细胞生物学实验手册:细胞中的微丝染色及微丝与细胞形态的实验观察
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动物细胞微丝观察教学实验的设计与探索实验目的:1.了解动物细胞的基本结构和功能;2.观察和理解微丝对细胞形态和运动的影响;3.发展实验设计和观察技巧。
实验材料:1.动物细胞样品(如动物组织切片);2.显微镜;3.高倍镜片;4.盐水或缓冲液;5.染色剂(如荧光染料)。
实验步骤:1.准备动物细胞样品:可以使用动物组织切片作为样品,也可以通过染色方法使微丝更容易观察。
将样品放在盐水或缓冲液中以保持细胞的活性。
2.放置样品在显微镜玻片上:将动物细胞样品放在显微镜玻片上,并在其上方加上一滴盐水或缓冲液。
3.覆盖玻片:使用另一张玻片将样品与盐水或缓冲液夹在中间,确保玻璃压力适中以保持细胞结构的完整性。
4.倒置显微镜:倒置显微镜将上面的光源放在下方,以便于观察样品。
5.调整显微镜:调整显微镜的对焦和放大倍数,在低倍镜下找到并锁定细胞,然后切换到高倍镜以观察微丝。
6.观察微丝:仔细观察样品中的微丝,并记录下你发现的结构和特征。
可以尝试不同的染色剂和显微镜设置以获得更清晰的图像。
实验结果:学生应该能够观察到样品中微丝的存在,并描述微丝的形状、位置和数量。
他们也可以观察到微丝的动态变化和对细胞形态的影响。
实验讨论:1.微丝的功能:与学生讨论微丝在细胞结构和运动中的重要性。
微丝可以提供细胞的支持,维持细胞的形态,并参与细胞的运动、分裂和代谢过程。
2.微丝的组成:解释微丝是由蛋白质丝素组成的,丝素分为肌动蛋白丝和微管丝。
与学生讨论微丝的组成对于其功能的影响。
3.微丝在不同细胞中的差异:与学生一起讨论微丝在不同细胞类型中的差异,并解释这种差异对细胞的特殊功能和形态具有重要意义。
实验拓展:1.观察微丝的功能:探索微丝在细胞运动、分裂和代谢过程中的具体作用,可以进一步观察和记录微丝在不同条件下的变化和效果。
2.比较不同类型的细胞:观察和比较不同类型的动物细胞中微丝的形态和分布,讨论这种差异对细胞功能的影响。
3.观察微丝的实时动态:使用显微镜和适当的显微镜设置,观察和记录微丝的实时动态。
实验8 微丝染色及形态观察
实验8是关于微丝染色及形态观察的实验。
在该实验中,首先需要准备样本,如细菌或其他微生物。
然后,使用合适的染色方法对样本进行染色,以突显其微丝的形态和分布。
常用的染色方法包括苏木精-亚甲蓝染色、格拉姆染色和荧光
染色等。
不同的染色方法适用于不同类型的微生物。
在染色过程中,需要特别注意操作的细致性和准确性,以避免染色结果的偏差。
完成染色后,可以使用光学显微镜观察染色样本。
可以调节显微镜的放大倍率和焦距,以获得清晰的图像。
观察时,需要注意确定微丝的位置和形态,并记录下来。
同时,还可以使用图像处理软件进行图像分析和测量,从而更详细地了解微丝的特征和分布。
实验的目的是通过染色和形态观察,了解微丝的存在和特征,以进一步研究微生物的生理和功能。
细胞微丝和细胞核染色实验报告【实验目的】1、认识光学显微镜下细胞的形态结构;2、掌握临时制片和显微绘图的方法。
【材料、器材和试剂】材料:人体口腔黏膜上皮细胞、洋葱鳞茎;器材:显微镜、剪刀、镊子、载玻片、盖玻片、牙签、滤纸;试剂:1%碘液。
【方法和步骤】1、口腔黏膜上皮细胞的制片与观察口腔黏膜细胞涂片标本的制备:吸取一滴碘液滴在一张洁净的载玻片中央,用一根事先灭菌的牙签伸入自己的口腔内壁轻轻刮取黏膜上皮细胞,然后,将其放入载玻片上的染液中并来回搅动使细胞散开,染色1 min左右后小心加盖玻片(尽量避免产生气泡),用滤纸吸去盖玻片周围的液体。
观察:将自制的口腔黏膜上皮细胞标本装片置于显微镜下观察,先用低倍镜观察较分散的、轮廓清晰的黏膜上皮细胞。
由于该细胞体积较小、着色较淡,观察时应稍降低视野亮度以便于较快找到目标(在低倍镜下,用碘液染色的细胞呈黄色,成群或分散分布,形态大小多呈扁平椭圆形)。
选择轮廓清晰的细胞移至视野中央,转换至高倍镜下观察。
在高倍镜下,可见口腔黏膜上皮细胞外围有一层薄薄的细胞膜,扁圆形的细胞核呈深黄色,细胞质呈浅黄色或浅蓝色,核中央致密的结构为核仁。
2、洋葱鳞茎内表皮细胞的制片与观察表皮细胞装片标本的制备:取一干净载玻片,在其中央滴一滴碘液,将洋葱鳞茎用小刀分为几块,取一块肉质鳞叶,用剪刀在内表皮划“田”字形小方格,每一小方格边长3-4mm,然后用镊子轻轻撕下一小方格的膜质表皮,置于载玻片的碘液滴中铺平,取一干净的盖玻片,将其一侧先接触标本旁的碘液,再缓缓地盖上盖玻片,尽量避免产生气泡,用滤纸吸去盖玻片周围的液体。
观察:将制备好的装片标本放到显微镜下,先用低倍镜观察,可见许多长柱状、排列整齐、彼此相连的细胞,选择其中一个典型的细胞移至视野中央,再转换至高倍镜下仔细观察细胞壁、细胞核、细胞质和液泡等结构。
【实验结果】绘图并进行适当标注:人口腔黏膜上皮细胞和洋葱鳞茎内表皮细胞。
【讨论】简述观察细胞形态时,制作临时装片和显微镜镜检时的注意事项。
动物细胞微丝观察教学实验的设计与探索引言微丝(microfilament)是细胞骨架的重要组成部分,它由肌动蛋白蛋白丝组成,负责细胞的运动和形态的维持。
为了让学生更加直观地了解微丝的结构和功能,本教学实验设计了一系列的操作,通过显微镜观察动物细胞中的微丝,并进行相关的探索。
实验目的1. 了解微丝的结构和功能。
2. 学习使用显微镜观察细胞中的微丝。
3. 探索微丝在细胞活动中的作用。
实验材料1. 小鼠肝脏组织切片2. PBS缓冲液3. 甲醛4. 细胞骨架染色剂(如荧光染色剂菲卡林-鳞白素)5. 蛋白酶6. 阿利尔独家荧光防护罩7. 显微镜实验步骤1. 取一片小鼠肝脏组织切片,放置在含有PBS缓冲液的离心管中,并加入适量的甲醛进行固定。
2. 在冰箱中放置固定后的离心管,使其在4摄氏度下浸泡过夜。
3. 取出离心管,将组织切片放置在含有蛋白酶的溶液中,用振荡器进行处理,使细胞膜完全破裂释放出微丝。
4. 用PBS缓冲液清洗组织切片,去除蛋白酶和细胞碎片。
5. 将组织切片放置在含有细胞骨架染色剂的溶液中,静置20分钟,进行染色。
6. 用PBS缓冲液清洗组织切片,去除多余的染色剂。
7. 将组织切片平铺在显微镜玻片上,并用封口胶固定。
8. 将显微镜玻片放入显微镜的载玻片夹中,使用显微镜进行观察。
实验结果与分析通过显微镜观察,可以看到组织切片中的细胞出现了明显的荧光信号,这是由于细胞骨架染色剂与微丝结合后发出的荧光。
在观察过程中,可以看到微丝呈现出细长的形状,并且分布在细胞的不同部位。
这表明微丝在细胞中具有广泛的存在和重要的功能。
进一步的分析可以发现,微丝位于细胞的质膜下一侧,形成了一个与细胞边缘平行的网状结构。
微丝的结构稳定,可以支持细胞的形态变化和运动,保证细胞的结构和功能的稳定性。
微丝还参与细胞的细胞分裂、内质网的运输以及细胞骨架的再建等生物学过程。
讨论与展望通过本实验,学生可以直接观察到细胞中微丝的存在与形态,了解微丝的结构和功能。
动物细胞微丝观察教学实验的设计与探索动物细胞微丝是由蛋白质组成的细长的纤维状结构,参与了细胞的运动、形态维持和物质运输等重要生命过程。
为了帮助学生更好地理解和掌握动物细胞微丝的结构和功能,设计了以下的教学实验。
实验设计:实验目的:观察和了解动物细胞微丝的结构和功能,并学习细胞显微镜的使用。
实验器材:1. 动物细胞培养物(如人体组织培养物)2. 细胞显微镜3. 显微镜载物和盖玻片4. 甲醛和PBS缓冲液5. 荧光标记的微丝标记剂(如荧光标记的肌动蛋白)实验步骤:步骤一:制备动物细胞玻璃载物1. 取一片玻璃载物,用甲醛洗涤5分钟,然后用PBS缓冲液冲洗2次。
2. 在载玻片上滴加适量的动物细胞培养物。
步骤二:观察动物细胞微丝的形态结构1. 将载有细胞培养物的载物放置在显微镜载物台上。
2. 调节显微镜的倍数和焦距,观察动物细胞的形态结构。
特别关注细胞边缘和核周围的细胞微丝。
步骤三:荧光标记的微丝观察1. 在步骤一中滴加荧光标记的微丝标记剂,并进行适当的染色时间。
2. 将载物放置在显微镜载物台上,并使用合适的滤光片观察荧光显微镜下的微丝分布。
步骤四:数据记录和分析1. 观察和记录动物细胞微丝的形态结构和荧光分布。
2. 分析和比较不同细胞类型或不同实验条件下动物细胞微丝的差异。
实验探索:1. 不同温度条件下微丝结构的变化:将细胞培养物置于不同温度条件下观察微丝的形态变化,比较不同温度对微丝结构的影响。
2. 细胞运动与微丝相关性的观察:观察在细胞运动过程中微丝的变化,以及微丝在细胞运动中的作用。
3. 不同细胞状态下微丝的分布变化:观察在细胞分裂或凋亡等不同细胞状态下,微丝的分布和形态变化。
实验注意事项:1. 滴加荧光标记的微丝标记剂时,注意荧光标记剂的浓度和染色时间,避免过度染色。
2. 使用显微镜时,注意调节倍数和焦距,保持显微镜的干净和清晰度。
3. 注意细胞培养物的处理和使用,避免细胞污染。
4. 注意实验室安全,遵守实验室操作规范。
实验一: 细胞显微形态的观察生31班卢文2003012377一、目的与要求1.观察各种组织细胞的切片, 熟悉各种细胞的基本形态结构, 并注意联系细胞形态与功能的关系;二、通过观察细胞的显微结构, 提高分析、思考和解决实际问题的基本能力。
三、实验原理细胞是生物体结构和功能的基本单位。
由于其内在的结构、自身的表面张力及外部的机械压力, 所以细胞呈现圆球形、多边形、柱形、纺锤形等多种形态。
而细胞的形态又是和其功能密切相关的, 如血细胞是圆形的, 有利于血管内循环;肌肉细胞按收缩方向呈细长的纤维状结构, 适于细胞的收缩运动;精子较小, 具有能运动的尾部;动物的神经细胞有很多突起以便传导冲动等等。
四、细胞在形态上具有多样性, 它们的基本结构却是一致的, 但是这些基本结构不是模式化的, 只有通过对各种具体的细胞形态的观察, 才能正确认识了解细胞的结构。
五、生活状态下的细胞是无色透明的, 细胞内的不同部位、不同的细胞器中常含有一些有特别染色特性的物质, 因而可通过细胞特异染色, 把各种结构区别开来。
每种细胞器在不同类型的细胞中、同种细胞不同发育时期和不同生理状态下的形态、大小也有所不同, 所以细胞器的观察可用来判断细胞的生理状态和发育情况。
六、实验用品七、显微镜, 动、植物显微标本, 擦镜纸实验步骤:观察各装片并绘图实验观察结果记录:见附图。
1、结果分析与讨论:i.注意事项:ii.观察切片要注意切面与整体的关系, 如观察肌细胞时应同时观察纵横切, 建立三维的立体印象。
iii.应从标本的制作过程来认识和分析观察到的现象。
如脂肪在制片过程中被抽提, 细胞会缩小并且缩小比例不同, 相对大小会发生变化等。
iv.注意形态结构与功能的关系v.装片观察结果分析:假复层扁平上皮(图一):修复层柱状纤毛上皮细胞的特点是其细胞呈柱状, 细胞核亦呈长圆形。
细胞游离面有纤毛。
可是, 这类细胞大小有差异, 形成了核的位置不在一水平线上, 看上去向多层细胞排列。
细胞生物学实验细胞凝集反应:1.实验原理:细胞膜是双层脂嵌蛋白质结构,脂和蛋白质以能与糖分子结合为细胞表面的分支状糖外被。
凝集素是一类含糖的并能与糖专一结合的蛋白质,它具有凝集细胞各刺激细胞分裂的作用。
凝集素可以通过使它与细胞表面的糖分子连接,在细胞间形成“桥”的结果,加入能与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集。
2.为什么在等渗溶液中细胞也会发生破裂和溶血现象?答:细胞膜可以允许一些溶质进入细胞内,水也可以透过膜进入细胞内,从而导致细胞内的渗透压大于细胞外的渗透压,细胞出现破裂。
3.造成溶血时间不同的因素有哪些?答:1.细胞膜对于溶质进入细胞的速率不同导致溶血速度不同。
2.也与分子本身的性质有关,分子越小,进入细胞速率越快,反之则慢,另外非极性分子比极性分子更容易进入细胞。
4.细胞会出现破裂有哪些情况?1.细胞在低渗或高渗溶液中会出现破裂,2.细胞在等渗溶液中,由于细胞外的溶质可以进入细胞内,造成渗透压不平衡,导致细胞破裂。
(可能不考)实验结果:细胞器的活体染色:1名词解释:1.詹纳斯绿B:主要用于生物活体染色的一种碱性染料。
能穿过细胞膜,进入细胞特异地显示线粒体是一种对线粒体专一的活体染料,有染色能力的基团带正电,结合在负电性性的线粒体内膜上,内膜的细胞色素c氧化酶使染料保持氧化状态,呈现蓝绿色,2中性红:细胞活体染色和酸碱性指示剂的一种碱性染料,植物的活细胞能大量吸收中性红并向液泡中排泌,进入液泡的中性红便解离出大量阳离子而呈现樱桃红色,在这种情况下,原生质和细胞壁一般不着色。
3.活体染色:对生活有机体的细胞或组织能着色但又无毒害的一种染色方法。
4.超活染色:即为体外活染,是用燃料溶液从活的动植物中分理处细胞或组织小块染料被选择固定在生活细胞上的某种结构上而显色。
叶绿体的分离和荧光观察:1名词解释1.差速离心:利用不同物质沉降速率的差异,在不同离心速度下分离和收集不同颗粒的离心技术。
常用于分离细胞匀浆中的各种细胞器。
实验一动物细胞的基本形态观察和显微测量【实验目的】制备不同细胞的临时制片,观察、了解细胞的基本形态,学会使用测微尺,通过测量对红细胞的进化进行分析。
【实验用品】一、材料和标本蟾蜍一只,人血液一滴。
二、器材和仪器配有目镜测微尺的显微镜一台、载片十张、盖片三张、吸水纸、手术器材一套、解剖盘一个、镜台测微尺一个、小平皿一个、牙签。
三、试剂 1%甲苯胺兰、1%甲基兰、Ringer氏液(两栖类用)。
【实验内容】一、细胞的基本形态观察(一)原理细胞的形态结构与功能相关是很多细胞的共同特点,在分化程度较高的细胞更为明显,这种合理性是生物漫长进化过程所形成的。
例如:具有收缩机能的肌细胞伸展为细长形;具有感受刺激和传导冲动机能的神经细胞有长短不一的树枝状突起;游离的血细胞为圆形、椭圆形或圆饼形。
不论细胞的形状如何,细胞的结构一般分为三大部分:细胞膜、细胞质和细胞核。
但也有例外。
例如:哺乳类红细胞成熟时细胞核消失。
(二)观察方法与结果1.制备蟾蜍脊髓压片观察脊髓前角运动神经细胞。
取蟾蜍一只,破坏脑和脊髓,在口裂处剪去头部,除去延脑,剪开椎管,可见乳白色脊髓,取下脊髓放在平皿内,用Ringer氏液洗去血液后放在载片上,剪碎。
将另一载片压在脊髓碎块上,用力挤压。
将上面的载片取下即可得到压片。
在压片上滴一滴甲苯胺兰染液,染色10分钟,盖上盖片,吸去多余染液。
在显微镜下观察,染色较深的小细胞是神经胶质细胞。
染成兰紫色的、大的、有多个突起的细胞是脊髓前角运动神经细胞,胞体呈三角形或星形,中央有一个圆形细胞核,内有一个核仁(参照照片)。
2.蟾蜍骨骼肌细胞的剥离与观察剪开蟾蜍腿部皮肤,剪下一小块肌肉,放在载片上,用镊子和解剖针剥离肌肉块成为肌束,继续剥离,可得到很细的肌纤维(肌细胞)。
尽可能拉直肌纤维。
在显微镜下观察,肌细胞为细长形,可见折光不同的横纹,每个肌细胞有多个核,分布于细胞的周边(参照照片)。
3.蟾蜍肝脏压片的制备与观察剪开蟾蜍腹腔,取一小块(约2~3mm 3)肝放在平皿内,用Ringer氏液洗净,用镊子轻压将肝中的血挤出。
实验四细胞中的微丝染色及微丝与细胞形态的实验观察
【实验目的】
掌握微丝的染色方法,了解光学显微镜和电子显微镜下微丝的基本形态结构。
【实验用品】
一、材料和标本盖片培养的成纤维细胞三片。
二、器材和仪器光学显微镜一台、镊子一把、小平皿六个、载片三个、吸水纸、37℃恒温箱。
三、试剂 PBS(pH7.2)、2%Triton X—100液、M—缓冲液、3%戊二醛固定液、0.2%考马斯亮兰染液、100μg/ml的细胞松驰素B、DMEM培养液。
【实验内容】
一、成纤维细胞微丝的染色及其对细胞松驰素B的反应
(一)原理
微丝普遍存在于多种细胞,对细胞的形状和运动有一定作用。
细胞松驰素B 可与微丝的亚单位肌动蛋白结合,从而破坏微丝,改变细胞的形状。
(二)细胞松驰素B处理成纤维细胞与染色观察
1.在平皿中有三张成纤维细胞贴壁生长的盖片,在超净工作台内将一张盖片移入另一皿中继续培养,用作对照。
2.在有两片的平皿内加100μg/ml的细胞松弛素B 4滴继续培养半小时。
3. 将用细胞松弛素B处理过的两张盖片取一张做染色处理,另一张用培养液洗五次(在平皿内换五次培养液,每次都要摇动),继续培养、观察。
两小时后细胞形状恢复,接近正常。
4.对恢复的盖片与第一张没用药的盖片一同做染色处理。
5.染色处理
①将需染色的盖片放入盛有PBS的平皿内用吸管轻轻吹洗盖片,换液三次,每次3分钟,洗去培养液。
②将盖片移入2%Triton X一100液,置37℃恒温箱内处理20~30分钟,以提取骨架以外的蛋白质,使骨架图像清晰。
③立刻将盖片移入M一缓冲液,换洗三次,每次3分钟。
M一缓冲液有稳定细胞骨架的作用。