第１４卷第２期 ２００８年２月 河北ｔｉ 学 ＨＥＢＥＩ ＭＥＤＩＣＩＮＥ Ｖｏ１．１４，Ｎｏ．２ Ｆｅｂ．．２Ｏ０８ 中图分类号：Ｒ４４６．１１ 文献标识码：Ｂ 血气分析包括血液的ＰＨ、ＰＯ：、ＰＣＯ 的测定值， 还包括经计算求得如ＴＣＯ 、ＡＢ、ＤＥ、Ｓａｔｏ 、Ｃｏｎｔｏ 等参 数。它是评价病人呼吸、氧化及酸碱平衡状态的必要 指标，对Ｉ临床疾病的诊断和治疗发挥很重要的作用。 但血液标本的采集和保存是否恰当，以及操作是否规 范，对测定结果有较大影响，乃至对Ｉ临床的观察和治疗 都起到很关键的影响，应该引起我们足够的重视。笔 者根据多年的工作经验和探讨，现将认识报告如下： １采血部位的选择 选择足够粗、位于体表、与大静脉和神经离的较远 的动脉。一般选择桡动脉最为符合，另外股动脉和前 臂动脉也可作为采血部位。这些部位不仅有利于方便 操作，万一出现意外时，侧枝循环也能够补偿。特别注 意的是：①如果穿刺区皮肤出现破溃、感染、硬结、皮肤 病等情况时，则不能进行穿刺取血。②对于不允许进 行动脉穿刺的患者如：不宜反复动脉穿刺的患者、特殊 疾病的患者或婴幼儿，可采取毛细血管采血，一般选择 手指末端或耳垂，婴幼儿最好选择脚后跟。 ２采血工具的选择 由于氧能透过塑料针筒弥散，导致ＰＣＯ 的测定 值偏低，所以笔者主张最好选择５ｍｌ的玻璃空针，而针 头选择一次性采血器上的针头即可。采血前用０．５ｍｌ 的肝素，使其均匀涂于针筒壁四周，并将多余的肝素排 出。注意肝素过多或血标本过少（小于１ ｍ１）均会造成 稀释性误差。 ３采血程序要规范 常规消毒穿刺区皮肤和操作者的手指，消毒面积 要大，直径在５ｍｌ以上，选择固定血管的食指、中指消 毒面积要超过２个关节。穿刺成功后，只要进入动脉， 切不要用负压去抽取血液，血液回在血压的作用下自 动进入空针，采血总量每次不低于２ｍｌ。采够足够的 血量后，立即排出空针内的小气泡，取掉针头，用橡皮 帽或小软木塞封住针管，以确保血标本封闭。轻轻转 动针筒ｌ０次左右，使肝素钠同血液充分混合。同时对 文章编号：１００６—６２３３（２ｏｏ８）０２－０２４３—０２ 穿刺点用无菌干燥棉球压５ｍｉｎ左右，直至不出血为 止，且记不要用力揉，以免造成局部血肿。穿刺时患者 若出现肢体麻木或剧烈疼痛，则提示有可能损伤周围 神经，应立即抽回针头。如果抽出的血液为暗红色，则 表示针头误人静脉，应立即拔出针头，重新选择新的穿 刺位置，重新穿刺。采取的血液标本应立即放人含有 氯化钠冰水的容器中，使标本迅速冷至４摄氏度以下， 然后及时送检，为了减少检验结果的误差，建议在 ３０ｍｉｎ内完成检验。 ４分别对待特殊的采血对象 正常情况下特殊的采血对象要采取相应的特殊方 法，如：①病人在进行体外循环时，要等到血液得到混 匀后再进行采血，以保证采血样品检验结果的客观性。 ②对于吸氧的病人，要注意氧气的流量，以计算出该病 人每分钟吸人的氧含量。③对于躁动的患者，应先做 好解释工作。使其保持良好的心理状态，理解和配合 采血的正常进行，绝对避免由于恐惧、剧烈活动造成穿 刺失败或检验结果的误差。 总之要想保证检验质量就要注意采血和检验过程 中的一些细节问题，才能最大限度的减少检验数值的 误差，才能给Ｉ临床提供更可靠更科学的数字依据。一 般而言，血气指的是血液中所含的Ｏ 和ＣＯ 气体，而 且只有动脉血才能真实反映血的氧化作用和酸碱状 态。血气分析的有关数据对Ｉ临床医生对病人的诊断和 治疗起到很关键的作用。要想给Ｉ临床提供客观的检验 报告，一定注意各种不利的影响因素。操作时要精力 集中，尽量“一针见血”，若穿刺失败，切勿在同一区域 多次穿刺，以免损伤血管和神经或形成血肿。采血后 尽量减少混入空气的机会，因为空气中ＰＯ 高于血 液。ＰＣＯ 低于血液，血液一旦与空气接触，就会造成血 液ＰＯ ｔ和ＰＣＯ 的误差，而且与空气接触还易造成对 血标本的污染，所以采血前要检查采血器是否密闭完 好。采血后，注射器要稍外推，并排出第一滴血后弃 之，然后立即将塑料嘴或橡皮泥封住针头以隔离空气。 Ｆ一８００血细胞分析仪临床应用体会 周海军 （河北省滦平县医院， 河北 滦平０６８２５０） ・２４３・
检验医学与临床２００８年】２月第５卷笫２４期 Ｌａｂ Ｍｅｄ Ｃｌｉｎ，Ｄｅｃｅｍｂｅｒ ２００８，Ｖｏ１．５，Ｎｏ．２４
血细胞分析仪在临床应用中的干扰因素及分析
宿瑞俊，苑芳（内蒙古医学院附属医院检验科，呼和浩特０１００５０）
【关键词】血细胞分析仪； 干扰因素； 血小板； 白细胞 中图分类号：Ｒ４４６．１ｌ 文献标志码：Ａ 文章编号：１６７２—９４５５（２００８）２４一】５１２—０２
随着血细胞分析仪的发展及广泛使用，仪器法以其简便、
快速、精密度高、提供信息多等优点在血液分析检测中占据了 主导地位。但仪器法在临床应用中存在着诸多不容忽视的干
扰因素，在应用过程中会遇到不少问题，常常影响分析结果的
可靠性，影响临床医生对检验结果的信任度，值得检验工作者 重视 本文就血液细胞分析仪在临床检验应用中存在的常见 干扰因素作一分析。
１环境温度的干扰
丛玉隆等研究认为，实验室环境温度决定了仪器、试剂以 及标本的温度，计数时稀释液的温度应为（２２土４）℃。当稀释 液的温度低时，红细胞溶解后的膜碎片聚集，粒度分布曲线的
平坦段变短，当试剂温度低于１８℃时需加热使用。有些溶血
剂在低温时可出现结晶，并不容易被察觉，很少引起操作者的 注意，但在显微镜下，可见到其中悬浮着许多细小的结晶，这样
的溶血剂滴入血液中，白细胞计数必然增高。这种情况在实际 操作中时有发生，尤其是在北方的冬季，且不易找到真正的原
因。成景松 研究认为，低温对稀释液具有一定的影响，可以 使稀释液结品，在这种情况下．聚合的结晶可使仪器分析不出
结果或结果分析异常。对这一现象的处理方法：将溶血剂或稀 释液进行加热升高温度，消除结晶。另有文献报道，加入适量
的非离子表面活性剂．可减轻溶血刺结晶的发生。低温也易激 活血小板，引起血小板凝集，造成血小板计数假性降低¨２］。刘
忠伦等 研究发现１Ｏ℃时血小板计数结果仪器法显著低于手
工法，且血小板直方图异常；２５℃时仪器法计数结果与手工法
血细胞分析仪
血细胞分析仪
血细胞分析仪是医院临床检验应用非常广泛的仪器之一，随着近几年计算机技术的日新月异的发展，血细胞分析的技术也从三分群转向五分群，从二维空间进而转向三维空间，而且我们也注意到现代血细胞分析仪的五分类技术许多采用了和当今非常先进的流式细胞仪相同的技术，如散射光检测技术、鞘流技术、激光技术等等。本文重点就五分群血细胞分析仪器的检测方法及其应用加以阐述。
检测方法
1．体积、电导、激光散射法（VCS）
这是Beckman－Coulter公司生产的血细胞分析仪所采用的经典分析方法，它集三种物理学检测技术于一体，在细胞处于自然原始的状态下对其进行多参数分析。该方法也称为体积、电导、激光散射血细胞分析法。此技术采用在标本中首先加入红细胞溶血剂溶解掉红细胞，然后加入稳定剂来中和红细胞溶解剂的作用，使白细胞表面、胞浆和细胞体积保持稳定不变。然后应用鞘流技术将细胞推进到流动细胞计数池（Flowcell）中，接受仪器VCS三种技术的检测。
V代表体积（Volume）测量法，是采用经典的库尔特专利技术，用低频电流准确分析细胞体积。体积是区分白细胞亚群的一个重要的参数，它可有效区分体积大小差异显著的淋巴细胞和单核细胞。
C代表高频电导性（Conductivity），采用高频电磁探针原理测量细胞内部结构间的差异，也是该公司的专利技术。细胞膜对高频电流具有传导性，当电流通过细胞时，细胞核的化学组份可使电流的传导性产生变化，其变化量可以反映出细胞内含物的信息。该参数可用来区分体积相近而内部性质不同的细胞群体，如淋巴细胞和嗜碱性粒细胞，由于它们的细胞核特性不同而在传导性参数上有所区别。
S代表激光散射（Scatter）测量技术，采用氦氖激光源发出的单色激光扫描每个细胞，收集细胞在10°～70°角度内出现的散射光 (MALS)信号。该激光束可穿透细胞，探测细胞内核分叶状况和胞浆中的颗粒情况，提供有关细胞颗粒性的信息，可以区分出颗粒特性不同的细胞群体。例如细胞内颗粒粗的要比颗粒细的散射光更强，因此可以用于区分粒细胞中的嗜中性、嗜酸性和嗜碱性三种细胞。 2. 电阻抗、射频与细胞化学联合检测技术
血细胞分析仪50年的发展历史和展望
中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院检验科张时民
1590 年荷兰人米德尔堡和詹森设计制造了最原始的显微镜（图1），1610 年伽利略使用望远镜观察小的物体并将其放大，后来被列文霍克改进成为原始的显微镜。1658 年意大利人马尔皮基应用最原始的显微镜首先观察到了红细胞，他是第一个见到红细胞的人，开始进行红细胞计数则是200 年后的事情了。而设计并生产出第一台血细胞计数仪则又过了近100 年。
自从发明了显微镜以后，人们从微观世界中了解和观察到了血液的组成，并根据他们的特点分别将它们称为红细胞和白细胞和血小板。在以后的研究中，人们发现许多疾病的发生和发展与血液中的细胞数量之间存在一定的关系。依据对疾病诊断的需求，人们开始寻求对血液中细胞的数量进行计数。1852 年就有人开始设计对红细胞的计数办法，1855 年发明了用于计数血细胞的计数板， 目前仍然使用的改良Neubauer 计数板就是应用最为广泛和持续时间最为长久的经典一种，虽然各种类型的血细胞计数仪已在广泛使用，但血细胞计数板法仍然是最为可靠和最为经典的计数技术，它不仅适用于血细胞计数， 还可用于其他细胞、动物血细胞、微小粒子及需要在显微镜下计数的各种样品，因此计数板仍然是检验工作者应该掌握的基本技能，是不应该忘记和放弃的手段。
随着对血细胞计数和分析需求的不断增加，对血细胞计数的方法进行改进，实现自动化、高速度、准确性、标准化和智能化的要求也越来越高，现代的血液细胞分析技术与50 年前的发明虽然有着本质上的相同或相似，但已经有了显著的飞跃。作者力图通过有限的资料对细胞计数和分析技术的发展进程进行回顾，并对最新的进展进行介绍和展望，期望对关注这一领域和从事血细胞分析工作的同行有所帮助。
一、血细胞计数仪的发展历史
谈到血细胞计数仪的发展史，在这个领域首开先河的人是1912 年出生在美国阿肯色州一个小城的人Wallance H. Coulter （图2a，b），他年青时对电子学非常感兴趣，最初是一位广播电台的电器工程师，后来做过X光机的销售员和维修工程师，在亚洲许多国家包括我国的上海工作过。1948 年他在芝加哥一家公司工作时，在一间地下室建立了自己的实验室，开始秘密的从事自己的实验，这项实验导致了一个重大的发明，他发现了微小粒子通过特殊的小孔时可产生电阻变化这一现象，并根据这种电阻变化特点将其应用于微小粒子的粒度测量和计数上。科技界为表彰他的发明，将其称为库尔特原理（Coulter principle ）。根据这个原理，Coulter 先生将其引入到血液细胞计数上，在1953 年获得美国发明专利，同年和他的兄弟约瑟夫（Joseph ）开创了自己的公司，并成功的设计和制造出了可以计数血细胞的专用仪器，然后开始了在这一领域的商业运作。这种仪器看起来非常原始和简单，好象一个示波器另加一些管道、电极和瓶瓶罐罐（ 图3） 。它的计数原理是根据血细胞的不良导电性和产生电阻抗原理来计数血液中的细胞，也就是电阻式血细胞计数原理，这种原理现在已经成为血细胞计数和分析中最为经典的原理。
