生药学部分

生药学部分实验一生药的理化鉴定（1） (25)实验二生药的理化鉴定（2） (29)实验三冬虫夏草、茯苓、贯众、麻黄等生药鉴别 (33)实验四大黄、何首乌、黄连，川乌、白芍等生药的鉴定 (36)实验五淫羊藿、防己、厚朴、五味子、肉桂等生药的鉴别 (39)实验六延胡索、板蓝根、大青叶、山楂苦杏仁等生药的鉴别 (42)实验七黄芪、甘草、槐米、黄柏等生药鉴别 (45)实验八人参、三七、沉香、丁香等生药鉴别 (48)实验九当归、川芎、柴胡、白芷、小茴香、马钱子等鉴别 (51)实验十龙胆、薄荷、丹参、黄芩等生药鉴别 (54)实验十一洋金花、地黄、金银花、天花粉等生药鉴别 (57)实验十二桔梗、茵陈、红花、苍术、木香等生药鉴别 (60)实验十三麦冬、知母、砂仁、半夏、天麻等生药鉴别 (63)实验十四动物、矿物类生药 (67)实验十五中成药的显微鉴定 (69)实验十六生药的综合鉴定 (71)附录一显微绘图法 (72)附录二显微测量法 (75)附录三组织透化法 (78)附录四常用试剂及配置方法 (79)附录五石蜡切片法 (82)实验一生药的理化鉴定(1)一、实验目的（一）掌握生药中糖类、苷类成分与氰苷、酚苷、蒽苷的理化性质和定性反应并能应用于生药鉴定中，以确证生药中这些成分是否存在。

（二）学会生药理化鉴定的常用方法。

（微量升华法、灰分测定法）二、实验材料、仪器及试剂党参、玉竹、苦杏仁、牡丹皮、虎杖、大黄、三七试管架、试管、量筒、具塞试管、烧杯、三角烧瓶、水浴锅、吸管、滤纸、小漏斗。

马福炉、天平、坩锅、干燥皿、Fehling试剂、α-萘酚试剂、10％的盐酸试液、10％氢氧化钠试液、苦味酸钠试纸、氢氧化钾试液、硫酸亚铁试液、稀盐酸试液、1％三氯化铁、5％三氯化铁试液、醋酸镁甲醇溶液、浓硫酸。

三、实验内容与方法1、单糖、多糖与苷类成分的鉴别取玉竹0.5g，剪碎，置50ml三角瓶中，加蒸馏水10ml，瓶口放一小漏斗（空气冷凝，防止水分蒸发太多），水浴温热10分钟，滤过药渣加适量水，再滤过，合并滤液至10ml，备用。

（1）费林（Fehling试验）试验：取滤液lml于50ml烧杯中，加碱性酒石酸铜试剂（Fehling）试剂8ml（临用时由甲液与乙液等量混和而成，置沸水浴加热5分钟，观察有无砖红色沉淀产生（尤其要观察瓶壁处））。

反应原理：（2）α-萘酚试验(Molish试验)：取玉竹粉末0.5~1g，加蒸馏水10ml。

水浴温热5～10min，滤过，取滤液1ml于大试管中，加α-萘酚试剂2～3滴，摇匀，沿管壁，缓慢加入浓硫酸1m1，保留二层液面，观察二液面交界处有无形成紫红色环。

反应原理：2、氰苷的鉴别（1）苦味酸钠试验：取苦杏仁1粒，研碎后置具塞试管中，加水数滴湿润，管口悬挂苦味酸钠试纸，密塞，将试管置60'℃水浴中温热，观察试纸逐步由黄变红。

（2）普鲁士蓝试验：取苦杏仁1粒，研碎后置试管中，加水数滴湿润，立即用滤纸包扎管口，并加氢氧化钾试液1滴使湿润，将试管置60'C水浴温热约10分钟后，于试纸上加硫酸亚铁溶液1滴，并加稀盐酸和5％三氯化铁试液各1滴，滤纸即显蓝色。

3、酚苷的鉴别取牡丹皮0.5g，加乙醇5ml，水浴温热5分钟，取上清液2ml于试管中，滴加1％三氯化铁试剂1滴，即呈紫红色。

反应原理：ROH+(Fe(H2O)6)3+→[Fe(H2O)5(ROH)]3+→[Fe(H2O)5RO]2++H3O+(ROH示丹皮酚)4、蒽苷的鉴别（1）碱液反应：取大黄粉少许于小试管中，加10％氢氧化钠试液，即呈红色，继续加10％盐酸使中和，药液变黄色，再加氢氧化钠试液又显红色。

（2）Borntrager（保恩特来格）反应：取大黄粉约0.5g于试管中，加10％氢氧化钠试液2ml，振摇后过滤，得红色滤液，加10％盐酸酸化后，溶液转为黄色，加乙醚2ml，振摇后静置分层，分取黄色的乙醚液于另一试管中，再加l0％氢氧化钠试液1ml，振摇匀后静置分层，则碱液层又显红色。

（3）醋酸镁反应：取大黄粉末约0.2g于试管中，加乙醇3ml，水浴温热5分钟，滤过，得滤液，加l％醋酸镁甲醇溶液2滴，振摇后观察，溶液渐呈橙红色。

（4）微量升华：如图5所示，取大黄粉末少许于金属圈内、小火徐徐加热数分钟，可见黄色升华物附着载玻片上，将玻片取下翻转后，在显微镜下检视，低温升华时可见针状结晶、高温时可见羽毛状结晶，滴加碱液后，结晶消失，并呈红色。

5、生药中灰分的测定总灰分测定取粉碎后过二号筛的三七粗粉约3g，置炽灼至恒重的坩埚中，精密称定（精确至0.01g），放马福炉中缓缓炽热，至完全灰化时，逐渐升温到500～600℃，完全灰化至恒重。

根据残渣重量，计算三七中含灰分的百分数。

酸不溶性灰分的测定取上面所得灰分，加入稀盐酸约10ml，用表面皿覆盖，水浴上加热10分钟，表面皿用5ml热水冲洗，洗液入坩埚，用无灰滤纸过滤，坩埚内残渣用水洗于滤纸上，并洗涤至洗液不显氯化物反应为止。

将滤渣连同滤纸移至同一坩埚内，干燥并炽灼至恒重。

根据残渣重量，计算三七中含酸不溶性灰分的百分数。

四、实验报告1.记录各鉴别反应的步骤与结果，并说明反应原理（可用化学反应式表示）。

2.计算出三七的总灰分、酸不溶性灰分的百分含量。

五、思考题1.怎样鉴别某生药含单糖、多糖或苷类成分?2.灰分测定的原理是什么?3.总灰分和酸不溶性灰分与生药品质的关系是什么，举例说明。

实验二生药的理化鉴定(2)一、实验目的（一）掌握生药中黄酮苷类、皂苷类、强心苷类、香豆精苷类的理化性质和定性反应，并能应用于生药鉴定中。

（二）掌握生药中生物碱类、鞣质类、氨基酸与蛋白质类的理化性质和定性鉴别反应。

（三）学会应用荧光分析法、薄层层析法，水份测定法鉴别生药。

二、实验材料、仪器及试剂槐米、桔梗、穿山龙、地高辛片(tabellae digoxin)、白芷、粉防己、硫酸阿托品注射液、五倍子、槟榔、天花粉。

试管、试管架、量筒、烧杯、水浴锅、50ml三角烧瓶、滤纸、蒸发皿、紫外分析灯、硅胶板、层析瓶。

乙醇、1％盐酸、碘化铋钾试剂、碘化钾碘试剂、碘化汞钾试剂、硅钨酸、明胶氯化钠溶液、三氯化铁试剂、饱和溴水、醋酸铅试剂、饱和石灰水、茚三酮试剂、10％氢氧化钠溶液、0.5％硫酸铜试剂、镁粉、1％三氯化铝甲醇液、10％盐酸试液、0.9％氯化钠溶渡，2％红细胞悬浮液、醋酐、浓硫酸、冰醋酸、三氯化铁-冰醋酸试剂、K-K试剂、3,5-二硝基苯甲酸乙醇试液、乙醚、7％盐酸羟胺甲醇溶液、20％氢氧化钾甲醇溶液、稀盐酸、1％三氯化铁乙醇溶液、甲苯、醋酸乙酯、甲酸。

槐花乙醇提取液、远志生理盐水提取液、夹竹桃醇提取液、粉防己酸性乙醇液；核桃楸皮、秦皮和秦皮甲素乙醇提取液。

三、实验内容与方法1、黄酮苷的鉴别取槐米粗粉约0.5g，加乙醇10ml，水浴温热5分钟，滤过，得滤液。

（1）盐酸-镁粉还原反应：取上述滤液2ml于大试管中，加镁粉少许振摇，滴加浓盐酸数滴，观察到产生许多泡沫，同时溶液渐变樱红色。

（2）三氯化铝反应：取上述滤液2ml于试管中，加1％三氯化铝甲醇溶液1ml，振摇，可见溶液渐变鲜黄色。

2、皂苷的鉴别取桔梗与穿山龙粗粉各1g，分别置50ml三角烧瓶中，加水l0ml，煮沸2分钟，滤过，滤液加水至10ml，备用。

（1）泡沫试验：分别取上述滤液各2ml，置2个试管中，密塞或以手指压住管口，强烈振摇数分钟，观察是否产生大量泡沫，放置10分钟后，再记录泡沫的高度。

另取桔梗与穿山龙滤液各4ml，分置4支试管中，每支2ml滤液，其中一支桔梗与一支穿山龙滤液中分别加10％盐酸试液调节pH为l，另一支桔梗与另一支穿山龙滤液中分别加10%氢氧化钠试液调节pH为13，将酸碱两管滤液同时强烈振摇数分钟，观察泡沫高度。

可见桔梗溶液的酸碱两管泡沫高度相同。

而穿山龙碱液管的泡沫比酸液管高。

（2）溶血试验：取远志生理盐水提取液2ml置一试管中，另取一试管加0.9％NaCl溶液2ml，于二支试管中分别加2％红细胞球悬浮液1ml，摇匀后放置，注意观察哪支试管溶液变清。

3、强心苷的鉴别分别取新鲜夹竹桃叶1片剪碎与地高辛3片，各置50ml三角烧瓶中，加70％乙醇10ml，用空气冷凝装置水浴加热5分钟，滤过，得滤液，并加水至10ml，备用。

（1）α-去氧糖反应（Keller-Kiliani反应）：取夹竹桃滤液2ml于蒸发皿中．水浴蒸干，加三氯化铁-冰醋酸试液lml使残渣溶解，并转入小试管中，沿管壁缓缓滴加浓硫酸1ml，观察两液层交界处有无棕色环产生，上层醋酸液呈何颜色?另取地高辛滤液2ml，同样操作，观察结果。

（2）3,5-二硝基苯甲酸反应（Kadde反应），取滤液1ml于试管中，滤液中加新配制的3,5-二硝基苯甲酸乙醇溶液1ml，观察溶液是否变成紫色。

反应原理（C17上不饱和内酯环反应）4、生物碱的鉴别取粉防己粗粉0.5g，置50ml三角烧瓶中，加乙醇15ml、用空气冷凝装置、水浴回流10分钟，滤过。

滤液置蒸发皿中，于水浴蒸干，残渣加l％盐酸5ml使溶，滤过，滤液分置4支小试管中，每试管1ml，分别滴加下表中生物碱沉淀剂各2滴，观察沉淀的颜色与数量(以＋＋＋、＋＋、＋表示)。

5、荧光分析法：取秦皮，核桃核桃楸皮粉末各1g，放入三角烧瓶中，分别加入乙醇l0ml，水浴回流提取l0分钟，放冷过滤。

滤液作供试品。

另取秦皮甲素(七叶树苷)，加乙醇制成每1ml含5mg的标准液做对照品。

将三者分别点于滤纸上，置365nm紫外分析灯下观察荧光反应。

6、薄层层析法：(两人做一份)样品、标准品的制备：同荧光分析法。

制板：取硅胶G2克加入0.5％羧甲基纤维素钠的水溶液6ml，搅拌均匀，倒在6cm×22cm干净的玻璃板上铺匀，放置水平位置，自然干燥，干后于105℃活化一小时，活化后置干燥器中备用。

展开剂：甲苯：醋酸乙酯：甲酸：乙醇＝3：4：l：2点样：距玻璃板下端一厘米处，分别点上秦皮、核桃楸皮的提取液及秦皮甲素的标准液。

展开方式：倾斜上行法。

展距约15cm。

晾干后，置365nm紫外分析灯下观察荧光斑点并描绘出层析图谱，计算秦皮甲素的R f值。

7、水分测定法（甲苯法）当归约50g。

水分测定装置一套，如图6．【实验内容、方法及步骤】1、甲苯的制备取甲苯约250m1，加少量蒸馏水振摇，放置后弃水层．再蒸馏甲苯后备用。

2、测定取经粉碎的当归粗颗粒约20g，精密称定（准确至0.01g），置A瓶中，加甲苯约20ml，如图连接，再从冷凝管顶部加甲苯充满B的狭窄部分，将A置可调温电热套中加热至苯沸腾，调节温度使2滴／秒，至B管的水量不再增加，将冷凝管内部用甲苯冲洗，再用饱蘸甲苯的长刷把管壁上的甲苯推下，继续蒸馏5分钟，放冷至室温，待水分与甲苯完全分离，检读水量，并换算成当归中含有水分的百分数。