基因转移载体的研究进展

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转基因技术的研究报告综述及利弊关系

转基因技术的研究综述及利弊关系转基因技术作为生命科学的前沿技术之一，已经逐渐走入了人们的生活。

转基因技术可以认为是在一定程度上通过科学技术手段让其他生物、植物朝着对人类有利方向开展的技术。

通过对转基因技术的介绍，阐述了该技术的利弊关系，指出只有通过正确的引导和规管理，才能很好地利用该技术，使它为人类效劳。

关键词转基因技术开展历程利弊关系1 前言转基因技术是生命科学前沿的重要领域之一。

自从人类耕种作物以来，我们的祖先就从未停顿过作物的遗传改进。

过去的几千年里农作物改进的方式主要是对自然突变产生的优良基因和重组体的选择和利用，通过随机和自然的方式来积累优良基因。

遗传学创立后近百年的动植物育种则是采用人工杂交的方法，进展优良基因的重组和外源基因的导入而实现遗传改进。

因此，可以认为转基因技术是与传统技术一脉相承的，其本质都是通过获得优良基因进展遗传改进。

但在基因转移的围和效率上，转基因技术与传统育种技术有两点重要区别，第一，传统技术一般只能在生物种个体间实现基因转移，而转基因技术所转移的基因则不受生物体间亲缘关系的限制；第二，传统的杂交和选择技术一般是在生物个体水平上进展，操作对象是整个基因组，所转移的是大量的基因，不可能准确地对*个基因进展操作和选择，对后代的表现预见性较差。

而转基因技术所操作和转移的一般是经过明确定义的基因，功能清楚，后代表现可准确预期。

因此，转基因技术是对传统技术的开展和补充。

将两者严密结合，可相得益彰，大提高动植物品种改进的效率。

2 转基因技术的介绍转基因技术是指用人工别离和修饰过的外源基因导入生物体的基因组中，从而使生物体的遗传性状发生改变的技术，可分为转基因动物与转基因植物两大分支。

人们常说的"遗传工程〞、"基因工程〞、"遗传转化〞均为转基因的同义词。

2.1 转基因植物技术转基因植物是指利用重组DNA技术将克隆的优良目的基因整合到植物的基因组中，并使其得以表达，从而获得的具有新的遗传性状的植物。

基因直接转移法在骨科领域的研究进展

在骨科研究中太多采用局部应用的方险性．用过程中研究的最多的Ａ一也ｄ２和脂质体是
法．：如骨骼肌、节腔内注射和骨折区Ａ．美国已有多年的临床免疫宴验子层小颗粒，够增强质粒或病毒ＩＡ姜ｄ５在能）Ｎ内直接应用等；有一些学者采用垒身材料，明是安全的；３Ａ的应用途径导人细胞的能力．经在临床试验中采也证（）Ｖ已应用，将基因通过血管注射＾实验对较多．町静脉注射，可局部肌肉注用ｉｖｖ即既叉ｎｉｏ洼洽疔黑色素瘤一其中阳象体内，的基因通过血液循环到达患射；可胶囊口服，可喷雾吸人；４离子脂质体【ｉｎｃｌｏｎｅｏｌｏｌｌ）目既卫（） ∞ｌｉｉｓ哪１ｉｔｉｏｐ＂ｐｉｎｃ处．后者特异的摄取，被并在局部高教表ＡＶ的制备也非常方便，够迅速的达到可将带负电荷的ＤＡ完垒包裹，强了能Ｎ增
但ＡＶ整台了外谭性基因后很难产生Ａ
质粒是位于细菌染色体以外能自主较高的浓度，失去了其原有的稳定整也
Ｎ分９染１骑对象体内；一种称为间接基因转移复制的环状ＤＡ分子．为严蔡型质粒合到宿主ｌ色体的一端的特点０一另法（ｘｖｏ．称为体外转移，将靶细和松弛型质粒粒载体是在天然松弛ＨＶ的优点在于特别容易感染神经系统ｅｉ）或ｖ是质Ｓ

基因治疗载体的研究进展

225科技资讯 S CI EN CE & T EC HNO LO GY I NF OR MA TI ON 学术论坛基因疗法是经由各种载体将目的基因导入至特定的组织靶细胞中,并通过转录表达达到治病目的[1]。

理想的基因载体应具有如下特点:在特异组织细胞中可有规律地、持续地进行外源基因表达;与细胞膜亲和性高、一定的靶向性及稳定性、安全、制备工艺简单。

基因疗法的载体可分成病毒型及非病毒型载体,病毒型载体转染效率高,但导向性差、携带信息量低及潜在致瘤性等不足;非病毒型载体则毒性低,免疫原性低,但与组织细胞亲和力较低[2]。

目前。

本文就两种常用的基因治疗在体进行相关综述,报道如下。

1 病毒载体1.1逆转录病毒载体逆转录病毒载体基因传递系统主要由两部分组成:一部分为应用外源基因代替病毒本身组成基因的逆转录病毒载体;另外一部分为在包装细胞的基因序列中整合了部分逆转录病毒基因。

20世纪90年代,世界上应用基因治疗的首例临床病例应用的就为逆转录病毒载体。

截止目前,R V 是在基因治疗临床试验中应用最为广泛的一种载体。

其中,常用的是一种经moloney鼠白血病病毒(M M L V )修饰获得的R V 载体。

R V具有较多优点,如基因表达稳定持久、转染率高,但其转染只限于分裂期细胞,最大可携带8Kb外援基因,与宿主基因组随机整合可诱发基因突变,产生具有遗传特征的野生型病毒,故进一步完善。

1.2腺病毒载体腺病毒是一种D N A 分子,为裸露的DNA病毒,载体容量需要小于7.5kb。

腺病毒能够感染全部周期的癌变细胞,获得广泛采用。

研究发现,E1区替代型腺病毒载体感染、表达率高、毒性低、制备工艺简便、可得到高滴度的纯化载体。

鉴于重组腺病毒载体不会整合进入宿主基因组织,在体基因也以额外的形式存在于染色体以外,表达时间不持久,因此是IL-2肿瘤基因治疗中的较为合适的载体。

1.3慢病毒载体慢病毒是经由HIV21演变而来的一种RNA病毒,属于逆转录病毒亚类。

转基因动物新技术研究进展

ｃｌ（Ｓｃｌ）ｗｉａｒｖｄｄａｌｒａｉｅｗｙｔｅｉｅｐｕｉｏｅｔｔｍｅｌｏｒｅａｉｌｗｉｘｅｄｔｅｅｌｉｅｌ，ｈｃｈｓｏｉｅｎａｅｎｔａｏｄｒｌｐｔｅｃｌｆｌｇｎｍａ，ｌｅｔｓＰｓｈｐｔｖｖｒｎｓｓａｓｌｎｈ
连ＨＲＤＴＳ（ｅｉ）２１年５ＥＥＩＢｉｇ０１月Ａｊｎ
ＩＮ０５—７２ＷＷｃｉｇｎ．Ｓ２３７Ｓ９Ｗ．ｎｅｅＲｈａＣ
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生物学中的基因工程技术与遗传病治疗的研究成果

生物学中的基因工程技术与遗传病治疗的研究成果基因工程是指通过分子生物学技术对生物体的基因进行操作和改造的过程。

基因工程技术在生物学领域具有广泛的应用，其中之一就是遗传病治疗。

遗传病是由于基因突变导致的疾病，基因工程技术为遗传病的治疗提供了新的方法和可能性。

以下是一些基因工程技术与遗传病治疗的研究成果：1.基因修复：基因修复是通过修复或替换基因中的突变位点来治疗遗传病的方法。

目前，已经有一些研究成功地在实验室中修复了导致遗传病的基因突变。

2.基因替代：基因替代是指将正常的功能基因引入患者体内，以替代突变或有缺陷的基因。

这种方法已经在一些遗传病的治疗中取得了成功，例如囊性纤维化。

3.基因调控：基因调控是指通过改变基因的表达水平来治疗遗传病。

例如，通过使用RNA干扰技术来抑制有害基因的表达，或者通过使用基因编辑技术来调节基因的表达。

4.基因治疗载体：基因治疗载体是指将基因转移到患者体内的载体，包括病毒载体和非病毒载体。

病毒载体可以有效地将基因传递到目标细胞中，但可能存在一些风险。

非病毒载体则相对较安全，但传递效率可能较低。

5.临床应用：目前，基因工程技术在遗传病治疗方面已经取得了一些临床应用的成功案例。

例如，基因治疗已经成功用于治疗某些类型的白血病和淋巴瘤。

6.未来前景：基因工程技术在遗传病治疗方面的研究成果为未来更广泛的应用提供了可能性。

随着技术的不断发展和完善，未来可能能够治疗更多的遗传病，甚至预防遗传病的发生。

总结起来，基因工程技术在遗传病治疗方面的研究成果为患有遗传病的人们带来了希望。

然而，这项技术仍然存在一些挑战和风险，需要进一步的研究和改进。

习题及方法：1.习题：基因工程技术是如何实现基因修复的？解题思路：回顾基因修复的定义和基本原理，描述基因工程技术在基因修复过程中的具体步骤。

答案：基因修复是通过修复或替换基因中的突变位点来治疗遗传病的方法。

基因工程技术实现基因修复的过程包括：1）识别和定位到需要修复的基因突变位点；2）设计合适的修复模板或替换基因；3）利用载体将修复模板或替换基因引入目标细胞；4）在细胞内实现基因修复，恢复正常的基因功能。

磁性纳米颗粒作为基因递送载体的研究进展

２．４磁场
磁性纳米粒的包覆剂，如表面活性剂、聚合物、碳水化
合物、蛋白质、硅、金等。这些材料通常与ＰＥＩ等阳离子聚合物结合使用以达到提高转染效率、降低细胞毒性的作用，这也是一种发展趋势。Ｋｉｅｖｉｔ等使
得到显著提高。磁场的作用归因于以下３个方面的原
～
Ｏｏ
因： ①提高了沉积速率；②提高了纳米颗粒与细胞的接
触机会，从而提高了纳米颗粒的内化；③ 提高了质粒在
ＡＰＴＥＳ・－ＩＯＮＰＤＮＡＬｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅＴｈｅＣｏｍｂｏ — ＤＮＡｃｏｍｐｌｅｘ
ＤＮＡ和ｓｉＲＮＡ的体外递送作用。Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ或
超顺磁性是磁性纳米颗粒作为基因递送材料的优势
ＴｕｒｂｏＦｅｃｔ本身的毒性和低转染率问题限制了它们的进
一
解，提高对ＤＮＡ和ｓｉＲＮＡ的递送效率（图２）。重要的是，形成的这种复合物也可用于悬浮细胞的基因递送。
＼／Ｏｒ一＾＼／、ＮＨ
会导致脉管系统中栓塞的形成。超顺磁性在基因递送中
的另一个优势是在磁场作用下可以将基因转移到特定的组织、器官或细胞，从而实现靶向治疗的作用。此外，利用磁场还可以进一步提高磁性纳米颗粒的基因

基因治疗中的靶向转移载体研究

体在体内向肿瘤细胞呈递药物蛋白。２３质粒．
．
质粒为高度亲水性的高分子胶体物质，表面带有
负电荷，质粒的腔体及表面性质决定其在体内的分布。细胞摄取、细胞内的处理及接酸的易位过程。因质粒不能有效穿过膜及连续的内皮系统，在细曲外组织中的扩散也有限因此基因传递系统将致力于修饰其胶体及表面性质以提高质粒在体
文蕾标识码：Ａ文章一号：１０ —０４２０）：Ｏ７－２０６２８（０２０，０５Ｏ２－
杆状病毒作为载体，将人血小板生成亲（Ｔ）因导人哺乳１ｏ基
动物体内已获得成功。该载体具有转染效率高，插入外捧基
因片段可＞０ｂ病毒易复制．２ｋ，传代快，密度高等特点，直接可
携带目的基因的病毒稳定地转移至靶细胞中，靶细胞需处但
于活性增殖期。其趋向性由其外壳包膜蛋白ｅｖ宿主细胞ｎ和表面的特异蛋白受体相互作用确定，因此可经过修饰ｅｖｎ基因或ｅｖ白来改变其感染谱。现已有多种基因被构建到逆ｌ蛋ｌ转录病毒载体中，如肿瘤坏死因子ｄ体（Ｎａ）抗癌基因受ＴＦＲ．ｐ３。Ｋｓｈｒ５等ａＢｓａ等…用编码红细胞生成索（Ｐ）ＤＡ序ＥＯ的Ｎ列取代编码逆转录病毒单向性包膜蛋白印７Ｎ末端的部分０一ＤＡ片段，Ｎ结果改造后的病毒载体对有ＥＯ受体的细胞具有Ｐ
过试验也证明把带有单纯疱疹病毒牌腺噎啶桉苷澈酶（Ｓ — ＨＶ

基因治疗中基因转移载体的研究进展

的载体来实现目的基因的转移。这种方法具有很高的转移效率，此在目前的基因治疗中占有重要地位。该方法的具因体步骤是先将目的基因导入经改造的病毒颗粒中，让病毒再颗粒感染靶细胞，而将目的基因转移到靶细胞中口。常从］用的病毒载体有逆转录病毒载体（ＲｔｖｒｓＶ）腺病毒ｅｒｉ，Ｒ、ｏｕ载体（ｅｏｉｓＶ）腺相关病毒载体（ｅｏＡｓｏｉｅＡｄｎｖｒ，Ａ、ｕＡｄｎ— ｓｃｔｄａＶｉｓＡＡＶ）单纯疱疹病毒载体（ｒｅｉｌｒｓｒ，ｕ、ＨｅｐｓＳｍｐｅＶｉ，ｘｕ
■●治或预疾，用因移基调来－曼疗者防病是基转或因控治戛＿利
● ■一愈疾病的手段，在基因水平上对人类遗传疾病进行是治疗。基因治疗不仅用于遗传疾病的治疗，用于后天获得也性疾病，肿瘤、如自身免疫性疾病、官移植等的治疗。被转器移的基因在靶细胞内替代或者修复受损基因，细胞恢复正使
体内。这一方法的优点是在将细胞移植回体内前，以对细可
胞进行检查和优化。但该方法仅局限于可移植细胞，淋巴如
细胞、髓细胞等，时仍需对可能发生的免疫反应进行检骨同查。间接体内法这种间接治疗方法比体内法具有更高的转

nature杂志中关于嫁接进行基因转移的文章

nature杂志中关于嫁接进行基因转移的文章《嫁接进行基因转移的研究》1. 引言自然界中，嫁接是一种普遍存在的现象。

在植物领域中，嫁接不仅是一种传统的栽培技术，同时也被广泛应用于研究基因转移。

最近在《Nature》杂志中发表的一篇关于嫁接进行基因转移的文章掀起了科学界的轩然大波，该研究为我们带来了新的视角和可能性。

2. 基因转移的意义基因转移是一项重要的生物技术，它可以在植物中引入新的特性和功能，提高其抗逆性和生长性。

嫁接作为一种传统的栽培技术，为基因转移提供了一个天然的载体，通过嫁接，不同品种或种属的植物可以将其基因进行合并，达到特定的目的。

3. 嫁接进行基因转移的研究方法在这篇《Nature》杂志中的研究中，科学家们首先选择了一对作为研究对象的植物品种，并在它们的茎部进行了嫁接。

他们通过一系列精密的实验方法，成功地将一个携带特定基因的植物品种的部分特性转移到了另一个品种上，取得了令人惊喜的成果。

4. 基因转移的潜在影响这一研究成果引发了科学家们对于基因转移可能影响的讨论。

嫁接进行基因转移是否会导致基因的稳定性问题？转移的基因是否会对接受品种的其他性状产生影响？这些问题是需要我们进一步深入研究和讨论的。

5. 对于未来研究的展望从嫁接进行基因转移的研究中，我们可以看到植物基因转移领域有着巨大的潜力和可能性。

我们期待未来科学家们能够继续深入研究，探索更多的嫁接和基因转移的可能性，为植物育种和品种改良提供更多新的途径和策略。

6. 个人观点作为一名关注生物科技领域的爱好者，我对于这一研究成果感到非常兴奋和期待。

嫁接进行基因转移的方法为植物基因转移研究开辟了新的思路，我相信随着科学的不断进步，我们将会看到更多基因转移领域的创新和突破。

7. 总结在本文中，我从基因转移的意义、研究方法、潜在影响和未来展望等方面对于《Nature》杂志中关于嫁接进行基因转移的文章进行了综合和深入的探讨。

通过此次研究，我们对于基因转移的认识又迈上了新的台阶，我期待着在未来能够看到更多关于基因转移领域的精彩研究成果。

非病毒载体基因转移技术的现状和展望

的运动轨迹等。１３电穿孔法。通过短暂的高强度的电场作用，瞬时提高细胞膜的通透性，而将周围介质中的外源核酸分从子导人细胞内。电穿孔法是一种既可以用于体外也可以用于体内的基因转移方法。理论上任何可以插入两个电极的组织器官都可以用电穿孔法导人外源基因，而目前体内用电穿孔法导人基因然主要用于皮肤和肌肉组织。１０Ｄ的ＤＡ被报０ＫＮ道可以利用电穿孔的方法成功导人肌肉组织中Ｊ。电穿孔导人的外源基因也有被报道长期稳定表达超过１时间】年。本课题组前期工作中利用电穿孔法将质粒ｐＦ．２导人白血病细胞株ＧＰＮ
因转移的目的。有学者成功地将裸露的质粒ＤＡＮ注射入肌肉、肝脏ｌ、】皮肤［等组织，］２但基因表达水平较低。注射法中，胞表面的某些受体起了细
一
定的作用，它们能够特异或者非特异性地结合
ＤＡ并且介导ＤＡ的内吞，ＮＮ但这些受体的详细作用机制不甚清楚。由于注射法有其独特优点如：
孔法、超声波法等都是借助物理力量穿透细胞膜达到基因转移的目的；化学方法则是借助天然的或者人工合成的化合物辅助完成基因转移。尽管近年来在非病毒基因转移领域中取得了显著成效，总体而言，病毒载体相对于病毒载体来说但非
转移基因的效率要低，体内的基因转移尤其如在此。现在把目前较常用的非病毒载体基因转移方法的优势和局限综述如下。

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就是将裸 ,81 直接注入单个细胞或组织，分为显微注射法和穿刺法。该法转移效率可达 *//9 ，准确快速，但设备昂贵，不适合大量细胞的转染，常用于转基因动物的研究。 .7 *7 . ,81 ) 磷酸钙共沉淀法其目的基因的制备比较容易，不需要构建复杂的载体，但效率低，仅用于体外细胞的基因转移及 ,81 的随机整合。 .7 *7 ! 电穿孔法 : 3;<=>?@A@?B>C@D E # */ % 借助外部高压短脉冲作用使细胞膜出现瞬间孔隙而使一定大该法简便迅速，对质粒纯度要求不高，但小的 ,81 分子进入细胞。高压电击必须在体外实施，且可同时杀死部分细胞。 .7 *7 " 基因枪 : 微粒子轰击法， FC=?@AB?>C=;< G@FGB?2F<D> E # ** % 利用亚微粒的钨和金能自发地吸附 ,81，在高压电极作用下使其瞬间进入靶细胞。该法快速简捷，不损伤靶细胞原有的结构，但仅适用于皮肤或肌肉组织，难用于深部组织。 .7 *7 H 超声法使用高频、低强度的超声波转染荧光素酶质粒 I@JKCBKC 等
!""# 年第 $% 卷第 % 期
药学专论
基因转移载体的研究进展
童荣生，徐孝麟
（四川省人民医院，四川成都
中图分类号： "#$% 摘要文献标识码： &
I"$$=C）
文章编号： !’’$ ( )#*! + %’’) , ’* ( ’’** ( ’)
目的：介绍基因转移载体的研究进展，为其深入研究提供参考。方法：对近年来有代表性的文献进行分析、归纳。结果：介绍了病毒载
# *. %
有报道双顺反子 &’( ) * 载体对狗骨髓单核细胞的基因转染高度有效。另外，由于 &’( 可靶向转染 +," - 细胞，因此 &’( 有可能用作艾滋病基因治疗的载体。总之，病毒载体的基因转染率高、表达时间长。但 ./// 年美国宾州大学以重组病毒为载体的基因治疗药物临床试验造成了受试者死亡的悲剧 # 0 % 。最近研究还发现 12 载体可能改变被转染细胞的主要上腺皮质样作用。 3* 4 3! 缺失的 12 载体能显著增加 *$ ) 5& ) 酮、然而这些激素诱导的促肾 ** ) 脱氧皮质醇和皮质醇的基础分泌， #6 % 上腺皮质激素的释放则降低。鉴于病毒载体安全性的困扰，因此以非病毒为载体的基因转移研究越来越受到关注。 ! 9" ! .7 *7 * 非病毒载体一般理化方法直接注射法
和能编码进行自身复制的各种特殊酶类，为发展多价活疫苗及高效表达活性多肽开辟了新途径，也将成为研究基因调控的良好模型。主要缺点是易引发宿主的免疫反应，使重复给药成为问题。 !" @ 乙型肝炎病毒 # 8%9.&)&)+ A ()$*+%+5 =A6 , 由于 TVQ 能特异性与肝细胞结合并高效感染静止期肝细胞，因此有可能用于肝靶向的基因治疗载体。 O.. W 等 / I 0 以重组 TVQ 为
载体携带外源基因在人的原代肝细胞和 T’KSC 细胞中，已被成功地转移和表达。
中国药业 !"#$% &"%’(%)*+,#)%-.
・!!・
药学专论
!" # 人免疫缺陷病毒 $ %&’() *’’&)+,-.*/*-)/0 1*2&34 567 8
#$ %
!""# 年第 $% 卷第 % 期反应很小，然而现有研究表明，呼吸道吸入脂质复合物后，可诱导产生剂量依赖性的肺部炎症反应并伴随细胞因子的产生。若静脉注射给予 ,81 阳离子脂质复合物，可激发高水平的细胞因子如干这些细胞因子扰素 : ’8M ) " E 和肿瘤坏死因子 ) # : Q8M ) # E 产生。不仅引起所治疗小鼠的毒性，还抑制外源基因的表达。诱导细胞因子产生的主要成分是质粒 ,81 中未甲基化的 +LR 二核苷酸，阳离子脂质起一个协同作用。目前解决上述问题的办法在于修饰质粒 ,81 以减少 +L R 数目和使用免疫抑制剂 # *S % 。 9" : 聚合物或聚合复合物 .7 !7 * 聚 ) T ) 赖氨酸 *60$ 年首次报道与去唾液酸糖蛋白连接的聚 ) T ) 赖氨酸偶合物用于肝细胞的基因靶向转移。聚合物用作基因载体的早期研究工作主要集中于如何耦联靶向配体或抗体以增加靶细胞的摄取。研究发现，如果既不连接靶向配体或抗体，又不添加内吞体或溶酶体溶解剂 : 如氯喹 E ，其基因转染效果较阳离子脂质体差，这是双亲性阳离子脂质与可溶性聚合物—— — 聚 ) T ) 赖氨酸的重要区 # *$ % 别。这种聚合复合物的细胞摄取和基因转染，在有或无靶向配体的情况下皆依赖于聚合复合物正电性的存在 # *0 % 。将组氨酸连接到聚 ) T ) 赖氨酸中 T ) 赖氨酸的 $ ) 残基上形成的聚合物比添加了氯喹的聚 ) T ) 赖氨酸混合物更有效，组氨酸的使用似乎有助于避免 ,81 在内吞体中被降解 # *6 % 。研究还表明，用半胱氨酸和色氨酸残基替代聚 ) T ) 赖氨酸中的一些氨基酸残基，也会增强此聚合复合物的基因转染效果，表明 ,81 的释放可能受细胞内二巯键的还虽然聚 ) T ) 赖氨酸与脂质体一样能阻止血清中核酶原所激发 # ./ % 。对 ,81 的降解，但若经静脉注射，聚合物与血浆蛋白结合后仍将迅速从血浆中清除。 .7 !7 . 聚乙烯亚胺 : A@;U<>PU;<DCFCD<V L3’ E 与聚 ) T ) 赖氨酸不同的是，这种支链或线形 L3’ 阳离子聚合物因其自身的内吞缓冲特性，在不需要内吞体或溶酶体溶解剂的情况下可显示出更好的基因转染效果 # .* % 。 L3’ 和阳离子脂质体一样
基因治疗已成为世界医学最活跃的研究领域，人类基因组草图的绘制完成及深入研究将为基因治疗打下坚实的基础。 "##$ 年， /" 0 %&’()* +(,’&-.( 等把腺嘌呤脱氨酶 1 +,’(.-2(’ 3’452(4-’6 +3+ 7 基因导入到一名 8 岁小女孩的 9 淋巴细胞中，治疗 +3+ 基因缺陷 “ 重型合并性免疫综合症 ” 所致的，开创了人体基因治疗成功的先河，至今已完成了 :$$ 多例基因治疗的临床试验，但其结果尚不尽人意，最大障碍在于开发无毒、高效的基因导入系统。目前，基因转移载体可分为病毒载体和非病毒载体两大类，现就其研究概况作一简述。 ! !" ! 病毒载体逆转录病毒 # $%&$’()$*+ ,
基因转染率高达 F:G ，并且能使 C H "$# 个基因修饰 9 细胞传代。 !" - 腺病毒 # ./%0’()$*+， 1/ , 是一种无包膜的双链 3<+ 病毒，长约 !I >?。优点： !插入 3<+ 链较长； " 不需要正在分裂的靶细胞即可原位感染； # 滴度高，可达 "$"" J "$"C KLA M 5N；一般不会整合 $ 可导入各种组织细胞，到宿主的基因组中而大大减少了插入突变的危险。缺点： ! 缺乏特异性； " 对造血细胞导入率低； # 腺病毒不能在细胞内长期存在， “ 给药 ” 往往需要反复；在 $ 重复给予时机体可能产生免疫反应。以前的研究中都使用 : 型 +, 1 +,: 7 ，但 +, 载体介导的基因转染中， +,: 对造血干细胞无效。 O.P(,4 等 / ! 0 发现一种 +,: M %!: 载体在无生
*4Y’ ?’’( &’Y2’\’, 4(, )B4--2L2’,[ /$.01&.) 9*’ 4,Y4(P4X’ 4(, ,2-4,Y4(P4X’ .L Y2&4B 4(, (.( ] Y2&4B Y’)P.&- *4Y’ ?’’( *2X*B2X*P’,[ 9*’ Y2&4B Y’)P.&- *4Y’ *2X*’& P&4(-L’& ’LL2)2’()Z 4(, B.(X’& ,A&4P2.( .L X’(’ ’^K&’--2.( P*4( (.( ] Y2&4B Y’)P.&-6 ?AP 2P- -4L’PZ 2--A’- -A&&.A(,2(X P*’ A-’ .L Y2&A-’- *4Y’ ?’’( KB4XA’,[ 2,3%10.’,3) _P 2- (’)’--4&Z P*4P P*’ )’BBAB4& 4(, 5.B’)AB4& 5’)*4(2-5 .L ,’B2Y’&2(X 3<+ P. P*’ (A)B’4& .L P4&X’P2(X )’BB ?’ 2(P’(-2Y’BZ -PA,2’, 2( .&,’& P. 25K&.Y’ P*’ P&4(-L’& ’LL2)2’()Z 4(, P*’ X’(’ ’^K&’--2.( ,A&4P2.( .L (.( ] Y2&4B Y’)P.&-[ >2? @75-3 S’(’‘ Q2&4B Q’)P.&‘ <.( ] Q2&4B Q’)P.& 长因子的情况下能高效转染原代造血干细胞，且毒性较低。 !" 2 腺相关病毒 # ./%0’ 3 .++’4).&%/ ()$*+5 116 , 是一种单链 3<+ 病毒，需要辅助病毒才能包装成病毒。优点：不会引起免疫反应；可导入包括造血 ! 无致病性， " 宿主范围广，细胞在内的各种分裂期或非分裂期细胞； # 对各种物理化学处理缺点：稳定，因而易被分离、纯化、浓缩； $ 载体构建简单。 ! 滴度较低 1 "$8 KLA M 5N 7 ； " 感染效率低； # 外源基因容量小； $ 制备上尚存在问题，工艺上须考虑如何去尽野生型辅助病毒； % 病毒蛋白对细胞有毒性。对于糖尿病或感染患者难以愈合的伤口，目前正试图用基因治疗来加速伤口的愈合。 3’.,4P. 等 / 8 0 用 ++Q 载体表达含有能显著诱导新生血管的形成 "I: 个氨基酸的血管内皮生长因子 +，以及加速真皮和表皮的形成，从而缩短了伤口的愈合时间。 !" 7 单纯疱疹病毒 # 8%$9%+ +):9;%< ()$*+5 =>6 , 是一种双链 3<+ 病毒，长达 ":C >?。优点： ! 容纳外源基因的