分子生物学实验室常用仪器及使用方法.

分子生物学实验室仪器使用说明书一、引言分子生物学实验室仪器的使用是进行基因研究和分析的重要环节，正确的仪器操作和维护对于保证实验结果的准确性具有至关重要的作用。

本说明书旨在提供对分子生物学实验室仪器的正确使用方法和维护技巧的指导，以确保实验室工作的顺利进行。

二、常用仪器1. 基因扩增仪基因扩增仪是分子生物学实验室常用的仪器之一，其中最常见的是PCR仪。

以下是PCR仪的使用步骤：- 将待扩增的DNA模板、引物和试剂添加至PCR管或96孔板中；- 根据所需的扩增程序，在PCR仪面板上设置合适的温度和时间参数；- 启动PCR仪，开始扩增；- 扩增结束后，及时取出试管或孔板，并进行下一步实验操作。

2. 凝胶电泳仪凝胶电泳仪主要用于观察DNA、RNA或蛋白质的迁移情况以及分子大小的测定。

以下是凝胶电泳仪的使用步骤：- 准备所需的琼脂糖凝胶，并注入到电泳槽中；- 将待检测的样品混合液加入到电泳槽中的样品孔中；- 在电泳槽两侧连接正负极电源，并设置合适的电压和时间参数；- 启动电源，进行电泳；- 电泳结束后，取出凝胶，进行染色或进一步分析。

3. 离心机离心机用于分离混合物中的固体颗粒和液体，是分子生物学实验室必备的仪器之一。

以下是离心机的使用步骤：- 将待离心的样品均匀加入离心管中，并保持离心管的平衡；- 将离心管放入离心机转盘的相应位置，并注意转盘的平衡；- 根据离心速度和时间要求，设置合适的参数；- 启动离心机，开始离心过程；- 离心结束后，小心取出离心管，注意避免离心管的倾斜或颠倒。

三、常见问题及处理方法1. 仪器出现异常- 若仪器出现异常操作或显示异常，应首先检查是否按照正确的使用步骤进行操作；- 仔细阅读仪器说明书，查看是否存在使用特殊注意事项；- 若仍无法解决问题，及时联系仪器维修人员进行检修。

2. 仪器维护- 每次使用仪器后，应进行基本的清洁和消毒，保持仪器干净整洁；- 定期检查仪器是否正常，如电源是否接触良好，仪器表面是否有明显损坏等；- 根据仪器的要求，及时更换耗材和维护配件。

简述微量移液器的使用方法和注意事项微量移液器，是在分子生物学、生物工程等领域非常常用的一种实验仪器。

主要用于准确地移液、取样等。

微量移液器使用起来非常方便，但是也有一些注意事项需要注意。

首先来看一下微量移液器的使用方法。

微量移液器主要由三个部分组成：移液杆、体积调节旋钮和推顶针。

使用时，首先需要确定要移液的体积范围，然后根据需要调节旋钮，使其指示出体积目标。

接下来需要将移液器插入药液中，先吸取一部分药液，然后稍稍抬高液面，等待一段时间让移液器内部和外部压力平衡，使空气泡完全排除。

最后，将移液器精确地取出，小心地将药液滴在目标位置。

使用微量移液器需要注意的事项有以下几点：
1.选择适当的移液器：微量移液器有不同容积范围的型号，选择适当的型号非常重要。

如果选择的移液器和需要移液的范围不匹配，可能会导致结果出现误差。

2.保持移液器的清洁：移液器需要保持清洁，以避免污染。

在使用之前，需要清洗移液器头，并确认它们没有被机械或化学物质损坏。

另外，建议在使用之前将移液器头用高度消毒酒精消毒。

3.正确吸液：吸液时需要保证吸液杆浸泡液体，且深度不宜过深，以免吸取过多液体。

如果吸取的量比标尺多了，需要轻轻吹出多余液体。

4.正确读数：移液器上的指示标尺是非常小的，需要正确地读数和调整。

如果读数错误，可能会导致实验误差和结果不准确。

5.正确保管：移液器需要放在避光、干燥、温度适宜的地方。

避免受到震动或温度变化的影响。

总之，微量移液器是实验仪器中非常重要的一部分。

使用时需要注意以上事项，以保证实验的准确性和可靠性。

PCR仪
PCR仪，也称DNA热循环仪、基因扩增仪，能使 一对寡核苷酸引物结合到正负DNA链上的靶序列两 侧，从而酶促合成拷贝数为百万倍的靶序列DNA片 段，它的每一循环包括DNA变性、复性、延伸三个 反应。
PCR仪主要应用于基础研究和应用研究等许多领域， 如基因分析、序列分析、进化分析、临床诊断、法医 学等。
试剂、器皿及实验用具，应严格灭菌； 对于经过导入DNA重组分子的菌株，操作后
必须进行严格的高压消毒灭活处理 。
操作程序：
1）开盖：转动手轮，使锅盖离开密封圈，添加蒸馏水刚没 至板上； 2）通电：打开控制面板上电源开关，若水位低则红灯亮； 3）堆放物品：需包扎的灭菌物品，体积不超过 200mm×100mm×100mm为宜，各包装之间留有间隙， 利于蒸汽穿透，提高灭菌效果； 3）密封高压锅：推横梁入立柱内，旋转手轮，压紧锅盖； 4）灭菌：121℃， 20min；如为液体，液体必须装在可 耐高温的玻璃器皿中，不宜超过2/3； 5）灭菌结束，所有东西放入干燥箱干燥，排尽水气。
注意事项：
1、 不要戴“脏”手套触摸电脑鼠标、键盘及其它位置； 2、 不要戴“脏”手套触摸仓门和灯箱电源开关； 3、 不要戴“脏”手套触摸外接电源开关； 4、在图像获取过程中，若通过软件打开紫外/可见光，则
必须再通过软件关闭，若通过紫外与可见分析装置上 打开紫外/可见光，则从分析装置上关闭，严禁互用， 导致紫外灯长亮。
0.5～10μl
10～100μl 常见规格
20～200μl
100～1000μl
量液的操作步骤：
第一停点 第二停点
A 保持微量移液器垂直，将按钮压至第一停点； B 微量移液器头尖端浸入溶液，缓慢释放按钮； C 保持微量移液器垂直，将微量移液器头与容器壁接触，慢

分子生物学实验安全
紫外线辐射的危害和防护
在实验室里常用的紫外光源包括 手提式紫外灯和紫外透射仪、凝胶成像系统 。 只能通过吸收有害波长的滤片或安全玻璃片才能观察。在紫外光下操作时要戴合适的预防性手 套。应佩戴具有紫外线防护功能的护目镜和/或防护面罩，并遮蔽暴露的皮肤。
建议：使用荧光染料，切胶在Dark reader上操作。
分子生物学实验安全
化学试剂的安全使用
DTT 二硫苏糖醇
很强的还原剂，散发难闻的气味。可因吸入、咽下或皮肤吸收而危 害健康。当使用固体或高浓度储存液时，戴手套和护目镜，在通风橱中 操作。 PMSF 苯甲基磺酰氟 一种高强度毒性的胆碱酯酶抑制剂。它对呼吸道黏膜、眼睛和皮肤有非常 大的破坏性。可因吸入、咽下或皮肤吸收而致命。戴合适的手套和安全眼镜， 始终在化学通风橱里使用。在接触到的情况下，要立即用大量的水冲洗眼睛或 皮肤，已污染的工作服作为有害废物处理。 Triton X-100 引起严重的眼睛刺激和灼伤。可因吸入、咽下或皮肤吸收而受害。戴合适 的手套和护目镜。
分子生物学实验安全
化学试剂的安全使用
过硫酸铵 (NH4)2S2O8 对黏膜和上呼吸道组织、眼睛和皮肤有极大危害性。吸入可致命 。操作时戴合适的手套、安全眼镜和防护服。始终在通风橱里操作， 操作完后彻底洗手。 叠氮钠（NaN3） 毒性非常大。它阻断细胞色素电子运送系统。含有叠氮钠的溶液要 标记清楚。可因吸入、咽下或皮肤吸收而损害健康。戴合适的手套和安 全护目镜，操作时要格外小心。 吉姆萨（Giemsa） 染料咽下可致命或引起眼睛失明，通过吸入和皮肤吸收是有毒的。 其可能的危险是不可逆的效应。戴合适的手套和安全护目镜。在化学通 风橱里操作，不要吸入其粉末。
Dark Reader 荧光透射仪 (Transilluminators) 的特点 : 1.Dark Reader 使用新的无毒 DNA 染料 : SYBR Green, SYBR Gold等, 避免了Ethidium Bromide (EB) 染料对人体的伤害。 2.Dark Reader使用 可见光 （400-500 nm）,没有UV（紫外线），将其对人体的伤害降低 至零。同时，大大降低了 对DNA样本的损伤，克隆DNA的效率将成百倍的提高。 3.灵敏度高，远远高于UV检测仪。 4.适 用染料范围广；荧光素 （fluorescein）, AttoPhos, GelStar, Vistra Green, SYPRO Orange, red-shifted GFP variants等都可使用。对于Rhodamines, Ethidium Bromide(EB)等激发光大于500 nm的染料亦 可适用；可以广泛用于DNA、RNA 以及蛋白质的检测。 5.Dark Reader同时提供琥珀色镜片的观 察眼镜（AG16），供切割凝胶时使用。 紫外照射消毒后由于空气中臭氧富集，不宜立即开始工作，应在停止紫外照射30 min后开始 工作，有条件的实验室，可安装无臭氧紫外灯。 超净工作台中进行紫外照射消毒后，也应用强风进行吹扫后再进行工作，以免臭氧危害身 体健康。

4、不测量时要打开暗室盖，以确保光门关闭，以 免加快光敏元件的老化（比色计暗室上有一小钉， 压下后光门打开）。
5、灵敏档选择的依据时能够调零，尽量选用低档， 这样可以确保读数较稳定。
6、所测得的A值尽量在0.1～0.7之间，（最好在 0.2～0.6之间），因为此值范围内读数较准，超 过时，应稀释溶液
二、分子生物学实验的特点
1、分子生物学实验主要应用化学原理和方法所设计 的科学实验，也渗进了一些相关学科的理论知识与 方法。
2、由于研究对象为生物体，所以标本的来源不易， 微量和定量是分子生物学实验的一大特点。
3、分子生物学实验往往涉及生物大分子和生物材料 的检测，因此取材常为生物体的组织器官，甚至是 活的生物体。所以很难保证样品、标本的无菌性， 要注意作好自身防护。
4、实验课后均要将用过的仪器试管进行清洗，并整理 台面。
四、基本操作
（一）仪器的清洗
1、一般玻璃仪器：如试管烧杯量筒三角瓶等，先用自 来水洗刷，用毛刷沾少许肥皂粉或去污粉洗刷；再用自 来水反复冲洗，去尽肥皂水或去污粉直至无泡沫，最后 用蒸馏水淋洗2～3次，干燥备用。
2、做定量实验或要求严格时，除了用去污剂外，还需 以热洗液洗涤一次（或冷洗液浸泡过夜），而后再用蒸 馏水淋洗2～3遍。洗液由浓硫酸—重鉻酸钾—水按一定 比例根据不同需要配成。
（二）吸量管的使用与选择
1、吸管为精密吸量器，其规格有：0.1ml、0.25ml、1ml、2ml、 5ml、10ml等，有的吸量管上有两个环，上面的数字标示最 大体积，下面的是最小分刻度体积。根据实验需要，选择合 适规格的吸量管。如吸取1.5ml溶液，以选2 ml为宜；若用1 ml吸两次，则会增大误差。另外还应注意，在一组实验中， 吸量同一种试剂，应尽量选用一支移液管，以减少系统误差。

分子生物学实验室仪器使用方法说明书一、实验室仪器的介绍1.1 仪器名称：分子生物学实验室仪器1.2 仪器型号：XXX1.3 仪器功能和用途：该仪器主要用于分子生物学实验室中的基因分析、DNA测序、蛋白质分析等实验。

二、仪器安装与准备2.1 确保电源连接：将仪器的电源线插入电源插座，并确保稳定的电源供应。

2.2 连接通信接口：根据仪器所要求的通信接口，将该仪器与电脑或其他设备进行连接。

2.3 检查仪器附件：检查仪器包装盒内的各个附件是否齐全，并确保它们的完好无损。

三、仪器基本操作步骤3.1 仪器的启动与关机3.1.1 启动仪器：按下仪器的电源开关，等待仪器正常启动。

3.1.2 关闭仪器：按下仪器的电源开关，等待仪器正常关闭，并断开电源连接。

3.2 仪器系统设置3.2.1 打开仪器软件：在电脑上打开仪器所需的软件，并等待软件正常加载。

3.2.2 系统配置：根据实验需求，对仪器系统进行必要的配置，例如调整仪器的温度、位置等参数。

3.3 样品准备与加载3.3.1 样品制备：按照实验要求，制备所需的样品，并确保样品的纯度和浓度符合要求。

3.3.2 样品加载：将制备好的样品按照仪器的要求进行加载，确保样品的正确放置和固定。

四、仪器操作注意事项4.1 安全操作：在操作仪器时，应穿戴实验室所要求的防护设备，并遵守实验室的安全规范。

4.2 仪器维护与清洁：定期对仪器进行清洁和维护，保持仪器的良好状态和运行效果。

4.3 实验记录与数据保存：及时记录实验过程和结果，并进行数据的保存和备份，以便后续分析和研究。

五、故障排除5.1 常见故障：列举常见的仪器故障和可能的原因，例如电源故障、通信故障、样品加载故障等。

5.2 故障排查方法：针对每种故障，提供相应的排查方法和解决方案。

5.3 遇到无法解决的故障时，应及时联系仪器维修人员或生产厂家进行维修。

六、仪器的维护与保养6.1 清洁与消毒：定期对仪器进行清洁和消毒，确保仪器的卫生和操作的安全。

基因表达谱研究（ DNA chip, SAGE）
医学领域
• 疾病基因检测 / 遗传病的产前诊断 • 致病病原体的检测 • 肿瘤治疗中癌基因的检测
会推广到大部分疾病治疗前的检测
• DNA指纹、个体识别、亲子关系鉴别、 法医物证
• 其他: 动、植物检疫（转基因动植物检测）
PCR具有极高的灵敏度
污染是PCR实验的常见问题。只要实验室里曾经扩增过某个 片段，就有可能以后的实验中发生污染。
• 3－ 待测样品中有相当含量的杂质。A260/A280 和 260/A230是DNA 纯度的指示值，纯度好的DNA，在 pH7-8.5下其比值应该在2.0 或2.5，A230 是多肽、芳香 基团、苯酚和一些碳氢化合物的吸光度，A280 是蛋白 质的吸光度
• 答：产生四个加号的原因是因为测量的数值超过 了测量上限>3.0A，请检查
DNA酶的活性，防止PCR扩增产物降
解
33
核酸电泳的指示剂
• 指示剂：ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
– 溴酚兰 – 二甲苯青
• 溴酚兰：在碱性液体中呈紫兰色 • 二甲苯青：水溶液呈兰色 • 电泳时，其迁移速率与双链线性
DNA大致相当
34
载样缓冲液
• 指示剂一般与蔗糖、甘油或聚蔗糖400组成 载样缓冲液
• 作用： – ①增加样品密度，使其比重增加，以确保 DNA均匀沉入加样孔内 – ②在电泳中形成肉眼可见的指 示带，可预测核酸电泳的速度和位置 – ③使样品呈色，使加样操作更方便
13
原位PCR扩增
• 在PCR仪上增加原位PCR模块就 可以在玻片上进行原位PCR扩增，
14
多槽式高通量PCR仪
• 随着基因组高通量研究的需求的提高
• MJ有一种一拖四，就是1个主机带4个扩增槽， 每个槽可以独立控温，一次可以作96x4个样品的 PCR，不过一旦出现问题4个都不能用了。

2）灭菌结束后，要等温度降为“0”，才可打开灭
菌锅锅盖；
3）高压蒸汽灭菌时，须保持高温高压，因此必
须严格按照操作规程操作，否则易发生意外
事故。
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分 子实 生验
物 31 学
实验二
琼脂糖凝胶电泳的制 备及核酸检测
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分 子实 生验
物 32 学
带电荷的物质在电场中的趋向运动称为电泳。电泳一 般分为自由界面电泳和区带电泳两大类:自由界面电泳 不需支持物，这类电泳目前已很少使用;而区带电泳则 需用各种类型的物质作为支持物，常用的支持物有滤纸、 醋酸纤维薄膜、非凝胶性支持物、凝胶性支持物及硅胶 -G薄层等，分子生物学领域中最常用的是琼脂糖凝胶电 泳其优点主要在于操作简单、快速、灵敏。
5. 移液器使用完后，将刻度调到最大刻度，收藏。
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物 6学
台式高速离心机
离心机的分类 低速：每分钟几千转 高速：每分钟1 ~ 3万转 超速：每分钟3万转以上
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物 7学
离心机的功能：分离，纯化
低速：细胞等大分子 高速：DNA，蛋白等 超速: 病毒，蛋白，细胞器等
3）密封高压锅：推横梁入立柱内，旋转手轮，压紧锅盖；
4）灭菌：121℃， 20min；如为液体，液体必须装在可
耐高温的玻璃器皿中，不宜超过2/3；
5）灭菌结束，所有东西放入干燥箱干燥，排尽水气。2010
分 子实
生验
物
30 学
注意事项：
1）如是手动的灭菌锅，灭菌过程中，应注意排
净锅内冷空气，否则会影响灭菌效果。
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物 36 学
附 注：

初中生物年度工作报告分子生物学实验室常用仪器及使用方法分子生物学实验室（p2设计）1.功能：进行分组织培养前实验室设计组织培养前实验室设计在进行植物组织培养工作之前，首先应对工作中需要哪些最基本的设备条件有个全面的了解，以便因地制宜地利用现有房屋，或新建、改建实验室。

实验室的大小取决于工作的目的和规模。

以工厂化生产为目的，实验室规模太小，则会限制生产，影响效率。

在设计组织培养实验室时，应按组织培养程序来没计，避免一些环节倒排，引起日后工作混乱。

植物组织培养是在严格无菌的条件下进行的。

要做到无菌的条件，需要一定的设备、器材和用具，同时还需要人工控制温度、光照、湿度等培养条件。

实验室设计原则：保证无菌操作，达到工作方便，防止污染。

实验室组成：化学实验室、洗涤菌室、无菌操作室（接种室）、培养室、细胞学实验室、其他小型仪器设备。

1)化学实验室（准备室）：完成所使用的各种药品的贮备、称量、溶解、配制、培养基分装等。

主要设备：药品柜、防尘橱（放置培养容器）、冰箱、天平、蒸馏水器、酸度计及常用的培养基配制用玻璃仪器.2)洗涤、灭菌室：完成各种器具的洗涤、干燥、保存、培养基的灭菌等。

主要设备：水池、操作台、高压灭菌锅、干燥灭菌器（如烘箱）等。

3)无菌操作室（接种室）：主要用于植物材料的消毒、接种、培养物的转移、试管苗的继代、原生质体的制备以及一切需要进行无菌操作的技术程序。

主要设备：紫外光源、超净工作台、消毒器、酒精灯、接种器械（接种镊子、剪刀、解剖刀、接种针）等。

接种室宜小不宜大，一般7～8平米，要求地面、天花板及四壁尽可能密闭光滑，易于清洁和消毒。

配置拉动门，以减少开关门时的空气扰动。

接种室要求干爽安静，清洁明亮。

在适当位置吊装1～2盏紫外线灭菌灯，用以照射灭菌。

最好安装一小型空调，使室温可控，这样可使门窗紧闭，减少与外界空气对流。

接种室应设有缓冲问，面积1m2为宜。

进入无菌操作室前在此更衣换鞋，以减少进出时带入接种室杂菌。

分子生物学仪器操作保养规程前言分子生物学是生物学领域中最有前途和发展性的研究领域之一，与之相关的仪器设备相当重要。

不仅要掌握正确的操作方法，同时还要做好仪器设备的保养工作，以确保仪器设备的正常运行、延长使用寿命、提高工作效率、减少出错率。

本文档主要介绍一些分子生物学常用仪器的操作方法和保养规程。

PCR 仪操作保养规程PCR 仪是分子生物学实验中应用广泛的仪器之一，以下是对运用PCR 仪的操作和保养的一些常规规程：操作规程1.在操作 PCR 仪前，确保手部清洁，并且戴好实验手套。

2.充分调节 PCR 仪的温控系统，设定好所需的反应体系工作温度和时间。

3.冷启动 PCR 仪时，将样品轻轻地放进去，不要用太大的力气，以免破坏样品。

4.加热启动 PCR 仪时，盖好盖子，不要露出样品才能开始加热。

保养规程1.每次操作完后，及时关闭PCR 仪，清理样品位和仪器表面。

2.请勿使用水、挥发类液体等有危险性的溶剂来清理仪器表面，使用湿布或稀释的消毒酒精。

3.PCR 仪在日复一日的使用中，热风扇的使用概率比较大，需要及时清理热风扇。

4.接通电源时，要注意与电器专线相连，要避免与大功率电器共用一条线路，以避免电路过载导致故障。

稳态离心机操作保养规程稳态离心机也是分子生物学常用的仪器之一，以下是对稳态离心机的操作和保养的一些常规规程：操作规程1.操作机器离心前，需要查验离心机内和离心机转盘是否松动。

2.不同标本、转速、离心时间均有相应的程序，需根据自己的实验需求做好合理的设定。

3.启动离心机时，先放入标本或试管，然后将转盘固定。

4.从小转速到大转速逐渐加速，避免汽车抛锚现象。

5.离心结束之后，要等待离心机转速慢慢降下来，然后再轻轻地开盖取出标本。

保养规程1.在稳态离心机使用和保养中，检查离心机盘是否均匀摆置，避免盘摆不平。

同时，避免震动和模拟运动等原因导致离心机系统产生不稳定性问题。

2.注意离心机所有零部件之间的协调配合，并尽量避免不合适的装配、拆卸或掉落。

分子生物学实验室的常规仪器设备及有关操作一、验室的常规仪器、设备（一）温度控制系统：1. 冰箱: 根据药品、试剂及多种生物制剂保存的需要，必须具备不同控温级别的冰箱，最常使用的有：4℃、-20℃、-80℃冰箱。

4℃适合储存某些溶液、试剂、药品等.-20℃适用于某些试剂、药品、酶、血清、配好的抗生素和DNA、蛋白质样品等。

-80℃适合某些长期低温保存的样品、纯化的样品、特殊的低温处理消化液等的保存。

0—10℃的冷柜适合低温条件下的电泳、层析、透析等实验。

2．液氮罐：有些实验材料、某些器官组织、细胞株、菌株及纯化的样品等，要求速冻和长期保存在超低温环境下，就需要一个液氮罐（—196℃）具有经济、省力和较好地保持细胞生物学特性的优点.3．培养箱：37℃恒温箱用于细菌的固体培养和细胞培养。

CO2培养箱适用于培养各种细胞,可恒定地提供一定量的CO2（通常5%）,用来维持培养液的酸度（pH值）。

37℃恒温空气摇床可进行液体细菌的培养.4. 水浴锅：用于保温。

25-100℃水浴摇床可用于分子杂交试验，各种生物化学酶反应等试验的保温.25-100℃水浴箱用于常规试验。

5。

烘箱:主用于烘干实验器皿，有些需要温度高些，有些需要温度低些。

用于RNA方面的实验用具，需要在250℃烤箱中烘干，有些塑料用具只能在42-45℃的烤箱中进行烘干.(二)水的净化装置：随着分子生物学的飞速发展,许多实验对水纯度的要求越来越高。

1。

蒸馏水皿：单蒸水常难以满足实验要求。

双蒸水、三蒸水配液,许多实验要去离子水。

多次蒸馏水可除去水中挥发性杂质，不能完全除去水中溶解的气体杂质（Mn2+、Cu2+、Zn2+、Fe3+、Mo（Ⅵ)）.2. 离子交换器：去离子水—用离子交换法制取的水，称去离子水。

去离子效果好，但不能除去水中的非离子型杂质,其中常含有微量的有机物（树脂等）。

3．超纯水：用蒸馏水、离子交换水、反渗透纯水做为供水，磁铁耦合齿轮泵作用使水循环。

pcr仪的使用方法和注意事项
技术服务说明书
一、概述
PCR仪是一种高效灵敏的DNA扩增技术，是现代分子生物学的重要组成部分。

其特点是快，灵敏，可靠，并且能够在微量样本中获得大量DNA。

PCR仪是一种可以进行非编码RNA表达水平定量实验的常用仪器，可提供温度控制、计时和编程，以确保每次反应的准确性和精确性。

二、使用方法
1、首先，用户在PCR仪上安装一个放大振荡器，并将PCR反应液和反应封袋放在其上。

2、然后，启动PCR仪，并输入仪器中的相应参数，如温度、时间、复制次数等。

参数各种参数要参照试剂盒中的说明，并以实验需要为准。

3、接着，根据实验要求，将反应液添加到反应封袋中，完成PCR 试剂添加。

4、最后，控制PCR仪的反应参数，稳定的温度、时间、复制量，以及控制PCR仪的加热、稳定时间，以完成PCR实验。

三、注意事项
1、使用PCR仪之前，用户要搞清楚所使用试剂的厂家，以确保试剂的质量。

2、使用PCR仪进行实验时，用户要确保设置的参数符合实验要
求，以 make sure 反应结果精准可靠。

3、当使用PCR仪时，要特别注意清洁，避免污染样本，以保证实验数据的可靠性。

4、使用PCR仪时，要定期检查PCR仪内的元件，如放大板，电位器等，使仪器保持良好的工作状态，可以有效的保证实验的效果。

5、当使用PCR仪时，用户要注意安全，应避免曝晒、触碰内部的高温以及电源线，以免造成损伤。

紫外分光光度计
测定核酸含量 蛋白质含量 细菌生长密度
紫外透射仪
观测琼脂糖 凝胶电泳的 结果
台式高速冷冻离心机
德国effendorf 最高转速
25000rpm 感受态细胞的制
备
台式高速离心机
德国 eppendorf
最高转速 12500rpm
DNA样品制备
全温摇床（振荡器）
DNA 制备 细菌繁殖
PCR 仪
凝胶电泳装置 --水平电泳仪
琼 脂 糖 凝 胶 电 泳
凝胶电泳装微量离心管
又作：指管、 eppendorf管
常用0.5ml 1.5ml 微量物质离心沉淀 PCR 标记探针 样品保存 菌种保存
恒温培养箱
菌 株 培 养
自动高压蒸汽灭菌器
器具灭菌 培养基灭菌
制冰机和纯水仪
冰箱和超低温冰柜
pH计和pH试纸
磁力搅拌器
超净工作台
直流式 细菌增殖 质粒纯化
凝胶成像仪
凝 印胶 及电 分泳 析结
果 的 保 存 、 打
恒温循环仪
酶切
动物DNA 制备
微波炉
溶化琼脂和 琼脂糖

分子克隆
总结词
分子克隆是一种将外源DNA片段插入到载体DNA中，并在宿主细胞中进行复制 和表达的过程。
详细描述
分子克隆的基本步骤包括载体DNA的制备、限制性酶切、连接、转化和筛选等。 所需的仪器设备包括研磨仪、离心机、PCR仪和电泳仪等。
基因表达分析
总结词
基因表达分析是一种检测特定基因在 不同条件下的表达水平的技术。
凝胶电泳仪利用电场作用驱动带电分子在凝胶介质中移动，从而实现分离。通过染色或放射自 显影等技术，可以检测到分子的大小、数量等信息。凝胶电泳仪广泛应用于分子物学实验室中用于观察细胞和组织的常规仪 器设备。
显微镜通过光学系统将样品放大并呈现于观察者眼前，可观 察细胞形态、结构以及染色后的染色体等。根据不同的观察 需求，可以选择光学显微镜、荧光显微镜、倒置显微镜等不 同类型的显微镜。
实验人员在实验过程中应穿戴个人防护装备，如 实验服、护目镜、手套等，以防止化学品和生物 危害物质的侵入。
03 废弃物处理
实验产生的废弃物应按照规定进行分类处理，避 免对环境和人体造成危害。
02
常规仪器设备
离心机
离心机是分子生物学实验室中常用的设备之一，主要用 于分离和纯化各种生物样品。
离心机通过高速旋转产生离心力，使样品中的不同组分 因质量不同而沉降到离心管的底部，从而实现分离和纯 化。常见的离心机有高速离心机和超速离心机，分别适 用于不同质量和转速的样品。
PCR仪
PCR仪是分子生物学实验室中必不可少的设备， 用于进行聚合酶链式反应（PCR），扩增特定的 DNA片段。
PCR仪通过控制温度和时间，实现DNA的变性、 退火和延伸等反应过程，最终得到大量所需的 DNA片段。PCR仪具有高精度和高自动化的特点 ，提高了实验的准确性和可重复性。

1培养箱在分子生物学试验中,有很多反应都是在特定温度下进行的,这时就需要一个控温的装置.例如：用于细菌的平板培养,我们通常设定为37℃于培养箱倒置培养；其他分子生物学实验如酶切等需要25℃,30℃,37℃等条件.2冰箱冰箱是实验室保存试剂和样品必不可少的仪器.分子生物学实验中用到的试剂有些要求是4度保存,有些要求是负20度保存,实验人员一定要看清试剂的保存条件,放置在恰当的温度下保存.具体来说,不同温度下保存的物品如下：a.4℃适合储存某些溶液、试剂、药品等.b.-20℃适用于某些试剂、药品、酶、血清、配好的抗生素和DNA、蛋白质样品等.c.-80℃适合某些长期低温保存的样品、大肠杆菌菌种、纯化的样品、特殊的低温处理消化液,感受态等的保存.d.0-10℃的层析冷柜适合低温条件下的电泳、层析、透析等实验.3摇床摇床是实验室常用仪器,一般有常温型和低温型两种.对于分子生物学实验室,如果能配置低温型摇床,就可以适应不同的实验需求.例如：用于大肠杆菌,酵母菌等生物工程菌种的振荡培养及蛋白的诱导表达,培养通常为28度和37度,诱导表达需要20-37度；在感受态的制备过程中,需要有18度的温度控制；用于蛋白凝胶的染色脱色时振荡,常温使用；用于大肠杆菌常规转化时振荡复苏,常为37度.对于控制温度低于室温时,我们需要低温型摇床来控温.4水浴锅水浴锅也是一种控温装置,水浴控温对于样品来说比较快速且接触充分.例如,用于42度的大肠杆菌转化时的热激反应；用于DNA杂交过程中水浴控温.5烘箱烘箱是用于灭菌和洗涤后的物品烘干.烘箱有不同的控温范围,用户可以根据实验需求进行选择.例如,有些塑料用具只能在42-45℃的烤箱中进行烘干；用于RNA方面的实验用具,需要在250℃烤箱中烘干.6纯水装置纯水装置包括蒸馏水器和纯水机.蒸馏水器的价格便宜,但在造水过程中需要有人值守；纯水机价格高些,但是使用方便,可以储存一定量的纯水.纯水使用也有不同的级别,一般实验用水需要纯水,用于PCR、DNA测序、酶反应均需要超纯水.7灭菌锅分子生物学所用到的大部分实验用具都应严格消毒灭菌.包括实验物品、试剂、培养基等.灭菌锅也有不同大小型号,有些是手动的,有些是全自动的.用户需要根据自己的需要选购.8天平天平用于精确称量各类试剂.实验室常用的是电子天平,电子天平按照精度不同有不同的级别.9液体量器液体量器用于精密量取各类液体.常见的液体量器有量筒、移液管、微量取液器、刻度试管、烧杯.10pH计用于配置试剂时精确测量PH值,从而保证配置的溶液的精确性.有时也需要利用pH 计测定样品溶液的酸碱度.11分光光度计分光光度计通过测定吸光值,从而用于分析样品核酸和蛋白的含量及纯度；同时也可以测定培养菌液的浓度.12离心机离心机有冷冻和常温之分.主要用于收集微生物菌体、细胞碎片以及其他沉淀物.有些样品由于在常温下不太稳定,需要低温环境.例如在感受态制备过程中必须保证低温环境,所以需要冷冻离心机.13超净工作台分子生物学中凡是涉及对细菌的操作均需在超净工作台下完成,还有感受态制备,转化反应等,都需要无菌的环境.14电泳系统实验室常用的电泳主要是三种：水平电泳用于核酸DNA/RNA的琼脂糖电泳检测；垂直电泳用于蛋白的聚丙烯酰胺凝胶电泳检测；转印电泳用于将蛋白转印到膜上做western 检测.15PCR仪PCR仪有不同的类型,分别用于不同的实验.普通和梯度PCR仪用于基因克隆和基因检测过程中DNA/RNA的扩增.荧光定量PCR仪用于核酸定量分析、基因表达差异分析、单核苷酸多态性检测、甲基化检测.原位PCR仪用于鉴定和定位带有靶序列的细胞在组织中的位置.16凝胶成像分析系统/紫外检测仪凝胶成像系统用于对染色后的核酸琼脂糖电泳胶和蛋白聚丙烯酰胺凝胶的观察和拍照,有些可以进行切胶操作.紫外检测仪可以用于对染色后的核酸琼脂糖电泳胶的观察,胶回收时切胶操作,但是不能连接电脑拍照.17制冰机实验室常用的是雪花制冰机,制冰机一般是按每日制冰量分成不同型号.分子实验室中制造大多数核酸、蛋白质的实验操作所需的低温环境,以减少核酸酶或蛋白质酶的水解.感受态制备也需要长时间冰浴.18磁力搅拌器在配置试剂过程中,有些试剂较难溶解,这时需要借助磁力搅拌器.磁力搅拌器可以加速溶解固体内容物.磁力搅拌器一般带加热功能.19生物安全柜分子实验中涉及的试剂和样品很多是有毒的,对于操作人员来说伤害较大.为了防止有害悬浮微粒、气溶胶的扩散,可以利用生物安全柜对操作人员、样品及样品间交叉感染和环境提供安全保护.20微波炉和电炉用于溶液的快速加热,电泳琼脂糖凝胶的加热溶化配制,固体培养基的加热溶化.21液氮罐分子生物学实验中感受态细胞的制备需要液氮处理.感受态的保存也可以存于液氮中.22微管移液器微管移液器也有不同型号,是用于准确量取特定体积的溶液.。

❖ 2、每次实验课前均要清点实验桌上自己面前的一套试管架 上各种仪器是否齐备，如有破损，及时提出更换。
❖ 3、实验过程中，注意节约药品试剂，节约水电。药品试剂 用后即盖上，废弃物品不能乱丢，需由值日生统一收集。
❖ 4、实验课后均要将用过的仪器试管进展清洗，并整理台面。
六、思考题
❖ 1.分子生物学实验室的常规仪器设备有哪几 大类？简单说明。
〔二〕灭菌消毒及净化设备
1.高压蒸汽灭菌器 2.紫外灯 3.超净工作台
〔三〕温控及枯燥设备
❖ 1.冰箱、冷柜 ❖ 2.液氮罐 ❖ 3.水浴锅 ❖ 4.恒温恒湿培养箱
〔四〕电泳及检测设备
1.电泳设备 电泳仪、电泳槽 2.凝胶成像分析系统 紫外分析仪
〔五〕其他设备
❖ 1.超纯水仪 ❖ 2.离心机 ❖ 3.基因扩增仪〔PCR仪〕 ❖ 4.微波炉 ❖ 5.制冰机 ❖ 全自动雪花制冰机
四、分子生物学实验本卷须知
〔一〕设备方面 1.可调式移液器
2.电子天平 3.PH计
4.分光光度计 5.高压蒸汽灭菌器
6.电泳仪 7.离心学实验室规那么
❖ 1、实验室、实验桌凳勿乱涂写刻画；上课须统一穿白大衣。 这也是为了同学门自身的卫生与平安，因为实验过程中会用 到一些有毒或危险试剂等。
❖ 2.分子生物学实验室的常见的有毒试剂有哪 些？
七、实验安排
❖ 全班55人，按照学号分组，每6人一组，共9 组，最后一组7人。
6人一组
八、实验报告
2021级生物技术专业
分子生物学实验报告
姓名：
学号：
实验工程：实验一
1.实验目的
2.实验原理
3.实验试剂
4.实验步骤
5.实验本卷须知
6.思考题

分子生物学领域常用的实验室仪器介绍分子生物学领域是现代生命科学的重要分支之一，它研究的是生物分子层面的生命过程，旨在深入揭示生命的本质和机制。

而在分子生物学研究中，实验室仪器则是不可或缺的工具，它们不仅可以帮助研究者进行实验操作，还能够提高实验结果的可靠性和精度。

本文将为大家介绍分子生物学领域常用的实验室仪器。

一、PCR扩增仪PCR（聚合酶链式反应）扩增技术是分子生物学领域中最常用的实验技术之一，是通过对核酸单链进行不断反复的扩增，从而获得足够多的样品用于后续的实验研究。

PCR扩增仪是一种能够精确控制温度并产生稳定温度的设备，它可以通过快速升温和降温的方式对PCR反应的反应体系进行加热和冷却，以满足PCR反应各个步骤所需的不同温度条件。

根据不同的实验需求，PCR扩增仪通常有单块、双块和四块等不同规格型号。

二、电泳仪电泳是一个常见的探测和分离生物分子的方法，尤其在DNA和RNA分子的研究中应用广泛。

电泳仪则是进行电泳实验的设备。

电泳仪根据不同的实验需求、对样品大小和数量的要求，可以选择垂直电泳仪、平板电泳仪、毛细管电泳仪、聚丙烯酰胺凝胶等不同类型的电泳仪。

其中，聚丙烯酰胺凝胶电泳仪是目前应用最广泛的电泳仪之一，它可以以高效、稳定和可重复的方式对生物分子进行分离、检测和纯化。

三、荧光定量PCR仪荧光定量PCR（实时PCR）技术是PCR技术的一种延伸，它通过检测PCR反应过程中荧光信号的变化动态监测扩增产物的累积情况，从而实时定量测定PCR反应产物的含量。

荧光定量PCR仪是荧光定量PCR技术实验的核心设备，它通过荧光信号的强度或增长速率来定量PCR反应物质的含量。

荧光定量PCR仪可根据实验数量和复杂程度的不同分为单通道和多通道两种类型。

四、显微镜生物显微镜是分子生物学领域中经常使用的设备，它主要用于观察、研究和记录细胞和组织样品的结构和形态特征，以及细胞间和分子间的相互作用和动态过程。

在生物领域中广泛应用多种类型的显微镜如荧光显微镜、激光共聚焦显微镜、超高分辨率显微镜等。