奥林巴斯显微镜:物镜的数值孔径和分辨率
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显微镜物镜参数
显微镜物镜参数
显微镜的物镜是实现高倍放大和清晰成像的关键组成部分之一。
了解显微镜物镜的参数对于正确选择和使用显微镜至关重要。
下面是一些常见的显微镜物镜参数的解释和说明。
1. 放大倍数(Magnification):物镜的放大倍数表示在显微镜下观察时,物体被放大了多少倍。
常见的物镜放大倍数有4x、10x、40x和100x等,较高的倍数会提供更大的放大效果。
2. 数值孔径(Numerical Aperture,NA):数值孔径是物镜用于收集和聚焦光线的能力的度量。
较大的数值孔径表示物镜能够收集和聚焦更多的光线,从而获得更高的分辨率和更清晰的图像。
3. 工作距离(Working Distance):工作距离是从物镜的前表面到被观察物体之间的距离。
较大的工作距离可以提供更大的工作空间,方便在显微镜下进行操作。
4. 覆盖面积(Field of View):覆盖面积指的是在显微镜的视野范围内能够观察到的区域大小。
通常,高倍物镜的覆盖面积相对较小,而低倍物镜的覆盖面积较大。
5. 感光层(Cover Slip)厚度:感光层厚度是物镜的一个重要参数,
用于补偿玻片和液体介质的折射差异,以确保成像的准确性和清晰度。
6. 厚层(Working Cover Slip)厚度:显微镜物镜通常在设计时会考虑适应不同厚度的玻片。
厚层厚度通常为0.17毫米,而薄层厚度通常
为0.13毫米。
了解显微镜物镜的参数可以帮助您更好地选择适合您实际需求的物镜。
在使用显微镜时,根据需要选择合适的放大倍数、数值孔径和工作距离等参数,以获得清晰、高分辨率的观察图像。
奥林巴斯生物显微镜鉴定成像与挑选系统技术指标如下:OLYMPUS生物显微镜BX51超宽视野观察筒,4\10\20\40\60倍为干镜,500万成像系统1 显微镜镜体BX51TF Micrscope frame for transmitted microscopy with built-infilter holders for four filters(LBD, ND6, ND25, an openposition for an optional filter of 45mm dia.), includinghexagonal driver AB8804, immersion oil 8cc and shieldsticker AD4908(2pcs.)Corresponded to WEEE and RoHSregulations1超宽视野三目镜筒U-SWTR-3 Super widefield trinocular tube 1 六孔物镜转盘U-D6RE Sextuple revolving nosepiece with a slot for analyzer orDICslider1机械式载物台U-SVRB-4 Ceramic surface mechanical stage with right-hand lowdrivecontrol(long type)1夹片器U-HLDT-4 Specimen holder for BX stage, left hand, for two specimens,thick type1摆动式聚光镜U-SC3 Swing-out condenser N.A. 0.9-0.16 1 100W卤素灯灯室U-LH100-3 Lamp house for 100W halogen with connecting cableCorresponded to RoHS, WEEE regulations112V100W灯泡JC12V100WHAL-L Halogen bulb(Philips No. 7724) 2 电源线UYCP Power cord 1 防尘罩COVER-018 Dust cover Type 018 for BX2(L 510mm x W 320mm x H 530mm)1万能平场半复消色差物镜UPLFLN4X U plan semi apochromat objective 4X/0.13, WD 17 1UPLFLN10X2 U Plan Semi Apochromat objective 10X/0.3, WD 10 1 UPLFLN20X U plan semi apochromat objective 20X/0.5, WD 2.1(spring) 1UPLFLN40X U plan semi apochromat objective 40X/0.75, WD 0.51(spring)1UPLFLN60X U plan semi apochromat objective 60X/0.9 WD 0.2 withcorrection collar(spring, c.c. 0.11-0.23)1超宽视野目镜SWH10X-H Super widefield eyepiece 10X(focusable) 2 目镜测微尺U-OCMC10/100X Cross lines and 10mm/100 on X 1DP25 500万像素成像系统 1 C型视频接口U-TV0.63XC C-mount camera attachment with 0.63X lens 1 数码相机主机DP25 Digital camera for microscope with 5M pixel CCD, includingIEEE1394a connection cable, IEEE1394a PCI board andCD-ROM1图象软件DP2-BSW-E-V2.2 CD-ROM Application softwareforDP20/DP25/DP70/DP71/DP721电脑HP 1二SZX16 最大放大倍数230倍,落透两用光源 1 显微镜镜体SZX2-ZB16 16:1 zoom microscope body with aperture diaphragm 1三目镜筒SZX2-TR30 30 degrees inclined trinocular observation tube 1粗微调聚焦装置SZX2-FOF Fine and coarse focusing unit 1 超薄多功能透射光底座SZX2-ILLT Thin type LED transmitted illuminator, world voltage 1 电源线UYCP Power cord 1 电源线U-ACAD4515 Power cord for U-CFU, MM6-CFU, BXFM-A,SZX-FOA2/SZX2-FOA, SZX2-ILLT1高分辨率平场复消色差物镜SDFPLAPO1XPF Distortion free plan apochromatparfocal objective 1X(W.D.60mm)1SDFPLAPO2XPFC Distortion free plan apochromatparfocal objective 2X(W.D.20mm)with correction collar1目镜WHN10X-H Widefield eyepiece 10X, focusable 2 SZX16双物镜转换器SZX2-2RE16 Double revolving nosepiece for SZX16 1双分支互锁导光管光纤导管LG-DI Light guide, with bifurcated fiber optics 1 光源LG-PS2 Light source for light guide 1 聚光透镜HLL301 Collector lens 2 滤色片30.5S-G533 Green filter for black and white photography, 30.5mm dia. 1 30.5S-LB80 Light balancing filter, 30.5mm dia. 1 灯泡JCR12V100WB Halogen bulb for LG-PS2(SZX-DI/DFI/R66/ILLC) 2 电源线UYCP Power cord 1。
倒置荧光显微镜X71仪器名称:奥林巴斯IX71倒置荧光显微镜型号:IX71 1、说明书(多的话单独附件)IX71 产品规格光学系统UIS2光学系统。
观察法荧光(U激励)(B,G激发)荧光荧光(U激励)微分⼲涉相位差简易偏光明场对⽐照明系统透射照明100W卤素灯照明⽩光LED照明EPI照明100W汞灯75W氙⽓灯光源,光导镜筒双⽬宽视场22数场倾⾓30°宽视⾓CT*1摇摆双⽬宽视场22数场倾⾓30°常设三⽬宽视场22场35?85°的倾斜⾓度荧光光源130⽡的卤素灯光导照明100⽡汞脂蛋⽩灯外壳和变压器100⽡汞灯和变压器75 W氙灯外壳和变压器物镜转换器电动六孔物镜转换器(DIC滑块),防⽔结构编码六孔物镜转换器(DIC滑块),防⽔结构荧光照明复眼透镜L形荧光照明L形的设计与可交换FS模块L形的荧光照明器L形的交换FS和AS模块设计荧光照明直板造型设计与视场光阑研究级倒置显微镜1.1 物镜转换器:6孔式物镜转换器,带有简易防⽔装置*1.2 聚焦机构:备有聚焦机构同轴粗、微调旋钮(最⼩微调刻度单位:1µm),⾏程9mm(向上7mm、向下2mm),粗调旋钮扭矩可调,备有上限位装置*1.3 原象光⼝:双层光路设计,共6条射⼊/射出光路,最多可同时接4 路采集原像的图像获取系统,左侧光⼝的原像到机架的距离102mm*1.4 具有中间2级放⼤率转换器:1×/1.6×1.5 透射光照明装置:100W卤素灯透射光照明装置,视场可变光阑可调;外置电源供应器1.6 观察镜筒:双⽬镜筒:瞳距可在50-76mm范围内进⾏调节,视场直径为22*1.7 ⾼精度载物台:⾏程为50 × 50mm;载物台插⼊圆板(外径110mm、内径25mm)* 1.8 万能平场半复消⾊差相差物镜,视场数≥26.54X(N.A.0.13 W.D.17 mm);10X(N.A.0.3 W.D.10 mm)20X(N.A.0.45 W.D.6.6-7.8 mm);40X(N.A.0.6 W.D.3.0-4.2 mm)1.9 ⽬镜:⾼眼点⽬镜,10×,视场直径:221.110 反射荧光系统1.10.1 荧光照明装置:备有视场可变光阑,滤光⽚插板*1.10.2 荧光滤⾊镜盒:备有可装⼊6个滤⾊镜⽴体镜套的转盘式滤⾊镜盒,内装光闸*1.10.3 荧光激发块:蓝⾊(B)、绿⾊(G)、紫外(U)1.10.4 荧光光源:100W超⾼压汞灯2 超⾼分辨率制冷彩⾊CCD*2.1 像素:≥1700万像素(最⾼分辨率≥4800 X 3600)*2.2 制冷系统:低于环境温度10度*2.3 测光⽅式:30%、1%平均测光,可达0.1%点测光*2.4 ⽆压缩图像采集速度:≥15 幅/秒(1600 X 1200)2.5 提供2x2、4x4的像素混合模式(binning)2.6 图像传输速度:4秒(最⾼分辨率)2.7 芯⽚规格:1/1.8英⼨彩⾊CCD2.8 ⽩平衡:⾃动/ ⼿动/ 点触式2.9 感光度:可达ISO1600*2.10 具有3CCD模式,更佳的⾊彩还原性3 图像控制分析软件3.1 采集图像:⽀持奥林巴斯多种型号专业CCD,⽀持TWAIN接⼝,界⾯直观,操作容易,使⽤户更加容易的集中精⼒关注⽣物试验过程;3.2 对图像中的直线显⽰线上灰度强度变化,从⽽反映图像中的变化特性;3.3 在图像上添加注释、箭头等功能,可以⽅便的表⽰图像中的重点关注部位;3.4 调节亮度、对⽐度、伽玛值以及灰度显⽰范围,并可以单独调节RGB各通道的亮度,⽅便地对图像添加伪彩⾊、改变⾊彩模式以及⾊阶位数等功能,可以改变图像分辨率、旋转图像等各种操作,⽀持反转、低通、⾼通、锐化等滤镜,使图像关注点和各荧光通道获得最佳的显⽰效果;3.5 对单荧光通道图⽚做⾊彩合成,⽅便显⽰多染标本的图像;*3.6 合成透射光和荧光通道图像,显⽰荧光在细胞上的定位图像;3.7 ⽅便的输⼊硬件信息即可实现添加标尺功能,从⽽显⽰图像的放⼤⽐例关系;3.8 可以做离线⽩平衡、市场平整度以及背景校正等处理,便于后期图像处理;3.9 可以对多幅视野相邻的图像做⼤图拼接,轻松获取⾼分辨率⼤视野图像;*3.10 可以实时对多幅视野相邻的图像做⼤图拼接,实时获取⾼分辨率⼤视野图像;*3.11 可以测量直线长度、曲线长度、矩形⾯积、圆⾯积、周长、⾓度等多个参数,并把测量结果输出到EXCEL,并于后期分析处理。
Olympus is about life. About photographic innovations that capture precious moments of life. About advanced medical technology that saves lives. About information- and industry-related products that make possible a better living. About adding to the richness and quality of life for everyone. Olympus. Quality products with aREAL-TIME CONFOCALMICROSCOPE MX50-CFUNIVERSALINFINITY SYSTEMUMPLFL100X BDPUMPLFL100XBD LMPLAPO150X BDLMPLAPO150 BD0.2µm Compatible Ideal for Inspecting Delicate Gaps and Warps Confocal DIC Mode / Contact Hole Sharp Profile Images Right to the EdgeConfocal Mode / Contact HoleThe Real-time Confocal Microscope that Leads the Way in Image Clarity and OperabilityThe Ideal Combination for Confocal Microscopy: Nipkow Disk andUIS OpticsWith images scanned by the Nipkow Disk and enhanced by the superior technological performance of Olympus UIS optics, the MX50-CF provides outstanding real-time confocal observation – accurately resolving original images of less than0.25µm. Images are further clarified by sectioning effects which allow easy inspection of bottom layers in multi-layer specimens and pinhole bottoms – all with unparalleled higher resolution and higher contrast than any other microscope in this class.Maximized Brightness Ensures Excellent Image Clarity Even at the Highest MagnificationsThe incorporation of superior optical components and a higher mirror reflection factor enables the MX50-CF to minimize light loss and give significantly improved brightness during confocal observation. Bright images are achieved even under high magnification (e.g. via a 150x objective lens), making observation on monitor easier than ever.A Range of Observation Modes Including Original Confocal DIC MicroscopyFour observation modes are available. Selection is at the touch of a lever for CF1 mode (priority on brightness for good color reproduction of the specimen), CF2 mode (priority on axial resolution power for sectioning effects), or BF mode (brightfield observation). Nomarski DIC microscopy can also be selected for confocal effects: with the DIC prism slider IN and theλ/4 tint plate knob at OUT, the user can clearly observe and distinguish delicate textures that could not be recognized in general confocal modes.Direct Path Ensures Clear Images in Conventional MicroscopyThe MX50-CF allows easy switching between confocal image/non confocal observation. The direct observation path used during conventional microscopy procedures prevents image deterioration because the image does not have to go through the confocal contour relay path. The result is clear images – every time.Intermediate magnification factors contained for highmagnification observationTilting observation tube for comfortable operationFrontal layout for ease of useHigh-rigidity, anti-shock design for high magnificationobservation without disturbanceGreater color accuracy than conventional confocalmicroscopes: The MPLAPO objectives present images incolors closer to those of the actual specimenAdd-on to the MX50 for excellent operabilityCE accreditedMajor applications: bottom layer in multi-layer structuresand metal layer on patterned wafer, magnetic head andnew/metallic materialsConfocal mode selector leverBF: Non-confocal brightfieldCF1: Confocal 1CF2: Confocal 2Halogen lamp housing(for conventionalmicroscopeobservation)Optional hand switch(objective selector/recall function)Mercury/Xenon lamphousing (for confocalobservation)Coarsemovement grip(with clutch) Intermediate magnificationselector knobTilting trinoculartubeλ/4 tint plate knobDIC prism sliderLight path selector knobMX-CF selector knobMX: Direct light pathCF: Confocal light pathND filter knobCoarse/fineadjustmentknobsVoltageadjustmentknob forconventionalmicroscopeObjectiveselector buttonReal-time Confocal Optics Contour Relay Optical Path Direct Optical PathEyepieceEyepiece MX50 main unit Photo optical path Polarized light beam-splitterXenon light source for CFHalogen light source for MXCF1, CF2MX-CF switch lever Secondary imagePrimary imagePolarized light beam splitter Nipkow diskNipkow disk Nipkow diskEyepiece MX50 main unit Photo optical path Polarized light beam-splitter Xenon light source for CF Halogen light source for MX MX-CF switch lever Nipkow diskMotorImage forming lensObjective lens λ/4 plateRelay lensFundamentals Of Real-time Confocal Optics The MX50-CF's confocal scanning method is based on use of the Nipkow Disk. The Nipkow Disk has numerous pinholes on its primary image-forming disk: light passing through the pinholes is reflected off the specimen and back to the pinholes. However, since the pinholes are located on the primary image-forming disk, only light reflected onto the focused disk is transmitted through the pinholes: this is the confocal effect.When the disk is rotated at high speed, the light beams passing through the pinholes will scan the specimen simultaneously; this allows a real-time image to be observed, as with an ordinary optical microscope. There are also two pinhole diameters on the disk; switching between them adjusts the confocal effects.In conventional microscopy, illumination optics have not always been adequate for the high magnifications required for confocal observations; in particular, there tended to be insufficient brightness for accurate, detailed observation. To overcome this problem, Olympus has developed significant refinements to the illumination optics combined them with UIS optics to achieve today's highest standards of brightness and confocal effects.Unrivaled Levels of Resolution and Contrast Achieved by Confocal Image and Microscope ImageTop layer circuit Confocal mode (CF2)MPLAPO100X BDTop layer circuitConfocal mode (CF2)UMPLFL100X BD Bottom layer circuit Confocal mode (CF1)MPLAPO100X BD Bottom layer circuitConfocal mode (CF1)UMPLFL100 X BD Top layer circuitNon-confocal observation, brightfield modeMPLAPO100X BDBFObservation of LSIMeeting Diverse Needs in Semiconductor Inspection: A Line-up that Only OLYMPUS Can Offer As well as offering excellent performance as a stand-alone unit, theOlympus real-time confocal semiconductor inspection microscopecan be combined with a wafer loader, making it a mini workstation,or upgraded to the AL1000 flexible wafer inspection system by theaddition of an automatic stage.Olympus will continue to maintain its commitment to developinginnovative systems based on real-time confocal semiconductorinspection microscopes — systems that meet our customers'diverse needs for clear, accurate, high-resolution inspection.MX50-CF + AL100Real-time Confocal Microscope + Wafer LoaderCombining the MX50-CF with the AL100 wafer loader series(which offers the world's first micro/macro/back side 3-inspection feature) creates a mini workstation that 0.18µmcompatible. Additional advantages include cost-effectiveperformance and excellent space efficiency in clean roomworking environments.AL1000Flexible Wafer Inspection SystemThis powerful system is for inspecting super micro structures likethe 64M DRAM. Wafer observation software is offered in menuform for stage-by-stage operation, and settings for sampling, diemap, inspection time, microscopy method and objective magnification factor can all be made at the touch of a button.Manual wafer inspectionWafer loader+Manual wafer inspectionIntegrated wafer inspection under recipe control MX50-CF。
奥林巴斯显微镜物镜的数值孔径和分辨率显微镜物镜的数值孔径是其聚集的光,并在一个固定的物体距离解决细标本细节能力的量度。
图像形成光波穿过试样和如图1所示的该锥形光的纵切片示出孔径角,是由物镜的焦距确定的值中的倒置锥体进入物镜。
角μ是二分之一的孔径角(A)和涉及通过以下公式的数值孔径:数值孔径(NA)= n(sin μ)其中n是物镜的前透镜和样品盖玻璃,即从1.00范围为空气至1.51专门浸没油一个值之间的成像介质的折射率。
许多作者用变量α为μ数值孔径公式所示。
从这个方程很明显,当成像介质为空气(具有折射率,n = 1.0),则数值孔径仅取决于角度μ的最大值为90°。
角μ的sin,因此,具有(使用“干”显微镜物镜)的1.0(sin(90°)= 1),这是用空气作为成像介质操作透镜的理论最大数值孔径的最大值。
在实践中,但是,它是很难达到0.95以上的数值孔径值与干物镜。
图2示出了一系列从变焦距和数值孔径的物镜导出的光锥。
作为锥改变光的角度为7°μ增加,如图2(a)至图2的(c)60°,在数值孔径从0.12至0.87所得的增加,接近限制时空气是成像中。
通过检查数值孔径方程,很明显,折射率是在实现数值孔径大于1.0的限制因素。
因此,为了获得更高的工作数值孔径,物镜的前透镜和试样之间的介质的折射率必须增加。
显微镜物镜现在可以允许成像另类媒介,例如水(折射率= 1.33),甘油(折射率= 1.47),和浸油(折射率= 1.51)。
护理应符合这些物镜被用于防止当一个物镜是用比它的物镜是为不同的液浸介质中使用,这将产生不希望的伪影。
我们建议显微镜从不使用专为浸油或者用甘油或水的物镜,虽然有几个新的物镜,最近出台了将与多个媒体合作。
你应该向制造商咨询是否有任何怀疑。
在60X和100X(或更高倍率)的放大倍率范围最物镜是设计用于浸油的使用。
通过检查上面的数值孔径方程,我们发现,与浸油得到的最高理论数值孔径为1.51(当sin(μ)= 1)。
奥林巴斯生物显微镜操作规程奥林巴斯生物显微镜操作规程2篇篇一:OLYMPUS显微镜操作规程OLYMPUS显微镜操作规程(1)打开光源开关,调节光强到合适大小(不要调到最亮)。
(2)选择所需光路。
(3)转动物镜转盘,使低倍镜头正对载物台上的通光孔。
(4)将所要观察的玻片放在载物台上(玻片标本上下不得有水或其他液体),使玻片中被观察的部分位于通光孔的正中央。
(5)先用低倍镜观察(10X)。
观察之前,先转动粗动调焦手轮,使载物台上升,物镜逐渐接近玻片。
需要注意,不能使物镜触及玻片,然后,通过目镜观察,并转动粗调焦手轮,使载物台慢慢下降,直到看清物像。
如果像偏离视野,可调节载物台移动杆。
(6)瞳距调节:使两目镜距离与自己两眼距离相等。
(7)屈光度调节:以右眼看右目镜,用微调旋钮调好焦距;以左眼看左目镜,旋转屈光度调节环调好焦距。
(8)高倍物镜观察:把物像中需要放大观察的部分移至视野中央。
将高倍物镜转入光路(一般具有正常功能的显微镜,低倍物镜和高倍物镜基本齐焦,在用低倍物镜观察清晰时,换高倍物镜应可以见到物像,但物像不一定很清晰),微动调焦手轮进行调节。
(9)聚光镜调整:调节聚光镜升降旋钮使聚光镜到最高位置:调聚光镜孔径光阑②使与物镜倍数相对应。
(10)需更换标本观察时,先将物镜转到10×再更换标本,严禁在高倍物镜下取放标本。
篇二:奥林巴斯生物显微镜使用、维护保养操作规程1、仪器及电源组成:本系统由目镜、镜筒、中间镜筒、镜臂、物镜转盘、载物台、聚光镜、灯室等单元组成;电源由TL4外接30W电源装置组成。
2、打开光源,调节亮度2.1开启设备总电源开关,接通TL4外接电源:检查一下,光强调节旋钮‘I’的标志要指向低电压(最左边方向),然后,把主开关位于‘O’(关)的位置调至‘I’(开)。
2.2顺时针转动光强调节旋钮‘I’(提高照明电压,使照明更亮),从左边旋转到右边并根据玻片性质调整内置照明灯光亮度及光圈大小,使视野亮度处于合适范围;将事先准备好的玻片放到已降低的载物台上,拉开夹片器,放上样品载玻片用标本夹片器夹好,转动物镜转盘,先用移动手轮转动载物台旋钮,调整观察位置使观察样品大致位于物镜正下方。
光学显微镜物镜参数解读光学显微镜是一种广泛应用于科学研究和教学的工具,而物镜则是显微镜中最重要的光学元件之一。
物镜的不同参数对于显微镜成像的清晰度和放大倍数有着重要的影响。
下面将对物镜的常见参数进行解读。
1. 放大倍数(Magnification):放大倍数表示物镜放大样品的能力。
它指的是显微镜中从目镜到物镜之间的光学系统所提供的放大倍数。
放大倍数越高,样品的细节就能够被放大得更清晰。
常见的物镜放大倍数有4x、10x、40x和100x。
2. 数值孔径(Numerical Aperture,NA):数值孔径是衡量物镜收集和聚焦光线能力的参数。
它的值越高,物镜对于细节的解析能力就越强。
数值孔径一般表现为一个小数,例如0.25、0.65等。
较高的数值孔径物镜通常用于高分辨率成像和薄片的观察。
3. 工作距离(Working Distance):工作距离是物镜离样品表面的距离。
工作距离越大,物镜离样品的距离就越远。
这对于观察厚样品或者需要在样品上进行操作时非常重要。
工作距离常见的单位为毫米。
4. 橄榄(Objective Type):物镜有不同的类型,例如倍率物镜、测量物镜、油浸物镜等。
倍率物镜是用于获得不同放大倍数的物镜,而测量物镜则带有刻度,可以用于测量样品的尺寸。
油浸物镜则需要将物镜与样品之间填充高折射率的油,以获得更高的分辨率。
综上所述,物镜的参数包括放大倍数、数值孔径、工作距离和类型。
这些参数决定了显微镜的分辨率、视野和适用范围。
在选择物镜时,需要根据实际需求来考虑这些参数,以获得最佳的显微镜成像效果。
显微相机成像系统技术参数
数量:6套
*1、需分别与科室现有的2台莱卡DM2000、2台奥林巴斯CX31、2台奥林巴斯BX43显微镜配套
2、感光面:1/2.33英寸
3、像元大小:1.34微米*1.34微米
4、有效像素:1600万
5、最大分辨率:4608H*3456V
6、扫描模式:逐行扫描
7、快门模式:电子卷帘快门
8、帧频:25fps@(400万,2304*1728)
9、色彩深度:24bit
10、模数转换:8bit
11、曝光模式:自动/手动
12、积分时间:1ms-1.2s
13、白平衡模式:自动/手动
14、动态范围:>59.5dB(Gain 1X)
15、传输接口:usb3.0/5Gb/s
16、标准C接口
17、质量保证期:设备安装验收合格后≥2年
18、供货期:合同签订后15个工作日内。
19、投标商具有符合生产经营范围内的医疗器械经营许可证或医疗器械生产许可证。
显微镜物镜的五大参数数值孔径(NA)子午光线能进入或离开纤芯(光学系统或挂光学器件)的最大圆锥的半顶角之正弦,乘以圆锥顶所在介质的折射率,数值孔径是判断物镜性能(分辨率、焦深、亮度等)的重要指数。
数值孔径又叫镜口率,简写为NA。
它是由物体与物镜间媒质的折射率(n)与物镜孔径角的一半(θ\2)的正弦值的乘积,其大小由下式决定:NA=n×sinθ/2。
数值孔径简写NA(蔡司显微镜的数值孔径简写CF),数值孔径是物镜和聚光镜的主要技术参数,是判断两者(尤其对物镜而言)性能高低(即消位置色差的能力,蔡司公司的数值孔是代表消位置色差和倍率色差的能力)的重要标志。
其数值的大小,分别标在物镜和聚光镜的外壳上。
孔径角又称“镜口角”,是物镜光轴上的物体点与物镜前透镜的有效直径所形成的角度。
孔径角越大,进入物镜的光通亮就越大,它与物镜的有效直径成正比,与焦点的距离成反比。
显微镜观察时,若想增大NA值,孔径角是无法增大的,唯一的办法是增大介质率n值。
基于这一原理,就产生了水浸系物镜和油浸物镜,因介质的折射率n值大于1,NA值就能大于1。
数值孔径最大值为1.4,这个数值在理论上和技术上都达到了极限。
目前,有用折射率高的溴萘作介质,溴萘的折射率为1.66,所以NA 值可大于1.4。
与其他参数的关系:数值孔径是显微镜物镜的重要参数,决定了物镜的分辨率。
与物镜的放大倍数,工作距离,景深有直接关系。
一般来说,它与分辨率成正比,与放大率成正比,焦深与数值孔径的平方成反比,NA值增大,视场宽度与工作距离都会相应的变小。
容易产生的误区:数值孔径与分辨率成正比,但这并不是说在选择物镜的时候一定要选择数值孔径(NA)最大才是最好,因为物镜还会有很多其他重要参数,比如荧光透过率、工作距离等等,最好根据自己的实验选择。
焦深焦深也叫景深,其定义是:指使用显微镜观察和拍摄样品表面时,从对准焦点的位置开始,改变物镜与样品表面的距离时,对焦能够保持清晰的范围。
奥林巴斯显微镜:物镜的数值孔径和分辨率
显微镜物镜的数值孔径是其收集光并解决细标本细节
在一个固定的物体距离的能力的量度。
图象形成光波穿过试样和在倒置锥体进入物镜,如图1这个锥形光的纵向切片显示了孔径角,是由物镜的焦距确定的值。
角μ是二分之一的数值孔径角(A),它与通过以下等式的数值孔径:数值孔径(NA) = n(sin μ)其中n是物镜的前透镜和试样玻璃盖,一个值,该范围为1.00空气1.51专门浸没油之间的成像介质的折射率。
许多作者替换变量α为μ在数值孔径方程。
从这个等式很明显,当成像介质为空气(具有折射率,n= 1.0),则数值孔径仅取决于所述角μ的最大值为90°。
角度的sin μ,因此,具有1.0(SIN(90°)= 1),这是一个透镜与空气作为所述成像介质操作的理论最大数值孔径(使用“干”显微镜物镜)的最大值。
在实践中,但是,它是很难实现的数值孔径值在0.95以上的干的物镜。
图2示出了一系列从变焦距和数值孔径的物镜衍生光锥。
作为光锥改变,角度μ从7°的增加在图2(a)至图2的(c)60°,从而增加了数值孔径从0.12至0.87,接近极限时空气是成像媒介。
通过检查数值孔径方程,很明显的是,折射率是在实现数值孔径大于1.0的限制因素。
因此,为了获得较高的工作数值孔径,物镜的前透镜和试样之间的介质的折射率必须增加。
显微镜物镜,
现已允许成像在其他媒体,如水(折射率= 1.33),甘油(折射率= 1.47),和浸油(折射率= 1.51)。
护理应与这些物镜可用于防止当一个物镜是,使用具有比它的物镜是为不同的浸没介质,这将产生不希望的伪影。
我们建议显微镜从来不使用专为油浸无论是与甘油或水的物镜,虽然有几个新的物镜,最近已经出台,将与多个介质。
您应与制造商检查是否有任何疑虑。
多数物镜在60倍和100倍(或更高版本)的放大倍率范围是设计用于浸油的使用。
通过检查上面的数值孔径方程,我们发现,最高理论数值孔径与浸油获得的是1.51(当sin(μ)= 1)。
在实践中,然而,大多数的油浸物镜的1.4的最大数值孔径,以最常用的数值孔径范围为1.0至1.35。
物镜的数值孔径也依赖,在一定程度上,在校正光学像差的量。
高度校正的物镜趋于如示于下表1中有大得多的数值孔径为各个放大倍数。
如果我们采取了一系列典型的10倍物镜作为一个例子,我们看到,平场校正的规划物镜,数值孔径增加对应校正色差和球面像差:平场消色差,NA = 0.25; 平场萤石,NA = 0.30; 并平场复消色差透镜,NA = 0.45。
物镜的数值孔径放大平场
消色差
(NA)平场
萤石
(NA)平场
复消色差透镜
(NA)0.5X0.025不适用不适用1X0.04不适用不适用2倍0.06不适用0.104倍0.100.130.2010倍0.250.300.4520倍
0.400.500.7540倍0.650.750.9540倍(油)不适用
1.301.0060X0.750.850.9560倍(油)不适用不适用
1.40100X(油)1.251.301.40150倍不适用不适用0.90。