网织红细胞检测进展及其临床应用
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网织红细胞报告引言网织红细胞(reticulocyte)是指还保留有核的红细胞前体细胞,其通过骨髓释放入循环中,并最终成熟为无核的红细胞。
网织红细胞反映了人体红细胞的再生能力和骨髓功能的活跃程度。
本文将介绍网织红细胞的意义、影响因素以及相关的检测方法。
网织红细胞的意义网织红细胞作为红细胞再生的指标,可以用来评估人体骨髓功能和红细胞的更新速度。
正常情况下,网织红细胞的百分比是很低的,但在某些疾病状态下,这个比例会显著增加。
因此,通过检测网织红细胞的比例,可以评估红细胞再生的活跃程度,进而判断疾病的类型和程度。
影响网织红细胞比例的因素1. 缺铁性贫血缺铁性贫血是指机体缺乏足够的铁元素,导致红细胞无法正常合成血红蛋白的一种贫血类型。
在这种情况下,骨髓会释放更多的网织红细胞来进行红细胞的再生,以弥补缺铁造成的红细胞数量减少的情况。
因此,在缺铁性贫血患者中,网织红细胞比例往往会显著增加。
2. 贫血贫血是指血液中红细胞数量减少或者红细胞功能异常,无法满足组织需氧的状态。
在贫血患者中,由于红细胞的量减少,骨髓会增加网织红细胞的合成和释放,以弥补红细胞的减少。
因此,贫血患者的网织红细胞比例也会显著增加。
3. 血液失血大量的血液失血会导致红细胞数量急剧减少,进而刺激骨髓释放更多的网织红细胞来进行红细胞再生。
因此,在血液失血的情况下,网织红细胞比例也会升高。
4. 骨髓异常骨髓异常可以导致红细胞生成障碍,进而影响网织红细胞的生成和释放。
例如,骨髓增生异常综合症(MDS)等疾病可以导致网织红细胞比例明显增加。
网织红细胞的检测方法网织红细胞的检测可以通过流式细胞仪或者显微镜等方法进行。
以下是常用的流式细胞仪的检测步骤:1.准备血液样本:采集适量的静脉血,将血液样本放入抗凝剂处理。
2.处理血液样本:将血液样本进行稀释处理,使白细胞和红细胞分散均匀。
3.流式细胞仪检测:将样本放入流式细胞仪中进行检测。
流式细胞仪通过使用荧光染料或抗体标记网织红细胞,以便于识别和计数。
网织红细胞极其相关参数的临床应用网织红细胞参数缩写及参考范围RET%:网织红细胞比率0.57--2.07% RET#:网织红细胞绝对值22.4--93.5 109/LLFR:低荧光网织红细胞87.8--98.6% MFR:中荧光网织红细胞1.8--12.5% HFR:高荧光网织红细胞1.8--12.5% IRF:未成熟网织红细胞0--2.4%网织红细胞是晚幼红细胞脱核后到完全成熟红细胞间的过渡细胞,是反映骨髓造血功能的重要指标。
采用血液分析仪,流式细胞法对RET进行分类计数,可将RET分成LFR、MFR、和HFR,荧光越高,表示网织红细胞含核酸越多,细胞也就越幼稚;IRF为MFR和HFR之和,表示幼稚细胞占总RET的百分比。
RET及其各参数的临床意义可大致归纳如下:一、新生儿相关疾病的网织红水平RET被视为EPO(促红细胞生成素)功能活跃的反应,新生儿RET增多被作为溶血性疾病、出血和缺氧的指针;对早产儿贫血恢复进程的预测和输血血型不合的评估都是一个有价值的指标。
HFR对EPO功能而言比网织红细胞计数更实用二、再生障碍性贫血时网织红细胞急性再障:Hb下降较快,RET <1%,RET绝对值< 15x109 /L,WBC中性粒细胞绝对值< 0.5 x109 /L,PLT常< 10 x109/L。
慢性再障:骨髓造血障碍所致,Hb下降较缓慢,RET、WBC与WBC中性粒细胞绝对值和PLT较急性再障时高。
再生障碍危象时:Hb、RBC、HCT明显减少,Hb常低至20-30g/L,网织红细胞急剧下降或为“0”。
纯红细胞再障碍:贫血呈正细胞性,网织红细胞显著减少(<0.1%)或缺如。
白细胞和血小板正常。
三、缺铁性贫血时网织红细胞RET大多正常或轻度增高,,服用铁剂后一周左右RET可迅速增高(2--8%)。
四、巨幼细胞贫血时网织红细胞RET#减少,相对值正常或轻度增高,服用维生素B12、叶酸后可明显增高。
第27卷第2期2009年4月实验与检验医学EXPERIMENTALANDLABOR.ATORYMEDICINE・157.V01.27No.2Feb.2009网织红细胞质控品研究进展・综述・章海斌,综述王小中2李静3审校(I、南昌大学医学院2005级医学检验一班;2、南昌大学第二附属医院检验科;3、南昌大学第一附属医院检验科330006)中图分类号R446.11+1文献标识码C文章编号1674—1129(2009)02-0157-03'[)面迂巫圣窆鱼凹!篮西碧至Ⅱ垫:2鲤亟豳耍口1概述网织红细胞(reticulocyte,Ret。
RET)是幼稚的红细胞,南骨髓中有核红细胞脱去细胞核形成.大约3d后被释放入血液,并进一步通过降解、自噬、胞吐等复杂机制丢失核糖体、线粒体等细胞器和膜脂、部分血红蛋白、水等成分而获得典型的双凹圆盘状形态,成为成熟红细胞。
这一成熟过程不但能在活体血液内完成,在离体抗凝状态下同样可以进行fⅧ。
1865年Wilhelm在贫血患者的血片上发现红细胞中的这种颗粒.而后由Erhich用亚甲蓝对血液进行活体染色,建立了网织红细胞活体染色和显微镜检查法[41。
经过一个多世纪的发展.今天发达国家已开发出多种网织红细胞的自动分析技术和相应的仪器、试剂等。
这些方法具有分析速度快、效率高.精确度高、自动化程度高等特点.但是价格十分昂贵。
近年来,随着我国经济水平的提高.国内一些大中型的医院先后引进了这些先进的技术.并且通过实验证实,与过去的手工法比较.采用自动分析技术测定网织红细胞具有重复性好,准确性高.操作简便、快捷.提供的参数多。
可大批量快速测定的优点【5.q。
目前我国临床上常用的网织红细胞分析方法有:普通光学显微镜法、流式细胞仪法、专用网织红细胞分析仪法、血液细胞分析仪法,其中有网织红细胞分析功能的血液分析仪主要有应用VCS技术分析网织红细胞的Beckman—Coulter公司产品.采用细胞流式原理和细胞化学染色技术的Sysmex公司产品.应用多角度偏振光散射分析技术(MAPSS)I均Abbott公司产品和美国Bayer公司系列产品和法国ABX公司产品。
网织红细胞(Ret)检测的重要性血常规检测是基础的临床化验检查之一,但通过化验血常规可以检查出很多问题。
网织红细胞(Ret)是没有完全成熟的红細胞,其胞质内含有嗜碱性的RNA物质,经化学染色剂染色后呈浅蓝色或深蓝色网状结构,并因此得名。
网织红细胞的检测,其结果可用于监测骨髓新生红细胞内血红蛋白的生成情况,从而为临床诊断提供更有价值的诊断依据。
本文重点从网织红细胞(Ret)检测对诊断贫血、应用于临床化疗以及反映骨髓造血功能等三个方面展开阐述,旨在为网织红细胞(Ret)检测对提高临床应用价值提供参考。
1.开展网织红细胞(Ret)检测的临床意义网织红细胞(Ret)及其相关参数是反映骨髓造血功能的重要指标,在临床诊断价值方面,其灵敏度、特异性要优于传统的红细胞与白细胞计数,有较高的研究价值。
具体来说(1)网织红细胞(Ret)增高:提示骨髓造血功能旺盛。
见于各类增生性贫血,溶血性贫血尤为显著;(2)网织红细胞(Ret)减少:见于非增生性贫血(如铁、铜、维生素B6、维生素B12缺乏),慢性病性贫血(如慢性炎症、恶性肿瘤、慢性肾衰竭、再生障碍性贫血),急性白血病和纯红细胞再生障碍;(3)鉴别贫血;如缺铁引起的小细胞性贫血,缺维生素B12和叶酸引起的大细胞性贫血等。
2.网织红细胞(Ret)检测反映骨髓造血功能的应用网织红细胞(Ret)作为反映人体骨髓造血功能与红细胞生成活力敏感指标,自该技术诞生以来,随着计数手段的持续改进,其临床应用价值日益凸显。
实践检测中,激光技术能够在不同测量通道内同时检测数十项参数。
网织红细胞(Ret)经碱性槐黄染色后,通过流式细胞技术加以检测分析,明确网织红细胞(Ret)数目、比率、分类。
网织红细胞(Ret)最初应用于对血液系统肿瘤患者的外周血细胞监测,提出幼稚网织红细胞(Ret)变化是骨髓受抑与逐渐恢复敏感指标;近二十年前,我国开始应用自动化检测仪对外周血动态监测。
实践中,意识监测病人的骨髓功能,重点是监测其各血细胞值是否降低正常值或上升到正常值。
一、实训背景网织红细胞是红细胞前体,其计数对于评估骨髓造血功能和红细胞生成情况具有重要意义。
本实训旨在通过学习网织红细胞计数的操作方法,掌握其计数原理和注意事项,提高对血液学检验的认识和技能。
二、实训目的1. 了解网织红细胞计数的基本原理和操作方法。
2. 掌握显微镜下观察和计数网织红细胞的技术。
3. 学会分析网织红细胞计数结果,并应用于临床实践。
三、实训内容1. 网织红细胞计数原理网织红细胞计数是通过染色技术将网织红细胞与成熟红细胞区分开来,然后进行计数。
常用的染色剂有煌焦油蓝、新亚甲蓝等。
染色后,网织红细胞呈现蓝绿色网状或点粒状物质,而成熟红细胞则呈红色。
2. 网织红细胞计数操作方法(1)制备血涂片:取新鲜血液2滴,加入10g/L煌焦油蓝生理盐水溶液2滴,立即混匀,置37℃下15~20分钟。
(2)制片:取1小滴制成薄血涂片,自然干燥。
(3)染色:将染好的血涂片放入染色缸中,用染液染色5~10分钟。
(4)观察:在低倍镜下选择红细胞分布均匀的部位进行观察。
(5)计数:在油镜下计数至少1000个红细胞中的网织红细胞数。
(6)计算:网织红细胞分数 = 计数的网织红细胞数 / 1000网织红细胞绝对值 = 红细胞数× 10^12 / L × 网织红细胞分数3. 注意事项(1)染色时间要适中,过长或过短都会影响计数结果。
(2)观察时要选择红细胞分布均匀的部位,避免计数误差。
(3)计数时要仔细区分网织红细胞与HbH包涵体。
(4)计算时要确保数值准确。
四、实训结果与分析本次实训,我们按照操作步骤进行了网织红细胞计数,并计算出网织红细胞分数和绝对值。
通过对计数结果的分析,我们了解到患者的骨髓造血功能和红细胞生成情况。
五、实训总结通过本次实训,我们掌握了网织红细胞计数的操作方法,了解了其计数原理和注意事项。
同时,我们也认识到,在实际操作中,要严格按照操作步骤进行,确保计数结果的准确性。
此外,我们还学习了如何分析计数结果,并将其应用于临床实践。
网织红细胞极其相关参数的临床应用网织红细胞参数缩写及参考范围RET%:网织红细胞比率0.57--2.07% RET#:网织红细胞绝对值22.4--93.5 109/LLFR:低荧光网织红细胞87.8--98.6% MFR:中荧光网织红细胞1.8--12.5%HFR:高荧光网织红细胞 1.8--12.5% IRF:未成熟网织红细胞0--2.4%网织红细胞是晚幼红细胞脱核后到完全成熟红细胞间的过渡细胞,是反映骨髓造血功能的重要指标。
采用血液分析仪,流式细胞法对RET 进行分类计数,可将RET分成LFR、MFR、和HFR,荧光越高,表示网织红细胞含核酸越多,细胞也就越幼稚;IRF为MFR和HFR之和,表示幼稚细胞占总RET的百分比。
RET及其各参数的临床意义可大致归纳如下:一、新生儿相关疾病的网织红水平RET被视为EPO(促红细胞生成素)功能活跃的反应,新生儿RET 增多被作为溶血性疾病、出血和缺氧的指针;对早产儿贫血恢复进程的预测和输血血型不合的评估都是一个有价值的指标。
HFR对EPO功能而言比网织红细胞计数更实用二、再生障碍性贫血时网织红细胞急性再障:Hb下降较快,RET <1%,RET绝对值< 15x109 /L,WBC 中性粒细胞绝对值< 0.5 x109 /L,PLT常< 10 x109/L。
慢性再障:骨髓造血障碍所致,Hb下降较缓慢,RET、WBC与WBC 中性粒细胞绝对值和PLT较急性再障时高。
再生障碍危象时:Hb、RBC、HCT明显减少,Hb常低至20-30g/L,网织红细胞急剧下降或为“0”。
纯红细胞再障碍:贫血呈正细胞性,网织红细胞显著减少(<0.1%)或缺如。
白细胞和血小板正常。
三、缺铁性贫血时网织红细胞RET大多正常或轻度增高,,服用铁剂后一周左右RET可迅速增高(2--8%)。
四、巨幼细胞贫血时网织红细胞RET#减少,相对值正常或轻度增高,服用维生素B12、叶酸后可明显增高。
网织红细胞的临床意义与实验室检测技术进展网织红细胞(Ret)是红细胞成熟过程中的一个重要阶段,是判断贫血状况,反映机体骨髓红系造血功能及评估其他相关性疾病治疗效果的重要参考指标,Ret的实验室检测方法已进入自动化分析阶段,现对网织红细胞实验室检测技术的进展及其临床应用作一综述。
标签:网织红细胞;检测技术;临床应用网织红细胞(Ret)是介于晚幼红细胞和成熟红细胞之间的过渡阶段细胞,是有核红细胞刚刚失去核的阶段,仍属未完全成熟的红细胞,胞质尚有核糖体、核糖核酸等嗜碱性物质残存,经煌焦油蓝或新亚甲蓝染色后,胞质中常可见蓝色或蓝绿色枝点状甚至网状结构,故名网织红细胞。
网织红细胞内含核糖核酸,使用新亚甲蓝或煌焦油对其进行染色后呈网状结构。
网织红细胞总数(retic)、网织红细胞平均体积(MCVr)、网织红细胞百分比(retic%)、单个网织红细胞平均血红蛋白浓度(CHCMr)、单个网织红细胞血红蛋白含量(CHr)和成熟度(LFR、MFR、HFR)是临床上检测该细胞时主要的检测参。
总数及百分比可以有效诊断贫血类型和观察治疗效果。
CHr可以准确判断溶血性贫血及增生性贫血等。
随着医学检测技术的发展,逐渐取代人工显微镜检测的传统方式并进入全自动分析的全新阶段。
笔者就网织红细胞的临床应用及实验室检测技术的进展综述如下。
l 网织红细胞的临床意义目前在肿瘤放、化疗过程中,常用白细胞(WBC)和血小板(PLT)来监测骨髓造血功能状况,但放、化疗患者易受到感染、输血应激等因素影响,WBC 不能准确及时反映患者情况;同时当发现WBC、PLT下降时骨髓已明显受到抑制。
因此,及早得到骨髓造血功能变化的提示,对于指导临床科学、合理用药,预防感染、出血有重要临床意义。
有学者报道,接受放、化疗的肿瘤患者Ret 降低总是早于WBC、PLT的降低;在骨髓恢复时,患者未成熟Ret迅速升高,IRF升高明显早于WBC、PLT等参数。
李文楷报道肿瘤患者放、化疗后第3天,MFR、HFR、Ret显著减低,而WBC、PLT变化不明显,直到第6天才显著减低,当造血功能恢复时MFR、HFR、Ret于放、化疗后第12天开始增高,而WBC、PLT仍持续下降,放、化疗后第15天MFR、HFR显著升高,而WBC、PLT直到第20天才出现明显升高。
网织红细胞及其荧光强度检测的临床意义目的探讨流式细胞检测结合核酸荧光染色技术在网织红细胞(Ret)及其荧光强度分析中的临床应用价值。
方法应用Sysmex XT——2000i全自动血液分析仪分析不同类型贫血患者的网织红细胞和荧光强度的变化。
结果130例贫血患者与30例正常人群比较,其Ret 绝对值及其Ret百分比有不同程度的升高、轻度降低或显著降低;荧光强度的变化差异较大,表现为低荧光强度网织红细胞比率(IFR)降低,幼稚网织红细胞比率(IRF)、中荧光强度网织红细胞比率(MFR)和高荧光强度网织红细胞比率(HFR)升高,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。
结论网织红细胞荧光强度分析是骨髓造血系统抑制和恢复较敏感的指标,可作为某些贫血诊断和鉴别诊断的初筛指标及对判断和监测骨髓的损伤程度和预后具有重要的临床意义。
标签:贫血; 网织红细胞计数; 荧光强度; 临床应用网织红细胞(Ret)是介于晚幼红细胞和成熟红细胞之间尚未成熟的红细胞,其胞质内存留多少不等的嗜碱物质RNA,其RNA含量越多,Ret越不成熟,反之亦然。
通过使用核酸荧光染料多聚亚甲基可对细胞胞浆中的核酸物质(RNA)进行染色,越不成熟的Ret其荧光越强,反之,成熟Ret荧光极少或最弱,故将Ret分成高荧光强度网织红细胞(HFR)、中荧光强度网织红细胞(MFR)、低荧光强度网织红细胞(LFR)三部分。
IRF定义为中、高荧光强度区域内Ret百分数之和(MFR+HFR),为不成熟Ret比例,可更灵敏的反映骨髓造血系统的状况。
我院使用的具有全自动网织红细胞计数、荧光强度自动化分析及成熟度分类功能的Sysmex X T-2000i 血细胞分析仪,广泛用于临床血液常规标本的检测,为临床提供了大量的分析参数和研究参数,现将网织红细胞及其光强度分析的临床应用情况报道如下。
1 材料与方法1.1 研究对象2009年1~11月本院住院患者均为首诊并未做过输血及抗贫血治疗。
2017年12月第43卷第6期现代临床医学JOURNAL OF MODERNCLINICAL MEDICINEDec. 2017Vol.43 No. 6•综 "•网织红细胞检测及其应用研究进展徐鹏(绵阳市中心医院检验科,四川绵阳621000)【摘要】网织红细胞是尚未成熟的红细胞,是骨髓造血系统的重要参数,在疾病的诊断、治疗和预后判断中具有潜在的应用价值,本文就网织红细胞检测技术进展和网织红细胞参数在临床中的应用进展,包括在血液系统疾病、肿瘤化疗、肝脏疾病、代谢性疾病和病毒感染中的应用进展作一综述。
【关键词】网织红细胞;检测技术;临床应用;进展【中图分类号】R446. 11 【文献标识码】A DOI: 10. 11851/j. issn. 1673-1557. 2017. 06. 001优先数字出版地址:http://kns. cnki. net/kcms/detail/51. 1688. R. 20171121.1631.002. html网织红细胞(reticulocyte,Ret)是尚未成熟的红细 胞,骨髓中晚幼红细胞脱核时其胞质中血红蛋白合成 量仅占90%,其残存的核糖体(主要含RNA)经煌焦油 蓝等碱性染料染色时被染成深染的网状结构,故称网 织红细胞[1]。
Ret是骨髓造血系统的重要参数,在疾 病的诊断、治疗和预后判断中具有潜在的应用价值。
本文就R e t的检测技术进展和临床应用价值作一综述。
1网织红细胞检测进展1.1手工计数法早期手工计数Ret分为玻片法和 试管法。
因玻片计数法易受血液中水分挥发、染色时 间等较多因素的影响,已被试管法取代[2]。
试管法是 手工计数R et的参考方法,易掌握且重复性较好。
采 用煌焦油蓝染液2滴于小试管中,加入等量的末梢血 或EDTA-IT抗凝静脉血混勻,放置室温10 ~ 15 m in 染色,然后混勻推片并对细胞分布均勻的体尾交界处 用油 数。
血液网织红细胞测定分析网织红细胞绝对记数和百分比仍然是最常用的反映红细胞增生活性的血液学指标,但随着血细胞分析仪中各种新技术的使用,许多新的参数被发现,仪器不仅可提供骨髓释放出来的网织红细胞数量,还可以提供外周血中网织红细胞的成熟度。
为探讨网织红细胞绝对计数、网织红细胞百分比和网织红细胞的成熟度的敏感性,笔者使用促红细胞生成素前后的观察,现报道如下。
1 血液网织红细胞测定1.1 血液网织红细胞测定不但对血液系统疾病的诊断,治疗及疗效观察具有重要的意义。
而且通过观察网织红细胞,可以了解肿瘤病人化疗及化疗后骨髓变化的情况。
MFR是评价骨髓受抑制后开始恢复的较敏感的指标。
MFR+HFR是估计移植后造血恢复的早期指标。
监测网织红细胞还能了解骨髓移植,观察肾移植术后促红细胞生成素(EPO)的疗效、调整药物剂量和治疗方案早期指标。
1.2 SYSMEX-R3500的优点是能直接用全血测定网织红细胞,操作简便,快捷,与SE9000,SP100自动制片染色机,电脑工作站组合起来,构成HST流水线。
其质控物批内CV为2.95%,标本批内CV为4.42%(1.27~10.05%),与文献报道一致。
批间CV为3.56%,与文献报道一致。
同时仪器显示的散点图直接反映网织红细胞的成熟阶段,根据荧光强度,将网织红细胞分成高、中、低荧光强度网织红细胞(HFR、MFR、LFR),越是幼稚的网织红细胞显示出的荧光越强。
网织红细胞的成熟指数(RMI)是根据HFR+MFR/网织红细胞绝对值的计算而来。
SYSMEX-R3500存在的线性范围:0%~15%,超出线性范围的标本需手工稀释后测定。
当某些病人血液中有核细胞或淋巴细胞异常增加时,可导致结果假阳性增加:仪器计数受Howell-Jolly小体,疟原虫和大血小板的干扰;冷凝集素存在、红细胞的聚集、某些病理因素或药物都能使红细胞产生自身荧光,影响结果。
1.3 COULTER MAXM不但能进行网织红细胞的测定并给出其绝对值,还能检测CBC和WBCD-IFF,提供高分辨率的三维分类。
检验科更换网织红细胞计数新方法的公告我科现更换网织红细胞计数方法,引进了希斯美康配套检验试剂,现发布公告【网织红细胞的临床意义】网织红细胞计数(尤其是网织红细胞绝对值)是反映骨髓造血功能的重要指标。
正常情况下,骨髓中网织红细胞均值为150×109/L,血液中为65×109/L。
当骨髓网织红细胞计数增多,外周血减少时,提示释放障碍;骨髓和外周血网织红细胞计数均增加,提示为释放增加。
从网织红细胞成熟类型获得红细胞生成活性的其他信息,正常时,外周血网织红细胞中Ⅲ型约占20%~30%,Ⅳ型约占70%~80%,若骨髓增生明显,可出现Ⅰ型和Ⅱ型网织红细胞计数。
1、判断骨髓红细胞造血情况(1)增多:见于①溶血性贫血:溶血时大量网织红细胞进入血循环,网织红细胞计数可达6%~8%,急性溶血时,可达约20%,甚至50%以上,绝对值超过100×109/L。
急性失血后,5~10d网织红细胞达高峰,2周后恢复正常。
②放疗、化疗后:恢复造血时,网织红细胞计数短暂和迅速增高,是骨髓恢复较敏感的指标.③红系无效造血:骨髓中红系增生活跃,外周血网织红细胞计数正常或轻度增高。
(2)减少:见于再生障碍性贫血、溶血性贫血再障危象.典型再生障碍性贫血诊断标准之一是网织红细胞计数计数常低于0.005,绝对值低于15×10 9/L。
2、观察贫血疗效缺铁性贫血、巨幼细胞性贫血患者治疗前,网织红细胞计数仅轻度增高(也可正常或减少),给予铁剂或维生素B12、叶酸治疗后,用药3~5天后,网织红细胞计数开始上升,7~10天达高峰,2周左右,网织红细胞计数逐渐下降,表明治疗有效医学*教育*网整理.3、骨髓移植后监测骨髓移植后第21天,如网织红细胞计数大于15×109/L,表示无移植并发症;小于15×109/L,伴嗜中性粒细胞和血小板增高,可能为骨髓移植失败。
4、网织红细胞生成指数(RPI)是网织红细胞生成相当于正常人的倍数。