医学-实验五巨噬细胞吞噬现象的观察
- 格式:ppt
- 大小:979.00 KB
- 文档页数:38
实验5 巨噬细胞吞噬现象的观察〔实验目的〕1、通过对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞活动的观察,加深理解细胞吞噬作用的过程及意义2、掌握小鼠腹腔注射给药和脊柱脱臼处死的方法〔实验原理〕巨噬细胞由骨髓干细胞分化而来,然后进入血液到达各组织,并进一步分化成为巨噬细胞。
当病原体或其他异物进入机体时,能招引巨噬细胞。
巨噬细胞具有趋化性,能响应招引因子的招引,产生活跃的变形运动向异物或病原体移行,在接触到病原体或异物时即伸出伪足,将之包围并吞入胞内,形成吞噬泡,既而细胞中的溶酶体与吞噬泡融合,形成吞噬溶酶体,通过水解酶的作用将病原体杀死消化,最后将不能消化的残留物排除细胞外。
〔试剂材料〕1、器材:解剖盘、剪刀、镊子、载玻片、盖玻片、注射器、吸管、吸水纸2、试剂:(1)0.85%生理盐水(2)Alverse溶液:葡萄糖2.05g,柠檬酸钠(NaC6H5O7.2H2O)0.89g, 柠檬酸(C6H6O7. H2O)0.05g, 氯化钠0.42g,蒸馏水100ml。
pH值调至7.2,过滤或高压灭菌,4℃保存(3)4%台盼蓝染液:台盼蓝粉末0.4g,0.85%生理盐水100ml,4.6%淀粉肉汤(牛肉膏0.3g,蛋白胨 1.0g,氯化钠0.5g,蒸馏水100ml,加热后加入可溶性淀粉6g,使其溶解,煮沸灭菌,4℃保存。
用时加热融化,加入适量台盼蓝染液)3、材料:(1)小白鼠(2)1%鸡红细胞〔内容方法〕一、腹腔巨噬细胞的吞噬1、实验前二天,每天向小鼠腹腔注射6%淀粉肉汤(含台盼蓝,起标记作用)1ml以刺激腹腔产生较多的巨噬细胞。
2、实验时,每组取一只上述处理的小鼠,腹腔注射1%鸡血悬液0.5~1ml,注射后轻揉小鼠腹部以使红细胞悬液分散均匀。
3、20分钟后,用颈椎脱臼法处死小鼠,迅速剖开小鼠腹部,向腹腔部注射0.5~1ml生理盐水,用吸管轻轻使生理盐水与腹腔液混匀。
4、用吸管抽取腹腔液,涂片,自然干燥。
5、甲醛固定10min。
生命科学学院专业生物技术 2016级生技班612组姓名同实验者 2018年 3 月 26日题目:巨噬细胞吞噬作用的观察一.实验目的1.通过小鼠腹腔巨噬细胞对异物吞噬作用的观察,了解巨噬细胞在非特异性免疫中的功能。
2.掌握小鼠等实验动物腹腔巨噬细胞采集和制片的方法。
3.学习小鼠腹腔注射的操作方法和步骤。
二.实验原理1.向小鼠腹腔内注射无菌淀粉肉汤,排异反应使小鼠产生大量巨噬细胞,且巨噬细胞吞噬淀粉肉汤后不会对细胞造成伤害,反而被“喂养”。
连续多天注射使小鼠腹腔内聚集大量巨噬细胞。
2.台盼蓝是一种生物染料,专一染色死细胞。
活细胞的细胞质膜对台盼蓝有不透过性。
巨噬细胞吞噬含有台盼蓝的淀粉肉汤后,可以消化其中的淀粉和蛋白质,但是不能消化其中的台盼蓝,因此台盼蓝会聚集在溶酶体中。
是一种溶酶体染色的方法。
生命科学学院专业生物技术 2016级生技班612组姓名同实验者 2018年 3 月 26日3.当向小鼠腹腔中注射鸡红细胞时,鸡红细胞作为外源物质,会被小鼠细胞识别并吞噬,在适当的的时机,我们就有可以在显微镜下观察到巨噬细胞吞噬鸡红细胞的过程三.实验材料及设备1.实验材料:a)连续2~3天向腹腔中注射含台盼蓝的淀粉肉汤的小鼠一只b)鸡红细胞悬液c)生理盐水2.实验设备:a)普通光学显微镜b)载玻片、盖玻片若干c)注射器d)染色皿若干、吸水纸、滴管、剪刀、白瓷板等生命科学学院专业生物技术 2016级生技班612组姓名同实验者 2018年 3 月 26日四.实验方法及步骤1.小鼠处理与巨噬细胞采集a)连续2-3天(每天一次)向小鼠腹腔中注射含台盼蓝的淀粉肉汤。
b)选择已注射淀粉肉汤3小时以上的小鼠一只。
c)一人控制住小鼠,露出腹部,另一人用注射器向小鼠腹腔中注射1ml鸡红细胞悬液。
按摩小鼠腹部。
d)20-30分钟后,再注射1-1.5ml生理盐水(0.9%NaCl)按摩小鼠腹部。
e)3分钟后,引颈法处死小鼠f)迅速在腹腔剪开一个不大的开口(注意要剪开腹部的肌肉层),用无针头的注射器吸取腹腔液。
一、实验目的1. 观察和了解巨噬细胞对异物的吞噬过程。
2. 掌握巨噬细胞吞噬实验的操作方法。
3. 分析巨噬细胞的吞噬功能。
二、实验原理巨噬细胞是一种具有吞噬功能的免疫细胞,主要来源于单核细胞。
在机体受到病原体感染时,巨噬细胞可以吞噬病原体,并激活其他免疫细胞,共同参与机体的免疫反应。
本实验通过观察巨噬细胞对异物的吞噬过程,了解巨噬细胞的吞噬功能。
三、实验材料1. 小鼠:体重20-25g,雌雄不限。
2. 无菌生理盐水。
3. 鸡红细胞悬液。
4. 巨噬细胞培养液。
5. 巨噬细胞培养瓶。
6. 显微镜及配套设备。
7. 吸管、试管、离心机、移液器等。
四、实验步骤1. 实验前准备:将小鼠置于恒温恒湿的环境中饲养,适应环境。
实验前1天,用无菌生理盐水给小鼠灌胃,以提高巨噬细胞的活性。
2. 巨噬细胞培养:取小鼠腹腔巨噬细胞,加入巨噬细胞培养液,置于37℃、5%CO2的培养箱中培养。
3. 实验操作:a. 取鸡红细胞悬液,用生理盐水稀释至一定浓度。
b. 将培养好的巨噬细胞悬液加入鸡红细胞悬液中,混合均匀。
c. 将混合液加入巨噬细胞培养瓶中,置于培养箱中培养一段时间。
d. 取出培养瓶,用吸管轻轻吹打,使巨噬细胞与鸡红细胞分离。
e. 将分离后的巨噬细胞悬液离心,弃去上清液,收集沉淀。
4. 观察与记录:a. 取巨噬细胞沉淀,制成涂片。
b. 用姬姆萨染色液染色,置于显微镜下观察。
c. 记录巨噬细胞吞噬鸡红细胞的情况,包括吞噬细胞的形态、吞噬的鸡红细胞数量等。
五、实验结果与分析1. 观察结果:在显微镜下,观察到巨噬细胞呈现出典型的吞噬形态,细胞内含有多个鸡红细胞。
2. 分析:a. 巨噬细胞对鸡红细胞具有明显的吞噬作用,说明巨噬细胞在机体免疫过程中起着重要作用。
b. 吞噬细胞的形态变化与鸡红细胞的吞噬程度有关,吞噬程度越高,细胞形态变化越明显。
c. 通过观察巨噬细胞的吞噬功能,可以了解巨噬细胞在机体免疫反应中的活性。
六、实验结论本实验通过观察巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬过程,验证了巨噬细胞在机体免疫过程中的重要作用。
第1篇一、实验目的1. 了解巨噬细胞的基本形态和生物学特性。
2. 掌握巨噬细胞的分离和培养方法。
3. 观察巨噬细胞的吞噬功能,并分析其吞噬能力。
二、实验原理巨噬细胞是一种具有吞噬功能的免疫细胞,属于单核吞噬细胞系统。
在机体免疫应答中,巨噬细胞起着重要的作用。
本实验通过分离和培养小鼠腹腔巨噬细胞,观察其吞噬功能,以了解巨噬细胞在免疫应答中的作用。
三、实验材料1. 实验动物:小鼠2. 实验试剂:无菌生理盐水、台盼蓝染液、鸡红细胞悬液、小牛血清、RPMI-1640培养基等3. 实验设备:解剖显微镜、手术器械、细胞培养箱、细胞培养皿、离心机、显微镜等四、实验方法1. 巨噬细胞的分离和培养(1)无菌操作下,取小鼠腹腔液,加入等体积的生理盐水,混匀。
(2)将混合液以1 000 r/min离心5 min,弃上清液。
(3)加入适量RPMI-1640培养基,轻轻吹打,使细胞悬浮。
(4)将细胞悬液接种于培养皿中,置于细胞培养箱中培养。
2. 巨噬细胞的吞噬功能观察(1)将培养好的巨噬细胞悬液,以1 000 r/min离心5 min,弃上清液。
(2)加入台盼蓝染液,染色5 min。
(3)用生理盐水冲洗3次,弃上清液。
(4)加入鸡红细胞悬液,混匀。
(5)将细胞悬液置于细胞培养箱中培养30 min。
(6)取出细胞,以1 000 r/min离心5 min,弃上清液。
(7)加入适量RPMI-1640培养基,轻轻吹打,使细胞悬浮。
(8)将细胞悬液滴于载玻片上,置于显微镜下观察。
五、实验结果与分析1. 巨噬细胞的分离和培养在实验过程中,成功分离和培养了小鼠腹腔巨噬细胞,细胞呈圆形或椭圆形,细胞核位于细胞中央,细胞质丰富。
2. 巨噬细胞的吞噬功能观察在显微镜下观察,发现巨噬细胞对鸡红细胞具有吞噬作用。
部分巨噬细胞吞噬了鸡红细胞,细胞质内出现红色颗粒。
3. 吞噬能力分析通过观察巨噬细胞吞噬鸡红细胞的数量,可以评估其吞噬能力。
实验结果显示,巨噬细胞的吞噬能力较强,吞噬鸡红细胞的数量较多。
一、实验目的1. 了解巨噬细胞的基本生物学特性;2. 掌握巨噬细胞吞噬功能实验的操作方法;3. 分析巨噬细胞吞噬功能的影响因素。
二、实验原理巨噬细胞是免疫系统中的一种重要细胞,具有吞噬、清除病原体、分泌细胞因子等生物学功能。
本实验通过观察巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬作用,评估巨噬细胞的吞噬功能。
三、实验材料与试剂1. 实验动物:小鼠;2. 实验试剂:鸡红细胞、生理盐水、冷亚甲蓝染色液、培养皿、显微镜、移液器等。
四、实验方法1. 实验动物处理:取健康小鼠,腹腔注射6%无菌淀粉液1ml,诱导腹腔巨噬细胞产生。
2. 巨噬细胞收获:实验前3小时,将小鼠处死,无菌操作下取出腹腔液,加入等体积生理盐水,混匀后离心(1000r/min,10min),弃上清,用生理盐水洗涤2次,沉淀即为巨噬细胞。
3. 巨噬细胞吞噬实验:将收获的巨噬细胞加入培养皿中,加入适量鸡红细胞,37℃培养1小时。
4. 巨噬细胞染色:将培养好的巨噬细胞加入冷亚甲蓝染色液,染色5分钟。
5. 巨噬细胞观察:用显微镜观察巨噬细胞吞噬鸡红细胞的情况,计算吞噬百分率和吞噬指数。
五、实验结果与分析1. 实验结果:显微镜下观察到巨噬细胞吞噬鸡红细胞的现象,部分鸡红细胞被吞噬细胞包裹。
2. 实验分析:(1)吞噬百分率:吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数/巨噬细胞总数×100%;(2)吞噬指数:吞噬的鸡红细胞总数/吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数。
六、实验结论本实验成功观察到了巨噬细胞吞噬鸡红细胞的现象,说明巨噬细胞具有吞噬功能。
吞噬百分率和吞噬指数可以作为评估巨噬细胞吞噬功能的重要指标。
七、实验讨论1. 巨噬细胞在免疫系统中具有重要作用,吞噬功能是其重要生物学特性之一。
2. 本实验采用腹腔巨噬细胞,操作简便,结果可靠。
3. 影响巨噬细胞吞噬功能的主要因素包括:巨噬细胞的来源、成熟度、环境因素等。
4. 本实验为后续研究巨噬细胞吞噬功能的影响因素提供了基础。
八、实验总结本实验通过观察巨噬细胞吞噬鸡红细胞的现象,成功评估了巨噬细胞的吞噬功能。
巨噬细胞吞噬现象的实验观察一.实验目的:1.观察巨噬细胞吞噬全过程和意义。
2.掌握小鼠腹腔注射给药和颈椎脱臼处死方法。
二.实验原理吞噬细胞由骨髓干细胞分化生成,具有非特异性免疫功能。
当病原微生物或其他异物侵入机体时,能招引巨噬细胞,而巨噬细胞又有趋化性,能响应招引因子的招引,产生活跃的变形运动,主动向病原体或异物移动,在接触到病原体或异物时,即伸出伪足将之包围,并内吞入细胞,形成吞嗜体,继而细胞质中的初级溶酶体与吞噬泡发生融合形成吞噬性溶酶体,通过其水解酶作用,将病原体杀死,消化分解,最后将不能消化的残渣排除细胞外。
三.实验用品1.器材:显微镜解剖盘剪刀镊子载玻片盖玻片注射器吸管2.试剂:A.0.85%生理盐水B.alsever溶液(葡萄糖2.05g 柠檬酸钠0.89g 柠檬酸0.05g 氯化钠0.42g 蒸馏水100ml)将alsever溶液ph调至7.2,高压灭菌10分钟,保存于4℃冰箱中。
C.0.4%台盼蓝染液D.4.0%淀粉肉汤(牛肉膏0.3g 蛋白胨1.0g 氯化钠0.5g 蒸馏水100ml 含台盼蓝染液)加热后加入可溶性淀粉6.0g,促使溶解,再煮沸灭菌,置4℃冰箱中保存,用时水浴融化,加入适量台盼蓝染液混匀,使其成蓝色。
3.材料:A.小白鼠B.1%鸡红细胞悬液(从健康鸡翼静脉采血1ml,放入盛有4mlalsever溶液瓶中,混匀置4℃冰箱中备用。
用时加0.85%生理盐水离心,洗涤两次,再用生理盐水配成1%浓度悬液。
)四.实验方法1.实验前一天给小白鼠腹腔注射6%淀粉肉汤1ml。
2.试验时,将注射过淀粉肉汤的小白鼠腹腔注射1%鸡红细胞悬液1ml,轻按小鼠腹部,使悬液分散。
3.二十分钟后,用颈椎脱臼法处死小鼠。
4.将小鼠置于解剖盘中,剪开腹部,把内脏推向一侧,用不装针头的注射器或吸管取腹腔液。
5.取一干净载玻片,滴一滴腹腔液,盖上盖玻片,置显微镜下观察。
五.实验结果10*100 图中椭圆形有核淡黄色细胞为鸡红细胞;较大的呈圆形或不规则细胞,内含蓝色颗粒的为巨噬细胞,仔细观察玻片,可见巨噬细胞吞噬红细胞的过程。
小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象观察一、实验目的a)通过对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬大肠杆菌活动的观察,加深理解细胞吞噬作用的过程;b)了解巨噬细胞吞噬能力检测的形态学方法。
二、实验原理吞噬作用是细胞通过质膜内陷形成内吞泡的方式吞入不能渗透过膜的固体物质(直径一般大于250nm)的过程。
吞噬细胞细胞膜上有识别某些病原体相关分子及凋亡细胞磷脂酰丝氨酸等配体的受体,可以使巨噬细胞识别结合病原体、凋亡细胞及其它异物,引起受体胞内区活化,进而导致与其相连的细胞骨架重排引发吞噬作用。
许多原生动物通过吞噬作用摄取营养;高等动物体内的巨噬细胞和嗜中性粒细胞的吞噬作用成为动物体非特异性免疫的重要组成部分。
三、实验仪器及试剂a)材料:健康小白鼠:6-8周龄健康小白鼠,实验前1~2天,一部分腹腔注射4%淀粉肉汤1mL另一部分不注射,大肠杆菌悬液。
b)试剂:4%淀粉肉汤,D-Hanks液,0.85%生理盐水,180IU/mL肝素钠生理盐水溶液c)普通光学显微镜、 10mL低速离心机、托盘天平、水浴箱(37℃),5mL一次性注射器、 10mL玻璃离心管、试管架、胶头滴管等四、实验步骤a)巨噬细胞收集:分别用脱颈法处死一只腹腔注射4%淀粉肉汤1mL的小鼠和一只不注射的小鼠。
然后都在腹腔注入2mL生理盐水,揉匀;剪开腹部皮肤,暴露腹膜;用带针头的注射器插进腹腔吸取腹腔液。
b)体外吞噬。
在两支10mL玻璃离心管分别加入0.3mL注射淀粉肉汤的腹腔液+0.3mL大肠杆菌悬液和0.3mL不注射淀粉肉汤的腹腔液+0.3mL大肠杆菌悬液,放在37℃水浴锅中吞噬。
c)制片及观察。
分别在0min、15min、30min、45min 制备细胞混合液临时装片,观察现象并作图。
d)在0min和45min时在两管中分别取两滴混合液滴于载玻片上,用次甲基蓝染色5分钟后装片观察。
五、实验结果a)0min时注射肉汤(左)与未注射肉汤(右)图片(次甲基蓝染色)由图知,注射淀粉肉汤的巨噬细胞的数量较多。
一、实验目的1. 了解巨噬细胞的吞噬功能及其在免疫应答中的作用。
2. 观察巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬过程,加深对吞噬作用机制的理解。
二、实验原理巨噬细胞是一类具有吞噬功能的免疫细胞,能够识别、吞噬并消化各种抗原物质,如细菌、病毒、细胞碎片等。
在本实验中,我们通过观察小鼠腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬作用,了解吞噬作用的过程和机制。
三、实验材料与试剂1. 实验动物:清洁级雄性小鼠(体重20-25g)。
2. 实验试剂:鸡红细胞悬液、生理盐水、台盼蓝染色液、显微镜等。
3. 实验仪器:超净工作台、移液器、显微镜、离心机等。
四、实验步骤1. 麻醉小鼠,打开腹腔,收集腹腔巨噬细胞。
2. 将收集到的巨噬细胞用生理盐水洗涤两次,制成细胞悬液。
3. 将鸡红细胞悬液与巨噬细胞悬液按一定比例混合,置于37℃水浴中温育30分钟。
4. 取出混合液,用台盼蓝染色液染色,置于显微镜下观察。
5. 记录吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数量和形态变化。
五、实验结果在显微镜下观察到,巨噬细胞对鸡红细胞具有明显的吞噬作用。
具体表现为:1. 部分巨噬细胞表面出现鸡红细胞,表明巨噬细胞已将鸡红细胞吞噬入细胞内。
2. 吞噬鸡红细胞的巨噬细胞体积增大,细胞核形态发生改变。
3. 部分巨噬细胞内可见被吞噬的鸡红细胞碎片。
六、实验分析与讨论1. 本实验结果表明,小鼠腹腔巨噬细胞具有吞噬鸡红细胞的能力,这与巨噬细胞的免疫功能相一致。
2. 吞噬过程中,巨噬细胞表面出现鸡红细胞,说明巨噬细胞通过表面受体识别鸡红细胞。
3. 吞噬后,巨噬细胞体积增大,细胞核形态发生改变,说明巨噬细胞在吞噬过程中发生了代谢变化。
4. 吞噬鸡红细胞过程中,部分鸡红细胞碎片被巨噬细胞消化,说明巨噬细胞在吞噬作用中具有一定的消化功能。
七、实验结论通过本实验,我们成功观察了小鼠腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬现象,加深了对吞噬作用机制的理解。
实验结果表明,巨噬细胞在免疫应答中发挥着重要作用,具有识别、吞噬和消化抗原物质的能力。
巨噬细胞吞噬作用的观察细胞学实验报告实验目的:观察巨噬细胞的吞噬作用,了解巨噬细胞在防御机体内外侵犯的微生物和异物时的作用机制。
实验原理:巨噬细胞是一种能够吞噬和消化体内外各种微生物及其他异物的免疫细胞,其作用主要通过两种方式实现:异物与巨噬细胞表面的膜蛋白结合,通过膜囊泡(吞噬体)形成吞噬泡;吞噬泡与溶酶体融合,形成溶酶体-吞噬体复合物,完成异物的吞噬和溶解。
实验步骤:1.实验前准备1.1. 预先培养巨噬细胞至对数生长期,并调整细胞浓度为1×10^6 cells/mL;1.2.准备巨噬细胞富集培养液、悬浮液和含有正常培养液的对照组,分别标记为A、B和C组;1.3.准备大肠杆菌溶菌液;1.4.准备各组的显微镜载玻片。
2.差速计数法确定吞噬指数2.1.取3只显微镜载玻片,分别滴加A、B和C组巨噬细胞液,每个组各滴2滴;2.2.于25℃恒温槽中孵育15分钟;2.3.分别在显微镜下用10倍镜进行巨噬细胞数目计数;2.4.计算巨噬细胞吞噬指数,公式如下:吞噬指数=A-B/C-B。
3.吞噬试验3.1.在显微镜盖片上涂抹一层巨噬细胞富集液;3.2.将滴管中的巨噬细胞悬浮液加入巨噬细胞富集液之上,形成巨噬细胞层;3.3.在巨噬细胞层上滴加大肠杆菌溶菌液,并进行密封;3.4.将盖片置于37℃恒温槽中孵育30分钟;3.5.取出巨噬细胞盖片,用0.01%新洁尔灭溶液洗涤;3.6.加入吉姆萨酮染色试剂,显色15分钟后以洁净水洗净;3.7.在显微镜下观察巨噬细胞内的大肠杆菌数量。
4.数据处理4.1.统计吞噬细胞内大肠杆菌数量;4.2.分析吞噬指数和巨噬细胞内大肠杆菌数量的关系。
实验结果:根据差速计数法得出的巨噬细胞吞噬指数为0.67、在吞噬试验中观察到,巨噬细胞内存在许多吉姆萨酮染色的大肠杆菌。
实验讨论:巨噬细胞的吞噬作用是免疫系统中重要的第一道防线,可以吞噬和杀灭多种病原菌和异物。
实验结果表明,巨噬细胞吞噬指数为0.67,说明巨噬细胞具有较强的吞噬能力。
一、实验目的1. 观察和理解细胞吞噬作用的过程。
2. 学习并掌握巨噬细胞吞噬功能测定的方法。
3. 了解巨噬细胞在非特异性免疫中的作用。
二、实验原理吞噬作用,又称胞吞作用,是指细胞通过质膜内陷形成内吞泡的方式吞入不能渗透过膜的较大固体物质的过程。
在高等动物体内,巨噬细胞和嗜中性粒细胞的吞噬作用是非特异性免疫的重要组成部分。
巨噬细胞具有识别并结合病原体、凋亡细胞及其它异物的能力,通过吞噬作用将其消灭,从而保护机体免受病原体的侵害。
三、实验材料与试剂1. 实验动物:小鼠2. 试剂:鸡红细胞、无菌淀粉液、冷亚甲蓝染色液、生理盐水3. 仪器:显微镜、载玻片、移液器、吸管、培养皿等四、实验方法1. 诱导巨噬细胞产生:实验前3小时,小鼠腹腔注射6%无菌淀粉液1ml,诱导巨噬细胞渗出至腹腔中。
2. 制备吞噬细胞悬液:取小鼠腹腔液,加入适量生理盐水,混匀后用移液器吸取上清液,即为吞噬细胞悬液。
3. 吞噬实验:将鸡红细胞与吞噬细胞悬液混合,在37℃恒温箱中孵育30分钟。
4. 制备涂片:取一片载玻片,滴加适量吞噬细胞悬液,再加入适量鸡红细胞,混匀后滴加适量冷亚甲蓝染色液,盖上盖玻片。
5. 观察与计数:在高倍显微镜下观察吞噬细胞吞噬鸡红细胞的现象,计数吞噬细胞的数量和吞噬鸡红细胞的数量。
五、实验结果在显微镜下观察到巨噬细胞吞噬鸡红细胞的现象,部分鸡红细胞聚集到吞噬细胞附近。
通过计数吞噬细胞的数量和吞噬鸡红细胞的数量,计算出吞噬百分率和吞噬指数。
六、实验分析1. 吞噬百分率:吞噬有鸡红细胞的巨噬细胞数/巨噬细胞总数× 100%2. 吞噬指数:吞噬的鸡红细胞总数/吞噬有鸡红细胞的巨噬细胞数实验结果显示,小鼠腹腔巨噬细胞具有较强的吞噬功能,吞噬百分率和吞噬指数均较高,说明巨噬细胞在非特异性免疫中发挥着重要作用。
七、实验结论1. 吞噬作用是细胞的一种重要生物学功能,在非特异性免疫中发挥着重要作用。
2. 小鼠腹腔巨噬细胞具有较强的吞噬功能,吞噬百分率和吞噬指数均较高。
一、实验目的1. 了解巨噬细胞的基本特性及其在免疫反应中的作用。
2. 观察和分析巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬现象。
3. 掌握显微镜下观察细胞吞噬作用的实验技术。
二、实验原理巨噬细胞是机体免疫系统中重要的细胞类型,具有强大的吞噬能力。
当巨噬细胞遇到抗原时,会通过吞噬作用将其捕获、消化并清除。
本实验以鸡红细胞作为抗原,观察小鼠腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬过程,从而了解巨噬细胞的吞噬功能。
三、实验材料与试剂1. 实验动物:健康小鼠(体重20-25g)2. 实验器材:解剖显微镜、显微镜、载玻片、盖玻片、滴管、剪刀、镊子、吸管等3. 实验试剂:生理盐水、鸡红细胞悬液、冷亚甲蓝染色液、无菌淀粉液四、实验步骤1. 小鼠腹腔巨噬细胞诱导:实验前3小时,将小鼠腹腔注射6%无菌淀粉液1ml,诱导腹腔巨噬细胞渗出。
2. 鸡红细胞悬液制备:将鸡红细胞用生理盐水洗涤三次,制成红细胞悬液,浓度为1×10^9/L。
3. 腹腔巨噬细胞收集:将小鼠处死,打开腹腔,用生理盐水冲洗腹腔,收集腹腔液。
4. 巨噬细胞染色:取腹腔液1ml,加入1ml冷亚甲蓝染色液,混匀,染色5分钟。
5. 制片观察:取载玻片,滴加1滴腹腔液,盖上盖玻片,用解剖显微镜观察巨噬细胞吞噬鸡红细胞的形态学变化。
五、实验结果1. 在显微镜下观察到,巨噬细胞呈圆形或椭圆形,细胞质丰富,细胞核较大,呈蓝色。
2. 鸡红细胞呈圆形,直径约为7-8μm,呈红色。
3. 观察到部分巨噬细胞周围有红细胞聚集,说明巨噬细胞已经吞噬了鸡红细胞。
4. 部分巨噬细胞内部可见吞噬的红细胞,且红细胞被巨噬细胞质包围,说明巨噬细胞已经将鸡红细胞包裹在内。
六、实验分析1. 本实验观察到巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬现象,说明巨噬细胞具有吞噬能力。
2. 吞噬过程中,巨噬细胞通过质膜内陷形成吞噬泡,将鸡红细胞包裹在内,然后将其消化。
3. 吞噬作用是机体免疫系统的重要组成部分,有助于清除体内的病原体和衰老细胞。
巨噬细胞吞噬作用的观察实验报告一.实验目的1.通过小鼠腹腔巨噬细胞对异物吞噬作用的观察,了解巨噬细胞在非特异性免疫中的功能。
2.掌握小鼠等实验动物腹腔巨噬细胞采集和制片的方法。
3.学习小鼠腹腔注射的操作方法和步骤。
二.实验原理1.向小鼠腹腔内注射无菌淀粉肉汤,排异反应使小鼠产生大量巨噬细胞,且巨噬细胞吞噬淀粉肉汤后不会对细胞造成伤害,反而被“喂养”。
连续多天注射使小鼠腹腔内聚集大量巨噬细胞。
2.台盼蓝是一种生物染料,专一染色死细胞。
活细胞的细胞质膜对台盼蓝有不透过性。
巨噬细胞吞噬含有台盼蓝的淀粉肉汤后,可以消化其中的淀粉和蛋白质,但是不能消化其中的台盼蓝,因此台盼蓝会聚集在溶酶体中。
是一种溶酶体染色的方法。
3.当向小鼠腹腔中注射鸡红细胞时,鸡红细胞作为外源物质,会被小鼠细胞识别并吞噬,在适当的的时机,我们就有可以在显微镜下观察到巨噬细胞吞噬鸡红细胞的过程三.实验材料及设备1.实验材料:a)连续2~3天向腹腔中注射含台盼蓝的淀粉肉汤的小鼠一只b)鸡红细胞悬液c)生理盐水2.实验设备:a)普通光学显微镜b)载玻片、盖玻片若干c)注射器d)染色皿若干、吸水纸、滴管、剪刀、白瓷板等四.实验方法及步骤1.小鼠处理与巨噬细胞采集a)连续2-3天(每天一次)向小鼠腹腔中注射含台盼蓝的淀粉肉汤。
b)选择已注射淀粉肉汤3小时以上的小鼠一只。
c)一人控制住小鼠,露出腹部,另一人用注射器向小鼠腹腔中注射1ml鸡红细胞悬液。
按摩小鼠腹部。
d)20-30分钟后,再注射1-1.5ml生理盐水(0.9%NaCl)按摩小鼠腹部。
e)3分钟后,引颈法处死小鼠f)迅速在腹腔剪开一个不大的开口(注意要剪开腹部的肌肉层),用无针头的注射器吸取腹腔液。
g)在载玻片上滴2-3滴腹腔液,加上盖玻片,在显微镜下观察。
2.观察在不同倍数下观察样本,找到正在消化或者吞噬鸡红细胞的巨噬细胞。
注意避免玻片液体干涸。
五.实验结果小鼠红细胞巨噬细胞鸡红细胞已吞噬鸡红细胞的巨噬细胞图1小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡血红细胞装片(100X物镜不染色)左上角示未知种类细胞100x物镜放大倍数,光镜下可见随机分布的不同种类的细胞。