下载文档原格式
麻黄的化学成分与药理活性的研究进展摘要】麻黄作为一种著名的中药药材，其化学成分主要有生物碱类、黄酮类、挥发油、有机酚酸类以及多糖类物质，具有活血降压、利尿消肿、发汗平喘、促进血液循环、抗氧化、抗病毒的作用。
本文将对麻黄的化学成分及其药理活性的研究进展做详细的分析。
【关键词】麻黄；化学成分；药理活性【中图分类号】Q949.67+2【文献标识码】A【文章编号】2096-0867（2015）-10-258-010引言麻黄是一种麻黄属曹本植物，高20~40cm，常年生长于山坡、河床、草原等处，采摘方便。
麻黄类药物有草麻黄、木贼麻黄以及中麻黄三种，麻黄的草质茎部位是入药部位，植物根茎内蕴含丰富的生物碱、黄铜、挥发油、多糖、酚酸等物质，具有活血降压、宣肺平喘、利尿消肿等功效，同时对人体的心脑血管、中枢神经等具有优质的药理作用［1］。
本文将对麻黄的化学成分及其药理活性的研究进展做详细的分析。
1 麻黄的化学成分1.1 麻黄碱类麻黄中后蕴含丰富的麻黄碱，目前在麻黄中提取十多种麻黄碱的，而含量最高的就是左旋麻黄碱、右旋伪麻黄碱以及左旋去甲麻黄碱等。
麻黄碱在麻黄的根和茎中含量丰富，陶华明等［2］对麻黄中麻黄碱的含量进行了测定，发现不同种类的麻黄中生物碱的含量从1%~3%不等。
麻黄碱是一种结晶状的白色粉末，无味，遇光变质，溶于水，采用化学分离法从草麻黄、木贼麻黄以及中麻黄中提取到具有维生素P 的活性的白麻黄碱（ leucoephedine ）以及具有抗消炎作用的麻黄碱（ephedroxane）。
而采用红外光谱以及HPLC 技术能够鉴定麻黄智中蕴含4-羟基-7 甲氧基-喹啉羟酸、1-麻黄碱、d-伪麻黄碱、d-N-甲基伪麻黄碱、麻黄次碱等物质。
有学者从8 个麻黄生物碱中提取到2，3，4，6-四甲吡嗪、O-苯甲酰-右旋伪麻黄碱以及2，3，4-三甲基苯唑烷。
而在麻黄种子以及果实中提取生物碱则并没有研究报道。
1.2 黄酮类国内对麻黄黄铜的研究偏少，初步对斑子麻黄中的黄铜的含量有所研究。
我国药典2020版麻黄质量标准1. 简介我国药典是我国药品标准的权威性文件，对于药品的质量、安全、有效性等方面提供了具体的要求。
其中，对于中药材的质量标准是非常重要的，而麻黄作为一种常用的中药材，其质量标准对于保障药品的质量和临床疗效具有重要意义。
2. 麻黄的来源和性味麻黄是一种常见的中药材，来源于麻黄科植物——麻黄。
该药材在我国分布广泛，以北方地区较为常见。
麻黄性味辛温，归肺、膀胱经。
3. 我国药典2020版麻黄质量标准的内容我国药典2020版对于麻黄的质量标准进行了详细的规定，主要包括以下内容：3.1 外观特征：要求麻黄呈现出纤细、灰黄色、有光泽、易折断的特征。
3.2 性状鉴别：要求麻黄应具有清新的气味，苦涩的味道，具有辛温的性味特征。
3.3 含量测定：规定了麻黄中麻黄碱的含量不得低于标准规定的最低含量。
3.4 不合格项：包括霉菌和微生物限度、重金属含量、杂质等项的限定。
3.5 其他：还规定了麻黄的贮存要求、包装要求等。
4. 对质量标准的意义我国药典2020版麻黄质量标准的制定，对保障麻黄的质量和安全具有重要意义。
质量标准可以起到规范生产的作用，使得麻黄的生产过程更加规范化，避免了药材在生产过程中受到污染或混入杂质。
对麻黄中麻黄碱的含量进行规定，可以保证药材的药效质量符合标准，保证了其临床疗效。
5. 麻黄的合理使用在使用麻黄时，应当根据医师的指导进行合理使用。
由于麻黄具有辛温的性味，可发散风寒、解表散寒、宣肺开音、平喘止咳的功效，但同时也应当注意避免超量使用，以免对人体造成不良反应。
6. 结语我国药典2020版麻黄质量标准的制定，对于规范麻黄的质量、保障患者用药安全、提高药品质量具有重要意义。
在使用麻黄药材时，应当遵循质量标准和医嘱，以确保药材的安全有效使用。
7. 麻黄的药用价值除了在传统中医中广泛使用外，现代药理研究也证实了麻黄的药用价值。
麻黄中的主要有效成分是麻黄碱，它具有抑制组织胺释放、扩张支气管、收缩血管等作用，可用于治疗感冒、哮喘、支气管炎等疾病。
麻黄及含麻黄碱制剂的定量分析及临床使用的注意事项探析目的探究并分析麻黄及含麻黄碱制剂的定量分析方法及使用的注意事项。
方法通过中国知网、万方远程等知识平台检索2010年以来的相关资料，对麻黄及含麻黄碱制剂的定量分析方法及使用的注意事项进行总结分析。
结果麻黄及含麻黄碱制剂的定量分析方法主要包括中和滴定测定法、分光光度法等5种；如果不注意使用的方法和剂量，患者出现高压危象、心率失常及严重性失眠等不良反应，其中头晕头痛、严重失眠的发生率显著高于其他不良反应，差异具统计学意义（P＜0.05）。
结论5种麻黄及含麻黄碱制剂的定量分析方法中高效液相色谱法测定的操作简单便捷、不易受到药剂中其他组分的干扰，安全性、准确性均较高。
标签：麻黄；麻黄碱制剂；定量分析麻黄是一种应用十分广泛的中药，具有发汗平喘、抗菌消炎、收缩血管等疗效，属于剧药类范畴[1]。
麻黄碱是麻黄的一种提取物，是一种广泛使用的生物碱也是麻黄的主要有效成分[2]。
目前，麻黄及含麻黄碱制剂的定量分析方法主要有电位滴定、分光光度法、气象色谱法等[3]。
本次为了探究麻黄及含麻黄碱制剂的定量分析方法，并讨论麻黄及含麻黄碱制剂使用的注意事项，我院特作此统计调查，现将结果汇报如下：1资料与方法1.1一般资料调查资料主要来源于中国知网、万方远程等知识平台检索的2010年以来的相关资料文献，包括关于麻黄及含麻黄碱制剂的定量分析方法的分析类文献，及85例麻黄及含麻黄碱制剂的使用患者的临床病例。
1.2 方法仔细阅读上述所得资料，总结归纳麻黄及含麻黄碱制剂的定量分析方法及特点，并详尽记录85例麻黄及含麻黄碱制剂的使用患者出现的不良反应情况，进而总结分析使用麻黄及含麻黄碱制剂的注意事项。
1.3统计指标统计分析麻黄及含麻黄碱制剂的定量分析方法的种类及特点、85例麻黄及含麻黄碱制剂的使用患者出现失眠、头晕头痛、心率失常等不良反应情况的发生率。
1.4统计学处理统计分析时采用spss17.0软件分析，用x±s表示计量资料，用t检验比较计量数据组间，用x2检验计数资料，以P＜0.05为有统计学意义。
HPLC法测定麻黄中盐酸麻黄碱的含量
刘永;秦剑
【期刊名称】《现代医药卫生》
【年(卷),期】2004(020)004
【摘要】目的:建立麻黄中盐酸麻黄碱的含量测定方法.方法:采用高效液相色谱法,以 C18为固定相,流动相为乙腈-含 0.1%三乙胺、 0.1%磷酸的水溶液( 4: 100),检测波长为 210 nm.结果:盐酸麻黄碱进样量在 0.4224～4.224 μ g范围内与峰面积有良好的线性关系, r=0.9999,平均回收率为 97.1%( RSD=2.3% ,n=6).结论:本法专属性强、重现性好.
【总页数】2页(P238-239)
【作者】刘永;秦剑
【作者单位】重庆市潼南县人民医院,重庆,402660;重庆市中药研究院,重
庆,400060
【正文语种】中文
【中图分类】R28
【相关文献】
1.RP -HPLC 法测定麻黄及其炮制品中盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱含量 [J], 祝婧;钟凌云;龚千锋;刘礼平;曾文雪
2.HPLC法测定1%盐酸麻黄碱滴鼻剂中盐酸麻黄碱的含量 [J], 卞兰芳;袁恒杰;任耘
3.HPLC法测定盐酸麻黄碱滴鼻液中盐酸麻黄碱的含量 [J], 黄艳霞
4.HPLC法测定盐酸麻黄碱滴鼻剂中盐酸麻黄碱的含量 [J], 甄华; 李振莲; 张润祥
5.HPLC法测定藏麻黄中盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱的含量 [J], 张勇仓;张成栋;刘兰;贡桥次仁;卢玉滨;王振发;张亚琴;秦欢
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
㊀基金项目:深圳市科技计划项目基础研究面上项目(Ｎｏ.ＪＣＹＪ２０２１０３２４１４０２０４０１１)ꎻ深圳市医疗卫生三名工程项目(Ｎｏ.ＳＺＺＹＳＭ２０２１１１００２)ꎻ深圳市坪山区卫生系统科研项目资助(Ｎｏ.２０１９６５)作者简介:卫平ꎬ女ꎬ博士研究生ꎬ副主任中药师ꎬ研究方向:药物分析及中药药代动力学研究ꎬＥ－ｍａｉｌ:ｗｅｉｐｉｎｇ１２３８＠１２６.ｃｏｍ通信作者:李一圣ꎬ男ꎬ副主任中药师ꎬ研究方向:中药新药研究ꎬＴｅｌ:０７５５－２８９８９９９９ꎬＥ－ｍａｉｌ:ｌｙｓ６０７＠ｓｏｈｕ.ｃｏｍＬＣ－ＭＳ/ＭＳ法测定麻黄－桂枝药对中１１个成分及其溶出影响的探讨卫平１ꎬ邓小玉１ꎬ黄蓓１ꎬ陈剑平２ꎬ李一圣３(１.深圳市坪山区妇幼保健院<南方医科大学坪山总医院>ꎬ广东深圳５１８１１８ꎻ２.深圳市中医院ꎬ深圳市医院中药制剂研究重点实验室ꎬ广州中医药大学第四临床医学院ꎬ广东深圳５１８０３３ꎻ３.深圳市龙岗区耳鼻咽喉医院<深圳市耳鼻咽喉研究所>ꎬ广东深圳５１８１７２)摘要:目的㊀建立麻黄－桂枝药对中原儿茶酸㊁儿茶素㊁表儿茶素㊁丁香醛㊁香豆素㊁肉桂醇㊁肉桂酸㊁桂皮醛㊁麻黄碱㊁伪麻黄碱和甲基麻黄碱１１个成分的液相色谱－串联质谱(ＬＣ－ＭＳ/ＭＳ)含量测定方法ꎬ并探讨单煎共煎对１１个成分溶出的影响ꎮ方法㊀分别以麻黄桂枝共煎液㊁单煎液㊁单煎合并液为样品ꎬ采用液相色谱－串联质谱法测定８个苯丙素类成分和３个麻黄类生物碱的含量ꎮ结果㊀１１个成分在各自范围内均呈良好的线性关系(ｒȡ０.９９４８)ꎻ平均加样回收率为９８.３０％~１００.９２％ꎬＲＳＤɤ５.８５％(ｎ＝９)ꎻ精密度㊁重复性和稳定性均良好ꎬ符合方法学考察要求ꎮ麻黄与桂枝共煎时ꎬ８个苯丙素类成分煎出量均有不同程度的降低ꎬ而３个麻黄类生物碱均有不同程度升高ꎮ结论㊀该方法简便快速㊁准确可靠ꎬ可用于１１个成分的含量测定ꎬ共煎对麻黄桂枝各自成分的溶出均具有一定的影响ꎮ关键词:麻黄－桂枝药对ꎻ苯丙素类成分ꎻ麻黄类生物碱ꎻ液相色谱－串联质谱ꎻ共煎ꎻ单煎中图分类号:Ｒ９２７.２㊀文献标识码:Ａ㊀文章编号:２０９５－５３７５(２０２２)１２－０７９１－００５ｄｏｉ:１０.１３５０６/ｊ.ｃｎｋｉ.ｊｐｒ.２０２２.１２.００５ＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｅｌｅｖｅｎａｎａｌｙｔｅｓａｎｄｉｔｓｄｉｓｓｏｌｕｔｉｏｎｅｆｆｅｃｔｓｉｎｄｒｕｇｐａｉｒｏｆＥｐｈｅｄｒａｅＨｅｒｂａａｎｄＣｉｎｎａｍｏｍｉＲａｍｕｌｕｓｂｙＬＣ－ＭＳ/ＭＳＷＥＩＰｉｎｇ１ꎬＤＥＮＧＸｉａｏｙｕ１ꎬＨＵＡＮＧＢｅｉ１ꎬＣＨＥＮＪｉａｎｐｉｎｇ２ꎬＬＩＹｉｓｈｅｎｇ３(１.ＰｉｎｇｓｈａｎＤｉｓｔｒｉｃｔＭａｔｅｒｎａｌ＆ＣｈｉｌｄＨｅａｌｔｈｃａｒｅＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＳｈｅｎｚｈｅｎꎬＰｉｎｇｓｈａｎＧｅｎｅｒａｌＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＳｏｕｔｈｅｒｎＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬＳｈｅｎｚｈｅｎ５１８１１８ꎬＣｈｉｎａꎻ２.ＳｈｅｎｚｈｅｎＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＨｏｓｐｉｔａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅＰｒｅｐａｒａｔｉｏｎꎬＴｈｅＦｏｕｒｔｈＣｌｉｎｉｃａｌＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅｏｆＧｕａｎｇｚｈｏｕＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅꎬＳｈｅｎｚｈｅｎＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅＨｏｓｐｉｔａｌꎬＳｈｅｎｚｈｅｎ５１８０３３ꎬＣｈｉｎａꎻ３.ＬｏｎｇｇａｎｇＥ.Ｎ.ＴＨｏｓｐｉｔａｌ＆ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＥ.Ｎ.ＴＳｈｅｎｚｈｅｎꎬＳｈｅｎｚｈｅｎ５１８１７２ꎬＣｈｉｎａ)Ａｂｓｔｒａｃｔ:Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ㊀ＴｏｅｓｔａｂｌｉｓｈａＬＣ－ＭＳ/ＭＳｍｅｔｈｏｄｏｆｔｈｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｐｒｏｔｏｃａｔｅｃｈｕｉｃａｃｉｄꎬｃａｔｅｃｈｉｎꎬｅｐｉｃａｔｅ￣ｃｈｉｎꎬｅｕｇｅｎｏｌꎬｃｏｕｍａｒｉｎꎬｃｉｎｎａｍｙｌａｌｃｏｈｏｌꎬｃｉｎｎａｍｉｃａｃｉｄꎬｃｉｎｎａｍａｌｄｅｈｙｄｅꎬｅｐｈｅｄｒｉｎｅꎬｐｓｅｕｄｏｅｐｈｅｄｒｉｎｅａｎｄｍｅｔｈｙｌｅｐｈｅｄｒｉｎｅｉｎＥｐｈｅｄｒａｅ－Ｃｉｎｎａｍｏｍｉｈｅｒｂｐａｉｒꎬａｎｄｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｓｉｎｇｌｅ－ｄｅｃｏｃｔｉｏｎａｎｄｃｏｍｂｉｎｅｄ－ｄｅｃｏｃｔｉｏｎｏｎｄｉｓｓｏｌｕｔｉｏｎｏｆｅ￣ｌｅｖｅｎｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ.Ｍｅｔｈｏｄｓ㊀Ｕｓｉｎｇｔｈｅｅｐｈｅｄｒａｅ－ｃｉｎｎａｍｏｍｉｄｅｃｏｃｔｉｏｎꎬｃｉｎｎａｍｏｍｉｄｅｃｏｃｔｉｏｎꎬｅｐｈｅｄｒａｅｄｅｃｏｃｔｉｏｎꎬｅｐｈｅｄｒａｅａｎｄｃｉｎｎａｍｏｍｉｃｏｍｂｉｎｅｄｄｅｃｏｃｔｉｏｎａｓｔｈｅｔｅｓｔｓａｍｐｌｅｓꎬｔｈｅｅｉｇｈｔｐｈｅｎｙｌｐｒｏｐａｎｏｉｄｃｏｍｐｏｕｎｄｓａｎｄｔｈｒｅｅｅｐｈｅｄｒａａｌｋａｌｏｉｄｓｗｅｒｅｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙＬＣ－ＭＳ/ＭＳ.Ｒｅｓｕｌｔｓ㊀Ｔｈｅ１１ｉｎｄｉｃａｔｉｖｅｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｈａｄｇｏｏｄｌｉｎｅａｒｉｔｙ(ｒȡ０.９９４８).Ｔｈｅａｖｅｒａｇｅｒｅｃｏｖ￣ｅｒｉｅｓｗｅｒｅ９８.３０％~１００.９２％ꎬＲＳＤɤ５.８５％(ｎ＝９).Ｔｈｅｐｒｅｃｉｓｉｏｎꎬｒｅｐｅａｔａｂｉｌｉｔｙａｎｄｓｔａｂｉｌｉｔｙａｒｅａｌｌｇｏｏｄꎬｍｅｅｔｉｎｇｔｈｅｍｅｔｈｏｄ￣ｏｌｏｇｉｃａｌｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔｓ.ＷｈｅｎＥｐｈｅｄｒａａｎｄＣｉｎｎａｍｏｍｉｗｅｒｅｄｅｃｏｃｔｅｄｔｏｇｅｔｈｅｒꎬｔｈｅａｍｏｕｎｔｏｆｅｉｇｈｔｋｉｎｄｓｏｆｐｈｅｎｙｌｐｒｏｐａｎｏｉｄｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｄｅｃｒｅａｓｅｄｉｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔｄｅｇｒｅｅｓꎬｗｈｉｌｅｔｈｅａｌｋａｌｏｉｄｓｏｆｔｈｒｅｅｋｉｎｄｓｏｆｅｐｈｅｄｒａｉｎｃｒｅａｓｅｄｉｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔｄｅｇｒｅｅｓ.Ｃｏｎｃｌｕ￣ｓｉｏｎ㊀Ｔｈｉｓｍｅｔｈｏｄｗａｓｓｉｍｐｌｅꎬｒａｐｉｄꎬａｃｃｕｒａｔｅａｎｄｒｅｌｉａｂｌｅꎬｃａｎｂｅｕｓｅｄｆｏｒｔｈｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｅｌｅｖｅｎｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ.Ｔｈｅｃｏ－ｄｅｃｏｃｔｉｏｎｈａｄａｃｅｒｔａｉｎｅｆｆｅｃｔｏｎｔｈｅｄｉｓｓｏｌｕｔｉｏｎｏｆｔｈｅｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｏｆＥｐｈｅｄｒａａｎｄＣｉｎｎａｍｏｍｉ.Ｋｅｙｗｏｒｄｓ:ＥｐｈｅｄｒａｅＨｅｒｂａ－ＣｉｎｎａｍｏｍｉＲａｍｕｌｕｓＨｅｒｂＰａｉｒꎻＰｈｅｎｙｌｐｒｏｐａｎｏｉｄｃｏｍｐｏｕｎｄｓꎻＥｐｈｅｄｒａａｌｋａｌｏｉｄｓꎻＬＣ－ＭＳ/ＭＳꎻＣｏ－ｄｅｃｏｃｔｉｏｎꎻＳｉｎｇｌｅ－ｄｅｃｏｃｔｉｏｎ㊀㊀麻黄为麻黄科植物草麻黄(ＥｐｈｅｄｒａｓｉｎｉｃａＳｔａｐｆ)㊁中麻黄(ＥｐｈｅｄｒａｉｎｔｅｒｍｅｄｉａＳｃｈｒｅｎｋｅｔＣ.Ａ.Ｍｅｙ.)或木贼麻黄(ＥｐｈｅｄｒａｅｑｕｉｓｅｔｉｎａＢｇｅ.)的干燥草质茎ꎬ具有发汗散寒㊁宣肺平喘㊁利水消肿的功效[１]ꎮ桂枝为樟科植物肉桂(ＣｉｎｎａｍｏｍｕｍｃａｓｓｉａＰｒｅｓｌ.)的干燥嫩枝ꎬ具有散寒解表㊁温通经脉㊁促阳化气之功[１]ꎮ麻黄－桂枝药对出自«伤寒论»ꎬ在麻黄汤㊁大青龙汤等诸多经典方剂中常作为君药㊁臣药应用ꎮ现代研究表明[２－５]ꎬ麻黄中生物碱类㊁苯丙素类等成分对感冒㊁咳嗽㊁心血管和免疫系统疾病等具有治疗作用ꎻ桂枝中苯丙素类具有解热镇痛㊁抗菌㊁抗炎㊁抗病毒㊁抗肿瘤㊁抗血小板聚集等作用ꎮ桂枝与麻黄配伍后ꎬ解热镇痛㊁抗炎作用增强ꎬ不仅如此ꎬ桂枝㊁麻黄配伍后能提高生物利用度ꎬ桂枝能拮抗麻黄引起的兴奋性中枢神经毒性ꎬ降低了麻黄生物碱的蓄积ꎬ起到减毒的作用[６－８]ꎮ药对是中药配伍应用的重要模式ꎬ常作为药物组成方剂的核心ꎬ具备复方的基本功能主治和疗效[９]ꎮ中药配伍使用后产生助溶㊁沉淀㊁化学反应等现象ꎬ以及煎煮等因素的影响ꎬ有效成分溶出率发生变化ꎬ对临床疗效也可产生影响[１０－１１]ꎮ近年来ꎬ关于中药配方颗粒(以单味中药饮片为原料精制而成) 单煎合同 与传统汤剂 群药合煎 的物质基础一致性一直是大众比较关注的问题[１２－１３]ꎮ本试验建立液相色谱－串联质谱(ＬＣ－ＭＳ/ＭＳ)法测定８个苯丙素类成分(原儿茶酸㊁儿茶素㊁表儿茶素㊁丁香醛㊁香豆素㊁肉桂醇㊁肉桂酸㊁桂皮醛)和３个麻黄类生物碱(麻黄碱㊁伪麻黄碱㊁甲基麻黄碱)的含量ꎬ考察麻黄桂枝共煎㊁单煎及单煎合并液中１１个成分的变化ꎬ以期探索共煎及单煎合并对其主要成分的溶出影响ꎬ为该药对的配伍物质基础及临床应用研究提供试验数据ꎮ１㊀材料１.１㊀仪器㊀岛津ＬＣ－ＭＳ８０４５型液质联用仪(岛津公司ꎬ配备ＤＧＵ－２０Ａ３Ｒ在线脱气机ꎬＬＣ－２０ＡＤＸＲ梯度泵㊁ＳＩＬ－２０ＡＸＲ自动进样器ꎬＣＴＯ－２０Ａ柱温箱ꎬＬＣＭＳ－８０４５检测器ꎬＣＢＭ－２０Ａ系统控制器ꎬＦＣＶ－２０ＡＨ２高压切换阀ꎬＬａｂＳｏｌｕｔｉｏｎｓ色谱工作站)ꎻＥＰ２２５ＳＭ－ＤＲ型十万分之一分析天平(瑞士普利塞斯公司)ꎻＡ３Ｓ－１０－１０－ＣＥ型超纯水机(美国艾科浦公司)ꎻＬＤ５－２Ａ型离心机(北京京立离心机有限公司)ꎻＫＱ５２００ＤＥ数控超声波清洗器(昆山市超室仪器有限公司)ꎻ手动移液器(Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ公司)ꎮ１.２㊀药物与试剂㊀麻黄饮片(康美药业股份有限公司ꎬ批号:２０１００００５１)ꎻ桂枝饮片(中山市正德香中药饮片有限公司ꎬ批号:２０２０１１０６８)ꎬ经深圳市医院中药制剂研究重点实验室陈剑平副主任中药师鉴定ꎬ分别为麻黄科草本状小灌木草麻黄(ＥｐｈｅｄｒａｓｉｎｉｃａＳｔａｐｆ.)的草质茎和樟科植物肉桂(ＣｉｎｎａｍｏｍｕｍｃａｓｓｉａＰｒｅｓｌ.)的干燥嫩枝ꎬ符合«中国药典»２０２０年版(一部)项下规定ꎻ其中麻黄产自内蒙古ꎬ桂枝产自广东ꎮ肉桂酸(批号:１１０７８６－２０１６０４ꎬ９８.８％)㊁桂皮醛(批号:１１０７１０－２０２０２２ꎬ９９.５％)㊁儿茶素(批号:１１０８７７－２０１６４ꎬ９９.２％)㊁表儿茶素(批号:１１０８７８－２０１７０３ꎬ９９.７％)㊁原儿茶酸(批号:１１０８０９－２０１９０６ꎬ９７.７％)㊁盐酸麻黄碱(批号:１７１２４１－２０１８０９ꎬ１００.０％)㊁盐酸伪麻黄碱(批号:１７１２３７－２０１５１０ꎬ９９.８％)和盐酸甲基麻黄碱(批号:１７１２４７－２０１５０２ꎬ９９.６％)购自中国食品药品检定研究院ꎻ肉桂醇(批号:ｗｋｑ２１０３０５０３ꎬＨＰＬＣȡ９８％)和香豆素(批号:ｗｋｑ２１０３０２０７ꎬＨＰＬＣȡ９８％)购自四川省维克奇生物科技有限公司ꎻ丁香醛(广州市齐云生物科技有限公司ꎬ批号:２００９１０ꎬＨＰＬＣȡ９８％)ꎻ乙腈和甲醇(质谱级ꎬＭｅｒｃｋ公司)ꎻ甲酸(质谱级ꎬ赛默飞公司)ꎻ超纯水(由Ｍｉｌｌｉ－Ｑ超纯水系统制得)ꎮ２㊀方法与结果２.１㊀溶液的制备２.１.１㊀对照品溶液制备㊀苯丙素类成分:精密称取原儿茶酸㊁儿茶素㊁表儿茶素㊁丁香醛㊁香豆素㊁肉桂醇㊁肉桂酸㊁桂皮醛对照品适量ꎬ加入乙腈超声溶解ꎬ制成质量浓度分别为０.７８６５㊁１.３１９４㊁１.５３２１㊁０.６２５３㊁１.３９５０㊁１.７４６３㊁０.８９４１㊁５.３９２８ｍｇ ｍＬ－１的单一对照品储备液ꎬ备用ꎮ分别精密量取上述对照品溶液适量ꎬ置同一容量瓶中ꎬ加入乙腈至刻度ꎬ即得原儿茶酸(０.７０７４μｇ ｍＬ－１)㊁儿茶素(１８.４７１６μｇ ｍＬ－１)㊁表儿茶素(１５.３２１０μｇ ｍＬ－１)㊁丁香醛(０.３１３０μｇ ｍＬ－１)㊁香豆素(３.９０６０μｇ ｍＬ－１)㊁肉桂醇(８.７３２０μｇ ｍＬ－１)㊁肉桂酸(１４.３０５６μｇ ｍＬ－１)㊁桂皮醛(６４.７１３６μｇ ｍＬ－１)的混合对照品溶液ꎮ麻黄生物碱类:精密称取盐酸麻黄碱㊁盐酸伪麻黄碱㊁盐酸甲基麻黄碱对照品适量ꎬ加入甲醇超声溶解ꎬ制成质量浓度分别为２.０７５０㊁１.３７９７㊁１.６８３２ｍｇ ｍＬ－１的单一对照品储备液ꎬ备用ꎮ分别精密量取上述对照品溶液适量ꎬ置同一容量瓶中ꎬ加入甲醇至刻度ꎬ即得麻黄碱(１７.９２８０μｇ ｍＬ－１)㊁伪麻黄碱(８.８２８８μｇ ｍＬ－１)㊁甲基麻黄碱(２.１５５５μｇ ｍＬ－１)的混合对照品溶液ꎮ２.１.２㊀供试品溶液制备㊀麻黄－桂枝共煎液称取麻黄９０ｇꎬ加水２４００ｍＬꎬ浸泡３０ｍｉｎꎬ先煎煮２０ｍｉｎꎬ放入桂枝６０ｇꎬ继续煎煮３０ｍｉｎꎬ保持微沸ꎬ过滤ꎬ放冷ꎬ定容至２０００ｍＬꎬ即得ꎮ麻黄单煎液:称取麻黄９０ｇꎬ加水２４００ｍＬꎬ浸泡３０ｍｉｎꎬ煎煮５０ｍｉｎꎬ保持微沸ꎬ过滤ꎬ放冷ꎬ定容至２０００ｍＬꎬ即得ꎮ桂枝单煎液:量取水２４００ｍＬꎬ煮沸ꎬ放入桂枝６０ｇꎬ继续煎煮３０ｍｉｎꎬ保持微沸ꎬ过滤ꎬ放冷ꎬ定容至２０００ｍＬꎬ即得ꎮ单煎合并液:分别量取麻黄㊁桂枝单煎液各１０００ｍＬꎬ混匀ꎬ即得ꎮ供试品溶液:精密量取各煎液１ｍＬꎬ置于２ｍＬ容量瓶中ꎬ加入甲醇至刻度线ꎬ摇匀ꎬ０.２２μｍ微孔滤膜滤过ꎬ即得以上各供试品溶液ꎮ２.２㊀色谱条件２.２.１㊀苯丙素类成分㊀色谱柱:ＡｇｉｌｅｎｔＺＯＲＢＡＸＳＢＣ１８柱(４.６ｍｍˑ２５０ｍｍꎬ３μｍ)ꎻ流动相:乙腈(Ａ)－０.０１％甲酸水溶液(Ｂ)ꎬ０~２０ｍｉｎꎬ５％ң５５％(Ａ)ꎻ流速:１.０ｍＬ ｍｉｎ－１ꎬ分流比为０.４ꎻ柱温:３０ħꎻ进样量:２μＬꎮ２.２.２㊀麻黄类生物碱㊀色谱柱:ＷａｔｅｒｓＸｓｅｌｅｃｔＨＳＳＴ３柱(４.６ｍｍˑ２５０ｍｍꎬ５μｍ)ꎻ流动相:乙腈(Ａ)－０.１％甲酸(Ｂ)ꎬ０~２０ｍｉｎꎬ３％ң８％(Ａ)ꎻ２０~２５ｍｉｎꎬ８％ң２０％(Ａ)ꎻ流速:１.０ｍＬ ｍｉｎ－１ꎬ分流比为０.４ꎻ柱温:３５ħꎻ进样量:２μＬꎮ２.３㊀质谱条件㊀电喷雾离子源(ＥＳＩ)ꎬ多反应监测(ＭＲＭ)模式ꎬ正负离子(苯丙素类生物碱)㊁正离子(麻黄生物碱类)ꎬ雾化气流量为３.０Ｌ ｍｉｎ－１ꎬ干燥气流量为１０.０Ｌ ｍｉｎ－１ꎬ加热气流量为１０.０Ｌ ｍｉｎ－１ꎬ检测器电压为１.８８ｋＶꎬ检测离子及主要参数见表１ꎮ２.４㊀方法学考察２.４.１㊀专属性试验㊀分别精密吸取 ２.１ 项下混合对照品溶液ꎬ供试品溶液各２μＬꎬ按 ２.２ 和 ２.３ 项下色谱及质谱条件进样测定ꎬ记录色谱图ꎮ结果ꎬ各待测成分色谱峰峰形良好且实现基线分离ꎮ２.４.２㊀线性关系考察㊀取 ２.１.１ 项下各单一对照品储备液ꎬ用甲醇(麻黄生物碱类)或乙腈(苯丙素类)稀释配制为梯度浓度的混合溶液ꎬ按照 ２.２ 和 ２.３ 项下条件进行测定ꎬ以质量浓度(Ｘꎬμｇ ｍＬ－１)为横坐标ꎬ峰面积(Ｙ)为纵坐标ꎬ分别绘制标准曲线ꎬ得回归方程ꎬ结果见表２ꎮ２.４.３㊀精密度试验㊀取 ２.１.２ 项下的供试品溶液ꎬ按 ２.２ 和 ２.３ 项下条件进样测定ꎬ记录峰面积并计算ＲＳＤꎮ结果ꎬ原儿茶酸㊁儿茶素㊁表儿茶素㊁丁香醛㊁香豆素㊁肉桂醇㊁肉桂酸㊁桂皮醛㊁麻黄碱㊁伪麻黄碱㊁甲基麻黄碱的ＲＳＤ(ｎ＝６)分别为２.２４％㊁３.１５％㊁２.５０％㊁３.２７％㊁１.６８％㊁２.４２％㊁２.２１％㊁１.５０％㊁２.５１％㊁２.６４％㊁０.８０％ꎬ均小于５.０％ꎬ表明本方法的精密度良好ꎮ表１ 各成分质谱检测参数序号成分ｔ/ｍｉｎ母离子(ｍ/ｚ)子离子(ｍ/ｚ)加和方式碰撞能量/ｅＶ１原儿茶酸４.０３１５３.１０１０９.１５Ｍ－Ｈ１８２儿茶素５.５６２９０.９０１６５.１０Ｍ＋Ｈ－１２３表儿茶素６.６３２９０.９０１６５.１０Ｍ＋Ｈ－１２４丁香醛８.５０１８２.９５１５５.１５Ｍ＋Ｈ－１０５香豆素１１.７３１４７.２０９１.１５Ｍ＋Ｈ－２４６肉桂醇１２.６４１１７.３０９１.００Ｍ＋Ｈ－Ｈ２Ｏ－２６７肉桂酸１３.４８１４７.１５１０３.１０Ｍ－Ｈ１６８桂皮醛１４.９６１３３.１５１１５.１０Ｍ＋Ｈ－１５９麻黄碱１７.８６１６６.３０１４８.２０Ｍ＋Ｈ－１４１０伪麻黄碱１８.８９１６６.３０１４８.２０Ｍ＋Ｈ－１４１１甲基麻黄碱２０.４３１８０.３０１６２.１０Ｍ＋Ｈ－１５２.４.４㊀稳定性试验㊀取 ２.１.２ 项下的供试品溶液ꎬ按 ２.２ 和 ２.３ 项下条件分别于０㊁４㊁８㊁１２㊁１６㊁２４ｈ进样测定ꎬ记录峰面积并计算ＲＳＤꎮ结果ꎬ原儿茶酸㊁儿茶素㊁表儿茶素㊁丁香醛㊁香豆素㊁肉桂醇㊁肉桂酸㊁桂皮醛㊁麻黄碱㊁伪麻黄碱㊁甲基麻黄碱的ＲＳＤ(ｎ＝５)分别为㊁６.７８％㊁４.６９％㊁６.２４％㊁３.３５％㊁３.１９％㊁５.７５％㊁１.６３％㊁４.２８％㊁３.３３％㊁２.９９％㊁４.６０％ꎬ均小于５.０％ꎬ表明供试品溶液在室温放置２４ｈ内稳定性良好ꎮ２.４.５㊀重复性试验㊀按 ２.１.２ 项下方法平行制备６份供试品溶液ꎬ并按 ２.２ 和 ２.３ 项下条件进样测定ꎬ测定含量并计算ＲＳＤꎮ结果ꎬ原儿茶酸㊁儿茶素㊁表儿茶素㊁丁香醛㊁香豆素㊁肉桂醇㊁肉桂酸㊁桂皮醛㊁麻黄碱㊁伪麻黄碱㊁甲基麻黄碱的平均含量分别为１.１２５１㊁３８.３７５５㊁２５.１３１１㊁０.７１１０㊁９.１１２０㊁１７.８７３８㊁２３.３２７１㊁１１１.０２５４㊁１６５.６１６０㊁７６.０８２５㊁１８.１６３０μｇ ｍＬ－１ꎬＲＳＤ(ｎ＝６)分别为３.８９％㊁３.５４％㊁２.７９％㊁４.６４％㊁１.４４％㊁１.９２％㊁１.６１％㊁１.８１％㊁０.８３％㊁１.３２％㊁１.４２％ꎬ均小于５.０％ꎬ表明本方法的重复性良好ꎮ２.４.６㊀加样回收试验㊀取９份已知含量的样品０.５ｍＬꎬ按质量比０.５ʒ１㊁１ʒ１㊁１.５ʒ１加入各对照品适量ꎬ平行３份ꎬ按 ２.１.２ 项下方法制得供试品溶液ꎬ并按 ２.２ 和 ２.３ 项下条件进样测定ꎬ计算加样回收率ꎮ结果ꎬ原儿茶酸㊁儿茶素㊁表儿茶素㊁丁香醛㊁香豆素㊁肉桂醇㊁肉桂酸㊁桂皮醛㊁麻黄碱㊁伪麻黄碱和甲基麻黄碱的加样回收率分别为９９.０３％㊁１００.３８％㊁９８.２７％㊁１００.９２％㊁１００.１２％㊁９６.７６％㊁９８.６０％㊁１０２.１８％㊁９９.５７％㊁１０１.７７％㊁１００.８６％ꎬＲＳＤ(ｎ＝９)分别为５.１９％㊁２.５５％㊁４.８１％㊁４.６５％㊁３.３８％㊁１.４０％㊁３.６５％㊁１.９７％㊁５.１９％㊁２.５５％㊁４.８１％ꎮ表２㊀１１个成分的标准曲线方程和线性范围成分回归方程ｒ线性范围/μｇ ｍＬ－１定量限/μｇ ｍＬ－１检测限/μｇ ｍＬ－１原儿茶酸Ｙ＝４３９１０６Ｘ－４９９６３.００.９９４９０.１１７９~１.８０７８０.０３０.０１儿茶素Ｙ＝１４０９４２Ｘ－３０７５９４０.９９６８２.６３８８~５２.７７６００.２００.０７表儿茶素Ｙ＝１９０３３４Ｘ－２５１９７００.９９８４３.０６４２~４５.９６３００.１３０.０４丁香醛Ｙ＝４８３１８０Ｘ－２４４７.１７０.９９９００.０６２６~０.９３９００.０６０.０２香豆素Ｙ＝１.０５７６４ˑ１０６Ｘ－８３１７６.６０.９９９９０.５５８０~１１.１６０００.０６０.０２肉桂醇Ｙ＝２９０２３０Ｘ＋１３６６３８０.９９９６１.７４６４~２２.７０３２０.１００.０３肉桂酸Ｙ＝４０７１９.４Ｘ－４８２５８.２０.９９８３１.７５００~４４.７０５００.３３０.１１桂皮醛Ｙ＝８６６６６.６Ｘ＋１３２８３１０.９９９８１０.７８５６~１９４.１４０８２.０４０.６７麻黄碱Ｙ＝２.２５８８３ˑ１０６Ｘ＋６.６６３５０ˑ１０６０.９９４８２.２４１０~２９.２５７５１.０７０.３５伪麻黄碱Ｙ＝２.７０４０９ˑ１０６Ｘ＋４.１８１３１ˑ１０６０.９９９０１.１０３６~１６.５５４００.０３０.０１甲基麻黄碱Ｙ＝２.２８２９１ˑ１０６Ｘ＋１５０４３３０.９９９１０.２６９４~４.０４１６０.０５０.０２２.５㊀含量测定㊀按 ２.１.２ 项下方法制得各批次供试品溶液(平行５份)ꎬ按 ２.２ 和 ２.３ 项下条件进样测定ꎮ记录峰面积根据标准曲线方程及定容体积折算等计算出麻黄－桂枝共煎液㊁麻黄单煎液㊁桂枝单煎液和单煎合并液中原儿茶酸㊁儿茶素㊁表儿茶素㊁丁香醛㊁香豆素㊁肉桂酸㊁肉桂醇㊁肉桂醛㊁麻黄碱㊁伪麻黄碱和甲基麻黄碱的含量ꎬ结果见表３ꎮ表３㊀含量测定结果成分含量(μｇ ｍＬ－１ꎬｎ＝５)麻黄－桂枝共煎麻黄单煎桂枝单煎单煎合并原儿茶酸１.０４８９ʃ０.０３４５∗∗０.４９１２ʃ０.０１０７∗∗０.８８６６ʃ０.０３１８∗∗１.３２６９ʃ０.０５８２儿茶素３３.８２３１ʃ１.１１１８３２.０６２３ʃ０.８３６２１９.６０１５ʃ１.５１７９∗∗２４.５１９９ʃ０.６６２３∗∗表儿茶素２０.８０８５ʃ０.５７７６７.５４５６ʃ０.１４５１∗∗１８.９４２８ʃ１.２５２２∗∗２２.０２３８ʃ０.６５９８丁香醛０.６１８１ʃ０.０３７２∗∗０.２４０７ʃ０.００８６∗∗０.５２１７ʃ０.０３５０∗∗０.６９９９ʃ０.０２９０∗∗香豆素８.３６０４ʃ０.４０３１∗∗０.４３０４ʃ０.０２７０∗∗１１.１６３０ʃ０.６４３１１１.３７２５ʃ０.６１６６肉桂酸１７.５７８７ʃ０.６１５７∗∗９.７７５７ʃ０.０９１５∗∗１２.５３４５ʃ０.９０６５∗∗２１.９０８０ʃ１.２５７２肉桂醇１６.２８８０ʃ１.１７３４∗∗－１９.７４５２ʃ０.９６５９２２.４７９５ʃ５.４４９０桂皮醛１０５.４０７５ʃ７.８５２０∗∗－１６９.８０４０ʃ１２.２８３０１７１.７７７９ʃ２０.０５５５麻黄碱１９１.５２３７ʃ８.７４１２∗∗１６４.４６１７ʃ８.２６９２∗∗－１３８.２２７６ʃ４.３８９５∗∗伪麻黄碱７２.８９４５ʃ１.２５３９∗∗６３.７６１８ʃ３.０８７２∗∗－４２.９３７７ʃ１.９０６５∗∗甲基麻黄碱１９.３０９８ʃ０.５７０６∗∗１７.７９４９ʃ０.３７９９∗∗－１５.６７１２ʃ０.４２３０∗∗㊀注:各组间相比ꎬ∗∗Ｐ<０.０１㊀㊀由表３可知ꎬ与单煎合并液相比ꎬ麻黄与桂枝共煎后ꎬ原儿茶酸㊁丁香醛㊁香豆素㊁肉桂醇㊁肉桂酸和桂皮醛的含量均有不同程度的下降ꎬ降幅为１１.６９％~３８.６３％ꎻ另原儿茶酸㊁肉桂酸单煎合并后与各自单煎液测定结果的和无显著性差异ꎬ香豆素㊁肉桂醇和桂皮醛单煎合并后与各自单煎液测定结果的和以及桂枝单煎液无显著性差异ꎮ说明以上溶液在混合时ꎬ温度对以上成分的溶出存在一定的影响作用ꎮ与单煎合并液相比ꎬ麻黄与桂枝共煎后ꎬ儿茶素的含量有很大程度的增高ꎬ增幅为３７.９４％ꎬ而表儿茶素的含量则无明显的变化ꎮ不管是单煎合并还是共煎ꎬ丁香醛㊁儿茶素和表儿茶素的含量比麻黄桂枝各自单煎液测定值的和均有所下降ꎬ表明麻黄与桂枝合并使用均降低该３种成分的含量ꎮ与单煎合并液相比ꎬ麻黄与桂枝共煎后ꎬ麻黄碱㊁伪麻黄碱和甲基麻黄碱的含量均有不同程度的增高ꎬ增幅为１８.８４％~４１.１０％ꎮ３ 讨论３.１㊀色谱条件的优化㊀本研究曾尝试同时测定苯丙素类和麻黄生物碱类成分ꎬ但由于麻黄碱类成分的检测条件为正离子扫描模式ꎬ在流动相为乙腈－０.１％甲酸水溶液时ꎬ各色谱峰的分离度㊁峰形均较好ꎬ将流动相改为乙腈－水㊁乙腈－０.０１％甲酸水溶液后ꎬ各色谱峰均不成峰形ꎬ分离度也不理想ꎻ而苯丙素类成分中肉桂酸的检测条件为负离子扫描模式ꎬ且对流动相体系的ｐＨ值敏感ꎬ在流动相为乙腈－０.１％甲酸水溶液时ꎬ色谱峰检测不到ꎬ未有响应值ꎮ当流动相更换为乙腈－水溶液时ꎬ原儿茶酸㊁肉桂酸和丁香醛的色谱峰的峰形均不理想ꎻ流动相更换为乙腈－１ｍｍｏｌ Ｌ－１乙酸铵水溶液时ꎬ桂皮醛的响应值偏低ꎮ另外本研究还分别考察了ＷａｔｅｒｓＸｓｅｌｅｃｔＨＳＳＴ３(４.６ｍｍˑ２５０ｍｍꎬ５μｍ)和ＡｇｉｌｅｎｔＺＯＲＢＡＸＳＢＣ１８(４.６ｍｍˑ２５０ｍｍꎬ３μｍ)２种规格色谱柱ꎬ采用ＷａｔｅｒｓＸｓｅｌｅｃｔＨＳＳＴ３色谱柱时ꎬ原儿茶酸㊁肉桂酸２个色谱峰的峰形不理想ꎬ采用ＡｇｉｌｅｎｔＺＯＲＢＡＸＳＢＣ１８色谱柱时ꎬ各色谱峰的分离度㊁峰形均较好ꎬ故最终分别建立了苯丙素类成分和麻黄生物碱类成分的测定方法ꎮ由于桂皮醛不稳定ꎬ暴露于空气中易发生氧化ꎬ本研究曾用甲醇溶解桂皮醛对照品ꎬ于常温和４ħ条件放置一段时间后ꎬ纯度均降低ꎬ在ＬＣ－ＭＳ/ＭＳ中可明显检出肉桂酸和其他杂质峰ꎮ当采用乙腈溶解时ꎬ其稳定性较好ꎬ２４ｈ内未见有分解现象ꎬ因此最终选用乙腈溶解ꎮ本课题组前期建立苯丙素类成分的含量测定方法时ꎬ分别采用乙腈－水㊁乙腈－０.０１％甲酸水溶液为流动相ꎬ丁香醛㊁原儿茶酸和肉桂酸在乙腈－０.０１％甲酸水溶液为流动相时ꎬ峰形较好ꎬ基线平稳ꎬ分离度好ꎬ故最终选择乙腈－０.０１％甲酸水溶液作为苯丙素类成分测定的流动相ꎮ３.２㊀溶出影响探讨㊀与麻黄单煎和桂枝单煎测定结果的加和相比ꎬ共煎条件下８种苯丙素类成分的溶出均呈现不同程度的降低ꎬ而在单煎合并条件下ꎬ除儿茶素㊁表儿茶素和丁香醛的溶出有降低外ꎬ其余５种成分的含量变化无显著性差异ꎮ推测在两药煎煮后混合的过程中ꎬ温度对８种苯丙素成分的溶出存在一定的影响ꎮ与共同煎煮相比ꎬ单煎后合并有利于原儿茶酸㊁丁香醛㊁香豆素㊁肉桂醇㊁肉桂酸和桂皮醛的溶出ꎬ抑制了儿茶素的溶出ꎬ对表儿茶素的溶出则无显著性影响ꎮ麻黄桂枝单煎合并液中麻黄碱㊁伪麻黄碱㊁甲基麻黄碱的含量相较于单煎液而言ꎬ含量下降ꎬ推测简单的合并后ꎬ麻黄生物碱与苯丙素类酸性成分酸碱反应形成复盐ꎬ导致含量降低[１４]ꎬ而共煎后的麻黄生物碱等含量较麻黄单煎液中的含量有了升高ꎬ升幅在８.５１％~１６.４５％ꎻ另本研究还对去甲基麻黄碱和去甲基伪麻黄碱进行了测定ꎬ测定的色谱条件同其他麻黄生物碱ꎬ由于未购买到该两种成分的对照品ꎬ暂未进行定量ꎬ峰面积结果显示ꎬ该两种生物碱的含量变化趋势与以上检测的３种麻黄生物基本一致ꎮ推测与桂枝共煎时ꎬ虽然与苯丙素类成分形成复盐ꎬ但桂枝中的某些成分可能促进生物碱类等成分更多溶出ꎬ具体反应途径亟待研究ꎮ麻黄和桂枝配伍共煎使用ꎬ对苯丙素类成分的溶出有一定的抑制作用ꎬ推断可能两者成分中的生物碱类与苯丙素类之间发生化学反应生成了复盐ꎬ导致含量降低ꎮ中医不传之密在于量ꎬ因此配伍后效应成分的变化对其主治病症有很重要的影响ꎮ本研究建立的８种苯丙类成分和３种麻黄生物碱的ＬＣ－ＭＳ/ＭＳ含量检测方法ꎬ简便快速ꎬ结果准确可靠ꎬ重复性好ꎬ为其临床应用和开发研究提供参考ꎮ参考文献:[１]㊀国家药典委员会.中华人民共和国药典２０２０年版(一部)[Ｓ].北京:中国医药科技出版社ꎬ２０２０.[２]ＭＩＡＯＳＭꎬＺＨＡＮＧＱꎬＢＩＸＢꎬｅｔａｌ.Ａｒｅｖｉｅｗｏｆｔｈｅｐｈｙ￣ｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙａｎｄｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｏｆＥｐｈｅｄｒａｈｅｒｂ[Ｊ].ＣｈｉｎＪＮａｔＭｅｄꎬ２０２０ꎬ１８(５):３２１－３４４. [３]ＬＩＵＪꎬＺＨＡＮＧＱꎬＬＩＲＬꎬｅｔａｌ.Ｔｈｅｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌｕｓｅｓꎬｐｈｙｔｏ￣ｃｈｅｍｉｓｔｒｙꎬｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙａｎｄｔｏｘｉｃｏｌｏｇｙｏｆＣｉｎｎａｍｏｍｉｒａｍｕ￣ｌｕｓ:ａｒｅｖｉｅｗ[Ｊ].ＪＰｈａｒｍＰｈａｒｍａｃｏｌꎬ２０２０ꎬ７２(３):３１９－３４２. [４]ＧÜＲＥＲＢꎬＫＥＲＴＭＥＮＨＲꎬＢＥＫＴＡŞＯＧ㊅ＬＵＰＫꎬｅｔａｌ.ＴｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆＣｉｎｎａｍａｌｄｅｈｙｄｅｏｎｅａｒｌｙｂｒａｉｎｉｎｊｕｒｙａｎｄｃｅｒｅｂｒａｌｖａｓｏｓｐａｓｍｆｏｌｌｏｗｉｎｇｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｓｕｂａｒａｃｈｎｏｉｄｈｅｍｏｒｒｈａｇｅｉｎｒａｂｂｉｔｓ[Ｊ].ＭｅｔａｂＢｒａｉｎＤｉｓꎬ２０１９ꎬ３４(６):１７３７－１７４６.[５]ＨＵＡＮＧＹꎬＣＨＥＮＪꎬＹＡＮＧＳꎬｅｔａｌ.ＣｉｎｎａｍａｌｄｅｈｙｄｅＩｎ￣ｈｉｂｉｔｓｔｈｅＦｕｎｃｔｉｏｎｏｆＯｓｔｅｏｓａｒｃｏｍａｂｙＳｕｐｐｒｅｓｓｉｎｇｔｈｅＷｎｔ/β－ＣａｔｅｎｉｎａｎｄＰＩ３Ｋ/ＡｋｔＳｉｇｎａｌｉｎｇＰａｔｈｗａｙｓ[Ｊ].ＤｒｕｇＤｅｓＤｅｖＴｈｅｒꎬ２０２０(１４):４６２５－４６３７.[６]王晓明ꎬ许良葵ꎬ罗佳波.麻黄－桂枝药对抗炎㊁镇痛作用研究[Ｊ].中药新药与临床药理ꎬ２０２０ꎬ３１(２):１７９－１８４.[７]郑芳昊.麻黄－桂枝药对配伍对麻黄碱引起的大鼠中枢神经系统毒副作用的保护机制研究[Ｄ].广州:南方医科大学ꎬ２０１５.[８]ＷＥＩＰꎬＴＡＮＧＱＦꎬＨＵＯＨＬꎬｅｔａｌ.Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅｐｈａｒｍａ￣ｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓｏｆｔｈｒｅｅｐｈｅｎｙｌｐｒｏｐａｎｏｉｄｓｉｎｒａｔｐｌａｓｍａａｆｔｅｒｏｒａｌａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎｏｆＲａｍｕｌｕｓＣｉｎｎａｍｏｍｉａｎｄＲａｍｕｌｕｓＣｉｎｎａｍｏｍｉ－ＥｐｈｅｄｒａｅＨｅｒｂａｈｅｒｂ－ｃｏｕｐｌｅｅｘｔｒａｃｔ[Ｊ].ＣｈｉｎＪＩｎｔｅｇｒＭｅｄꎬ２０１７.ｈｔｔｐｓ://ｄｏｉ.ｏｒｇ/１０.１００７/ｓ１１６５５－０１７－２７９９－８.[９]王嘉俊ꎬ李双蕾ꎬ李梦瑶.中药药对的现代认识与研究[Ｊ].中医杂志ꎬ２０１６ꎬ５７(８):７０１－７０４.[１０]田学浩ꎬ张昊ꎬ李桐ꎬ等.中药配伍理论科学内涵的外在表象－复方水煎自沉淀[Ｊ].中草药ꎬ２０１７ꎬ４８(２２):４７７８－４７８３.[１１]张聪聪ꎬ刘瀚泽ꎬ王永丽ꎬ等.ＵＨＰＬＣ－Ｑ－ＥｘａｃｔｉｖｅＯｒｂｉｔｒａｐＨＲＭＳ法同时测定大黄－桃仁药对中１６种成分及其溶出规律探究[Ｊ].中成药ꎬ２０２２ꎬ４４(４):１１７７－１１８３.[１２]李睿ꎬ翟华强ꎬ田伟兰ꎬ等.中药煮散的历史源流及其与现代配方颗粒的对比性分析[Ｊ].中国中药杂志ꎬ２０１６ꎬ４１(５):９６５－９６９.[１３]鲁云ꎬ刘佩仪ꎬ徐杰ꎬ等.不同配伍比例麻黄－桂枝药对单煎与合煎化学成分对比分析[Ｊ].现代中药研究与实践ꎬ２０２１ꎬ３５(６):４０－４４.[１４]徐文杰ꎬ陈飞龙ꎬ谢颖ꎬ等.不同配伍配比对麻黄－桂枝药对有效成分含量的影响[Ｊ].中国实验方剂学杂志ꎬ２０１２ꎬ１８(１０):８４－８８.。
中国是世界上惟一的天然麻黄碱生产国，麻黄为我国特产中药。
我国麻黄的主要产地是内蒙古，其次是新疆、山西、吉林、辽宁、宁夏、甘肃、陕西、河北、河南等地。
草麻黄产量最大，麻黄商品主流；中麻黄次之，木贼麻黄产量最小。
其他药源：丽江麻黄产云南，四川，贵州。
表面具较粗深的纵沟纹。
膜质叶先端2裂。
麻黄碱含量不少于0.6％。
每年仅新疆地区，消耗麻黄草的用量在8～10万吨左右。
由于生长麻黄草的主产区是中国沙漠化最为严重的地方。
而麻黄草又是这些地区的主要固沙植物，所以，近年来麻黄草的过度采挖，已经对这些地区的生态环境造成了严重影响。
因此。
以化学合成手段生产符合市场要求的麻黄碱将是减少麻黄草的采挖，保护生态环境，满足市场需求的有效途径。
目前，化学合成手段生产麻黄碱面临的主要问题是如何低成本地得到光学纯的产物。
后面合成的时候我们再具体介绍。
三种麻黄的性状比较：草麻黄（1）呈细长圆柱形，略扁，少分枝，直径 l～2 mm。
（2）表面淡绿色至黄绿色，有细纵棱线，触之微有粗糙感。
（3）节明显，节间长2～6cm。
节上有膜质鳞叶，裂片2（稀3），锐三角形，先端灰白色，反曲，基部连合成筒状，红棕色。
（4）体轻，质脆，易折断。
断面近圆形，略呈纤维性，周边黄绿色，中央髓部红色或红棕色，类圆形。
（5）气微香，味涩、微苦。
选择时：以干燥、茎淡绿、内心充实红棕、手拉不脱节、味苦涩者为佳。
中麻黄：（1）多分枝，直径1.5mm～3mm，有粗糙感。
（2）节间长2cm～6cm。
（3）膜质鳞叶长2mm～3mm，裂片3（稀2），先端锐尖、断面髓部呈三角状圆形。
茎节表面观木贼麻黄：（1）较多分枝,直径1～1.5mm，无粗糙感。
（2）节间上1.5cm～3cm，膜质鳞叶长1～2mm，裂片2（稀3），上部为短三角形，灰白色，先端多不反曲，基部棕红色至棕黑色。
三种麻黄的共性：①均具节与节间。
②表面具纵棱线。
③叶退化成膜质鳞叶，基部联合成筒状。
④折断时有粉尘飞出。
⑤断面髓部红棕色（玫瑰心）。
⑥味苦涩（生物碱、鞣质）。
【采收加工】秋季采割绿色的草质茎，阴干或晾至七成干时晒干。
曝晒过久则色易变黄，受霜冻则色变红，均影响药效。
本实验对不同溶剂提取麻黄的方法进行比较，采用HPLC c4 法测定不同产地麻黄中麻黄碱的含量，为制剂越婢加术颗粒的麻黄药材来源提供可靠保障。
一，麻黄与麻黄碱的来源之异同：麻黄的来源：麻黄是一种药用植物, 为麻黄科植物草麻黄或木贼麻黄或中麻黄的干燥草质茎。
麻黄是一种与麻黄碱同效的草药, 而麻黄碱是其主要有效成分之一, 5中国药典6 规定麻黄草中麻黄碱( C10H15NO) 的含量018% 以上才符合药用标准。
麻黄碱的来源：麻黄碱可以从麻黄植物中提取麻黄碱, 也可以有机合成法合成麻黄碱、微生物发酵生成麻黄碱、细胞培养法生成麻黄碱。
二，麻黄的化学成分：麻黄主含生物碱, 主要是1-麻黄碱、d-伪麻黄碱、麻黄次碱及甲基麻黄碱和去甲基麻黄碱等, 另含少量的挥发油、有机酸等成分。
其中主要药用成分为麻黄碱和伪麻黄碱。
麻黄碱是植物麻黄的主要药用成分之一。
三，麻黄与麻黄碱的药理作用之异同：麻黄的药理作用：（1）发汗作用：麻黄发汗作用已为几千年临床所证实, 古人也正是利用其发汗作用, 治疗风寒束表、发热无汗的表实证。
实验证明, 麻黄的挥发油有发汗作用, 也曾有人观察到在一般情况下, 麻黄虽不能诱发人体出汗, 但当人处在温热环境中, 用麻黄50~ 60 mg、经015~ 210 h 后, 汗腺分泌确比未用麻黄者更多、更快。
其发汗作用, 有人认为可能是由于麻黄阻碍了汗腺导管对钠的重吸收而导致汗液分泌增加。
现已发现, 麻黄根的生物碱部分能抑制低热和烟碱所致的发汗, 此与临床经验相吻合。
（2）平喘作用麻黄平喘作用, 沿用千年, 但其作用及作用机理的探讨, 直至21 世纪30 年代始进行。
大量的试验研究证明, 麻黄碱是平喘的有效成分。
其平喘机理主要是通过以下环节实现的。
( 1) 促进肾上腺素能神经和肾上腺髓质嗜铬细胞释放去甲肾上腺素和肾上腺素而间接发挥拟腺素的作用。
( 2) 因其化学结构与肾上腺素相似, 亦可直接与支气管平滑肌上的B-肾上腺素受体结合, 使支气管平滑肌松弛。
( 3) 阻止过敏介质的释放。
( 4) 直接兴奋A-肾上腺素受体, 使末梢血管收缩, 从而可缓解支气管粘膜的肿胀, 对哮喘的发作和预防有效。
麻黄碱的平喘作用与肾上腺素相比, 其特点是显效较慢, 而作用温和、持久, 且口服有效。
（3）利尿作用麻黄有一定的利尿作用, 以d-伪麻黄碱作用最显著。
利尿作用的机理, 有人认为是由于其扩张肾血管使肾血流增加的结果, 也有人认为是阻碍肾小管对钠离子重吸收的缘故。
（4）升高血压麻黄碱能兴奋肾上腺素能神经而使心跳加快, 心肌收缩力增强, 心输出增加, 血管收缩, 血压升高。
因其同时兴奋A、B-肾上腺素受体。
故收缩压的升高较舒张压明显, 其升压特点是缓慢、温和、持久, 反复应用易产生快速耐受体。
（5）兴奋中枢神经系统麻黄对中枢神经系统有兴奋作用, 以麻黄碱最为突出, 治疗剂量即能兴奋大脑皮质和皮质下中枢, 引起精神兴奋、失眠等症状, 并可缩短巴比妥类催眠作用时间, 亦能兴奋中脑, 延脑呼吸中枢和血管运动中枢。
（6）解热、抗病毒。
麻黄碱的药理作用：对心血管系统的作用 ( 1) 对心脏的影响麻黄碱通过激动B 受体, 加快心率, 增加收缩力。
( 2) 对血管及血压的影响麻黄碱激动A受体而收缩动脉。
麻黄碱和伪麻黄碱均有升高血压、增加心输出量的作用。
对胃肠道、气管、输精管等平滑活动的影响麻黄碱激动A受体增强小鼠输精管的自发收缩活动, 同时麻黄碱作用于突触前膜受体, 而增强电刺激致小鼠输精管的收缩[ 1, 2] 。
激动B 受体, 舒张气管平滑肌, 且麻黄碱与异丙肾上腺素有交叉脱敏现象。
对神经肌肉传递的作用低浓度麻黄碱可通过选择性激动B2 受体, 而拮抗高K去极化引起的大鼠膈肌麻痹。
对中枢神经系统的作用麻黄碱兴奋中枢神经系统。
1 仪器与试药1．1 仪器岛津(SHIMADZU)LC高效液相色谱仪，SHIMADZU LC一20AT多功能紫外检测仪，SHIMADZUSPD一20A型泵，LC solution Lite色谱工作站，海尔冰箱，万用电炉(北京市永光明医疗仪器厂)，电热恒温水浴锅(天津市泰斯特仪器有限公司)，循环水式真空泵(巩义市予华仪器有限责任公司)，1／10万分析天平(上海精天电子仪器厂)，超声波清洗器(巩义市予华仪器有限责任公司，型号KQ一500E)，回流装置。
1．2 试药甲醇(上海沃凯)色谱纯，乙腈(上海沃凯)色谱纯，甲醇，磷酸二氢钾，三乙胺，磷酸，95％乙醇，盐酸均为分析纯，娃哈哈纯净水，氢氧化钠，盐酸麻黄碱对照品(中国药品生物制品鉴定所，批号1241—200102，含量>99．9％)，蒸馏水。
1．3 药材4种麻黄药材来源于哈尔滨医科大学大庆校区中药标本馆，经该校生药研究室魏东华教授鉴定均为麻黄科植物草麻黄(Ephedrae sinica stapf)的干燥草质茎。
2 方法和结果2．1 色谱条件色谱柱为INERTSIL ODS—SP柱(4．6 mnl×150 mm，5 m)，检测波长：205 nm，流动相：乙腈一(0．02 mol／L磷酸二氢钾+0．02％三乙胺+0．2％磷酸水溶液)(10：90)，流速：1 ml／min，进样量10 l。
2．2 溶液制备2．2．1 对照品溶液的制备精密称取盐酸麻黄碱标准品4 mg，置50 ml量瓶中，甲醇溶液稀释至刻度，得80 g／ml对照品溶液。
2．2．2 样品溶液的制备分别精密称取产地为山西、河北、陕西、内蒙的麻黄粗粉各5 g，各置于250 ml圆底烧瓶中，加70％乙醇50 ml回流1 h，过滤，重复回流3次，合并滤液，最后制成每100 ml相当麻黄生药l g的4份不同产地的麻黄样品溶液。
对照品和样品色谱图如图1。
1．盐酸麻黄碱图1 对照品(A)样品(B)HPLC色谱图2．3 线性关系考察精密吸取8O g／ml对照品溶液l0、8、6、5和2．5 Tn1分别置10 m1量瓶中，甲醇溶液稀释至刻度，摇匀，得浓度分别为80、64、48、40和20g／IIll的对照品溶液，在上述色谱条件下，分别精密吸取对照品溶液各10 l进样，记录色谱峰峰面积，以盐酸麻黄碱对照品的含量( g)为横坐标，峰面积积分值l，为纵坐标进行回归，得回归方程为Y=5 E+0．6 X+119 445(r=0．999 7)，线性范围为0．2—0．8g02．4 精密度试验精密吸取对照品溶液10 ，分别自上述色谱条件下，连续进样5次，记录色谱峰面积，计算麻黄碱峰面积积分值，RSD 值为0．71％。
理论塔板数为2354，表明仪器的精密度良好。
2．5 稳定性试验精密吸取山西样品溶液，于配制后0、2．5、5．0、7．5、10．0和l2．5 h 自上述色谱条件下分别进样测定，共测定5次，记录色谱峰面积，计算麻黄碱峰面积积分值，RSD值为1．53％。
表明山西样品溶液在l2．5 h内稳定。
2．6 加样回收率试验精密称取已知麻黄碱含量的山西麻黄5份，每份2．5 g，分别准确加入盐酸麻黄碱标准品适量，依照样品溶液的制备方法制备成5份样品，按上述色谱条件进样，记录麻黄碱峰面积，计算麻黄碱平均回收率(r／,=5)为98．21％，RSD值为0．79％。
2．7 提取方法的确定本实验在考察含量测定的同时，注重提取方法的研究。
本实验对水蒸气蒸馏法，酸水回流法，乙醇回流法，盐酸乙醇回流法，半仿生法进行了对比[引。
2．7．1 水蒸气蒸馏法取麻黄粗粉10 g，置圆底烧瓶中，加100 ml水，冷浸10 min，回流3次，分别为1、0．5和0．5 h，每次过滤，合并滤液，浓缩，于60℃干燥，称重。
2．7．2 酸水回流法取麻黄粗粉10 g，置圆底烧瓶中，加100 ml水，O．75 ml盐酸，冷浸10 min，回流3次，分别为l、0．5和0．5 h，每次过滤，合并滤液，浓缩，于60℃干燥，称重。
2．7．3 乙醇回流法取麻黄粗粉10 g，置圆底烧瓶中，加60％乙醇100 ml，回流3次，每次1 h，每次过滤，合并滤液，浓缩，于6O℃干燥，称重。
2．7．4 酸水乙醇回流法取麻黄粗粉l0 g，置圆底烧瓶中，加60％乙醇100 ml，0．75 ml 盐酸，回流3次，分别为1、0．5和0．5 h，每次过滤，合并滤液，浓缩，于60℃干燥，称重"J。
2．7．5 半仿生法取麻黄粗粉1O g，置锥形瓶中，加100 ml水，加盐酸调至pH=1，煎煮0．5 h，过滤，滤渣加80 ml水，加氢氧化钠调至pH=10，煎煮2次，每次0．5 h，每次过滤，合并滤液，浓缩，于60℃干燥，称重。
