蛋白质工程的应用实例共28页
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蛋白质工程技术在生产中的应用蛋白质工程技术是一种快速发展的生物技术,它不仅可以解决传统蛋白质生产过程中所存在的诸多问题,提升了工业化生产的效率和质量,更重要的是,它在医药、食品、环境、工业等领域的广泛应用,为人类带来了诸多福利。
本文将介绍蛋白质工程技术在生产中的应用。
一、蛋白质工程技术简介蛋白质工程技术是一种基于遗传工程、蛋白质化学和结构生物学的生物技术,在这个技术领域中,生物学家和化学家通过对蛋白质分子结构和功能的深入研究,发现了很多改变蛋白质分子结构和性质的方法,并运用这些方法对基因进行修改,从而实现对蛋白质产量、纯度、活性、稳定性、抗原性等方面的调控和提升。
二、蛋白质工程技术在医药领域的应用1、生产重组蛋白目前,生产重组蛋白是蛋白质工程技术在医药领域的主要应用之一。
复杂的蛋白质在传统的人工合成方法中难以得到大量的高质量的纯品,而重组DNA技术可以通过改变基因序列从而使得蛋白质在微生物生产的过程中得以大量表达。
在此基础上,通过蛋白纯化技术,可以得到高纯度、高效性的重组蛋白。
目前,重组蛋白已被广泛用于疫苗和药物的生产,如造血因子、生长激素、转化因子等,为治疗多种疾病提供了新的选择。
2、制备抗体类生物制品除了生产重组蛋白外,蛋白质工程技术还可用于开发抗体类生物制品,如单克隆抗体(mAb)等。
mAb是一种重要的抗体治疗药物,通过对基因进行修饰,可以使其在体内产生高效、特异性强的抗体,并对多种癌症、自身免疫性疾病等病症的治疗有着重要的作用。
3、开发新型蛋白质药物蛋白质药物是一类新颖而有效的药物,通过蛋白质工程技术,可以开发出更多种类的蛋白质药物,具有高效、靶向、可调节等优点。
以激动剂为例,这种具有高效、短效、剂量可控等特点的药物,在治疗高胰岛素同型性低血糖症、肿瘤、肺炎等方面有着广泛的应用前景。
三、蛋白质工程技术在食品领域的应用1、生产乳清蛋白粉乳清蛋白是一种高蛋白质、低脂肪、低糖的营养食品,具有免疫调节、抗氧化、增强肌肉力量等多种功效。
蛋白质工程的实际应用【提高稳定性】提高蛋白质的稳定性包括以下几个方面:(1)延长酶的半寿期;(2)提高酶的热稳定性;(3)延长药用蛋白的保存期;(4)抵御由于重要氨基酸氧化引起的活性丧失。
葡萄糖异构酶(GI)在工业上应用广泛,为提高其热稳定性,朱国萍等人在确定第138位甘氨酸(Gly138)为目标氨基酸后,用双引物法对GI基因进行体外定点诱变,以脯氨酸(Pro138)替代Gly138,含突变体的重组质粒在大肠杆菌中表达,结果突变型GI比野生型的热半衰期长一倍;最适反应温度提高10~12℃;酶比活相同。
据分析,Pro替代Gly138后,可能由于引入了一个吡咯环,该侧链刚好能够填充于Gly138附近的空洞,使蛋白质空间结构更具刚性,从而提高了酶的热稳定性。
【融合蛋白质】脑啡肽(Enk)N端5肽线形结构是与δ型受体结合的基本功能区域,干扰素(IFN)是一种广谱抗病毒抗肿瘤的细胞因子。
黎孟枫等人化学合成了EnkN端5肽编码区,通过一连接3肽编码区与人α1型IFN基因连接,在大肠杆菌中表达了这一融合蛋白。
以体外人结肠腺癌细胞和多形胶质瘤细胞为模型,采用3H-胸腺嘧啶核苷掺入法证明该融合蛋白抑制肿瘤细胞生长的活性显著高于单纯的IFN,通过Naloxone竞争阻断实验证明,抑制活性的增高确由Enk导向区介导。
【活性改变】通常饭后30~60min,人血液中胰岛素的含量达到高峰,120~180min内恢复到基础水平。
而目前临床上使用的胰岛素制剂注射后120min后才出现高峰且持续180~240min,与人生理状况不符。
实验表明,胰岛素在高浓度(大于10-5mol/L)时以二聚体形式存在,低浓度时(小于10-9mol/L)时主要以单体形式存在。
设计速效胰岛素原则就是避免胰岛素形成聚合体。
类胰岛素生长因子-I(IGF-I)的结构和性质与胰岛素具有高度的同源性和三维结构的相似性,但IGF-I不形成二聚体。
IGF-I的B结构域(与胰岛素B链相对应)中B28-B29氨基酸序列与胰岛素B 链的B28-B29相比,发生颠倒。
《蛋白质工程的应用》讲义一、蛋白质工程的概述蛋白质是生命活动的主要承担者,其结构和功能的多样性决定了生命现象的丰富多彩。
蛋白质工程则是在深入了解蛋白质结构与功能关系的基础上,通过基因修饰或基因合成等手段,对现有蛋白质进行改造,或制造出一种新的蛋白质,以满足人类生产和生活的需求。
蛋白质工程的基本原理是从预期的蛋白质功能出发,设计预期的蛋白质结构,推测应有的氨基酸序列,然后通过基因工程等技术手段,改造或合成相应的基因,从而获得具有预期功能的蛋白质。
二、蛋白质工程的应用领域(一)医药领域1、药物研发蛋白质工程在药物研发方面发挥着重要作用。
通过对蛋白质进行改造,可以提高药物的疗效、降低副作用。
例如,胰岛素是治疗糖尿病的常用药物,但天然胰岛素存在作用时间短等缺点。
利用蛋白质工程技术,对胰岛素的氨基酸序列进行改造,研发出了长效胰岛素类似物,大大提高了患者的用药便利性。
2、抗体药物抗体是免疫系统产生的能够特异性识别和结合抗原的蛋白质。
利用蛋白质工程技术,可以对抗体进行改造,提高其亲和力、特异性和稳定性,从而开发出更有效的抗体药物,用于治疗癌症、自身免疫性疾病等。
3、疫苗开发蛋白质工程在疫苗开发中也具有广阔的应用前景。
通过对病原体的蛋白质进行改造,使其能够激发更强的免疫反应,或者开发出新型的亚单位疫苗、合成肽疫苗等。
(二)工业领域1、酶工程酶是生物体内的催化剂,在工业生产中具有广泛的应用。
通过蛋白质工程技术,可以对酶进行改造,提高其催化效率、稳定性和耐受性,从而降低生产成本,提高生产效率。
例如,在洗涤剂工业中,通过对蛋白酶进行改造,使其能够在高温、高碱等恶劣条件下保持活性,提高了洗涤剂的去污能力。
2、生物材料蛋白质工程可以用于设计和制造具有特定性能的生物材料。
例如,通过对胶原蛋白等蛋白质进行改造,可以制备出具有良好生物相容性和机械性能的组织工程支架材料,用于修复和替代受损的组织和器官。
(三)农业领域1、抗虫抗病利用蛋白质工程技术,可以开发出具有抗虫、抗病功能的蛋白质,从而提高农作物的产量和质量。
蛋白质工程及其应用示例摘要:在论述蛋白质工程的基本概念和由来的基础之上, 介绍了蛋白质工程的主要内容,并着重阐述了蛋白质工程在工业用酶、食品行业和生物制药三个方面中的应用和前景。
关键词:蛋白质工程;简介;发展与应用;1.蛋白质工程的概念和由来蛋白质工程是以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础的学科,其主要通过化学、物理和分子生物学的手段进行基因修饰或基因合成,对现有蛋白质进行改造,或制造一种新的蛋白质,以满足人类对生产和生活的需求。
蛋白质工程最早始于1975年美国C. A. Hutehison使用了J. Lederberg 1960年推荐的寡脱氧核糖核普酸作为体外诱变剂,经他重新确定此诱变剂的顺序,成功地实现了定位突变试验,培育出了具有各类生物学特性的突变株[1]。
而蛋白质工程的命名是1981年由美国的K.Ulemer确定的[2]。
继后,许多大学及著名的实验室以及经营生物工程高技术产业的公司大量投资竞相研究与开发。
2.蛋白质工程的基本途径从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸(基因)3.蛋白质工程的基本原理基因工程通过分离目的基因重组DNA分子,使目的基因更换宿主得以异体表达,从而创造生物新类型,但这只能合成自然界固有的蛋白质。
蛋白质工程则是运用基因工程的DNA重组技术,将克隆后的基因编码序列加以改造,或者人工合成新的基因,再将上述基因通过载体引入适宜的宿主系统内加以表达,从而产生数量几乎不受限制、有特定性能的“突变型”蛋白质分子,甚至全新的蛋白质分子。
4.蛋白质工程的研究内容4.1 蛋白质结构分析 --- 基础蛋白质工程的核心内容之一就是收集大量的蛋白质分子结构的信息,以便建立结构与功能之间关系的数据库,为蛋白质结构与功能之间关系的理论研究奠定基础。
三维空间结构的测定是验证蛋白质设计的假设即证明是新结构改变了原有的生物功能的必需手段。