发育毒性及致畸作用机制和实验
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大鼠致畸试验实验报告一、实验目的本实验旨在研究某种受试物质对大鼠胚胎发育的致畸作用,评估其潜在的生殖毒性风险,为相关产品的安全性评价提供科学依据。
二、实验材料1、实验动物选用健康的 Wistar 大鼠,雌性体重约 200 220g,雄性体重约 250 280g。
动物饲养于温度(22 ± 2)℃、相对湿度(55 ± 5)%、12 小时光照/12 小时黑暗的环境中,自由饮食和饮水。
2、受试物质_____(受试物质名称),纯度为_____%。
3、仪器设备电子天平、灌胃针、手术器械、显微镜等。
三、实验方法1、动物分组与交配将雌性大鼠和雄性大鼠按 1:1 的比例于傍晚合笼交配,次日清晨检查阴栓,以发现阴栓的当天确定为妊娠第 0 天。
将受孕大鼠随机分为 4 组,分别为对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组,每组15 20 只。
2、受试物质给予对照组给予等体积的生理盐水,各剂量组分别给予不同剂量的受试物质,于妊娠第 6 15 天经口灌胃给予。
3、标本采集在妊娠第20 天,对大鼠实施安乐死,剖腹取出子宫,检查黄体数、着床数、活胎数、死胎数和吸收胎数。
4、胎仔检查对每只活胎仔进行外观检查,包括有无畸形、腭裂、短肢等;然后将胎仔放入 Bouin 氏液中固定,进行骨骼检查,观察有无骨骼畸形,如肋骨缺失、胸骨畸形等。
四、实验结果1、孕鼠体重及增重在妊娠期间,各剂量组孕鼠的体重增长趋势与对照组相比,无明显差异。
2、妊娠结局对照组的着床数、活胎数、死胎数和吸收胎数均在正常范围内。
低剂量组的妊娠结局与对照组相似。
中剂量组出现了少量的死胎和吸收胎。
高剂量组的死胎和吸收胎数量显著增加,活胎率明显降低。
3、胎仔外观畸形对照组胎仔外观未见明显畸形。
低剂量组胎仔偶见轻微的外观畸形,如短尾。
中剂量组胎仔的外观畸形发生率有所增加,出现了腭裂、腹裂等畸形。
高剂量组胎仔的外观畸形严重,如无脑畸形、脊柱裂等。
4、胎仔骨骼畸形对照组胎仔骨骼发育正常。