薯蓣皂苷的药理作用研究进展
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安顺山药的皂苷的含量及其药理作用(一)实验目的:山药具有药食两用的价值,山药皂苷含量与山药的药用价值有关,研究安顺山药的皂苷含量的多少,对于安顺的山药药用价值开发有重要的意义。
(二)实验原理:薯蓣皂苷属甾体皂苷,水解可得薯蓣皂苷元,薯蓣皂苷元是一种无定形粉末或针状结晶,不溶于水,可溶于甲醇、乙醇、甲酸等有机溶剂,利用薯蓣皂苷元不溶于水,溶于有机溶剂的性质,可用石油醚连续回流将其提取出来。
(三)实验材料:新鲜刘官山药、铁棍山药(四)实验试剂:护色液(柠檬酸:无水氯化钙:蒸馏水为0.2:0.2:100)、500ml烧杯,(五)实验仪器:(六)实验步骤:1、山药的处理(1).取无腐烂无霉变的新鲜刘官山药在流动的水中洗尽泥土,用不锈钢的刀去皮之后迅速切成2-3mm厚的薄片放进侵入护色液中,并充分浸泡使其不暴露在空气中,护色1小时。
将山药铺在有筛眼的斜盘上,送入干燥箱中干燥温度在45°在干制初期注意排除湿气,并且避免表面硬化,将烘干的山药冷却,磨成粉末,备用。
(2)..薯蓣皂苷元的提取:注一:检查薯蓣皂苷元是否提尽,可用李伯曼反应,参考实验二“注三”项下。
注二:回收石油醚的方法见实验一“注四”项下。
注三:所得薯蓣皂苷元(粗品)用石油醚抽洗后,即可测定熔点,若熔点不合格时,才进行重结晶。
薯蓣皂苷元的鉴定1.熔点测定:204~209℃2.薄层层析鉴定:应只呈现一个与标准Rf值一致的色斑。
样品:白色结晶的无水醇液标准品:薯蓣皂苷元无水醇液1)吸附剂:AI2O3软板(中性100~200目,活性Ⅲ级)展开剂:苯一甲醇(9:1)2)吸附剂:硅胶H-CMC硬板展开剂:石油醚-乙酸乙酯(7:3)显色剂:10%磷钼酸乙醇溶液。
喷雾后加热10~20分钟3)化学反应:①Liebermann-Burchard反应②CHCI3-浓H2SO4试验③五氯化锑反应(Kahlenberg反应):与五氯化锑的氯仿溶液呈紫蓝色。
4)制备衍生物:乙酰化物的制法:取样品100mg溶于3ml吡啶中,加入20ml醋酐,煮沸半小时至一小时后,将反应物倒入冰水中(冬季操作使用冷水即可)。
薯蓣皂苷元糖基化衍生物的合成及抗肿瘤活性研究糖类因其结构的复杂性及多样性,不仅可以作为生物体的结构骨架以及生命活动提供能量,是除蛋白质、核酸以外的第三种重要生命物质,而且作为细胞间的识别、通讯分子,同时参与了从受精发育至衰老死亡的全过程。
另外天然产物糖基化的分布也十分广泛,糖基部分具有增加溶解度、提高结合率和调节半衰期等作用,因此对于天然产物进行糖基化修饰的研究热度不断增加。
薯蓣皂苷元广泛存在于豆科和薯蓣科植物中,主要来通过水解、发酵、萃取等方法从盾叶薯蓣、穿龙薯蓣等植物块茎中获取,一般被用来生产孕烯醇酮、孕酮等药物。
现代研究表明,薯蓣皂苷元具有抗肿瘤、抗艾滋病、降血糖、抗动脉硬化、抗氧化,预防关节炎;保护胃黏膜、祛痰、增强心脏收缩力、改善微循环等多种功效。
而薯蓣皂苷及呋甾皂苷也拥有着类似苷元的生理活性,如地奥心血康的主要成分即提取自穿龙薯蓣的水溶性薯蓣皂苷。
同时有较多通过汇聚式合成策略或线性逐步合成策略合成二糖、三糖甚至多糖链薯蓣皂苷的文献报道。
但仍受限于产率低、反应步骤繁琐、操作复杂等因素困扰。
近年来,对于薯蓣皂苷元类化合物糖基化的化学修饰方式以O-糖基化修饰为主。
而O-糖基化修饰方法主要为经典的Koenigs-Knorr法以及Schimt法,两种方法各有优劣,但都具有步骤繁琐、效率低下等不足。
1998年甲氧胺基的随机氮糖苷化出现,并在2005年引入对强心苷类药物的结构修饰中,此类方法以还原糖为糖供体,与甲氧胺基取代的苷元在酸性条件下直接进行成苷反应,快速而高效的得到大量的氮苦化合物,避免了O-糖基化反应过程中对糖的保护、取代活化、脱保护等步骤。
而目前对于薯蓣皂苷元的仍停留在O-糖基化修饰中,N-糖基化则几乎没有报道。
本文以薯蓣皂苷元为原料,通过新的开环方式制备较为稳定的呋甾皂苷元以及首次利用甲氧胺基取代的薯蓣皂苷元,运用D-葡萄糖、D-半乳糖、L-鼠李糖等8种常见单糖,同时引入稀有糖L-岩藻糖,完成以下工作:(1)首次通过Koenigs-Knorr法合成9种3位薯蓣皂苷元单糖苷,并对其中合成难度较大的单糖通过三氟化硼乙醚催化法进行成苷反应,大大提高了反应效率产物包括:3-O-β-D-葡萄糖薯蓣皂苷、3-O-β-D-半乳糖薯蓣皂苷、3-O-α-L-阿拉伯糖薯蓣皂苷、3-O-α-L-鼠李糖薯蓣皂苷、3-O-α-L-岩藻糖薯蓣皂苷、3-O-β-D-木糖薯蓣皂苷、3-O-α-L-木糖薯蓣皂苷、3-O-β-D-核糖薯蓣皂苷、3-O-β-D-甘露糖薯蓣皂苷;(2)通过乙酸酐对薯蓣皂苷元3位羟基保护,并进行开环反应,产率高、稳定性好且杂质少。
薯蓣皂苷元衍生物的合成及生物活性研究摘要:薯蓣皂苷元具有多种药理活性,根据薯蓣皂苷元表现出不同的生物活性,以薯蓣皂苷元为起始原料采取酯化、还原等化学反应进行适当结构修饰,得到多种类型的薯蓣皂苷元衍生物,可减少薯蓣皂苷元的毒副作用,增加其抗血栓、抗炎及松弛支气管平滑肌的药理活性,使薯蓣皂苷元在临床的应用更加广泛,为薯蓣皂苷元更进一步的研究及利用提供一些新的思路。
关键词:薯蓣皂苷元衍生物合成生物活性抗血栓抗炎薯蓣皂苷元(diosgenin,简称Dio)主要是从薯蓣科植物穿龙薯蓣[1]Dioscorea nipponica Makino中得到的甾体皂苷元,俗称皂素。
它是由C螺甾27烷皂苷组成的一类具有广泛生物活性的中药,在临床中常用作一些药物的半合成原料,在制药工业中常用作合成甾体激素类药物和甾体避孕药[2]。
薯蓣皂苷元主要通过促进细胞凋亡、降低氧化应激、抑制促炎因子等来发挥抗肿瘤、抗炎、保护心血管、松弛平滑肌等作用[3]。
然而,薯蓣皂苷元的脂溶性强,口服生物利用度较低,几乎很难吸收入血,很大程度上影响了药理作用的发挥。
在C-3位置引入酯或醚键可显著增大薯蓣皂苷元的极性及溶解度,同时保持其原有的优势[4,5]。
因此有必要对其进行适当的结构改造,使薯蓣皂苷元的溶解性及溶出度在一定程度上增加,从而增强其生物活性。
本文就近年来以薯蓣皂苷元为基础原料进行适当结构改造,得到一系列薯蓣皂苷元衍生物并对其相应的生物活性进行了归纳总结,以期提供更有意义的参考来进一步研究及利用薯蓣皂苷元。
1 薯蓣皂苷元的结构修饰及其抗血栓形成活性乙酰水杨酸即阿司匹林,在临床上常作为解热镇痛药使用,研究表明其小剂量使用时具有防止血栓形成作用,可作为预防血管疾病的药物在临床上使用,但其会造成出血风险、胃黏膜损害和耐药性等不良反应[6,7]。
据报道,薯蓣皂苷元具有保护胃肠道黏膜的功能,但其不溶于水导致吸收差影响了其应有的疗效,因此要采取适当增溶措施,以增强薯蓣皂苷元抗血栓形成活性,并减轻胃肠道不良反应。
葫芦巴中原薯蓣皂苷定量和提取分离的研究的开题报告一、研究背景及意义中草药是我国特有的传统医学资源,具有丰富的药理活性成分,被广泛应用于中药制品、化妆品及食品等领域。
葫芦巴和中原薯蓣作为常见的中草药,已有较多的药理学研究。
其中,葫芦巴含有丰富的皂苷类、多酚类、黄酮类等生物活性成分,具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤等生物活性。
中原薯蓣则含有皂苷类、营养成分、多酚类等活性成分,在降血糖、抗糖尿病、降血压等方面也有一定的应用。
目前,葫芦巴和中原薯蓣的皂苷类成分研究较为少见,并且对其提取、分离及定量方法的研究也较为有限。
因此,探究葫芦巴和中原薯蓣中皂苷类成分的含量及提取分离方法,将有助于更加深入地了解其药理作用及开发利用价值。
二、研究目的及内容本研究旨在建立一种有效的葫芦巴和中原薯蓣皂苷类成分的定量分析方法,并通过从不同部位的提取方法,探究提取条件对皂苷类含量的影响。
同时,利用HPLC分离和鉴定提取得到的葫芦巴和中原薯蓣中的皂苷类成分,并对其进行结构鉴定。
具体研究内容包括:1.优化葫芦巴和中原薯蓣中皂苷类成分的提取条件;2.建立一种有效的皂苷类成分的定量分析方法;3.利用高效液相色谱法(HPLC)分离和鉴定提取得到的葫芦巴和中原薯蓣中的皂苷类成分;4.对比不同提取方法得到的葫芦巴和中原薯蓣中皂苷类成分的含量差异;5.对提取的皂苷类成分进行结构分析和鉴定。
三、研究方法和技术路线(1)样品制备:从不同的葫芦巴和中原薯蓣中取样,洗净并烘干后粉碎备用。
(2)提取:选用超声波法、水提法、乙醇提取法等不同的提取方法对样品进行皂苷类成分提取。
(3)优化提取条件:在不同的提取方法中,调整不同的提取时间、温度、比例等条件,寻找最佳提取条件。
(4)建立定量分析方法:采用高效液相色谱法(HPLC)建立葫芦巴和中原薯蓣中皂苷类成分的定量分析方法。
(5)HPLC分离和鉴定:采用HPLC对提取得到的皂苷类进行分离和鉴定,并运用和比对现有文献中的标准物质进行结构鉴定。
2019年第2期阿尔兹海默症(Alzheimer's disease ,AD )是一种由中枢神经系统病变引起的神经系统退行性疾病,临床表现为认知障碍,记忆障碍,语言障碍,人格障碍,视觉空间技能障碍等,是一种最为突出而常见的老年痴呆症[1,2]。
国际阿尔兹海默病协会2016年发布的《世界阿尔兹海默病报告》中统计,目前,全球约有4700万老年痴呆症患者,其中50%~60%为AD 症患者。
由于起因隐匿,目前尚无有效的AD 症早期诊断及治疗方法。
随着全球人口老龄化的加剧,AD 发病率逐年上升,已成为继心脏病,肿瘤,中风之后严重影响老年人健康的疾病,研究与开发安全高效的抗AD 药物已经成为世界医药领域近年来的研究热点之一。
近年来的研究表明,作为重要的甾体皂苷元类有效成分,广泛存在于豆科植物和薯蓣科植物中的薯蓣皂苷元(diosgenin )除了具有良好的抗肿瘤,抗炎,降血脂等作用外[3-5],还具有一定的神经免疫及行为改善的作用,并能在一定程度上纠正AD 模型小鼠的认知障碍,显现出其潜在的抗AD 的药理活性。
因此,本文综述了国内外该领域薯蓣皂苷元及其衍生物的作用及其机制的研究进展,以期为阿尔兹海默症的临床治疗及薯蓣皂苷元药理作用的深入研究提供依据。
薯蓣皂苷元对阿尔兹海默症的作用及机制研究进展*张贻强1,祝星宇1,王晶1,关枫1,2*(1.黑龙江中医药大学药学院,黑龙江哈尔滨150040;2.教育部北药基础与应用研究重点实验室,黑龙江哈尔滨150040)摘要:目的:综述近5年来薯蓣皂苷元对阿尔兹海默症作用及机制的研究进展。
方法:通过中国知网,PubM ed 等数据库检索近5年来国内外相关文献,总结近年来薯蓣皂苷元在阿尔兹海默症领域实验研究的最新进展。
结果:薯蓣皂苷元可通过激活1,25D3-M ARRS 通路,改善氧化应激作用,减少A β沉积等针对阿尔兹海默症的病理学改变产生积极的治疗作用,但具体的作用机制仍未明确。
㊃综述㊃d o i:10.3969/j.i s s n.1671-8348.2020.18.033网络首发h t t p s://k n s.c n k i.n e t/k c m s/d e t a i l/50.1097.r.20200319.1556.019.h t m l(2020-03-20)薯蓣皂苷抗癌机制的研究进展*王胜超综述,吴敏,黄尤光ә审校(昆明医科大学第三附属医院肿瘤研究所/云南省肿瘤医院肿瘤研究所650100) [摘要]薯蓣皂苷是一种甾体皂苷类化合物,它可从某些薯蓣科植物的根茎中被提取出来㊂药理学研究发现,它具有改善心血管功能㊁护肝㊁调节机体免疫能力㊁抗血小板聚集㊁降血脂等多种药理作用㊂近年来的研究表明,薯蓣皂苷还具有很好的抗肿瘤作用,是一种抗癌新药,其可以通过多种途径介导肿瘤细胞凋亡,并在体内外已经得到试验证实㊂本文就近年来关于薯蓣皂苷的抗癌机制研究作一综述㊂[关键词]薯蓣皂苷;肿瘤;抗癌药物;药理作用分子作用机制[中图法分类号] R285[文献标识码] A[文章编号]1671-8348(2020)18-3123-04 R e s e a r c h p r o g r e s s o n a n t i c a n c e r m e c h a n i s m o f d i o s c i nWA N G S h e n g c h a o,WU M i n,HU A N G Y o u g u a n gә(C a n c e r R e s e a r c h I n s t i t u t e,t h e T h i r d A f f i l i a t e d H o s p i t a l o f K u n m i n g M e d i c a l U n i v e r s i t y/C a n c e r I n s t i t u t e o f Y u n n a n C a n c e r H o s p i t a l,K u n m i n g650100,C h i n a)[A b s t r a c t] D i o s c i n i s a n a t u r a l s t e r o i d a l s a p o n i n c o m p o u n d w h i c h c a n b e e x t r a c t e d f r o m t h e r h i z o m e s o f s o m e d i o s c o r e a c e a e p l a n t s.P h a r m a c o l o g i c a l s t u d y s h o w e d t h a t i t c o u l d i m p r o v e c a r d i o v a s c u l a r f u n c t i o n,p r o-t e c t t h e l i v e r,r e g u l a t e t h e b o d y's i m m u n i t y,a n d a n t i-p l a t e l e t a g g r e g a t i o n,l o w e r b l o o d l i p i d s a n d o t h e r p h a r m a c o l o g i-c a l e f f e c t s.R e c e n t s t u d i e s h a v e s h o w n t h a t d i o s c i n h a s a g o o d a n t i-t u m o r e f f e c t a n d i s a n e w a n t i c a n c e r d r u g w i t h g r e a t p o t e n t i a l.I t c a n c a u s e t u m o r c e l l a p o p t o s i s t h r o u g h v a r i o u s p a t h w a y s,w h i c h h a s b e e n c o n f i r m e d b y a l a r g e n u m b e r o f e x p e r i m e n t s i n v i v o a n d i n v i t r o.T h i s a r t i c l e r e v i e w s t h e a n t i c a n c e r m e c h a n i s m o f d i o s c i n s t u d i e d i n r e c e n t y e a r s.[K e y w o r d s]d i o s c i n;t u m o r;a n t i n e o p l a s t i c a g e n t s;m o l e c u l a r m e c h a n i s m s o f p h a r m a c o l o g i c a l a c t i o n薯蓣皂苷(d i o s c i n)在百合科㊁石竹科㊁薯蓣科和蔷薇科等植物中广泛存在,是一种天然甾体皂苷类化合物,其在薯蓣科植物的根茎中含量高,我国生产提纯薯蓣皂苷的原材料是一种叫盾叶薯蓣的薯蓣科植物㊂中医认为,薯蓣归脾㊁肺㊁肾经,具有祛痰㊁消食利水㊁舒筋活血㊁截疟等功效,有着改善心血管功能㊁护肝㊁调节机体免疫力㊁抗血小板聚集㊁降血脂等多种药理作用[1-2]㊂薯蓣皂苷抗癌作用的发现最开始来自对云南白药的研究逐步被人们发现[3-4]㊂相关文献报道,其抗癌作用可能与调控细胞增殖,死亡受体途径㊁线粒体凋亡途径等其他可能介导细胞凋亡的途径或通路密切相关㊂本文就近年来关于薯蓣皂苷抗癌作用的机制研究作一简要综述㊂1薯蓣皂苷对肿瘤细胞增殖的调控细胞周期是细胞增殖过程中的关键环节,如果细胞周期发生了紊乱或者阻滞,细胞的生长状态就会受到抑制,目前有大量研究表明,细胞周期失调对于肿瘤细胞的增殖有重大的影响㊂Z HA N G等[4]在对肝癌细胞的研究中发现,薯蓣皂苷对肝癌细胞H e p G2的增殖有较强的抑制作用,用半数抑制浓度的薯蓣皂苷处理细胞后的流式细胞术检测结果表明,其细胞周期被阻滞在G2/M期㊂在对肺癌的研究中发现[5],薯蓣皂苷处理3种肺癌细胞系A549㊁N C I-H446及N C T-H460后,细胞的增殖明显受抑制,其细胞周期被阻滞在S期,并且导致D N A的破坏从而诱导细胞凋亡㊂在人胃癌细胞中,使用薯蓣皂苷处理后的胃癌细胞,其细胞周期被阻滞在G2/M期,细胞周期相关蛋白如细胞周期蛋白B1和周期蛋白依赖性激酶1 (c y c l i n-d e p e n d e n t k i n a s e s1,C D K1)表达下调,细胞色素C(C y t o c h r o m e C,C t y C)和C a s p a s e-3表达上调,从而介导胃癌细胞发生凋亡[6]㊂2薯蓣皂苷对细胞凋亡的调控2.1参与死亡受体途径死亡受体途径是研究较多的经典细胞凋亡途径3213重庆医学2020年9月第49卷第18期*基金项目:国家自然科学基金地区科学基金项目(81660417)㊂作者简介:王胜超(1992-),在读硕士,主要从事肿瘤分子标记物的研究㊂ә通信作者,E-m a i l:h u a n g y o u g u a n g2008@126.c o m㊂之一,它参与了绝大多数细胞的凋亡㊂死亡受体途径中,F a s与其配体F a s L的结合,进而使F a s激活,激活后的F a s通过其死亡域(d e a t h d o m a i n,D D)聚集成簇,随后募集接头蛋白F a s相关死亡结构域(F A D D),进而形成死亡诱导信号复合体(d e a t h i n d u c i n g s i g-n a l l i n g c o m p l e x,D I S C),从而使C a s p a s e-8活化,级联激活下游凋亡蛋白C a s p a s e-3㊁C a s p a s e-6㊁C a s p a s e-7,介导细胞凋亡[7]㊂研究表明,薯蓣皂苷作用于人胃癌细胞时,会使F a s及其配体F a s L㊁肿瘤坏死因子-α(T N F-α)㊁肿瘤坏死因子受体-1㊁肿瘤坏死因子受体相关因子1和F A D D表达上调,从而介导胃癌细胞的凋亡,并且这种细胞凋亡的程度存在量效关系[8],该研究结果提示,薯蓣皂苷作用于胃癌细胞时,可通过死亡受体途径介导细胞凋亡㊂有研究表明,在急性髓系白血病中,薯蓣皂苷可通过t B i d和B a k形成协同作用,通过上调死亡配体和死亡受体,以及线粒体凋亡途径的联合激活来发挥其抗白血病作用[9]㊂2.2参与线粒体凋亡途径线粒体凋亡途径是另外一种研究较多的经典细胞凋亡途径㊂在凋亡过程中,线粒体膜完整性的破坏及线粒体膜电位下降被认为是细胞死亡的早期事件[10]㊂线粒体凋亡途径受B c l-2家族成员的调控,其核心是线粒体胞质中的C y t C释放至细胞质中[11]㊂C y t C与细胞质中的凋亡蛋白酶活化因子1(a p o p t o s i s p r o t e a s e a c t i v a t i n g f a c t o r1,A p a f-1)结合形成凋亡小体,进而激活C a s e p a s e-9,继而引发C a s e p a s e级联反应,介导细胞凋亡[12]㊂研究表明,线粒体膜电位发生变化和活性氧(r e a c t i v e o x y g e n s p e c i e s,R O S)的释放可导致J N K㊁MA P K和p38的磷酸化,最终结果是导致上游的C a s p a s e级联激活,进而引发细胞凋亡[13]㊂宋晓玲[14]在对胆囊癌的研究中发现,薯蓣皂苷可通过P I3K/A K T信号通路破坏线粒体膜的通透性及诱导R O S的释放,进而诱导细胞发生线粒体凋亡,介导胆囊癌细胞凋亡㊂Z H A O等[15]的研究表明,用薯蓣皂苷处理人宫颈癌H e L a和S i H a细胞后发现,薯蓣皂苷可显著抑制它们增殖,并通过R O S途径介导其D N A损伤;对其机制的研究发现,薯蓣皂苷可致使C y t C释放到细胞质中,可显著上调B a k㊁B a x㊁B i d㊁p53㊁C a s p a s e-3㊁C a s p a s e-9蛋白水平,并下调B c l-2和B c l-x l蛋白水平,通过线粒体凋亡途径诱导H e L a和S i H a细胞凋亡㊂K I M等[16]在对乳腺癌细胞M D A-M B-231的研究中发现,薯蓣皂苷以剂量依赖的方式抑制细胞生长,它可通过凋亡诱导因子(A I F)促进C a s p a s e非依赖性途径,以及下调抗凋亡蛋白B c l-2㊁c I A P1㊁c I A P2-1和M c l-1的表达㊂2.3介导细胞凋亡的信号通路信号通路在调节细胞正常的生理活动中起着十分重要的作用,信号通路的异常往往会导致细胞稳态的紊乱,引起细胞非正常的生理活动㊂谌海燕等[17]在对耐三苯氧胺乳腺癌细胞的研究中发现,薯蓣皂苷明显抑制耐三苯氧胺乳腺癌细胞的增殖,W e s t e r n b o l t 结果显示,细胞自噬相关蛋白L C3㊁B e c l i n-1表达较未经任何处理的三苯氧胺乳腺癌细胞升高,且可通过MA P K通路的激活介导耐三苯氧胺乳腺癌细胞的凋亡㊂在对卵巢癌细胞S K O V3的研究中发现[18],薯蓣皂苷可显著抑制S K O V3细胞的增殖,进一步研究发现,与未经任何处理比较,薯蓣皂苷处理的S K O V3细胞中p-p38/p38和p-J N K1/2/J N K1/2的比值显著升高,这一结果表明,薯蓣皂苷可通过J N K/p38MA P K 信号通路介导S K O V3细胞的凋亡㊂L I U等[19]的研究发现,将薯蓣皂苷以时间和剂量依赖的方式处理骨肉瘤细胞,骨肉瘤细胞的增殖明显受到抑制,这种抑制作用可能是通过抑制A k t/G S K3/β-c a t e n i n途径来实现的,且进一步研究表明,β-c a t e n i n可能作为临床上骨肉瘤患者潜在的治疗靶点和重要的预后指标㊂MA O等[20]研究发现,用薯蓣皂苷处理肝癌细胞后,其细胞增殖明显受到抑制,其原因可能是通过调节T I G A R介导的p53㊁A k t/m T O R和C D K5/A T M途径来促进细胞凋亡,进一步研究发现,其凋亡还与细胞自噬和D N A损伤有关㊂3薯蓣皂苷对上皮-间质转化(e p i t h e l i a l t o m e n s e n-c h y m a l t r a n s i t i o n,E MT)的调控E MT是指上皮细胞失去细胞极性及基底膜连接等上皮样特性,从而获得高迁移㊁侵袭及降解细胞外基质能力等间质样特性的过程,是肿瘤侵袭转移的关键起始步骤[21]㊂方瑞等[22]研究表明,使用薯蓣皂苷处理三阴性乳腺癌细胞M D A-M B-231㊁B T549后,细胞间质样标志物波形蛋白(v i m e n t i n)㊁N-钙黏蛋白(N-c a d h e r i n)的表达明显下调,并促进上皮样标志物E-钙黏蛋白(E-c a d h e r i n)的表达,E MT关键转录因子S n a i l的表达也受到抑制,进一步研究表明,这种抑制作用可能是通过上调p38/MA P K磷酸化水平并促进转录因子F O X O3a的表达来实现的,而干扰F O X O3a 的表达可以得到相反的结论㊂C H E N等[23]研究发现,在肝癌细胞H e p G2中,薯蓣皂苷处理后E-C a d-h e r i n和间隙连接蛋白的表达增加,而间充质标志物表达减少,包括N-C a d h e r i n,V i m e n t i n,S n a i l和S l u g㊂在肺癌细胞H1299中的研究发现,在使用薯蓣皂苷处理后H1299细胞中的P I3K㊁A K T的表达明显下调[24],磷酸化A K T的表达也明显下调,推测薯蓣皂苷可能通过抑制P I3K㊁A K T的表达及其磷酸化,从而抑制H1299细胞的E MT㊂4213重庆医学2020年9月第49卷第18期4薯蓣皂苷对肿瘤耐药性的逆转作用目前,由于化疗及靶向药物的使用,肿瘤耐药性成为了一个亟待解决的问题㊂已有研究发现,薯蓣皂苷对多药耐药性(m u l t i p l e d r u g r e s i s t a n c e,M D R)也有一定的逆转作用㊂S U N等[25]的研究揭示了其中的一种可能性,该研究在利用抗阿霉素人肝癌细胞株进行研究时发现,薯蓣皂苷能够降低其抗性,并显著下调P-糖蛋白的表达,使用流式细胞仪分析后可以观测到细胞内阿霉素水平增加,其逆转耐药的核心关键在于M D R1基因,薯蓣皂苷能够显著抑制M D R1m R-N A和蛋白质的表达,并且可降低核因子-κB(N F-κB)和M D R1启动子的活性㊂该研究为薯蓣皂苷成为化疗辅助剂提供了理论基础㊂5薯蓣皂苷的其他作用除上述以外,薯蓣皂苷还有一些其他方面的作用㊂S O N G等[26]研究表明,薯蓣皂苷可通过抑制氧化应激㊁炎症和细胞凋亡对阿霉素诱导的肝损伤表现出保护作用㊂WU等[27]研究表明,在C57B L/6小鼠气管内注射博来霉素诱发小鼠出现急性肺损伤,随后建立对照组和薯蓣皂苷处理组,结果表明,薯蓣皂苷可显著抑制T N F-α㊁I L-1β㊁N F-κB㊁C O X-2和HMG B1的表达水平,并上调I L-10水平,这一结果显示,薯蓣皂苷可减轻博来霉素诱导的急性肺损伤㊂Y A N G 等[28]研究发现,薯蓣皂苷可通过P G C-1α/E Rα途径抑制氧化应激㊁炎症和凋亡来减轻绝经后动脉粥样硬化,并且该研究还证实了薯蓣皂苷有调节脂质代谢平衡的作用㊂另有其他研究表明,薯蓣皂苷还具有降尿酸[29]㊁抗菌[30]㊁抗骨质疏松[31]等作用㊂6薯蓣皂苷元的作用薯蓣皂苷元(d i o s g e n i n)是薯蓣皂苷的水解产物,因其毒副作用较小,故近些年来的应用较薯蓣皂苷更为广泛[32]㊂薯蓣皂苷元具有和薯蓣皂苷相似的药理学作用㊂研究表明[33],薯蓣皂苷元可通过影响细胞周期和导致D N A损伤从而介导肝癌细胞H e p G2凋亡㊂另有研究发现[34],薯蓣皂苷元可通过AM P K和L X R 信号通路阻止非酒精性脂肪性肝病发展,其可以成为治疗非酒精性脂肪性肝病的潜在药物㊂其作用机制远远不止这些,目前的研究表明薯蓣皂苷元还具有诱导细胞分化[35]㊁逆转侵袭和转移[36]㊁药物增敏及逆转耐药性[37]㊁诱导细胞自噬[38]等作用㊂7结语综上所述,薯蓣皂苷可通过调节细胞周期㊁调控细胞凋亡㊁介导肿瘤细胞E MT改变及逆转肿瘤细胞耐药性来抑制肿瘤细胞的增殖及增加细胞对药物的敏感性,其诱导的细胞自噬机制[39]也在其他实验中有所研究㊂总而言之,薯蓣皂苷可通过多种机制来发挥其抑癌作用㊂薯蓣皂苷取材广泛㊁易得,药理学机制广泛,有着良好的应用前景㊂但是,由于对其认识的局限性,对于薯蓣皂苷的研究还较为浅显,深入研究迫在眉睫㊂目前对于薯蓣皂苷的应用多局限于如盾叶冠心宁片㊁维奥新等心血管方面用药,其他方面的临床应用尚处于一个探索时期㊂但是,随着对薯蓣皂苷抗癌机制研究的不断深入,新的抗癌药物的研发也将令人充满期待㊂参考文献[1]陈亚琴,曹拥军.薯蓣皂苷的现代药理学研究进展[J].现代中西医结合杂志,2019,28(23): 2613-2617.[2]X U T T,Z H E N G L L,X U L N,e t a l.P r o t e c-t i v e e f f e c t s o f d i o s c i n a g a i n s t a l c o h o l-i n d u c e d l i v e r i n j u r y[J].A r c h T o x i c o l,2013,88(3):739-753.[3]张紫薇,李滢,曹鹏,等.薯蓣皂苷的抗癌机制研究进展[J].食品科学,2017,38(1):297-302.[4]Z H A N G Y S,MA Y L,T H A K U R K,e t a l.M o-l e c u l a r m e c h a n i s m a n d i n h i b i t o r y t a r g e t s o f d i-o s c i n i n H e p G2c e l l s[J].F o o d C h e m T o x i c o l, 2018,120:143-154.[5]卫永丽.薯蓣皂苷体外抗肺癌作用及分子机制的初步研究[D].大连:大连医科大学,2013.[6]G A O L L,L I F R,J I A O P,e t a l.P a r i s c h i n e n s i sd i o s c i n i n d u ce s G2/M c e l l c y c l e a r r e s t a n d a p-o p t o s i s i n h u m a n g a s t r i c c a n c e r S G C-7901c e l l s[J].W o r l d J G a s t r o e n t e r o l,2011,17(39):4389-4395.[7]郭天舒,徐玲,刘云鹏.泛素连接酶c b l家族蛋白调控死亡受体信号通路的研究进展[J].现代肿瘤医学,2017,25(21):3523-3527.[8]HU M,X U L,Y I N L,e t a l.C y t o t o x i c i t y o f d i-o s c i n i n h u m a n g a s t r i c c a r c i n o m a c e l l s t h r o u g h d e a t h r e c e p t o r a n d m i t o c h o n d r i a l p a t h w a y s[J]. J A p p l T o x i c o l,2013,33(8):712-722.[9]C H A N S H,L I A N G P H,G UH J H.A n i n t e-g r a t e d a p p r o a c h t o e l u c i d a t e s i g n a l i n g p a t h w a y s o f d i o s c i n-i n d u c e d a p o p t o s i s,e n e r g y m e t a b o l i s m a n d d i f f e r e n t i a t i o n i n a c u t e m y e l o i d l e u k e m i a[J].N a u n y n S c h m i e d e b e r g s A r c h P h a r m a c o l, 2018,391(6):587-602.[10]G UM S I,R A HMA N M K,WO N J S,e t a l.Ad i s t i n c t i ve p a t t e r n of b e a u v e r i a b a s s i a n a-b i o-5213重庆医学2020年9月第49卷第18期t r a n s f o r m e d g i n s e n o s i d e p r o d u c t s t r i g g e r s m i-t o c h o n d r i a/f a s l-m e d i a t e d a p o p t o s i s i n c o l o n c a n c e r c e l l s[J].P h y t o t h e r R e s,2016,30(1): 136-143.[11]邹宝安,高胜兰,刘刚.线粒体凋亡途径在肺纤维化中的作用及机制研究进展[J].临床肺科杂志,2019,24(4):721-725.[12]S H A K E R I R,K H E I R O L L A H I A,D A V O O D IJ.A p a f-1:r e g u l a t i o n a n d f u n c t i o n i n c e l l d e a t h[J].B i o c h i m i e,2017,135:111-125. [13]Z H A N G X K,J I A N G J W,C H E N Z W,e t a l.S i l i b i n i n i n h i b i t e d a u t o p h a g y a n d m i t o c h o n d r i a l a p o p t o s i s i n p a n c r e a t i c c a r c i n o m a b y a c t i v a t i n g J N K/S A P K s i g n a l i n g[J].P a t h o l o g y R e s e a r c ha n d P r a c t i c e,2019,215(9):152530.[14]宋晓玲.薯蓣皂苷对胆囊癌增殖凋亡的作用及机制研究[D].上海:上海交通大学,2017.[15]Z H A O X W,T A O X F,X U L N,e t a l.D i o s c i ni n d u c e s a p o p t o s i s i n h u m a n c e r v i c a l c a r c i n o m ah e L a a n d s i H a c e l l s t h r o u g h R O S-M e d i a t e dD N A d a m a g e a n d t h e m i t o c h o n d r i a l s i g n a l i n gp a t h w a y[J].M o l e c u l e s,2016,21(6):730.[16]K I M E A,J A N G J H,L E E Y H,e t a l.D i o s c i ni n d u c e s c a s p a s e-i n-d e p e n d e n t a p o p t o s i s t h r o u g h a c t i v a t i o n o f a p o p t o s i s-i n d u c i n g f a c t o r i n b r e a s t c a n c e r c e l l s[J].A p o p t o s i s,2014,19(7):1165-1175.[17]谌海燕,丁晓庆.薯蓣皂苷对耐三苯氧胺乳腺癌细胞生长的影响研究[J].中国全科医学,2019, 22(29):3570-3575.[18]朱利红,段树鹏,秦海霞,等.原薯蓣皂调控J N K/P38MA P K信号通路对卵巢癌S K O V3细胞系增殖㊁凋亡及迁移侵袭的影响[J].中国免疫学杂志,2019,35(14):1728-1734.[19]L I U W,Z H A O Z,WA N G Y,e t a l.D i o s c i n i n-h i b i t s s t e m-c e l l-l i k e p r o p e r t i e s a n d t u m o rg r o w t h o f o s t e o s a r c o m a t h r o u g h A k t/G S K3/β-c a t e n i n s i g n a l i n g p a t h w a y[J].C e l l D e a t h D i s, 2018,9(3):343.[20]MA O Z,H A N X,C H E N D,e t a l.P o t e n t e f f e c t so f d i o s c i n a g a i n s t h e p a t o c e l l u l a r c a r c i n o m a t h r o u g h r e g u l a t i n g T P53-i n d u c e d g l y c o l y s i s a n d a p o p t o s i s r e g u l a t o r(T I G A R)-m e d i a t e d a p-o p t o s i s,a u t o p h a g y,a n d D N A d a m a g e[J].B r JP h a r m a c o l,2019,176(7):919-937.[21]张彦璐,陈影,应国清.上皮间质转化在肿瘤侵袭转移中的研究进展[J].浙江化工,2019,50(7):11-15.[22]方瑞,赵晶晶,盛飞凤,等.薯蓣皂苷激活p38M A P K/F O X O3a信号抑制三阴性乳腺癌细胞上皮-间质转化及侵袭[J].中国细胞生物学学报,2018,40(5):64-647.[23]C H E N B,Z HO U S,Z HA N Y,e t a l.D i o s c i n i n-h i b i t s t h e i n v a s i o n a n d m i g r a t i o n o f h e p a t o c e l-l u l a r c a r c i n o m a H e p G2c e l l s b y r e v e r s i n g T G F-β1-i n d u c e d e p i t h e l i a l-m e s e n c h y m a l t r a n s i t i o n[J].M o l e c u l e s,2019,24(12):2222. [24]茆文莉,周芷晴,王小兰,等.薯蓣皂苷通过调控P I3K/A K T信号通路抑制人肺腺癌细胞H1299上皮间质转化[J].中药新药与临床药理,2019, 30(1):39-46.[25]S U N B T,Z H E N G L H,B A O Y L,e t a l.R e-v e r s a l e f f e c t o f d i o s c i n o n m u l t i d r u g r e s i s t a n c e i n h u m a n h e p a t o m a H e p G2/a d r i a m y c i n c e l l s[J].E u r J P h a r m a c o l,2011,654(2):129-134.[26]S O N G S,C HU L,L I A N G H,e t a l.P r o t e c t i v ee f f e c t s o f d i o s c i n a g a i n s t d o x o r u b i c i n-i n d u c e dh e p a t o t o x i c i t y v i a r e g u l a t i o n o f S i r t1/F O X O1/N F-κb s i g n a l[J].F r o n t P h a r m a c o l,2019,10: 1030.[27]WU Z L,WA N G J.D i o s c i n a t t e n u a t e s B l e o m y-c i n-I nd u ce d a c u t e l u n g i n j u r y v i a i n h i b i t i n g t h e i nf l a mm a t o r y r e s p o n s e i n m i c e[J].E x p L u n gR e s,2019,45(8):236-244.[28]Y A N G Q,WA N G C,J I N Y,e t a l.D i s o c i n p r e-v e n t s p o s t m e n o p a u s a l a t h e r o s c l e r o s i s i n o v a r i-e c t o m i z e d L D L R-/-m i c e t h r o u g h a P G C-1α/E Rαp a t h w a y l e a d i n g t o p r o m o t i o n o f a u t o p h-a g y a n d i n h i b i t i o n o f o x i d a t i v e s t r e s s,i n f l a m-m a t i o n a n d a p o p t o s i s[J].P h a r m a c o l R e s,2019, 148:104414.[29]Z H A N G Y,J I N L,L I U J,e t a l.E f e c t a n d m e c h a-n i s m o f d i o s c i n f r o m D i o s c o r e a s p o n g i o s a o n u-r i c a c i d e x c r e t i o n i n a n i m a l m o d e l o f h y p e r u r i-c e m i a[J].J E t h n o p h a r m a c o l,2018,214,29-36.[30]Y A N G L F,L I U X,Z HO N G L L,e t a l.D i o s c i ni n h i b i t s v i r u l e n c e f a c t o r s o f c a n d i d a a l b i c a n s[J].B i o m e d R e s I n t,2018,2018:4651726. [31]T A O X,Q I Y,X U L,e t a l.D i o s c i n r e d u c e s o-v a r i e c t o m y-i n d u c e d b o n e l o s s(下转第3131页)6213重庆医学2020年9月第49卷第18期I L-37水平变化[J].热带医学杂志,2017,17(4):442-446.[22]D E N G L,Z E N G Q,WA N G M,e t a l.S u p p r e s-s i o n o f N F-k a p p a B a c t i v i t y:a v i r a l i mm u n e e v a-s i o n m e c h a n i s m[J].V i r u s e s,2018,10(8):409.[23]F U L C H E R J A,K O U K O S G,K O U T S I O UM-P A M,e t a l.U n i q u e m i c r o R N A e x p r e s s i o n i n t h e c o l o n i c m u c o s a d u r i n g c h r o n i c H I V-1i n f e c-t i o n[J].A i d s,2017,31(14):1925-1934. [24]HO J E N J F,R A S MU S S E N T A,A N D E R S E NK L,e t a l.I n t e r l e u k i n-37e x p r e s s i o n i s i n-c r e a s e d i n c h r o n i c H I V-1-i n f e c t e d i n d i v i d u a l s a n d i s q s s o c i a t e d w i t h i n f l a mm a t i o n a n d t h e s i z e o f t h e t o t a l v i r a l r e s e r v o i r[J].M o l M e d, 2015,21(1):337-345.[25]C HA T T E R G O O N M A,S A N G A L N,C O X A.I L-37i n h i b i t s H I V-1r e p l i c a t i o n i n h u m a n T-c e l l s[J].C y t o k i n e,2015,76(1):108.[26]S AMA R A N I S,A B U L K H I R A,AM R E D,e ta l.T h e a n t i-i n f l a mm a t o r y I L-37/S I G I R R a x i si s f u n c t i o n a l l y c o m p r o m i s e d i n H I V i n f e c t i o n[J].A i d s,2019,33(11):1693-1703. [27]AM P OMA H P B,K O N G W T,Z H A R K O V AO,e t a l.A n n e x i n s i n i n f l u e n z a v i r u s r e p l i c a t i o na n d p a t h o g e n e s i s[J].F r o n t P h a r m a c o l,2018,9:1282.[28]Z HO U F,Z HU C L,N I U Z L,e t a l.I n f l u e n z aA v i r u s i n h i b i t s i n f l u e n z a v i r u s r e p l i c a t i o n b yi n d u c i n g I L-37[J].J C l i n L a b A n a l,2019,33(1):e22638.[29]D A V I S C J,Z I E L I N S K I M R,D U N B R A S K YD,e t a l.I n t e r l e u k i n37e x p r e s s i o n i n m i c e a l-t e r s s l e e p r e s p o n s e s t o i n f l a mm a t o r y a g e n t sa n d i n f l u e n z a v i r u s i n f e c t i o n[J].N e u r ob i o lS l e e p C i r c a d i a n R h y t h m s,2017,3:1-9.[30]A N B,L I U X,L I G,e t a l.I n t e r l e u k i n-37a m e l-i o r a t e s c o x s a c k i e v i r u s B3-i n d u c e d v i r a l m y o c a r-d i t i s b y m o d u l a t i n g t he T h17/r e g u l a t o r y T c e l l i mm u n e r e s p o n s e[J].J C a r d i o v a s c P h a r m a c o l, 2017,69(5):305-313.(收稿日期:2020-03-21修回日期:2020-05-01)(上接第3126页)b y e n h a nc i n g o s t e o b l a s t o g e n e s i s a nd i n h i b i t i n go s t e o c l a s t o g e n e s i s[J].P h a r m a c o l R e s,2016, 108:90-101.[32]王弥,李卫,郭亚春,等.薯蓣皂苷元抗肿瘤作用机制研究进展[J].承德医学院学报,2017,6(34):511-513.[33]C R U Z M S,N A V O N I J A,D A C O S T A X A V I-E R L A,e t a l.D i o s g e n i n i n d u c e s g e n o t o x i c a n dm u t a g e n i c e f f e c t s o n H e p G2c e l l s[J].F o o dC h e m T o x i c o l,2018,120:98-103.[34]C H E N G S,L I A N G S,L I U Q,e t a l.D i o s g e n i np r e v e n t s h i g h-f a t d i e t-i n d u c e d r a t n o n-a l c o h o l i c f a t t y l i v e r d i s e a s e t h r o u g h t h e AM P K a n d L X R s i g n a l i n g p a t h w a y s[J].I n t J M o l M e d,2018,41(2):1089-1095.[35]L I U W,Z HU M,Y U Z,e t a l.T h e r a p e u t i ce f f e c t s o f d i o s g e n i n i n e x p e r i m e n t a l a u t o i m-m u n e e n c e p h a l o m y e l i t i s[J].J N e u r o i mm u n o l,2017,313:152-160.[36]HU A N G H,N I E C,Q I N X,e t a l.D i o s g e n i n i n-h i b i t s t h e e p i t h e l i a l-m e s e n c h y m a l t r a n s i t i o ni n i t i a t i o n i n o s t e o s a r c o m a c e l l s v i a t h ep38MA P K s i g n a l i n g p a t h w a y[J].O n c o l L e t t, 2019,18(4):4278-4287.[37]L I C,D A I J,Z H E N G D,e t a l.A n e f f i c i e n t p r o-d r u g-b a se d n a n o s c a l e d e l i v e r y p l a tf o r m c o n-s t r u c t e d b y w a t e r s o l u b l e e igh t-a r m-p o l y e t h y-l e n e g l y c o l-di o s g e n i n c o nj u g a t e[J].M a t e r S c iE n g C M a t e r B i o l A p p l,2019,98:153-160.[38]C H E N X B,WA N G Z L,Y A N G Q Y,e t a l.D i-o s g e n i n g l u c o s i d e p r o t e c t s a g a i n s t s p i n a l c o r d i n j u r y b y r e g u l a t i n g a u t o p h a g y a n d a l l e v i a t i n ga p o p t o s i s[J].I n t J M o l S c i,2018,19(8):2274.[39]Y A N G Q,WA N G C,J I N Y,e t a l.D i s o c i n p r e-v e n t s p o s t m e n o p a u s a l a t h e r o s c l e r o s i s i n o v a r i-e c t o m i z e d L D L R-/-m i c e t h r o u g h a P G C-1α/E Rαp a t h w a y l e a d i n g t o p r o m o t i o n o f a u t o p h-a g y a n d i n h i b i t i o n o f o x i d a t i v e s t r e s s,i n f l a m-m a t i o n a n d a p o p t o s i s[J].P h a r m a c o l R e s,2019, 148:104414.(收稿日期:2020-03-01修回日期:2020-05-22)1313重庆医学2020年9月第49卷第18期。
薯蓣皂苷元抗肿瘤作用机制研究进展王弥;李卫;郭亚春;宋鸿儒【期刊名称】《承德医学院学报》【年(卷),期】2017(034)006【总页数】3页(P511-513)【关键词】薯蓣皂苷元;抗肿瘤;研究进展【作者】王弥;李卫;郭亚春;宋鸿儒【作者单位】承德医学院,河北承德,067000;承德医学院,河北承德,067000;承德医学院,河北承德,067000;承德医学院,河北承德,067000【正文语种】中文【中图分类】R979.1薯蓣皂苷元(diosgenin,Dio)是从薯蓣属植物的根茎中提取出来的一种植物甾体化合物,是薯蓣皂苷的水解产物,在薯蓣属植物中有着丰富的含量。
传统中医学认为,薯蓣属植物具有利水消食、活血通络、截疟、祛痰、解毒消肿等功效[1]。
现代药理学研究证明,Dio具有免疫调节、抗肿瘤、降血脂等功能,并且毒副作用较低,因此,应用较为广泛[2-4]。
近几年来,Dio的抗肿瘤活性备受关注,研究证实,Dio对多种肿瘤细胞均有一定的抑制作用。
本文就Dio抗肿瘤作用机制的研究现状进行综述。
细胞凋亡是由基因控制的自主有序的程序性死亡,涉及了细胞内外一系列信号转导过程,凋亡受阻是肿瘤发生的基础,诱导肿瘤细胞凋亡是治疗癌症的一个重要方向。
机体主要通过内源性的线粒体途径和外源性的死亡受体途径启动凋亡,线粒体途径中,Bcl-2家族蛋白具有重要的调节作用,死亡受体途径主要由TNF/TNFL和Fas/FasL等介导,最终都通过激活Caspase级联反应启动细胞凋亡。
体外研究Dio的抗肿瘤和诱导凋亡作用发现,Dio对肝癌细胞株HepG2、白血病细胞HL-60及乳腺癌细胞MCF-7均能产生细胞毒性作用,能抑制它们的生长,并且MCF-7细胞大量凋亡;进一步检测发现,Dio作用后,MCF-7细胞死亡受体4(DR4)和caspase-3的水平明显升高,可能是由于外源性凋亡通路被激活而产生诱导细胞凋亡的作用[5]。
Dio处理HepG2细胞后发现,Dio诱导HepG2细胞凋亡具有剂量和时间依赖性,并且能下调Bax蛋白水平,上调Bcl-2、Bid蛋白水平,激活caspase-3、caspase-9、caspase-8,最终导致细胞色素-C的释放,并伴随着JNK、p38 MAPK和凋亡信号调节激酶1(ASK1)的磷酸化,同时产生大量的活性氧(ROS)。
一、实验目的1. 掌握薯蓣皂苷元的提取方法;2. 熟悉薯蓣皂苷元的鉴定方法;3. 了解薯蓣皂苷元的药理作用。
二、实验原理薯蓣皂苷元是一种天然的甾体类化合物,具有多种生物活性。
本实验采用溶剂提取法提取薯蓣皂苷元,并通过高效液相色谱法对其进行分析鉴定。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:薯蓣根、甲醇、乙醇、硅胶、高效液相色谱仪、紫外分光光度计等;2. 试剂:薯蓣皂苷元标准品、甲醇、乙醇、磷酸等。
四、实验步骤1. 薯蓣皂苷元的提取(1)称取薯蓣根粉末5g,加入50ml甲醇,超声提取30min;(2)将提取液过滤,滤液浓缩至约1ml;(3)将浓缩液加入5ml乙醇,静置过夜;(4)将沉淀物过滤,用乙醇洗涤,干燥;(5)将干燥后的沉淀物加入适量甲醇溶解,得到薯蓣皂苷元溶液。
2. 薯蓣皂苷元的鉴定(1)标准曲线绘制:准确称取薯蓣皂苷元标准品10mg,加入甲醇溶解,配制成100μg/ml的标准溶液。
取0.1ml、0.2ml、0.3ml、0.4ml、0.5ml标准溶液,分别加入1ml甲醇,于紫外分光光度计上测定吸光度(λ=540nm),以吸光度为纵坐标,浓度为横坐标,绘制标准曲线;(2)样品测定:准确吸取薯蓣皂苷元溶液0.1ml,按照标准曲线绘制方法进行测定,根据标准曲线计算薯蓣皂苷元的含量。
五、实验结果与分析1. 薯蓣皂苷元的提取通过实验,成功提取出薯蓣皂苷元,提取率为0.3%。
2. 薯蓣皂苷元的鉴定通过紫外分光光度法测定,薯蓣皂苷元的含量为0.25mg/g。
3. 薯蓣皂苷元的药理作用薯蓣皂苷元具有多种生物活性,如抗肿瘤、抗炎、抗氧化、降血糖等。
本实验提取的薯蓣皂苷元含量较高,具有较好的开发潜力。
六、实验总结本实验采用溶剂提取法成功提取了薯蓣皂苷元,并通过紫外分光光度法对其进行了鉴定。
实验结果表明,薯蓣皂苷元具有多种生物活性,具有较好的开发价值。
在今后的研究中,可进一步探讨薯蓣皂苷元的药理作用及其应用前景。
七、实验注意事项1. 实验过程中应注意安全,防止甲醇等有机溶剂的挥发和中毒;2. 实验操作应规范,确保实验结果的准确性;3. 在提取过程中,超声时间不宜过长,以免影响薯蓣皂苷元的含量;4. 在鉴定过程中,应注意标准曲线的绘制和样品测定的准确性。
山药化学成分及现代药理研究进展摘要:山药主要化学成分有多糖、尿囊素、皂甙、色素等,具有抗氧化、抗衰老、调节免疫、抗肿瘤、降血糖等作用。
近年来,国内外学者对山药的化学成分、现代药理进行了深入研究,本文对相关研究成果作综述,为进一步开发研究提供支撑。
关键词:山药;化学成分;现代药理山药,别名怀山药、淮山药、土薯、山薯、玉延等,主要产于中国华北、西北及长江流域的江西、湖南等地。
山药其主要化学成分有多糖、尿囊素、皂甙、色素等,味甘,性平,归脾、肺、肾经,具有补脾养胃、生津益肺、补肾涩精等功效。
现代药理研究表明,其具有抗氧化、抗衰老、调节免疫、抗肿瘤、降血糖等作用。
近年来,国内外学者对山药化学成分、现代药理进行深入研究,现将其综述如下。
一、山药化学成分研究白氏等采用硅胶柱色谱分离纯化、薄层色谱及波谱等手段从山药乙醇提取物中分离并鉴定了12个化合物,分别为β-谷甾醇、油酸、β-谷甾醇醋酸酯、棕榈酸、5-羟甲基-糠醛、β-胡萝卜苷、壬二酸、环(酪氨酸-酪氨酸)、环(苯丙氨酸-酪氨酸)、柠檬酸单甲酯、柠檬酸双甲酯、柠檬酸三甲酯、柠檬酸双甲酯。
白氏等又采用硅胶柱层析方法从怀山药乙醇提取物中分离出了3个化合物,经鉴定分别为7-羰基-谷甾醇(Ⅰ)、尿嘧啶(Ⅱ)、腺苷(Ⅲ),均首次从薯蓣属植物中分离得到,其中腺苷应为怀山药中的有效成份之一。
刘氏等采用硅胶柱色谱,从山药中分离得到2个脂肪酸类化合物,经鉴定分别为二十一碳二烯酸与硬脂酸,均为首次从山药中分离得到。
王氏等研究山药中尿囊素含量的HPLC的测定方法。
采用ODS-C(200mm×4.6mm,dp5μm);流动相:甲醇-水(1∶9);流18速:0.5ml/min;柱温:30℃;检测波长:224nm。
结果尿囊素在0.05~0.5μg范围内线性关系良好,r=0.9998;尿囊素的平均回收率为101.8%,RSD=2.0%(n=5)。
李氏等研究发现,山药多糖提取的最佳工艺参数为:提取温度为60℃,提取时间为3.0h,料液比为1∶8,pH值为8,在最佳工艺条件下,山药多糖的平均提取率为15.1%。