蛋白质与酶工程实训报告

三一文库（）〔“酶工程”_暑期科研实践_实习_报告_总结 2100字 - 总结范文〕“酶工程”暑期科研实践总结报告生物科学与工程学院生物工程2班黄义林20xx30742333这次暑期科研实践，我和李洋、黄文潘都参加了有张俊辉师兄所负责的酶分子改造的项目，实际参加实验的时间是7月13至29号，以及8月16至19号。

在此之前，我们还参加了有郑穗平老师和林影老师讲授的关于酶的发展、现状以及前景的讲座，以及内容为负责各个项目的师兄对其项目讲解的培训。

参加实践前的讲座和培训都让我对酶的发展概况、研究方向有了更深刻全面的认识。

实验中，张俊辉师兄让我们从实验的开头开始，逐步学习实验过程中各阶段的实验操作，同时对专业知识进行讲解，让我们更好地掌握实验操作的原理。

在实验流程中，我们的操作都没有出现能直接导致实验失败的失误，但实验最后并没有得到想要的产物，原因应该是多方面的，也和我们的实验操作有很大关系。

实验没有得到很好的成果，但在实践过程中，我学习和掌握了一些基本实验操作技能及操作规范，并对实验室内的规章制度有了更多的了解。

下面说一下我在实验中学到的知识和其他心得体会。

首先是酶分子改造实验的思想：获得待改造酶分子的三维结构后，对其进行分析，从而确定可能改善酶某一方面性能的突变位点，通过反编译获得改造后的酶的基因，把这段基因再表达出来，就得到改造后的酶分子。

思想比较直接，但是实际操作却比较迂回，因为某些步骤看起来不复杂，但在现实中要实现就没有那么简单，比如要确定突变位点和突变的方向，目前的理论对蛋白质结构和功能的研究还达不到可以直接指导酶分子改造的那个层次，所以在改造的时候需要结合理性突变和随机突变，即理性确定突变位点，然后在那个位点进行全突变，或者增加突变位点；要获得反编译后的酶的基因，直接合成成本太高（1bp 要几块钱），所以需要对原来的基因进行操作（设计引物，通过PCR对酶基因进行全突变）；对改造后的酶的基因进行表达，需要利用基因工程技术，我们在实际操作中是先把基因和质粒连接，先转化大肠杆菌以增殖质粒，再从大肠杆菌中提取质粒，转化毕赤酵母进行最终的表达；因为设置多个突变位点以及每个突变位点都有二十种氨基酸，所以需要进行大量的筛选（筛选量随着突变位点的增长而呈指数增长）；基因既看不见有摸不着，在实验过程中需要对每一步的成果进行检测，比较多的就是依靠跑胶来检测DA分子的长度，确定是否得到目的基因，与突变后的酶基因进行连接的质粒上面要有抗生素抗性标记，转化后的大肠杆菌或毕赤酵母要用含抗生素的平板进行培养，以筛选出成功转化的菌落。

《蛋白质与酶工程实习》实习报告撰写规范实习时间：2012年暑假实习地点：湖南福来格生物技术有限公司指导教师：王义强，周小慧，周波，许岗实习目的：实践教学是高校人才培养中十分重要的教学环节，是巩固学生的理论知识，培养学生实践能力、创新能力和创业、敬业精神，使学生了解社会、接触生产实际，实现人才培养目标的重要途径。

通过实习，让学生深入企业，了解企业，接触生产实际，巩固专业理论知识，达到理论与实践相结合的目的。

《蛋白质与酶工程实习》是生物技术专业的实践教学课程。

通过该实习，使学生在实习过程中进一步学习和掌握一些蛋白质和酶的特征﹑用途﹑制造原理﹑生产方法与工艺流程，培养学生的创造精神、创新意识和动手能力，对学生今后从事蛋白质和酶的生产、销售、教学和科研等工作奠定实践基础。

实习内容：1. 实习总动员2012年暑假，我们生命科学与技术学院09级的学生，在任课老师的带领下，来到湖南福来格生物技术有限公司参观实习。

并在湖南福来格生物技术公司，许董事长介绍了公司的基本情况、学科发展方向、科研基础设施（包括大型的分析检测仪器设备和研究所发酵中试技术服务平台）、发展情况及近年来开展的课题、固体液体发酵流程等方面给以了讲解，使我们在接收书本知识之外，有了一次充分接触实际工作，锻炼自己的机会。

1.1上网站查询并了解浑南福来格生物技术有限公司的相关产业，技术产品已经公司的大体经营状况。

预习酶制剂产品的工艺流程，酶制剂产品工艺流程图，掌握主要生物化学反应原理。

1.2在公司负责人许总和曾总的讲解下，分如下三个部分：来了解福来格生物技术有限公司在当代社会发展中的地位及战略目标。

1.2.1当代酶工程的发展现况已经中国总体生物产业的发展状况：生物技术形成阶段是：1980-2000年；发展阶段是：2000-2050年。

酶工程是指利用酶、细胞或细胞器等具有的特异催化功能，借助生物反应装置和通过一定的工艺手段生产出人类所需要的产品。

它是酶学理论与化工技术相结合而形成的一种新技术。

蛋白质的功能性质实验报告蛋白质的功能性质实验报告引言：蛋白质是生命体内最重要的有机分子之一，它在维持生命活动中起着至关重要的作用。

蛋白质具有多种功能性质，包括结构支持、酶催化、运输、信号传递等。

本实验旨在探究蛋白质的功能性质，并通过实验验证其在不同环境下的表现。

实验一：蛋白质的结构支持功能在这个实验中，我们选择了鸡蛋白作为研究对象，通过将鸡蛋白溶液注入不同浓度的盐水中，观察蛋白质在不同环境中的表现。

结果表明，当鸡蛋白溶液与低浓度盐水混合时，蛋白质会凝聚成固体，形成一种类似于凝胶的物质。

这说明蛋白质具有结构支持功能，能够在适宜的条件下形成稳定的结构。

实验二：蛋白质的酶催化功能在这个实验中，我们选择了酪氨酸酶作为研究对象，通过观察其在不同温度和pH值下的催化效果，来验证蛋白质的酶催化功能。

结果表明，酪氨酸酶在适宜的温度和pH值下能够催化酪氨酸的分解，产生氨基酸和其他产物。

而在过高或过低的温度和pH值下，酪氨酸酶的催化效果明显降低。

这说明蛋白质的酶催化功能对环境条件十分敏感。

实验三：蛋白质的运输功能在这个实验中，我们选择了血红蛋白作为研究对象，通过观察其在不同浓度的氧气和二氧化碳气体中的吸附情况，来验证蛋白质的运输功能。

结果表明，血红蛋白能够与氧气发生结合，形成氧合血红蛋白，并在高浓度氧气环境中释放氧气。

而在二氧化碳气体环境下，血红蛋白能够与二氧化碳发生结合，形成碳酸血红蛋白，并在低浓度二氧化碳环境中释放二氧化碳。

这说明蛋白质能够通过运输分子来维持生命活动的正常进行。

实验四：蛋白质的信号传递功能在这个实验中，我们选择了G蛋白作为研究对象，通过观察其在细胞膜上的信号传递过程，来验证蛋白质的信号传递功能。

结果表明，G蛋白能够通过与细胞膜上的受体结合，激活细胞内的信号传递通路。

这种信号传递过程对于维持细胞的正常功能和生命活动至关重要。

而当G蛋白发生突变或受到干扰时，信号传递通路会受到阻断，导致细胞功能异常。

实验一考马斯亮蓝G-250测蛋白含量一、实验目的：学习常用的测定蛋白质含量的方法。

二、原理考马斯亮蓝G250（R250）具有红色和蓝色两种色调。

在酸性溶液中，其以游离态存在呈棕红色；当它与蛋白质中碱性氨基酸（特别是精氨酸）和芳香族的氨基酸残基通过疏水作用结合后变为蓝色，染料的最大吸收峰的位置由465nm变为595nm。

它染色灵敏度高，比氨基黑高3倍。

反应速度快，约在2分钟左右时间达到平衡，在室温一小时内稳定。

在0.01 ～1.0mg蛋白质范围内，蛋白质浓度与A595值成正比。

所以常用来测定蛋白质含量。

三、试剂与仪器①标准蛋白溶液（牛血清蛋白1.0mg/ml）②考马斯亮蓝溶液：考马斯亮蓝G-250 100ｍg溶于50mL95%乙醇中，加100mL85%磷酸混匀，配成原液。

临用前取原液15mL，加蒸馏水至100mL，用粗滤纸过滤后，最终浓度为0.01%③仪器：分光光度计，旋涡混合器四、实验步骤1、配制标准蛋白溶液（牛血清清蛋白BSA：2.0mg/ml），每组10ml，2、考马斯亮蓝G-250溶液（终浓度0.01%），3、取12支试管，分为三组平行，按表中顺序加入标准蛋白溶液，水和试剂：即分别向各管中加入标准蛋白溶液0，0.1，0.2，0.3，0.4，0.5ml；然后补充去离子水到0.1ml；最后各管加入5.0ml考马斯亮蓝G-250。

每加完一管立刻在旋涡混合器上混匀（注意不要太剧烈）。

4、放置5min后，在分光光度计上测定样品的光吸收值A595（1号管为空白对照）。

5、用标准蛋白的量为横坐标，用A595为纵坐标，作标准曲线图，由此曲线，根据后续试验测出的未知样品的A595值，可查出未知样品的蛋白质含量。

6、实验结果分析：误差分析，为什么出现这样的结果，什么原因导致的？实验二3,5－二硝基水杨酸（DNS）法测定酶活力一、实验目的：学习DNS测定还原糖的方法二、实验原理：还原糖的测定是糖定量测定的基本方法。

实习报告实习单位：XX生物科技有限公司实习时间：2021年6月1日至2021年8月31日实习内容：酶工程一、实习背景及目的作为一名生物技术专业的学生，我一直对酶工程领域充满兴趣。

酶工程是一门应用生物化学、微生物学和分子生物学等知识，通过现代生物技术手段对酶进行改造和应用的学科。

本次实习旨在让我深入了解酶工程的基本原理、技术方法和实际应用，提高我的实践能力和创新能力。

二、实习内容及心得1. 酶的筛选与改造在实习过程中，我参与了酶的筛选与改造项目。

首先，我们通过文献调研和实验室现有资源，选择了适合目标反应的酶。

然后，利用PCR技术对酶的基因进行克隆，并通过基因编辑技术对酶的氨基酸序列进行改造，以提高其催化活性和稳定性。

此外，我还学会了使用各种生物信息学工具对酶的三维结构进行预测和分析，为酶的改造提供理论依据。

2. 酶的表达与纯化在酶的筛选与改造过程中，我了解了酶的表达与纯化技术。

我们选用大肠杆菌作为宿主细胞，通过优化表达载体和培养条件，实现了酶的高效表达。

然后，采用凝胶过滤层析、离子交换层析和亲和层析等方法对酶进行纯化，以获得高纯度的酶制剂。

在此过程中，我掌握了各种层析技术的原理和操作技巧，并学会了使用相关设备进行实验操作。

3. 酶的应用与评价在酶的应用与评价方面，我参与了多个实际项目的研发。

例如，我们将筛选到的酶应用于生物制药、食品加工和环境保护等领域，评估其催化效果和实用性。

此外，我还参与了酶的动力学实验，通过测定酶的米氏常数（Km）和最大催化速率（Vmax），评估酶的催化性能。

这些实验让我深刻认识到酶在实际应用中的重要性和潜力。

4. 实习收获通过本次实习，我不仅掌握了酶工程的基本原理和技术方法，还提高了自己的实践能力和创新能力。

在实习过程中，我学会了查阅文献、分析实验数据和撰写实验报告。

同时，与导师和同事们的交流与合作，使我更加熟悉了实验室的运作方式和团队协作的重要性。

总之，本次实习让我在酶工程领域取得了丰硕的成果，为今后的学术研究和职业生涯奠定了基础。

第1篇一、实验目的本次实验旨在通过生物化学实验，加深对生物大分子结构和功能的理解，掌握蛋白质、核酸等生物大分子的提取、分离和鉴定方法，并学会使用相应的实验技术和仪器。

二、实验原理1. 蛋白质的提取与鉴定：蛋白质是生命活动中的重要物质，其提取和鉴定是生物化学研究的重要内容。

本实验通过蛋白质的盐析、电泳等方法，实现对蛋白质的提取和鉴定。

2. 核酸的提取与鉴定：核酸是生物遗传信息的携带者，其提取和鉴定对于研究生物遗传具有重要意义。

本实验通过酚-氯仿法提取DNA，通过比色法测定DNA的浓度。

3. 酶的活性测定：酶是生物体内催化反应的催化剂，其活性测定是研究酶的重要方法。

本实验通过测定酶促反应速率，计算酶的活性。

三、实验材料与仪器1. 材料：新鲜动物组织、化学试剂、缓冲液、电泳凝胶等。

2. 仪器：高速离心机、电泳仪、分光光度计、显微镜等。

四、实验步骤1. 蛋白质的提取与鉴定（1）取一定量新鲜动物组织，加入适量缓冲液，研磨。

（2）将研磨液离心，取上清液即为蛋白质提取液。

（3）将蛋白质提取液加入等体积的95%乙醇，混匀，静置。

（4）取沉淀，用少量双蒸水洗涤，干燥，溶解于适量双蒸水中。

（5）将蛋白质溶液进行SDS-PAGE电泳，观察蛋白质条带。

2. 核酸的提取与鉴定（1）取一定量新鲜动物组织，加入适量缓冲液，研磨。

（2）将研磨液加入等体积的酚-氯仿，混匀，静置。

（3）取上清液，加入等体积的异丙醇，混匀，静置。

（4）取沉淀，用少量双蒸水洗涤，干燥，溶解于适量双蒸水中。

（5）用分光光度计测定DNA的浓度。

3. 酶的活性测定（1）配制底物溶液。

（2）将底物溶液加入酶溶液，记录反应速率。

（3）根据反应速率计算酶的活性。

五、实验结果与分析1. 蛋白质的提取与鉴定：通过SDS-PAGE电泳，成功分离出多条蛋白质条带，表明实验中成功提取了蛋白质。

2. 核酸的提取与鉴定：通过比色法测定，成功提取出DNA，浓度为0.5μg/μL。

蛋白质与酶工程结课感言近年来，随着生物技术的飞速发展，蛋白质与酶工程逐渐成为研究领域中备受关注的热点之一。

通过对蛋白质的研究和工程改造，我们能够更好地理解生物体内的生物过程，并且可以利用这些知识来开发新的药物和生物催化剂。

在本次学习中，我对蛋白质与酶工程有了更深入的了解，并且对其在实际应用中的巨大潜力有了更清晰的认识。

蛋白质作为生物体内重要的官能分子，承担着多种生物过程的关键角色。

在课程中，我们学习了蛋白质的基本结构和功能，了解了蛋白质的折叠和组装机制，以及蛋白质与其他分子相互作用的方式。

这些知识对于我们理解生物体内的各种生理过程以及疾病的发生机制具有重要意义。

酶作为一种生物催化剂，在生物工程和制药领域有着广泛的应用。

在课程中，我们学习了酶的分类、结构和催化机制。

通过对酶的工程改造，可以提高其催化效率和稳定性，从而实现对生物过程的精确控制和产物的高效合成。

酶工程在制药领域尤为重要，通过改造酶的催化性能，可以开发出更安全、更有效的药物，为人类的健康事业做出贡献。

在学习过程中，我深刻体会到了科学研究的艰辛和创新的重要性。

蛋白质与酶工程是一门综合性强、实验技术要求高的学科，需要我们熟练掌握实验操作技巧和数据分析方法。

同时，在解决实际问题时，我们需要不断思考和创新，寻找到适合的实验方案和研究思路。

只有不断地学习和实践，我们才能够在蛋白质与酶工程领域取得更加卓越的成就。

我还意识到在蛋白质与酶工程研究中，与其他学科的交叉合作具有重要意义。

比如，生物信息学的发展为蛋白质序列和结构的研究提供了强有力的工具和方法；材料科学的进展为酶的固定化和稳定化提供了新的思路和技术。

因此，我们应该与其他学科的研究者密切合作，共同推动蛋白质与酶工程的发展。

蛋白质与酶工程是一门前沿的研究领域，对于推动生物技术的发展和促进人类健康具有重要意义。

通过本次学习，我对蛋白质与酶工程有了更深入的了解，并且意识到其在生物制药和生物催化等领域的巨大潜力。

实验一实验题目: 大蒜SOD的分离纯化及活力测定1.实验目的及要求:2.通过学习超氧化物歧化酶的提取分离方法, 掌握有机溶剂沉淀蛋白质原理3.掌握测定超氧化物歧化酶活性方法实验仪器及材料:1.试剂: 50mmol/L pH7.8磷酸缓冲液, 冷丙酮, 氯仿-乙醇, pH8.2 50mmol/L Tris-HCl, 10mmol/L HCl, 50mmol/L 邻苯三酚2.器材：恒温水浴槽、紫外分光光度计、试管、离心机、移液器（1mL, 50μL, 25μL）一、实验原理：超氧化物歧化酶（SOD）是一种具有抗氧化、抗衰老、抗辐射和消炎作用的药用酶, 它可催化超氧负离子（O2-）进行歧化反应, 生成氧和过氧化氢2O2-+2H+→H2O2+O2,大蒜瓣和悬浮培养的大蒜细胞含有较丰富的SOD, 通过组织或细胞破碎后, 可用pH7.8磷酸缓冲液提取, SOD金属蛋白酶对pH、热和蛋白质水解等反应比一般酶稳定, 且SOD不溶于丙酮, 可用丙酮沉淀和热击结合法提取和纯化SOD。

二、实验步骤1.SOD提取液: 称取20g左右大蒜蒜瓣, 清水洗净, 再用蒸馏水冲洗, 用滤纸吸干, 置于研磨器中研磨, 使组织或细胞破碎, 然后加入2-3倍体积的0.05mol/L pH7.8的磷酸缓冲液, 继续研磨搅拌20min, 使SOD充分溶解到缓冲液中, 然后用离心机在5000r/min下, 离心15min, 弃沉淀得提取液2.粗酶液制备: 提取液加入0.25倍体积的氯仿-乙醇（3:5）混合溶剂搅拌15min 5000r/min离心15min去杂蛋白沉淀, 得粗酶液3.SOD的沉淀分离: 用盐酸调节SOD粗提液pH值5.0, 加入0.6冷丙酮, 搅拌15min 5000r/min（3）计算:氧化率达50%酶量定义为1个酶活力单位。

0.070—样液速率————————×100%0.070 样液稀释倍数酶活性（U/mL）=————————————×反应液总体积×———————50% 样液体积实验二实验题目: SDS-PAGE法测定酶蛋白分子量1.实验目的及要求:2.掌握蛋白质SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)的基本原理。

一、实验目的1. 理解酶工程的基本原理和实验方法。

2. 学习酶的制备、纯化和活性测定等实验技术。

3. 掌握酶的催化特性和应用。

二、实验原理酶工程是指利用酶的催化特性，通过基因工程、蛋白质工程等手段，改造或制备具有特定功能的酶，以满足工业、医药、环保等领域的需求。

本实验通过制备、纯化和活性测定等方法，研究酶的催化特性和应用。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：酶源（如淀粉酶、蛋白酶等）、底物（如淀粉、蛋白质等）、缓冲液、指示剂等。

2. 实验仪器：离心机、电泳仪、紫外分光光度计、酶标仪等。

四、实验步骤1. 酶的制备（1）酶源培养：将酶源接种于培养基中，在适宜条件下培养，使其大量繁殖。

（2）酶提取：将培养好的酶源进行离心分离，收集上清液。

（3）酶浓缩：采用透析、超滤等方法，去除酶液中的杂质，提高酶的浓度。

2. 酶的纯化（1）离子交换层析：根据酶的等电点，选择合适的离子交换树脂，进行酶的吸附和洗脱。

（2）凝胶过滤层析：根据酶的分子量，选择合适的凝胶过滤柱，对酶进行分离和纯化。

3. 酶的活性测定（1）酶活力单位：采用紫外分光光度法测定酶的活性。

（2）酶催化反应速率：测定酶催化底物反应的速率，计算酶的活力。

4. 酶的催化特性研究（1）温度对酶活性的影响：在不同温度下测定酶的活性，研究温度对酶活性的影响。

（2）pH对酶活性的影响：在不同pH值下测定酶的活性，研究pH对酶活性的影响。

五、实验结果与分析1. 酶的制备通过酶源培养、酶提取和酶浓缩等步骤，成功制备了酶液，酶浓度达到实验要求。

2. 酶的纯化通过离子交换层析和凝胶过滤层析，成功纯化了酶，纯度达到95%以上。

3. 酶的活性测定酶活力单位为：X U/mL；酶催化反应速率为：Y mol/min。

4. 酶的催化特性研究（1）温度对酶活性的影响：在30℃时，酶活性最高，随着温度升高，酶活性逐渐降低。

（2）pH对酶活性的影响：在pH 7.0时，酶活性最高，随着pH值的变化，酶活性逐渐降低。