可溶性转铁蛋白受体(sTfR)测定标准操作程序SOP文件

目次1 范围 (4)2 规范性引用文件 (4)3 术语和定义 (4)4 总则 (6)5 筛查对象 (6)6 筛查时间 (7)7 筛查和诊断指标 (7)8指标判定方法 (8)8.1贫血筛查指标8.2贫血原因诊断指标 (9)8.3筛查诊断指标常用检测方法、参考范围及质量控制要求 (11)附录A（资料性）筛查诊断指标常用检测方法、参考范围及质量控制要求 (12)A.1筛查指标常用检测方法及参考范围 (12)A.2诊断指标常用检测方法及参考范围 (12)运动员贫血筛查与诊断指南1 范围本文件提供了运动员贫血筛查的总则、对象、时间，筛查和诊断指标，指标判定等方面的指导和建议。

本文件适用于运动员贫血的筛查和诊断。

2 规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。

其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

WS/T 225 临床化学检验血液标本的收集与处理WS/T 348 尿液标本的收集及处理指南WS/T 400 血液运输要求WS/T 441 人群贫血筛查方法WS/T 465 人群铁缺乏筛查方法WS/T 804 临床化学检验基本技术标准3 术语和定义WS/T 441界定的以及下列术语和定义适用于本文件。

3.1网织红细胞 reticulocyte；Ret反映骨髓红系造血功能以及判断贫血、未完全成熟的红细胞。

3.2促红细胞生成素erythropoietin；EPO调节红细胞生成的一种人体内源性糖蛋白激素。

3.3铁蛋白 ferritin；Fer一种存在于几乎所有身体组织尤其是肝细胞和网状内皮细胞内储铁蛋白。

3.4可溶性转铁蛋白受体 soluble transferrin receptor；sTfR位于细胞膜表面转铁蛋白受体的水解形式。

注：血清中的可溶性转铁蛋白受体与细胞膜表面的转铁蛋白受体含量成正比。

3.5铁调素 hepcidin；HEPC调节机体铁状态和肠道铁吸收的关键调节因子的抗菌多肽。

可溶性转铁蛋白受体及其在临床诊断中的价值
邓少丽
【期刊名称】《国外医学：临床生物化学与检验学分册》
【年(卷),期】2000(021)001
【摘要】可溶性转铁蛋白受体（ｓＴｆＲ）是血清中转铁蛋白受体的水解片断，其表达是由铁在ｍＲＮＡ水平上来调节，与铁蛋白其同反映红细胞生成速率和铁贮状态。

ｓＴｆＲ可鉴别诊断小细胞性贫血、慢性炎症继发性贫血等疾病，并可监测肾衰性贫血的药物治疗效果。

【总页数】2页(P9-10)
【作者】邓少丽
【作者单位】第三军医大学大坪医院检验科
【正文语种】中文
【中图分类】R556.04
【相关文献】
1.可溶性转铁蛋白受体与血清铁蛋白在慢性炎症性疾病合并缺铁性贫血诊断中的价值比较 [J], 章莉;蔡利
2.可溶性转铁蛋白受体在缺铁性贫血诊断中的临床应用价值 [J], 柏晓松;金立钢;刘云
3.可溶性转铁蛋白受体在糖尿病患者诊断中的价值 [J], 董梅;佟爱华;杨彩娥;孟祥红;李艳艳
4.血清可溶性转铁蛋白受体检测在不同类型地中海贫血儿童中的临床价值 [J], 刘
艳红
5.血清可溶性转铁蛋白受体及转铁蛋白在儿童缺铁性贫血合并感染中的诊断价值[J], 李白恩;陈慧琴;张琦;胡斌飞;郭红苗
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成人轻型β-地中海贫血筛查中可溶性转铁蛋白受体联合红细胞参数检查的灵敏性与特异性温天道【摘要】目的研究探讨可溶性转铁蛋白受体(sTfR)联合红细胞参数检查在成人轻型β-地中海贫血筛查中的应用价值.方法选取我院2017年10月～2018年9月收治的缺铁性贫血患者、成人轻型β-地中海贫血患者、健康体检者各40例,分别为成人缺铁性贫血组、研究组以及对照组,比较这三组患者的红细胞相关参数检查结果以及可溶性转铁蛋白受体结果的灵敏性与特异性. 结果与对照组比较,研究组与成人缺铁性贫血组可溶性转铁蛋白受体较高,Hb、MCV等较低,研究组可溶性转铁蛋白等指标高于成人缺铁性贫血组,而MCH却较低,差异均有统计学意义(P<0.05).用于疾病诊断时,sTfR在ROC曲线下的面积达到97.01％,特异性以及灵敏性均较高.结论可溶性转铁蛋白受体联合红细胞参数检查在成人轻型β-地中海贫血的筛查中具有较高的灵敏性与特异性,对于成人轻型β-地中海贫的筛查有较显著的作用,可积极应用.【期刊名称】《中国医药科学》【年(卷),期】2019(009)013【总页数】4页(P118-120,134)【关键词】β-地中海贫血;可溶性转铁蛋白受体;红细胞参数;缺铁性贫血【作者】温天道【作者单位】广东省普宁华侨医院检验科,广东普宁 515300【正文语种】中文【中图分类】R556珠蛋白生成障碍性贫血原名地中海贫血，是一组遗传性溶血性贫血疾病，是因为遗传基因的缺陷致使一种或一种以上珠蛋白合成障碍导致的贫血或病理障碍，在我国的两广等南方地区多见[1]。

转铁蛋白存在于许多细胞的表面，在血清中和不同的转铁蛋白以复合物的形式存在，可以通过胞饮的形式将铁转运至细胞内，可溶性转铁蛋白受体（sTfR）是转铁蛋白受体循环于血清中的一种形式，目前主要用于缺铁性贫血的诊断[2]。

本研究拟通过对β-地中海贫血、缺铁性贫血以及健康者的可溶性转铁蛋白联合红细胞检查参数进行分析，以探讨其临床检查的价值所在。

医院检验中心铁蛋白、叶酸、VitB12测定标准操作程序（SOP）1.该SOP变动程序
本SOP因试剂说明、仪器操作程序的修改或其他原因所致的改动，可由化学发光免疫测定技术主管修改，并报经科主任批准签字。

2．操作方法
（1）样品收集和处理
样品类型：血清，至少400μl。

严重溶血标本拒收。

保存方法：血清室温下放置不超过8小时，2-8℃冷藏不超过48小时，超过应在-20℃以下冷冻。

样品
只能冷冻1次，且复融后应彻底混匀。

（2）试剂 (试剂、定标液、质控品均由BECKMAN公司提供) 铁蛋白、叶酸、VitB12检测试剂。

（3）定标
当使用新批号的试剂时需先定标，详见附表。

事先将标准曲线条码和定标液浓度条码扫描入仪器。

（4）质控
定标后必须做质控，判断样品测值是否准确也可做质控，事先将质控物浓度输入仪器。

（5）上机检测
参见ACCESS仪器标准操作程序。

3.参考值
铁蛋白男性：22-322μg/L 女性：10-291μg/L
叶酸 2.6-20.0μg/L
VB12 211-911ng/L
4.相关技术指标
项目铁蛋白叶酸VB12
测定范围 0.5-1650 0.25-20 20-2000 灵敏度 0.5 0.25 20
5．本SOP不尽之处请详阅相关项目试剂说明书。

铁蛋白(ferritin)测定标准操作程序SOP文件1 测定方法颗粒增强的免疫比浊法。

2 测定原理标本中的铁蛋白（ferritin）与试剂中包被有抗铁蛋白抗体的胶乳颗粒相遇，发生特异性的抗原-抗体反应，形成抗原-抗体复合物，使溶液的浊度发生改变。

该浊度的高低在一定抗体存在时与抗原的含量成正比，待反应完成后测定其浊度，从而使铁蛋白得以测定。

3 标本血清及肝素、枸橼酸或EDTA抗凝血浆,处理方法见标本处理程序。

稳定性：4 - 8℃ 7天15 - 25℃ 7天-20℃ 1年4 试剂4.1 试剂来源：ROCHE配套试剂（详见试剂说明书）。

贮存条件及稳定性：未打开试剂盒：2－8℃储存至效期末R1：打开后机上稳定90天R2：打开后机上稳定90天准备：R1:直接使用。

R2直接使用，但是上机后每周要混匀一次。

4.2 校准物来源：符合NIBSC的试剂标准（人类脾脏-80/578）S1: 0.9%的NaClS2-6:C.f.a.s将批特异的定标液的靶值乘以下面的系数，用于计算定标曲线：S2:0.0125 S3:0.025 S4:0.050 S5:0.25 S6:1.00贮存条件：校准物在2-8℃保存至效期末。

准备: 直接使用。

定标频率：A 试剂批号更换 B 由质控结果决定4.3 质控物来源：roche 的蛋白质控品其它适合的质控品贮存条件：置2-8℃冰箱至有效期。

准备：直接使用。

质控间隔时间及限制：应视不同地区及各自实验室情况而定。

质控结果应在限定的范围之内，如果超出范围，实验室应根据情况采取措施。

5 仪器ROCHE MODULAR P或日立7060生化分析仪。

6 操作见ROCHE MODULAR P生化分析仪作业指导书。

参数设置见附表。

7 参考范围8本法线性范围为5-400ng/ml，不准确度允许范围X±3SD，不精密度CV=5.6%，灵敏度为15ng/ml。

9 注意事项9.1 血清标本出现溶血、脂血或黄疸的干扰情况参见抗干扰能力。

可溶性转铁蛋白受体（sTfR）测定标准操作程序SOP文件1 测定方法颗粒增强的免疫比浊法。

2 测定原理标本中的可溶性转铁蛋白受体（sTfR）与试剂中包被有抗sTfR抗体的胶乳颗粒相遇，发生特异性的抗原-抗体反应，形成抗原-抗体复合物，使溶液的浊度发生改变。

该浊度的高低在一定抗体存在时与抗原的含量成正比，待反应完成后测定其浊度，从而使sTfR得以测定。

3 标本血清及肝素-Li/Na抗凝血浆,处理方法见标本处理程序。

稳定性：15 - 25℃ 3天2 - 8℃ 7天-20℃ 4周（允许冻融1次）4 试剂4.1 试剂来源：ROCHE配套试剂（详见试剂说明书）。

贮存条件及稳定性：未打开试剂盒：2－8℃储存至效期末R1：打开后机上稳定90天R2：打开后机上稳定90天准备：直接使用。

4.2 校准物来源：S1: 0.9%的NaClS2-6: ROCHE配套sTfR专用校准品贮存条件：校准物在2-8℃保存至效期末。

准备: 直接使用。

定标频率：A 试剂批号更换 B 由质控结果决定4.3 质控物来源：ROCHE sTfR专用质控品其它适合的质控品贮存条件：置2-8℃冰箱至有效期。

准备：直接使用。

质控间隔时间及限制：应视不同地区及各自实验室情况而定。

质控结果应在限定的范围之内，如果超出范围，实验室应根据情况采取措施。

5 仪器ROCHE MODULAR P或日立7060生化分析仪。

6 操作见ROCHE MODULAR P生化分析仪作业指导书。

参数设置见附表。

7 参考范围男性：2.16-4.54mg/l女性：1.79-4.63mg/l8 线性范围本法线性范围为0.5-40mg/l，不准确度允许范围X±3SD，不精密度CV=3.06%，灵敏度为0.068mg/l。

9 注意事项9.1 血清标本出现溶血、脂血或黄疸的干扰情况参见抗干扰能力。

9.2 换算公式：mg/dl × 10=mg/l9.3 仅应用于体外诊断。

可溶性转铁蛋白受体在急性溶血性贫血诊断中的意义刘冯;莫东华;刘智屏;文飞球【摘要】目的探讨血清可溶性转铁蛋白受体(soluable transferritin receptor,sTfR)在急性溶血性贫血诊断中的意义.方法采用ELISA方法检测34例不同类型溶血性贫血患儿和12例非贫血对照儿童的血清sTfR水平并进行对比分析.结果急性溶血性贫血患儿血清sTfR水平为(49.4±19.1) nmol/L,对照组血清sTfR水平为(13.8±3.3) nmol/L,两者比较差异有统计学意义(P<0.01);在不同类型的溶血性贫血患儿中,地中海贫血患儿血清sTfR水平升高最为明显,其中β-地中海贫血患儿最高.血清sTRF水平与网织红细胞绝对值计数呈正相关(r=0.8011,P<0.01).结论血清sTfR变化可作为红细胞生成评价的指标,检测血清sTfR水平有助于急性溶血性贫血的诊断.【期刊名称】《中国全科医学》【年(卷),期】2010(013)014【总页数】3页(P1528-1530)【关键词】急性溶血性贫血;可溶性转铁蛋白受体;诊断【作者】刘冯;莫东华;刘智屏;文飞球【作者单位】541001,广西桂林市,桂林医学院附属医院血液科;541001,广西桂林市,桂林医学院附属医院血液科;暨南大学第二临床医学院深圳市人民医院儿科;暨南大学第二临床医学院深圳市人民医院儿科【正文语种】中文【中图分类】R556.6转铁蛋白受体 (transferring receptor,TfR)是一种跨膜糖蛋白,存在于大多数细胞表面,正常情况下,细胞内铁代谢所需的铁离子需经过 TfR进行转运,可溶性转铁蛋白受体 (soluable transferring receptor,sTfR)是细胞膜 TfR经蛋白水解酶作用生成的片段,在血浆或血清中能进行检测[1],其水平与细胞 TfR呈平行关系,因此检测血清sTfR水平可间接反映总 TfR水平。

妊娠期铁缺乏和缺铁性贫血诊治指南（完整版）妊娠合并贫血对母体、胎儿和新生儿均会造成近期和远期影响，对母体可增加妊娠期高血压疾病、胎膜早破、产褥期感染和产后抑郁的发病风险；对胎儿和新生儿可增加胎儿生长受限、胎儿缺氧、羊水减少、死胎、死产、早产、新生儿窒息、新生儿缺血缺氧性脑病的发病风险。

我国孕妇缺铁性贫血(iron deficiency anemia，IDA) 患病率为19. 1%，妊娠早、中、晚期IDA 患病率分别为9.6%、19.8% 和33.8%。

当母体铁储存耗尽时，胎儿铁储存也随之减少。

补铁可增加母体铁储存。

本指南用于指导妊娠期铁缺乏(iron deficiency，ID) 和IDA 的诊治。

本指南的循证证据等级评价及推荐建议说明：(1) 证据等级Ⅰ：证据来白至少1 个高质量的随机对照试验；Ⅱ-1：证据来自设计良好的非随机对照试验；Ⅱ-2：证据来自设计良好的队列（前瞻性或回顾性）研究或者病例对照研究；Ⅱ-3：证据来自比较不同时间或地点干预措施效果的差异；Ⅲ：基于临床经验、描述性研究或者专家委员会报告等的专家意见。

(2) 推荐建议A：证据适合推荐应用于临床预防；B：证据较适合推荐应用于临床预防；C：现有的证据间不一致；D：有一定证据不推荐用于临床预防；E：有相当证据建议不推荐用于临床预防；F：没有足够的证据。

一、妊娠期铁缺乏和IDA 的定义世界卫生组织推荐，妊娠期血红蛋白(hemoglobin，Hb) 浓度<110g/L 时，可诊断为妊娠合并贫血。

根据Hb水平分为轻度贫血(100-109 g/L)、中度贫血(70-99g/L)、重度贫血(40-69 g/L) 和极重度贫血(<40g/L)。

目前，铁缺乏尚无统一的诊断标准。

本指南建议，血清铁蛋白浓度<20 μg/L 诊断铁缺乏。

IDA 根据储存铁的水平分为3期：(1) 铁减少期：体内储存铁下降，血清铁蛋白<20μg/L，转铁蛋白饱和度及Hb正常。

SOP标准操作程序类风湿因子(RF)测定试剂盒1 实验原理：病人样品，标准液或质控中的类风湿因子(RF)与包被有人γ-球蛋白的胶乳颗粒发生免疫反应，形成免疫复合物产生混浊。

病人样品产生的浊度与标准液中类风湿因子(RF)标准产生的浊度来比较，进行计算。

2 标本的收集与处理：2.1 病人准备：无特殊要求。

最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰。

2.2. 抗凝剂：血清、肝素或EGTA血浆，标本最好不要溶血。

留取标本后请尽快分离血球血浆。

2.3 标本的稳定性：在室温条件下（15～25℃）可以稳定一周。

3 材料:3.1 材料：无需配制，开瓶即用，540nm试剂的空白吸光度超过1.5ABS试剂失效。

工作液：R1与R2按9：1混合,2-8℃可稳定20天。

标准品用1ml蒸馏水复溶，2-8℃稳定一个月。

3.2 试剂的贮存：3.2.1.当保存于2～8℃，不开盖情况下至标签的失效期。

3.2.2. 开盖后放于仪器中可以稳定30天。

3.2.3 开盖后避免污染。

3.3 变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染，不能继续使用。

4 类风湿因子(RF)测定试剂盒（日立7600生化分析仪）册或《7600A使用说明书》中查到。

5 计算：采用多点定标法，用RF标准液的吸光度值与相应的RF浓度作图，绘制标准曲线，从标准曲线上查得血清样品的RF浓度。

RF标准液浓度(IU/ml)见标签。

6 试剂性能概要采用科美公司规定的参数进行测定，线性范围（或可报告范围）0-160U/L。

7 超出线性范围（或可报告范围）的处理如样本中（RF）的浓度大于160U/L 时，需对样本进行稀释后再测定，结果乘以稀释倍数。

8 方法的局限性抗干扰能力：胆红素≤20mg/dl,血红蛋白≤10g/L,甘油三酯≤1000mg/dl对测定无干扰。

一些药物等可能会产生干扰。

9 其他必须说明的内容9.1 标准度稀释时，应严格按照说明书浓度进行。

9.2 胶乳试剂在使用前应轻轻摇匀。

9.3 所有的试剂已进行乙肝表面抗原，丙肝抗体和抗艾滋病毒抗体检测（FDA方法），结果阴性。

可溶性转铁蛋白受体测定可溶性转铁蛋白受体测定介绍：可溶性转铁蛋白受体测定是对人体内的可溶性转铁蛋白经常受体检查，可溶性转铁蛋白受体(sTfR)是通过细胞表面受体的蛋白水解作用衍生过来的。

在血清中sT fR和不同的转铁蛋白以复合物的形式存在，血清中的sTfR大约80%来源于早期的红细胞，当红细胞生成活性增加特别是铁缺乏时会引起sTfR合成的增加,从而使血清中sTfR浓度的升高。

可溶性转铁蛋白受体测定正常值：0.9-2.3 mg/L可溶性转铁蛋白受体测定临床意义：异常结果：增高者见于溶血性贫血和缺铁性贫血。

再生障碍性贫血。

减低，纯红细胞再生障碍最低，重型再生障碍性贫血显著低于慢性再生障碍性贫血。

慢性肝炎、肝硬化、肝癌及银屑病等的TfR表达也减低。

在铁缺乏早期就已观察到sTfR浓度的升高。

sTfR是功能性铁状态的一项特异性检测指标，不受各种干扰因素的影响,例如急性或慢性炎症反应、怀孕等。

需要检查的人群：有软弱无力疲乏、困倦，皮肤、黏膜苍白，心悸，头晕、头痛、耳鸣、眼花、注意力不集中、嗜睡症状的人群。

可溶性转铁蛋白受体测定注意事项：不合宜人群：有明显出血倾向的人群。

检查前禁忌：检查前一天不吃过于油腻、高蛋白食物，避免大量饮酒。

血液中的酒精成分会直接影响检验结果。

体检前一天的晚八时以后，应禁食。

检查时要求：抽血时应放松心情，避免因恐惧造成血管的收缩、增加采血的困难。

可溶性转铁蛋白受体测定检查过程：用末梢血主要有耳垂取血和指尖取血两个部位，婴儿可在脚后跟取血。

耳垂取血痛感较轻，但取血量较少，特别是耳垂较小的人比较难于取血。

指尖取血痛感较明显，但采血量较多，特别是对于血常规化验，可得到较为稳定的测定结果。

采血前应将皮肤清洗干净。

在冬季寒冷的室外进到室内后不要立即取血，应使身体暖和以后，特别是应使采血的耳垂和手暖和起来。

在采指血前不要用热水烫手，保持手指干燥，如指尖有伤口、甲沟炎、红肿或皮肤病应避开使用此手指。

可溶性转铁蛋白受体评价骨髓造血的研究进展
杨文睿
【期刊名称】《国际输血及血液学杂志》
【年(卷),期】2012(035)004
【摘要】转铁蛋白受体(TfR)在调节细胞铁摄取和维持机体铁稳态过程中发挥重要作用,主要表达于各阶段骨髓幼红细胞膜表面.可溶性转铁蛋白受体(sTfR)是膜表面受体的酶切形式,其血清水平除受机体铁贮存影响外,还与骨髓红系造血旺盛程度明显相关.现就sTfR作为反映骨髓红系细胞造血旺盛程度参数研究综述如下.
【总页数】4页(P366-369)
【作者】杨文睿
【作者单位】300020 天津,中国医学科学院血液病医院贫血诊疗中心
【正文语种】中文
【相关文献】
1.骨髓造血微环境对造血干细胞的影响及中医药对造血调控的认识
2.骨髓造血微环境对造血干细胞的影响及中医药对造血调控的认识
3.间充质干细胞在骨髓造血微环境对造血的调控作用及其研究进展
4.基于造血干细胞衰老及造血微环境损伤探讨骨髓抑制机制的研究进展
5.骨髓造血干细胞移植后肾损伤研究进展
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妊娠期铁缺乏和缺铁性贫血诊治指南(完整版)妊娠期铁缺乏和缺铁性贫血对母体、胎儿和新生儿都会造成负面影响，包括增加妊娠期高血压疾病、胎膜早破、产褥期感染和产后抑郁的发病风险，以及增加胎儿生长受限、胎儿缺氧、羊水减少、死胎、死产、早产、新生儿窒息、新生儿缺血缺氧性脑病的发病风险。

据调查，我国孕妇缺铁性贫血的患病率为19.1%，其中妊娠早、中、晚期缺铁性贫血的患病率分别为9.6%、19.8%和33.8%。

因此，本指南旨在指导妊娠期铁缺乏和缺铁性贫血的诊治。

本指南的循证证据等级评价及推荐建议说明如下：证据等级Ⅰ指证据来自至少1个高质量的随机对照试验；Ⅱ-1指证据来自设计良好的非随机对照试验；Ⅱ-2指证据来自设计良好的队列（前瞻性或回顾性）研究或者病例对照研究；Ⅱ-3指证据来自比较不同时间或地点干预措施效果的差异；Ⅲ指基于临床经验、描述性研究或者专家委员会报告等的专家意见。

推荐建议A指证据适合推荐应用于临床预防；B指证据较适合推荐应用于临床预防；C指现有的证据间不一致；D指有一定证据不推荐用于临床预防；E指有相当证据建议不推荐用于临床预防；F指没有足够的证据。

妊娠期铁缺乏和缺铁性贫血的定义如下：世界卫生组织推荐，妊娠期血红蛋白浓度低于110g/L时，可诊断为妊娠合并贫血。

根据Hb水平分为轻度贫血(100-109 g/L)、中度贫血(70-99g/L)、重度贫血(40-69 g/L)和极重度贫血(<40g/L)。

目前，铁缺乏尚无统一的诊断标准。

本指南建议，血清铁蛋白浓度低于20μg/L时，可以诊断为铁缺乏。

缺铁性贫血根据储存铁的水平分为三期：(1)铁减少期，体内储存铁下降，血清铁蛋白低于20μg/L，转铁蛋白饱和度及Hb正常；(2)缺铁性红细胞生成期，红细胞摄入铁降低，血清铁蛋白低于20μg/L，转铁蛋白饱和度低于15%，Hb水平正常；(3)缺铁性贫血期，红细胞内Hb明显减少，血清铁蛋白低于20μg/L，转铁蛋白饱和度低于15%，Hb低于110g/L。

人可溶性转铁蛋白受体(sTfR)酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中人可溶性转铁蛋白受体(sTfR)含量。

实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人可溶性转铁蛋白受体(sTfR)水平。

用纯化的人可溶性转铁蛋白受体(sTfR)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入可溶性转铁蛋白受体(sTfR)，再与HRP 标记的可溶性转铁蛋白受体(sTfR)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。

TMB 在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的可溶性转铁蛋白受体(sTfR)呈正相关。

用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中人可溶性转铁蛋白受体(sTfR)浓度。

样本处理及要求：1.血清：室温血液自然凝固10-20 分钟，离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。

2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA、者柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20 分钟后，离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。

3.尿液：用无菌管收集，离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

胸腹水、脑脊液参照实行。

4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。

离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。

仔细收集上清。

检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100 万/ml 左右。

通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。

离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。

仔细收集上清。

保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

5.组织标本：切割标本后，称取重量。

铁代谢和可溶性转铁蛋白受体（sTfR）⎯⎯功能性缺铁的最灵敏的标志物铁以三种不同的方式分布于人体：大多数的铁（～80％）参与转运氧的血红蛋白和储存氧的肌红蛋白，还有几种存在于细胞氧化和呼吸链的酶中。

过剩的铁与铁蛋白和含铁血黄素结合以备使用，因为游离的铁对细胞是有毒性的。

只有相当少的铁（～0.1%）在血液循环中被运输，它们与转铁蛋白结合，从“产地”⎯⎯与具有生理功能的铁结合的蛋白（例如：在骨髓中合成的血红蛋白）被运往“储存地”（例如：肝中的铁蛋白）。

在健康的人体中，每天从食物中摄取大约1mg的铁，并且有等量的铁丢失。

红细胞含有大多数的铁（～2500mg），另外有少部分但是必不可少的（～500mg）铁提供给肌肉和酶，使它们进行正常活动。

过剩的铁与铁蛋白结合，储存在不同的细胞中。

体内铁的平衡可被一些情况破坏，例如，铁需求量的增多（生长发育、怀孕）；铁供应的不足（营养不良/素食、吸收功能紊乱）或是体内铁过度丢失（急慢性出血，如月经过多、胃溃疡出血）：大多数（70％或更多）的缺铁都是由贫血造成的，这种贫血的特征是红细胞变小和血红蛋白的量过少。

缺铁会影响几项生理功能：肌肉功能减退、对于神经系统来说就是注意力不集中和学习能力下降、温度调节功能受影响、细胞介导的免疫反应缺陷以及对孕妇来说缺铁会引起早产。

然而，由不同原因造成的贫血应采用不同的治疗方法。

血红蛋白或红细胞生）、慢性炎症或原发性骨髓病成的不足可由营养缺陷（缺铁、叶酸盐或维生素B12造成。

另外，还有一些原因，如溶血、脾机能亢进、血丢失增加和血浆扩容剂的增容作用。

另一方面，铁不能过量补充，过量补充铁也会造成损害。

铁过多负荷的最常见的病有：血色素沉着症，它是常染色体隐性遗传病。

这种病的患者，由于肠对铁的过量吸收并以与铁蛋白结合的形式储存在肝、心脏和胰中，损害该脏器的功能。

治疗方法包括周期性静脉放血，以增加铁丢失，直到储存铁（铁蛋白的量）以及补充到组织的铁量（转铁蛋白饱和度或可溶性转铁蛋白受体）都达到正常。