降、细胞色素c 从线粒体内释放等。
细胞产品种类
细胞产品种类繁多,涵盖了生活各个方面。
下面将介绍一些常见的细胞产品种类,以及它们在科研、医疗、美容等领域的应用。
1.干细胞产品:干细胞是一种具有自我更新和分化潜能的细胞,可以分化成各种类型的细胞。
干细胞产品主要包括干细胞制剂、干细胞培养液等。
它们在组织工程、再生医学、疾病治疗等领域有广泛应用,如干细胞治疗、组织工程皮肤等。
2.免疫细胞产品:免疫细胞是人体防御系统的重要组成部分,可以识别和清除病原体。
免疫细胞产品包括免疫细胞制剂、免疫调节药物等。
它们在生物制品、疫苗、免疫治疗等领域具有重要应用,如CAR-T细胞疗法、癌症免疫疗法等。
3.基因细胞产品:基因细胞产品主要涉及基因检测、基因编辑、基因治疗等技术。
这类产品包括基因检测试剂、CRISPR-Cas9编辑系统等。
基因细胞产品在遗传病治疗、基因编辑技术、精准医疗等领域有广泛应用,如遗传病基因治疗、癌症基因组学检测等。
4.生物制品:生物制品是由生物细胞或其分泌物制备的一类制品,包括抗体药物、细胞因子、酶类等。
生物制品在医药、疫苗、生物治疗等领域具有重要应用,如抗体药物疗法、重组人干扰素α治疗等。
5.细胞培养产品:细胞培养是生物学研究中不可或缺的实验技术。
细胞培养产品包括培养基、血清、细胞房设备等。
它们在细胞生物学、分子生物学、生物制品研发等领域有广泛应用,如细胞培养技术、细
胞筛选等。
6.美容护肤产品:细胞美容护肤产品利用细胞生物学原理,旨在改善皮肤细胞状态,延缓衰老。
这类产品包括细胞精华、干细胞护肤品等。
它们在皮肤护理、抗衰老等领域有广泛应用,如干细胞护肤、皮肤年轻化等。
7.生物传感器:生物传感器是一种利用生物细胞或其代谢产物作为识别元件的传感器。
生物传感器产品包括酶传感器、免疫传感器等。
它们在医疗、环境监测、食品安全等领域具有重要应用,如血糖监测、毒素检测等。
8.组织工程产品:组织工程是一种利用生物材料、细胞和生物因子构建组织或器官的技术。
组织工程产品包括生物材料、细胞因子、组织支架等。
它们在再生医学、器官移植等领域有广泛应用,如人工皮肤、生物支架等。
总之,细胞产品种类繁多,应用领域广泛。
随着科学技术的不断发展,未来细胞产品在科研、医疗、美容等领域的应用将更加广泛,为人类生活带来更多便利和福祉。