11.霍乱弧菌

２０１２年第２４卷第８期　上海预防医学　２０１２，Ｖ—ｏｌ，２４　Ｎｏ．。８　Ｓｈａｎｇｈａｉ　Ｊｏｕｍａｌ　ｏｆ　Ｐｒｅｖｅｎｔｉｖｅ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ　

文章编号：１００４—９２３１（２０１２）０８—０４５９一ｏ４　

霍乱及霍乱弧菌检测技术研究进展　・综　述・　

燕勇　，罗建勇　，朱心强　，王恒辉　，林云　（】．浙江省嘉兴市疾病预防控制中心，浙江嘉兴３１４０５０；　

２．浙江大学医学院营养与食品安全研究所，浙江杭州３１００５８）　

当前，霍乱这个古老的肠道传染病仍是全球，特　

别是发展中国家面临的一个重大公共卫生问题…，　

霍乱爆发的可能性依然存在，小流行及散发依然不　

断。我国南方，尤其水网发达的江南地区，更是成为　

霍乱的重要流行区，每年在霍乱防治上花费了大量的　

人力、物力。随着国家和相关部门的日益重视，建立　

针对霍乱防治的突发公共卫生事件应急体系已成为　

当前的重要任务之一，而为其提供技术支持与服务的　

病原检测则成为疾控部门能力建设的重要内容。随　

着疾病的流行变迁和人们对病原体毒力、致病性等方　

面认识的深入，霍乱的流行病学和病原学研究方面有　

了一些新的进展，现综述如下。　

１　霍乱流行病学现状　

１．１全球流行概况　

进入２１世纪后，全球霍乱的发病数明显减少，涉　

及的国家和地区数逐年下降，霍乱的爆发和流行主要　

集中在非洲大陆，其次在亚洲，而欧洲、美洲多为输入　性病例，大洋洲偶发　Ｊ。近年来流行规模较大的　

２００８年８月　０ｏ９年６月津巴布韦霍乱疫情，据　

ＷＨＯ数据　报告疑似病例９８　４２４例，死亡４　２７６人，　

病死率达４．３％。爆发于２０１０年地震灾害的海地霍　

乱疫情，经历两次流行高峰，造成严重的卫生危机与　

人道主义灾难，截至２０１１年８月１８日，报告病例　

４１９　５１１例，死亡５　９６８例，病死率１．４％　。　

基金项目：嘉兴市科技计划项目（２００８ＡＹ２０４１—４）　作者简介：燕勇（１９７４一），男，副主任技师，硕士。　１．２我国流行概况　

霍乱弧菌检验程序

一、检查对象

一天内腹泻三次或三次以上的病人。

二、标本采集及处理

1、 采集时间：在未服用抗生素前采样。

2、 采集方式：用棉拭子或采便管从肛门插入直肠3—5厘米取样，必须看到有粪便黏附才可：对于自然排出的水样便、呕吐物及保存液保存的标本可直接接种分离或吸取0.5ML、成形大便取黄豆左右大小。

3、 标本送检：标本采集后应立即送检。若不能立即送检，可保存于碱性蛋白胨水中尽快送检验。24小时以上才能送检的标本，应使用文一腊二氏保存液保存。

4、 标本处理：将标本直接分离接种于4号琼脂及放入8—10ML碱性蛋白胨水中增菌。

“两管三板”：

送检标本马上接种一个4号琼脂平板、同时碱性蛋白胨水培养管增菌；—8小时后接种增菌管内标本于第二块4号琼脂平板，同时转种第二管碱性蛋白胨水；6—8小时后继续接种第二管碱性蛋白胨水的标本于第三块4号琼脂平板上。

三、检验程序：

1、 弧菌形态：

弧菌生长快、菌落大、培养4—5小时，原划线处有菌苔生长，8—10小时可长出小菌落，16小时菌落直径可达2毫米。菌落略带灰色、半透明、扁平、稍隆起、光滑湿润，培养时间延长或室温放置后，菌落略带黄色，中心厚而周围透明，培养基含亚碲酸钾使得菌落成灰色，中心形成黑色金属碲沉淀。在平皿上挑取典型菌落做玻片凝集试验。

2、 玻片凝集试验：

首先要注意抗原抗体比例和保证抗原（菌株）的纯洁性，使用O1群和O139群两种诊断血清。如未获单个菌落，可挑取可疑菌苔边缘透明部分做玻片凝集。注意，凝集的菌落应以生理盐水作对照，检查有无自然凝集；然后用此玻片显微镜下看动力（动力活泼如流星样）；再将此玻片革兰氏染色看弧菌形态。

3、 弧菌分型：

稻叶型和小川型诊断血清做玻片凝集试验进一步分型。

四、报疫程序：

一旦发现阳性可疑标本立即用铁罐保存，通知送检科室，确认病人资料；上报医院总值班2460或2560，派车送海珠区防疫站确证。

五、标本处理： 发现Ⅱ号菌阳性可疑标本，即送标本往防疫站确认。余下的碱性胨水管、直划板等放置于专用铁盒内，留待防疫反馈讯息后，浸5%戊二醛消毒水30分钟后交工人煮沸1小时再清洗或弃置。同时要登记于烈性传染病登记本和强毒菌株及污染物品处理登记本。

检验科绩效考核实施方案

为激发大家的工作热情，加强工作责任心，根据医院有关绩效考核的规定，特制定《检验科绩效考核实施方案》，请大家遵照执行。 一、考核目标与原则 目标：通过绩效考核，进一步明确工作任务和行为规范，提高职业素质和工作积极性，做到奖勤罚懒、优胜劣汰。

原则为激发大家的工作热情，加强工作责任心，根据医院有关绩效考核的规定，特制定《检验科绩效考核实施方案》，请大家遵照执行。

一、考核目标与原则

目标：通过绩效考核，进一步明确工作任务和行为规范，提高职业素质和工作积极性，做到奖勤罚懒、优胜劣汰。

原则：坚持实事求是、客观公正的原则，坚持定性考评与量化考核相结合的原则。

二、考核对象与时限

从2012年1月1日起，检验科所有员工实行绩效考核制度，每月考核一次。新员工转正后纳入当月考核。

三、考核的主要内容

（一）工作纪律：严格遵守《员工手册》及医院各项规章制度，热爱本职工作，有责任心。

（二）医疗质量：严格遵守卫生法律法规、卫生行政规章制度和医学伦理道德，严格执行查对制度和诊疗操作规程，确保医疗质量和安全。

（三）服务质量：服务用语文明规范，服务态度好，无“生、冷、硬、顶、推、拖”现象。认真践行服务承诺，加强与患者的交流和沟通，自觉接受监督，构建和谐医患关系。

（四）临床沟通：加强与临床科室的沟通与协调，倡导良好、融洽、简单的人际关系，做到求大同存小异，增强工作的凝聚力。

（五）全勤：鼓励员工出全勤，提高工作效率。

（六）加分：包括各级行政部门、媒体或患者的表扬，和卫生专业技术资格。

微生物检验技术专业实践能力模拟题21

以下每一道考题下面有A、B、C、D、E 5个备选答案。请从中选择1个最佳答案。

1. 多数无芽胞细菌在55～60℃死亡，所需时间为

A.15～30min

B.30～45min

C.30～60min

D.1～2h

E.2～4h

答案：C

[解答] 细菌主要由蛋白质组成，蛋白质在高温状态下易发生凝固或变性，酶的活性也随之消失。多数细菌繁殖体在55～60℃加热30～60min即可死亡。

2. 在湿热条件下，作用5～10min即可杀死所有细菌繁殖体和酵母菌的最低温度是

A.40℃

B.60℃

C.50℃

D.70℃

E.80℃

答案：E

[解答] 在湿热条件下最低需要80℃作用5～10min就可杀死所有细菌繁殖体和酵母菌。

3. SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳中，分子量标准蛋白(蛋白分子量Marker)的用途是

A.测算电泳条带分子量

B.减慢电泳速度

C.促进蛋白质解离

D.加快电泳

E.催化作用

答案：A

[解答] 十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳将待测蛋白质样品溶解于含有强阴离子去污剂(SDS)和还原剂的溶液中，加热使蛋白质解离，变性的多肽与SDS结合，结合的量与多肽的分子量成正比，借助已知分子量的标准参照物(蛋白质分子量Marker)便可测算出多肽链的分子量。

4. 疑为二期梅毒，用梅毒血清学方法初筛，宜选用的试验是

A.TPHA

B.RPR

C.CFT

D.TPPA

E.MHA-TP

答案：B

[解答] 梅毒螺旋体的初筛试验主要是非密螺旋体抗原试验，包括性病研究实验室试验(VDRL)、快速血浆反应素试验(RPR)和不加热血清反应素试验(USR)。其中二期梅毒的检出阳性率可达100%。

5. 在半固体培养基的穿刺线生长呈模糊或根须状，并使培养基变浑浊的细菌

A.无动力，有鞭毛

B.生长速度快

C.有动力，有鞭毛

D.有动力，无鞭毛

E.无动力，无鞭毛

答案：C