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生化反应曲线-PPT

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常用血生化检查ppt课件

常用血生化检查ppt课件
人体钾盐90%从食物摄入，被肠道吸收入血液，吸收 入血的钾90%从肾排出体外。血钾对调节水与电解质 、渗透压与酸碱平衡，维持神经肌肉的应激性等都 有重要生理意义。
参考值：
3.5～5.5mmol/L 低于3.5mmol/L为低血钾症 高于5.5mmol/L为高血钾症
血清电解质检测 黔东南州民族职业技术学院◇临床医学系
参考值：33%—55%
临床意义：
增高常见于铁利用障碍、血色病等； 减低常见于缺铁贫。
心肌酶和心肌蛋白 黔东南州民族职业技术学院◇临床医学系
临床意义：
血钾增高：常见于摄入过多、肾脏疾病等。 血钾减低：
• ① 3.0-3.5mmol/L为轻度； • ② 2.5-3质检测 黔东南州民族职业技术学院◇临床医学系
血钠测定
人体钠约60%存在于细胞外液，其主要功能是保持细 胞外液容量、维持渗透压及酸碱平衡，并具有维持肌 肉、神经应激性的作用。钠盐约95%经肾排出体外。
血清载脂蛋白参考值：
男性:(1.42±0.17)g/L 女性:(1.45±0.14)g/L
临床意义：
apoA I增高：可以直接反映HDL水平，作用较 HDL更精确。
apoA I减低：家族性疾病、急性心肌梗死、 糖尿病等。
血清电解质检测 黔东南州民族职业技术学院◇临床医学系
血钾测定
参考值：95～105mmol/L
血清阴离子测定 黔东南州民族职业技术学院◇临床医学系
临床意义：
1、血氯增高：急慢性肾衰少尿期、尿道梗阻、 心功能不全等。
2、血氯减低：饥饿、营养不良、严重呕吐、 肾上腺皮质功能不全等。
血清阴离子测定 黔东南州民族职业技术学院◇临床医学系
血磷测定

生化反应动力学 PPT课件

生化反应动力学 PPT课件

3、可逆抑制作用：
抑制作用可通过透析等方法除去。
• 原因：非共价键结合
可 逆 抑 制
竞争性抑制(competitive inhibition) 非竞争性抑制(non-competitive I.） 反竞争性抑制(uncompetitive I.)
（1）竞争性（Competitive)抑制

I： 抑制剂（ inhibitor）
依据： 能否用透析、超滤等物理方法 除去抑制剂，使酶复活。
1、不可逆抑制作用 ：
不 可 逆 抑 制
抑制剂与酶必需基团以牢固的共价键相连 很多为剧毒物质
重金属、有机磷、有机汞、有机砷、
氰化物、青霉素、毒鼠强等。
2、不可逆抑制剂
非专一性不可逆抑制剂
不 可 逆 抑 制
（作用于一/几类基团） 不可逆抑制剂 专一性不可逆抑制剂 （作用于某一种酶的 活性部位基团）
（2） 专一性不可逆抑制剂
①Ks型 • 具有底物类似的结构——（设计） • 带有一活泼基团：与必需基团反应（抑制）
∵利用对酶亲合性进行修饰
∴亲合标记试剂（affinity labeling reagent）
②Kcat型
•具有底物类似的结构 •本身是酶的底物 •还有一潜伏的反应基团 “自杀性底物”
物之间可能进行的历程。
一、底物浓度对酶反应速率的影响
研究前提
单底物、单产物反应；
酶促反应速度一般在规定的反应条件下， 用单位时间内底物的消耗量和产物的生 成量来表示； 反应速度取其初速度，即底物的消耗量 很小（一般在5﹪以内）时的反应速度； 底物浓度远远大于酶浓度。（[S] 》[E]）
初速度
产 酶促反应速度逐渐降低 物
0

检验科讲课生化ppt课件

检验科讲课生化ppt课件
28
血脂的检测
胆固醇（TC） 甘油三脂（TG） 高密度脂蛋白胆固醇（HDL-c） 低密度脂蛋白胆固醇（LDL -c） 载脂蛋白ApoA I 载脂蛋白ApoB 100 脂蛋白(a) LP (a)
29
多谢大家
30
此课件下载可自行编辑修改，供参考！ 感谢您的支持，我们努力做得更好！
27
血糖及糖尿病诊断标准
糖尿病的诊断标准： 1.空腹血浆葡萄糖测定》7.0mmol/L。 2.任意时间血浆葡萄糖测定》11.1 mmol/L 3.口服葡萄糖耐量实验（OGTT）》11.1 mmol/L 正常人空腹血浆葡萄糖浓度的参考范围： 3.89~6.11 mmol/L 。若空腹大于8 .0mmol/L，且有 临床症状可诊断为糖尿病，若小于6.0 mmol/L， 则可排除糖尿病，若在6.0~7.0之间应再做检查
12
胆红素代谢的检验
胆红素来源绝大部分来自衰老死亡的红细胞，当肝细 胞损伤、胆管阻塞、红细胞破坏增加或寿命缩短时， 胆红素代谢发生异常，临床出现黄疸。 血清胆红素分为结合与非结合胆红素，二者合称总胆 红素。TBIL=DBIL+IBIL TBIL:<34为隐性黄疸， <170为轻度黄疸， <340为中度 黄疸，>340为高度黄疸，完全阻塞性黄疸为340~510； 不完全阻塞者为170~265，肝细胞性黄疸17~200；溶 血性黄疸<85
13
三种黄疸的胆红素变化比较
正常人 溶血性黄疸
DBIL 0~6.8 轻度增高
肝细胞性黄疸 中度增高
阻塞性黄疸 明显增高
IBIL 1.7~10.2 明显增高
中度增高
轻度增高
DBIL/TBIL >35% <20%

生化试剂培训完整ppt课件

生化试剂培训完整ppt课件

.
15
二、常见校准方法
（2） 2点线性法 测定校准液1（试剂空白）与校准液2，形 成 线性工作曲线,校准曲线如图2-7所示：
.
16
二、常见校准方法
（3） 多点线性法 通过空白（或校准液1）和校准液（第2校准液及第6校准液）的测定 用线性回归制成线性工作曲线,校准曲线如图2-8所示:
图2-8 多点线性校准曲线（线性）
生化试剂培训教材
.
1
第一部分 基本术语
• 一、临床化学自动分析使用术语
• 1、双波长 由主波长和副波长构成，可以消除对实 验结果的影响。主波长是生成的产物颜色对光吸收 的特有波长。副波长是为消除其他干扰物质在主波 长造成测定干扰所设定的波长。
• 2、反应杯空白 在特定波长下，光通过以蒸馏水 或空气为反应体系所测得的吸光度值。
.
9
一、测试方法
反应曲线; R1
AL AL 1 2
SB B1 B2 B3
( AM AM 1) 2
时间（s）
分析项目：如酶法的肌酐（CRE）等。
图2-3 2点法终点
.
10
一、测试方法
• 2点速率 测定2个测光点，此两点既不测反应初始吸
光度也不是终点吸光度，在单位时间内计算2点 间的吸光度之差用于样本浓度的计算，称为2点 速率法，反应曲线如图2-4所示：
• 5、延迟时间
•
指试剂与样品混合后到监测开始之间的时间。
一般用于两点法和速率法。
• 注意：在速率法和两点法中，延长延迟时间必然缩 短线性监测期，减少测定的线性范围，也易发生底 物耗尽.ALT,AST,BUN,HBDH等负反应试剂 ，浓度 极高时测值不一定是超线性，还有可能是底物耗尽 而导致测值很低，这时要注意看线并且把吸光度界 限设定在0.5 。当有吸光度界限超出报警进行稀释再 测定。一般进行10倍稀释再做，如有超出继续稀释。

生化检验基础知识-PPT课件

生化检验基础知识-PPT课件

（2） 注意事项 收集尿液标本的容器必须清洁干燥， 最 好是一次性使用的容器。若容器反复使用， 则须用洗涤液和自来水清洗， 再用蒸馏水冲 洗。尿标本要防止混入月经血、阴道分泌物、 精液、前列腺液、粪便等异物。尿标本收集 后应 12 时内送检，以免细菌作用和化学成分 分解。若不能及时检验（如收集 24 小时尿 液），将标本置冰箱保存，若加入防腐剂， 保存效果更佳。 4.其他特殊标本的采集 需专科医生操作
⑥.EDTA抗凝管 紫色头盖，乙二胺四乙酸（EDTA，分子量 292）及其盐是一种氨基多羧基酸，可以有效地螯合血液标本 中钙离子，螯合钙或将钙反应位点移去将阻滞和终止内源性或 外源性凝过程，从而防止血液标本凝固。适用于一般血液学检 验，不适用于凝血试验及血小板功能检查，亦不适用于钙离子， 钾离子，钠离子，铁离子，碱性磷酸酶，肌酸激酶和亮氨酸氨 基肽酶的测定及PCR试验。 ⑦.枸橼酸钠凝血试验管 浅蓝头盖，枸橼酸钠主要通过与血样 中钙离子螯合而起抗凝作用。适用于凝血实验，国家临订实验 室标准化委员会（national committee for clinical laboratory standards,NCCLS)推荐的抗凝剂浓度是3.2%或 3.8%（相当于0.109mol/L或0.129mol/L),抗凝剂与血液的 比例为内添加有肝素。肝 素直接具有抗凝血酶的作用，可延长标本凝血时间。 适用于红细胞脆性试验，血气分析，红细胞压积试 验，血沉及普能生化测定，不适于做血凝试验。过 量的肝素会引起白细胞的聚集，不能用于白细胞计 数。因其可使血片染色后背景呈淡蓝色，故也不适 于白细胞分类。 ⑤血浆分离管 浅绿色头盖，在惰性分离胶管内加入 肝素锂抗凝剂，可达到快速分离血浆的目的，是电 解质检测的最佳选择，也可用于常规血浆生化测定 和ICU等急诊血浆生化检测。血浆标本可直接上机并 在冷藏状态下保持48小时稳定。

生化反应器ppt课件

生化反应器ppt课件

rP
max
(1
P Pmax
)[(P P0 ) YP/ X
X0]
代入积分得： 分 反馈回反应器的入口，
t 2）带循环时的 X1，S1，rXr，Dcr，Xr，XF
状态参数与操作变量的关系
max r
6 管式反应器CPFR
Pt
Pmax P0 YP/ X X 0
ln
X t (Pmax X 0 (Pmax
而
力学，，有则 效因子与转化率， 无关，因此
令：
，
2）带循环时的 X1，S1，rXr，Dcr，Xr，XF
，
K 当为单底物无抑制时，且酶无失活，将米氏方程代入L积分得m：
t r
(1 )r L max
ln S0 St
3、微生物反应
• 微生物反应过程以对数生长期和减速期的时间作为反应时
间，tr tr1 tr2，若对数期开始时细胞浓度为X0,指数期末为X1，减速期
若微生物的生长符合Monod方程，且YX/S为常数，则代入积分得
输入量＝输出量+反应量+累积量
响反应速率的因素，均能影响反应时间tr,即反应时间只与动
力学有关，而与反应器大小无关。
体积的计算
• 反应器的有效体积VR：是物料所占有的体积，是由物料的处理量决定 的，也就是说是由设计生产能力决定的，若单位时间内物料的处理量
P0 ) Pt )
2）带循环时，因为
，
，所以 ， ，
实际生产过程中有产物抑制时产物浓度的最佳值为 理想的微生物生长是菌量相对于时间以指数规律增加，所以可以使流加的物料以时间的指数函数增加，即指数流加。
为什么同一个反应过程，在其他条件均相同的条件下，采用BSTR所需的反应时间要小于CSTR中的反应时间？

生化反应曲线简介ppt课件

生化反应曲线简介ppt课件

☆其数学表达式：A = ɛ×C×L
I0
I
透射光
light detector
根据Lambert- Beer定律来计算待测物浓度 如若吸光系数 (ε )未知，我们就需要采用定标曲线来计算 待测物的浓度。
(amount of color)
70
吸 光
60
度 50
40
30
20
10
此值为定值
1
2
3
4
5
6
浓度 (amount of substance)
底
物
生成的丙酮酸可与起终止和显色作用的2,4二硝基苯肼发生加成 反应，生成丙酮酸-2,4-二硝基苯腙，进而在碱性环境中生成红
棕色的苯腙硝醌化合物，其颜色的深浅在一定范围内与丙酮酸
的生成量，亦即与ALT活性的高低成正比关系。据此与同样处
理的丙酮酸标准液相比较，便可算出或通过标准曲线查出血清
中ALT的活性。
连续监测法反应曲线
A单试剂连续监测法
B双试剂连续监测法
连续监测法的优点
可以确定线性期并计算ΔA/min，根据此值再准确地计算酶 活性，因而使自动生化分析仪在酶活性测定方面显著地优于手 工法。连续监测法也可用于测定呈线性反应的代谢物浓度，一 般是某些基于酶法测定的代谢物。
酶活性（U/L）＝ΔA/min×理论（或校准）K值。 代谢物浓度CU=ΔA/min×校准K值。
目录
A 生化分析基本原理 B 生化反应曲线
物质对光吸收的基本定律－ Lambert- Beer定律
-------光吸收的基本定律
Lambert－Beer定律表达为:
当一束平行的单色光通过含有均匀吸光物质的溶液时,溶液的吸光度(A) 与溶液的浓度(C)和光透过液层厚度(L)的乘积成正比。物质对光吸收的吸 光系数（e）为常数。

生化反应曲线资料

生化反应曲线资料
17
两点终点法
在被测物反应或指示反应尚未开始时，选择第一个吸 光度，在反应到达终点或平衡时选择第二个吸光度，此两 点吸光度之差用于计算结果。
18
Endpoint assays
两点终点法的特点 去除了样本的本底
采用两个测量点
针对两个或多个试剂的项目
第一个读数点一般选在添加最后一个试剂之前
第二个读数点一般选在加入最后一个试剂之后且已经达到了反应终点
尿素氮
2点速率法
36
Rate assays 2-point Rate assay
A (sample) + B1 (reagent 1) + B2 (reagent 2)
C + D (product)
Enzyme
37
Rate assays 两点速率法的特点2-point Rate assay
采用一种或多种试剂 检测两个测量点检测固定的间隔时间内两点的吸光度变化。
Concs = 标准品浓度 Δ Absx = 样本吸光度 Abss = 标准品吸光度
Calibrator/standard 标 准品 (cfas)
(amount of color)
吸 光 度
1
2
3
4
浓度 (amount of substance)
5
6
6
Lambert-Beer 定律
分光光度法定量分析的依据 Lambert-Beer 定律
11th
7-8th
34th
19-20th
n/a
n/a
时间 T0 = 0 min T1 ≈ 0 min T2 (≈ 1.5 min) T3 (≈ 5.0 min) T4 (≈ 10 min)

生化ELISA 实验PPT

生化ELISA 实验PPT

手动生化结果
OD值为手动加样酶标仪测值，样本活力是根据计算公式计算出来的结果
手动生化常见问题 1.样本复孔相差较大是怎么回事？ 答：一般情况下样本结果相差不会很大，如果结果差异大，先看一下样本OD值 是否很低，样本OD值很低的情况下，即使相差只有0.01，经过计算，会放大误差， 所以导致复孔结果相差较大。 2.有没有试剂盒？指标能不能测？怎么收费？ 答：备货的试剂盒只有SOD,MDA和GSH-PX，检测费10块一个样包含试剂费。 其余的指标都需要提供试剂盒不包含试剂费，检测费也是10块一个样。指标能不 能测要看能不能买到该指标的生化试剂盒，一般我们国产试剂盒用的是南京建成 的，可以去官网查。 3.细胞上清能测吗？样本溶血有影响吗？ 答：厂家虽然说可以测细胞上清，但是细胞上清有颜色会对OD值又较大影响。 不建议测细胞上清。同理样本溶血红细胞破裂，红细胞里的物质释放可能会影响 结果，且样本溶血颜色也会对OD值造成影响。 4.紫外法能测吗？ 答：我们酶标仪为全波长酶标仪，可以测可见光和紫外光，所以可以测紫外法的 试剂盒。但是测紫外光需要用紫外板，紫外板需要额外收费80元。
血常规检测
全自动动物血细胞分析仪
实验要求
• 用EDTA抗凝管采血100ul以上全血，不能有 凝块。
• 血液尽量新鲜，4度保存运输，时间越长效 果越差，超过一周不能用。
• 实验周期为一天
血常规结果
结果以电子档WORD 形式发送
常见问题 1.样本是否异常？ 答：样本4°长途运输，时间越长效果越差，肉眼可见的凝块会在实验结 果上标注，有些样本异常肉眼无法判断。 2.血常规报告上的参考范围是哪里来的？ 答：血常规为血球仪检测，检测范围为血球仪自带。
实验流程 实验流程（具体步骤以说明书为准）: 1.样本准备：血清、血浆、组织匀浆、细胞上清； 2.操作步骤：处理样本配制标准品—加样（标准品及样本）—洗板，加检 测抗体溶液，孵育—洗板，加酶溶液，孵育— 洗板，加TMB底物— 加终 止液50ul，立即450nm读数（双抗夹心法） 处理样本配制标准品—加样（标准品及样本）—加酶溶液—加检测抗体— 混匀孵育— 洗板，加TMB显色— 加终止液50ul，立即450nm读数（竞争 法） 3.实验结果：有样本OD值代入标曲中计算出浓度，结果以EXCEL形式发 出。
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☆其数学表达式：A = e*C*L
I0
I
=
2020/3/25
透射光 light =detector
5
5
根据Lambert- Beer定律来计算待测物浓度
如若吸光系数 (ε )未知，我们就需要采用定标曲线 来计算待测物的浓度。
此值为定值
Concx =Δ Absx x Concs Abss
70 60 待测样本 50 40 30 20 10
Endpoint and rate (kinetic) assays
2020/3/25
15
15
终点分析法
基于 被测物质在反应过程中到达反应终点或平衡点，
根据该点吸光度的大小求出被测物浓度，称为终点法。
吸光度 S+R1
• 终点法的计算：
A1
t 时间
从时间-吸光度曲线来看，到达反 应终点时，吸光度将不再变化。在达 到终点时任取一点进行测定，此时底 物和产物的量都不再变化。
2020/3/25
10
10
7000
Bichromatic Difference
6000
5000
Absorbance
4000
3000
2000
1000
0 1 3 5 7 9 11 13 15 17 19 21 23 25 27 29 31 33 35 37 39 41 43 45 47 49 51 53 55 57 59 61 63 65 67 69 cycles
6000
5000
Absorbance
4000
3000
2000
1000
0 1 3 5 7 9 11 13 15 17 19 21 23 25 27 29 31 33 35 37 39 41 43 45 47 49 51 53 55 57 59 61 63 65 67 69 Cycles
primary λ
2020/3/25
16
16
终点分析法（Endpoint assays）
▪ 两点终点法（2-point end） ▪ 一点终点法 （1-point end）
一点终点单试剂（1-point endpoint assay – one reagent） 一点终点双试剂（1-point endpoint assay – two reagents
Concx = 待测样本浓度
Concs = 标准品浓度
Δ Absx
= 样本吸光度
Abss
Calibrator/standard 标 准品 (cfas)
= 标准品吸光度
(amount of color)
吸 光 度
1
2
3
4
5
6
2020/3/25 浓度 (amount of substance)
6
6
Lambert-Beer 定律
2020/3/25
3
3
cobas® 8000 模块化组合分析系统 强劲
智能、高效、
2020/3/25
4
4
物质对光吸收的基本定律－ Lambert- Beer定律
-------光吸收的基本定律
Lambert－Beer定律表达为:
当一束平行的单色光通过含有均匀吸光物质的溶液时,溶液 的吸光度(A)与溶液的浓度(C)和光透过液层厚度(L)的乘积成正 比。物质对光吸收的吸光系数（e）为常数。
生化反应曲线
2020/3/25
1
1
内容概况
生化分析基本原理 生化反应曲线
2020/3/25
2
2
罗氏生化分析系统产品线
Cobas c111 180T/H
Cobas c311 300T/H
Cobas 6000 (c501) 600T/H
Modular P 800T/H Modular D 2400T/H Cobas 8000 2000T/H
采用两个测量点
针对两个或多个试剂的项目
第一个读数点一般选在添加最后一个试剂之前
第二个读数点一般选在加入最后一个试剂之后且已经达到了反应终点
A (样本) + B1 (试剂1) + B2 (试剂 2)
） ▪ 三点终点法（3-point end）
2020/3/25
17
17
两点终点法
在被测物反应或指示反应尚未开始时，选择第一 个吸光度，在反应到达终点或平衡时选择第二个吸光度， 此两点吸光度之差用于计算结果。
2020/3/25
18
18
Endpoint assays
两点终点法的特点 去除了样本的本底
12
12
Reaction sequence
2020/3/25
13
13
Instrument cycle
Mod P
Sample pipetting 1st
Reagent 1
1st
2nd reagent
5th
3rd Reagent
16th
4th reagent
33rd
C 501 Cycle No
1st
C702 1st
1st
1st
11th
7-8th

34th
19-20th
n/a
n/a
时间 T0 = 0 min T1 ≈ 0 min T2 (≈ 1.5 min) T3 (≈ 5.0 min) T4 (≈ 10 min)
2020/3/25
14
14
自动生化分析常用的方法有:
▪ 终点法（End Point Assays）：一般在整个反应完成后再来检测吸光度 ▪ 速率法（Rate assays） ：一般在反应的过程中监测吸光度的变化情况
▪ 光路系统可以测量后分光后12个波长的相应吸光度。 12 有效波长: 340, 376, 415, 450, 480, 505, 546, 570, 600,
660, 700, 800nm ▪ 多数检测项目都使用双波长检测方法。（可去除干扰物对检测结果
的影响）
2020/3/25
9
9
7000
Reaction Monitor Trig
分光光度法定量分析的依据
Lambert-Beer 定律
适合于任何均匀非散射的介质
生化比色分析 特定蛋白透射比浊分析
2020/3/25
7
7
Roche Hitachi Photometer
2020/3/25
8
8
Reaction sequence
当相应的比色杯每一次通过光路系统时，光路系统会测量 并记录下相应的吸光度
Bichromatic Difference
2020/3/25
11
11
仪器读数的原理
2020/3/25
反应转盘不停的周期旋转 当相应的比色杯通过光路系统时，光 路系统会测量并记录下相应的吸光度
在不同的时间点加入相应的反应试剂
不同仪器每个循环周期的时间间隔 Modular P 18秒 Cobas c702 16秒 Cobas C501 8秒 Modular D 12秒 C311 12秒