昆布多糖的研究进展
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昆布多糖及其制备方法和应用发明专利
昆布多糖及其制备方法和应用技术领域本发明涉及药物技术领域，特别涉及昆布多糖及其制备方法和应用。
背景技术昆布(Ecklonia kurome)，亦称“黑菜”、“鹅掌菜”、“五掌菜”等。
属于海带科植物，海带或翅藻科植物黑昆布的叶状体。
孢子体大型，褐色、革质，高30-100cm，分叶片、柄部、固着器、固着器假根状。
假根两叉式分支，柄部圆柱状，近叶片部渐扁平，叶片两侧羽状或复羽状分支，中部稍厚，居间生长，长1-12cm，粗3-7mm，粗锯齿叶缘。
游动孢子生于叶片两面，有明显的不等世代交替。
生长于温带海洋中，主治瘿瘤，瘰疬，睾丸肿痛，痰饮水肿。
发明内容本发明提供了一种昆布多糖及其制备方法和应用。
一种昆布多糖，以摩尔百分比计，所述昆布多糖的单糖组成为甘露糖醛酸89.3％和古洛糖醛酸10.7％。
在其中一实施例中，所述昆布多糖包含第一单元、第二单元和第三单元，所述第一单元和所述第二单元之间形成醚键，所述第二单元和所述第三单元之间形成醚键；其中，所述第一单元为(G-G) a，所述第二单元为(G-M) b，所述第三单元为(M-M) c，其中，G表示古洛糖醛酸，M表示甘露糖醛酸，a、b和c为大于或等于1的整数。
在其中一实施例中，a和b各自独立地为1、2、3或4；c为5、6、7、8或9。
在其中一实施例中，所述昆布多糖具有以下结构：在其中一实施例中，所述昆布多糖的分子量范围在20-30kDa之间，优选为27.9kDa。
在其中一实施例中，所述昆布多糖的红外光谱图在以下波长处具有伸缩振动峰：3453.88cm -1±0.2cm -1、2935.13cm -1±0.2cm -1、1616.06cm -1±0.2cm -1、1417.42cm -1±0.2cm -1、1035.59cm -1±0.2cm -1、956.52cm -1±0.2cm -1、890.95cm -1±0.2cm -1、821.53cm -1±0.2cm -1、792.12cm -1±0.2cm -1；或所述昆布多糖的1H NMR谱图在以下位置具有峰：5.12ppm±0.02ppm、4.04ppm±0.02ppm、 3.95ppm±0.02ppm、 4.29ppm±0.02ppm、4.53ppm±0.02ppm\3.87ppm±0.02ppm、3.93ppm±0.02ppm、3.83ppm±0.02ppm、4.10ppm±0.02ppm、4.73ppm±0.02ppm；和/或所述昆布多糖的13C NMR谱图在以下位置具有峰：102.45ppm±0.2ppm、65.87ppm±0.2ppm、78.46ppm±0.2ppm、81.2ppm±0.2ppm、68.57ppm±0.2ppm、176.58ppm±0.2ppm、101.22ppm±0.2ppm、71.12ppm±0.2ppm、72.55ppm±0.2ppm、79.06ppm±0.2ppm、76.69ppm±0.2ppm、175.96ppm±0.2ppm。
药物作业上传
海洋药物学论文海洋药物之昆布——昆布多糖摘要：昆布是我国传统的海洋中药材，其药理在很大程度上与其所含多糖有关。
本文介绍昆布多糖的3种主要成分的理化性质，提取工艺，药理作用：抗肿瘤、抗凝血、调血脂、降血糖、抗辐射、抗氧化等。
关键词：昆布多糖药理作用理化性质提取工艺昆布为褐藻门、海带目、翅藻科昆布属植物黑昆布(E cklonia kurome Okam)的干燥叶状体,其味苦、性寒, 具有软坚散结、消痰、利水之功效，为我国传统的海洋中药材。
1. 化学成分现代研究发现4昆布中主要成分为多糖、天然蛋白质、脂肪、纤维素、矿物质和核酸等，另含有不同比例的半乳糖、木糖、葡萄糖醛酸。
昆布药理作用在很大程度上与其多糖有成分关。
目前认为，昆布多糖主要有以下3种类型：褐藻胶(又称褐藻酸钠,在海带中含量约为19 . 7 % )、褐藻淀粉(又称昆布多糖、海藻硫酸多糖、褐藻多糖, 在海带中含量约为1 % )、褐藻糖胶(又称岩藻糖胶, 主要成分为岩藻多糖,又称岩藻聚糖) 。
多糖昆布中还含有少量的木糖、半乳糖、葡萄糖醛酸和蛋白质。
2. 昆布多糖的理化性质2.1 昆布多糖的物理性质。
研究表明：粗多糖干品为黄褐色块状固体, 有海腥味。
经H2O2 脱色后冻干得到白色纤维状固体, 可溶于水,易溶于热水, 难溶于酸碱, 不溶于高浓度乙醇、甲醇、丙酮等有机溶剂, 无挥发性, p H 值为 6 . 5 , 比旋光度为[α]D20= -1. 25(c= 0 .80 ,H2O )。
2.2昆布多糖的化学性质。
研究表明：Molish反应呈阳性,有紫色环产生,苯酚硫酸反应呈阳性,Fehling 试剂反应水解前呈阴性, 加酸水解后呈阳性, 说明粗多糖中存在还原糖; 咔唑-硫酸反应呈玫瑰红,说明含有糖醛酸; 碘- 碘化钾反应呈阴性, 说明不含有淀粉多糖。
以葡萄糖为标准糖测得粗多糖中总糖含量为66 . 58 % ,由海藻粉中提取多糖得率为18 . 31%。
3. 药理作用3.1 对甲状腺的作用昆布内含有丰富的碘。
昆布多糖生物活性研究进展
1 免疫调节功能
昆布多糖无论对于特异性免疫还 是非特异性免疫均具有重要调节作用， 可用于机体免疫增强剂的开发和利用。
王 庭 欣 等 选 用 迟 发 性 变 态 反 应、 脾脏抗体生成细胞数、巨噬细胞吞噬 功能等试验，从细胞免疫、体液免疫、 非特异性免疫等多个方面研究海带多 糖的免疫功能，发现海带多糖能明显 提高巨噬细胞吞噬功能、增强小鼠的 体液免疫、显著提高小鼠的细胞免疫 力 [2]。林建斌等研究发现添加 0.6% 海 带多糖的试验组珍珠龙胆石斑鱼免疫 活性（碱性磷酸酶、溶菌酶、总超氧 化物歧化酶）比对照组均有显著提高， 说明海带多糖能显著增强珍珠龙胆石 斑的机体免疫力 [3]。
多种生物活性。
6 结语
随 着 海 洋 资 源 的 不 断 开 发， 作 为
（下转 144 页）
142 食品安全导刊 2019年3月 Copyright©博看网 . All Rights Reserved.
Technology 科技 食品技术研究
灭菌应在不损害培养有效成分的条件 下确保灭菌效果，一般采用 121 ℃灭 菌 15 ～ 20 min。配制好的培养基应 按说明书规定的条件进行灭菌。为验 证灭菌效果，每次灭菌时需用嗜热芽 孢杆菌等生物监测管或压力蒸汽灭菌 化学指示卡对灭菌效果进行监测。须 指出的是，有些培养基无需经过高压 灭菌，如 VRBA、BS、SC 等，只需加 热煮沸溶解即可，过度加热会降低其 选择性。
强还原型 GSH 的抗氧化能力来实现对
超重微波过氧化损伤的防护 。 [14]
昆 布 多 糖 具 有 优 异 的 抗 氧 化、 抗
辐射功效，可为抗氧化剂和辐射防护
剂的制备和研发提供思路。
5 其他作用
研 究 还 发 现， 昆 布 多 糖 还 具 有 抗
昆布多糖无论对于特异性免疫还 是非特异性免疫均具有重要调节作用， 可用于机体免疫增强剂的开发和利用。
王 庭 欣 等 选 用 迟 发 性 变 态 反 应、 脾脏抗体生成细胞数、巨噬细胞吞噬 功能等试验，从细胞免疫、体液免疫、 非特异性免疫等多个方面研究海带多 糖的免疫功能，发现海带多糖能明显 提高巨噬细胞吞噬功能、增强小鼠的 体液免疫、显著提高小鼠的细胞免疫 力 [2]。林建斌等研究发现添加 0.6% 海 带多糖的试验组珍珠龙胆石斑鱼免疫 活性（碱性磷酸酶、溶菌酶、总超氧 化物歧化酶）比对照组均有显著提高， 说明海带多糖能显著增强珍珠龙胆石 斑的机体免疫力 [3]。
多种生物活性。
6 结语
随 着 海 洋 资 源 的 不 断 开 发， 作 为
（下转 144 页）
142 食品安全导刊 2019年3月 Copyright©博看网 . All Rights Reserved.
Technology 科技 食品技术研究
灭菌应在不损害培养有效成分的条件 下确保灭菌效果，一般采用 121 ℃灭 菌 15 ～ 20 min。配制好的培养基应 按说明书规定的条件进行灭菌。为验 证灭菌效果，每次灭菌时需用嗜热芽 孢杆菌等生物监测管或压力蒸汽灭菌 化学指示卡对灭菌效果进行监测。须 指出的是，有些培养基无需经过高压 灭菌，如 VRBA、BS、SC 等，只需加 热煮沸溶解即可，过度加热会降低其 选择性。
强还原型 GSH 的抗氧化能力来实现对
超重微波过氧化损伤的防护 。 [14]
昆 布 多 糖 具 有 优 异 的 抗 氧 化、 抗
辐射功效，可为抗氧化剂和辐射防护
剂的制备和研发提供思路。
5 其他作用
研 究 还 发 现， 昆 布 多 糖 还 具 有 抗
昆布多糖硫酸酯的药理作用研究进展
白含量； Ｍ１ Ｔ Ｉ 法 分别测定５ 一 Ｆ ｕ 、 Ｍ Ｔ Ｘ、 Ｍ ＭＣ 、 Ｅ Ｐ Ｉ 、 ｃ ｒ Ｄ（ 与Ｌ Ａ Ｍｓ 联合及单 独作用 胃癌细胞的Ｉ Ｄ ５ ０ 以及有效作用时间。结果 ： Ｌ Ａ ＭＳ ／ ６ ￣ １ 胃癌细胞 Ｂ ｃ ｌ ＿ ＿ ２ ｍＲ — Ｎ Ａ 及基因蛋 白表达下降， 使 胃癌细胞对５ 一 Ｆ ｕ 、 Ｍ Ｔ Ｘ、 ＭＭ Ｃ 、 Ｅ Ｐ Ｉ 、 Ｃ Ｔ Ｘ 的敏感度增加 、 有效作用时问延长 。结论 ： Ｌ Ａ ＭＳ 可有效地增 加 胃癌细胞对５ 一 Ｆ ｕ 、 ＭＴ Ｘ、 ＭＭＣ 、 Ｅ Ｐ Ｉ 、 Ｃ Ｔ Ｘ 的敏感陛。 Ｗｅ ｓ ｔ ｅ ｒ ｎ ｂ ｌ ｏ ｔ ￣测定Ｌ Ａ Ｍ ｓ 处理后Ｑ Ｇ Ｙ ７ ７ ０ １ 细胞Ｒ ｈ Ｏ Ｃ 蛋白表达 ， Ｔ ｒ ａ ｎ — ２ 对 于其他 疾病 的作 用 ． １ 抑制ＨＬ － － ６ 咖 胞增殖及诱导凋亡。 肖青以急性髓细胞 性白血病细 ｓ ｗ ｅ ｌ ｌ ￣ ｂ 室法计数Ｌ Ａ ＭＳ 处理后穿过多孔滤膜的细胞数 ，结果显示经 ２ － － ６ ０ 为模型， 采用Ｍ 删 去 测定不同浓度Ｌ Ａ Ｍｓ 对ＨＬ ＿ ６ 咖 胞的增 Ｌ Ａ Ｍｓ 处理后Ｑ Ｇ Ｙ ７ ７ ０ １ 细胞的Ｒ ｈ ｏ Ｃ 蛋 白表达显著降低，穿过多孔滤 胞系ＨＬ 膜 的细胞数显著减少从而得／ ￣ Ｌ Ａ ＭＳ 可Ｉ ￣ Ｑ Ｇ Ｙ ７ ７ ０ １ 细胞Ｒ ｈ ｏ Ｃ 蛋白 殖抑制作用 ； 应用光镜、 流式细胞仪（ Ｆ Ｃ Ｍ） 技术检测Ｌ Ａ Ｍｓ 诱导Ｈ Ｉ 广 ６ ０ 表达 ， 由此降低该细胞的侵袭力的结论。 细胞凋亡率；免疫细胞化学法检测Ｌ Ａ Ｍｓ 作用前后ＨＬ － － ６ ０ 细胞核转录 董浦江 ；姚榛祥通过 比较Ｌ Ａ ＭＳ 处理的肝癌细胞生长 曲线 、 Ａ ｇ — 因子Ｎ Ｆ － ￣ Ｂ 家族Ｐ ６ ５ 亚单位的表达变化。结果显示随着昆布多糖硫酸 Ｎ ｏ Ｒ ｓ ３ ￣ ＂ 量变化 ；用一步法Ａ 则 定Ｉ Ｊ Ａ Ｍｓ 拮抗肝癌细胞分泌物的促 酯浓度的增加其抑制程度增强 ， 在３ ． １ ２ ５ 咖 脓 度下抑制作用达到最 凝 血作用。 结果 ： Ｌ Ａ Ｍｓ 处理后的肝癌细胞增殖受抑制、 Ａ ｇ Ｎ ｏ Ｒ ｓ ￣ ｒ 减 少， Ｌ Ａ ＭＳ ￣ 拮抗肝癌细胞分泌物对Ａ Ｐ Ｔ １ ’ 的影响。结论： Ｌ Ａ ＭＳ 可有效 地抑制肝癌细胞增殖和促凝活性。 １ ． ２ 抑制胰腺癌细胞增殖。肖青及董浦江等人以Ｍ 删 去 分别测定不 同浓度Ｌ Ａ ＭＳ ￣Ｂ ｘ Ｐ Ｃ ３ 细胞增殖 的抑制作用 ，对以Ｌ Ａ ＭＳ ＠理前后的 Ｂ ｘ Ｐ Ｃ ３ 细胞分别用Ｔ Ｕ Ｎ Ｅ Ｌ （ Ｐ Ｏ Ｄ） 法测定凋亡细胞 、 免疫组化法测定
多糖的构效关系研究进展
中图分类号：Ｑ５３８；文献标识码：Ａ；文章篇号：１００７－２７６４（２００４）０３－０１５９－０６０ 多糖的构效关系研究进展黄卉 王弘 刘欣 （华南农业大学食品学院，广州５１０６４２） 摘 要：本文论述了影响多糖活性的结构因素，从糖单元的组成、糖苷键的类型、主链的构型、支链、空间构型、取代基的种类及数量等几个方面说明结构对其生物活性的影响。
关键词：多糖；构效关系；结构 Study’s Advances in the Structure Activity Relationship of PolysaccharideHuang Hui, Wang Hong, Liu Xin(Food Science College, South China Agricultural University, Guangzhou, 510642) Abstract: The review is about the relationship of structure factors and the activities of polysaccharide. The structure factors such as sugar unit, types of glycosidic chains and the backbone, the branch, conformation of chain, the substitute of the backbone and so on were discussed.Keywords: Polysaccharide; Structure-activity relationship; Structure近年来，在对免疫物质以及新药物资源的研究过程中，人们发现糖类参与了生命科学中细胞的各种活动，具有多种多样的生物学功能。
多糖及其缀合物对多种危害人类健康的疾病，如免疫紊乱、癌症、肝炎、血栓等，都具有显著的疗效。
昆布的药理研究和临床应用进展
昆布的药理研究和临床应用进展摘要：昆布又常为人们俗称为海带、海藻，也是日常生活中常用的一种食材，因此昆布不仅应用于医疗中，如瘿瘤、瘰疬的治疗等，也应用于日常的生活中，是人们常常食用的一种食材。
在本文通过研究昆布的药理作用机制，以及中医药的功效等，探讨昆布在抗血栓、抗肿瘤、抗病毒等各个方面的临床应用进展，为以后的研究提供一定的参考。
关键词：昆布；药理作用；临床应用；进展昆布是海带科海带属的植物，或者翅藻科植物昆布的干燥的叶状体，其又被称为海带、海藻、裙带菜等，是常见的一种药食同源的植物之一。
《中药大辞典》中记载，昆布具有软坚散结、消炎利水的作用，主要治疗瘿瘤、瘰疬等疾病，彩带药理研究显示，昆布中含有多糖、多种天然的蛋白质、纤维素以及核酸等，具有抗凝血，控制血压、血糖，免疫调节以及抗肿瘤的作用[1]。
目前对于昆布的研究也比较的多，但是大量的研究证实昆布的有效成分以及其注射液对于多种疾病具有较好的治疗作用，本文针对昆布的近现代的临床研究，探讨昆布的药理研究和临床应用进展，并为其进一步的研究提供有效的依据，，现将结果报告如下。
1.昆布的基本介绍昆布是《中国药典》中收录的一种草药，其多是海带科海带属的植物或者翅藻科植物的干燥叶状体，一般在夏秋两季采摘，并且晒干备用。
昆布多分布在辽东、山东、浙江以及福建等沿海地带，是药用价值十分高的一种植物，目前有的的地方开始采用人工养殖的方法培养。
昆布也是一种营养价值较高的蔬菜，特别是体内含有的精蛋白、粗纤维等高于其他的蔬菜，同时铁、钙等微量元素的含量也较高。
2.昆布的中医功效以及应用昆布咸、寒，无毒，味苦，性寒，主要归属于肝、胃、肾经，《本草再新》中记载其也归属于脾经。
从中医方面来说，昆布具有消痰散结、利水消肿的作用，主要用于治疗瘰疬、瘿瘤、痰饮水肿等疾病，比如睾丸肿痛等。
《食物本草》中记载，昆布又名裙带菜，还可主治女子赤白带下，男子精泄梦遗等。
《现代实用中药》中记载昆布可以治疗水肿，湿性脚气，俗称甲状腺肿。
昆布多糖提取纯化工艺及应用
昆布多糖提取纯化工艺及应用昆布多糖是一种具有多种生物活性的天然多糖，其在医药、保健品、食品等领域的应用广泛。
本文将介绍昆布多糖的提取纯化工艺及其应用。
一、昆布多糖的提取昆布多糖的提取通常采用水提法或碱提法。
水提法是利用昆布多糖的可溶性，以水为溶剂，通过加热搅拌或超声波辅助提取昆布多糖。
碱提法则是利用碱处理昆布，使昆布中的蛋白质和酚类物质变性，从而释放出昆布多糖。
二、昆布多糖的纯化提取得到的昆布多糖往往含有杂蛋白和色素等杂质，因此需要进行纯化。
常用的纯化方法包括 Sevage 法、DEAE 纤维素柱层析法和凝胶柱层析法等。
1. Sevage 法Sevage 法是一种常用的脱蛋白方法，其原理是利用蛋白质和脂溶性物质在有机溶剂中溶解度的差异，将蛋白质和脂溶性物质分离。
具体操作方法是加入Sevage 试剂（三氯甲烷：正丁醇=4：1），在搅拌下生成蛋白质沉淀，然后离心分离，得到粗提的昆布多糖。
2. DEAE 纤维素柱层析法DEAE 纤维素是一种阴离子交换剂，可用于分离和纯化多糖。
将 DEAE 纤维素装入色谱柱中，用一定浓度的 NaCl 溶液洗脱，通过逐步增加 NaCl 浓度的方法，将不同极性的组分分离。
通过 DEAE 纤维素柱层析法，可以将昆布多糖分为不同的组分，进一步提高纯度。
3. 凝胶柱层析法凝胶柱层析法是一种根据分子大小进行分离的方法。
将昆布多糖溶液通过凝胶柱，大分子物质不能进入凝胶颗粒，而小分子物质可以进入凝胶颗粒并被洗脱出来。
通过凝胶柱层析法，可以去除昆布多糖中的低分子量杂质和小分子量杂质。
三、昆布多糖的应用1. 药品原料药和辅料昆布多糖具有显著的抗肿瘤、抗凝血、抗氧化、抗炎、抗病毒等作用，因此被广泛用作药品原料药和辅料。
例如，可以将昆布多糖与其他药物成分结合，制备成抗肿瘤药物、抗凝血药物、抗炎药物等。
2. 保健品添加剂昆布多糖具有多种生物活性，对人体健康有很好的保健作用。
因此，昆布多糖也被用作保健品添加剂，如增强免疫力、抗衰老、降血糖等保健品中都含有昆布多糖成分。
昆布多糖对哮喘小鼠IL-33、VEGF、α-SMA及气道重塑的影响
昆布多糖对哮喘小鼠IL-33、VEGF、α-SMA及气道重塑的影响摘要】目的观察昆布多糖对哮喘小鼠肺泡灌洗液(BALF) 内白细胞介素-33（IL-33）、血管内皮生长因子（VEGF）及α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达的影响及气管重塑的影响。
方法将40只SPF昆明系小鼠随机分为哮喘模型组、激素吸入组、昆布多糖组和对照组4组，每组10只。
经OVA致敏激发制模成功后，哮喘模型组用生理盐水0．3 ml灌胃干预，激素吸入组雾化吸入布地奈德混悬液0.4ml干预，昆布多糖组采用昆布多糖50 mg／kg灌胃干预，均每日1次。
对照组采用生理盐水代替0VA致敏激发和灌胃干预。
苏木精-伊红染色观察各组哮喘小鼠肺组织病理学形态的变化，用免疫组化法测定小鼠BALF中IL-33、VEGF及α-SMA的水平。
结果与模型组比较，昆布多糖组及激素吸入组BALF中IL-33、VEGF、α-SMA显著降低 (P均<0.01)；与对照组比较，昆布多糖及激素吸入组各指标差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)，昆布多糖组与激素吸入组IL-33、VEGF及α-SMA差异均有统计学意义(P<0.05或P<O.01)。
结论昆布多糖能在一定程度上抑制急性哮喘小鼠的气道炎症，减轻气道重塑的发生。
【关键词】昆布多糖；支气管哮喘；血管内皮生长因子; 白细胞介素-33；α-平滑肌肌动蛋白【中图分类号】R965 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2014）32-0011-02支气管哮喘是一种常见病和多发病，据统计，全球哮喘的患病率为1％～18％，估计全世界有3亿哮喘病患者，每年因哮喘发作死亡的人数高达18万人[1]。
昆布多糖又称海带多糖，是从中药昆布中分离出的硫酸多糖成分，具有调节免疫，抗炎、抗纤维化、抗肿瘤、抗凝血，降血压、血脂，抗病毒和抗菌等功能[2]。
有研究表明，昆布多糖可促进T／B淋巴细胞分化及抗体生成，发挥抗炎作用[3]。
昆布多糖对大肠癌细胞生长转移能力抑制作用的研究
昆布多糖对大肠癌细胞生长转移能力抑制作用的研究刘玉;丁彦青;梁莉;杨光之;张文丽【期刊名称】《中国组织工程研究》【年(卷),期】2003(007)026【摘要】目的:研究昆布多糖( Laminarin)对结肠癌细胞生长、黏附和侵袭转移的抑制作用,为新药筛选提供理论依据. 方法 :采用同质、异质黏附,细胞分离及侵袭小室等试验技术检测不同含量昆布多糖对 4种大肠癌细胞的细胞生物学特性的影响. 结果 :与对照组相比,在低含量药物作用时,基质黏附能力和同质黏附性,以及细胞分离能力均无明显变化.高含量药物作用后, sw480, sw620, HT29, LoVo基质黏附率分别为( 0.292± 0.21)%,( 0.434± 0.23)%,( 0.428± 0.43)%,( 0.313± 0.28)%,sw480, sw620, HT29, LoVo同质黏附率分别为( 10.6± 2.3)%,( 18.2±2.1)%,( 25.5±3.0)%,( 11.1± 2.8)%,基质和同质黏附性均下降( P< 0.05～ 0.01, t=4.217, 7.105, 10.571, 2.196, 8.245, 3.452, 10.563,5.231); sw480, sw620, HT29, LoVo细胞分离率增强,分别为( 47.51± 7.2)%,( 45.26± 8.3)%,( 31.78± 5.3)%,( 45.226± 7.5)%,( P< 0.05～ 0.01, t=4.251, 19.142, 10.043, 3.497);sw480, sw620, HT29, LoVo细胞穿过基底膜能力减弱,分别为( 7.61±2.6),( 20.4±3.1),( 5.8± 1.3),( 15.1± 3.6)个( P< 0.01, t=11.541, 12.534, 16.143, 23.427). 结论 :昆布多糖可使细胞的恶性表型发生变化,使其侵袭转移能力受到抑制,并呈现剂量依赖性.%AIM:To investigate the effect of laminarin on colon-cancer cell grows,adhesion and metastasis and provide theoretical basis for screening new drugs.METHODS:The effect of laminarin with different concentrations on cell biological characteristics of four kinds of colon-cancer cells was examined with the technologies of homogeneity(the same cell) and heterogeneity(the matrigel),invading chamber test(transwell) and cell separation.RESULTS:Compared with the untreated controls,there were no obvious changes in the abilities of adhering to homogeneity(the same cell) and heterogeneity(the matrigel),invading chamber test(transwell) and cell separation(P >0.05) under lower concentration.After high concentration,the matrix adhesion rate of sw480, sw620, HT29 and LoVo was ( 0.292± 0.21)%,( 0.434± 0.23)%,( 0.428± 0.43)% and( 0.313±0.28)% ;the homogeneity adhesion rate of sw480, sw620, HT29 and LoVo was ( 10.6± 2.3)%,( 18.2± 2.1)%,( 25.5± 3.0)% and( 11.1± 2.8)% . The matrix and homogeneity adhesion rate were both decreased( P< 0.05 to 0.01,t=4.217, 7.105, 10.571, 2.196, 8.245, 3.452, 10.563, 5.231) and the cell separation rate of sw480, sw620, HT29 and LoVo was ( 47.51±7.2)%,( 45.26± 8.3)%,( 31.78± 5.3)% and( 45.226± 7.5)%( P< 0.05 to 0.01, t=4.251, 19.142, 10.043, 3.497) ;the ability of penetrating into basement membrane of sw480, sw620, HT29 and LoVo cells was ( 7.61± 2.6),( 20.4± 3.1),( 5.8± 1.3) and( 15.1± 3.6)( P< 0.01, t=11.541, 12.534, 16.143,23.427) ,which was increased.CONCLUSION:Laminarin can inhibit the growth and metastases of human colorectal carcinoma cells,and appears dosage-dependence.【总页数】2页(P3588-3589)【作者】刘玉;丁彦青;梁莉;杨光之;张文丽【作者单位】解放军第一军医大学肿瘤研究所,广东省广州市,510515;解放军第一军医大学肿瘤研究所,广东省广州市,510515;解放军第一军医大学肿瘤研究所,广东省广州市,510515;解放军第一军医大学肿瘤研究所,广东省广州市,510515;解放军第一军医大学肿瘤研究所,广东省广州市,510515【正文语种】中文【中图分类】R735.3【相关文献】1.三氧化二砷对人大肠癌细胞生长的抑制作用 [J], 徐丹;杨幼林;徐洪雨2.IL-21调节免疫平衡对大肠癌细胞生长的抑制作用 [J], 张振亚;张伟;陈学谦;安广权;单保恩;于跃明3.鸟氨酸脱羧酶和S-腺苷甲硫氨酸脱羧酶双反义腺病毒对大肠癌细胞生长的抑制作用 [J], 龚磊;姜春英;张冰;胡海燕;王伟;刘贤锡4.氢气对原代人大肠腺癌细胞生长的抑制作用及其影响因素 [J], 周晓;李宪孟;秦树存5.维生素C衍生物对癌细胞浸润转移能力的抑制作用机理研究 [J], 刘建文;魏东芝;杜长斌;三羽信比古因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
昆布多糖对哮喘小鼠气道炎症及重塑影响的研究的开题报告
昆布多糖对哮喘小鼠气道炎症及重塑影响的研究的
开题报告
一、研究背景
哮喘是一种慢性的气道疾病，其主要特征是气道炎症、气道过敏和气道重塑等。
哮喘患者常伴有气喘、气促、胸闷等症状，给患者的生活
带来很大困扰。
目前，哮喘的治疗方法主要是通过吸入类固醇、β2受体激动剂等药物进行治疗，但是这些药物副作用较大，长期使用容易出现
耐药性等问题。
因此，开发一些无副作用的天然药物治疗哮喘具有重要
的意义。
二、研究目的
本研究旨在探究昆布多糖对哮喘小鼠气道炎症及重塑影响的机制，为开发一种无副作用的天然药物治疗哮喘提供理论依据。
三、研究内容
1. 建立哮喘小鼠模型。
2. 分组：将小鼠随机分为对照组、哮喘组、昆布多糖低剂量组、昆布多糖中剂量组、昆布多糖高剂量组。
3. 分别观察各组小鼠气道炎症指标、肺功能指标及气道重塑程度。
4. 检测小鼠组织中炎症因子和细胞因子的表达水平。
四、研究方法
1. 建立哮喘小鼠模型：使用OVA致敏和挑战法。
2. 气道炎症指标，包括炎症细胞浸润、炎症因子表达（如IL-4, IL-5, IL-13）等。
3. 肺功能指标，包括呼吸道阻力（RL）等。
4. 气道重塑程度指标，包括气道平滑肌增生、黏液腺增生等。
5. 检测小鼠组织中炎症因子和细胞因子的表达水平，包括BDNF、TGF-β1、MUC5AC等。
五、研究意义
本研究有望探明昆布多糖对哮喘小鼠气道炎症及重塑的影响机制，为开发一种无副作用的天然药物治疗哮喘提供理论依据。
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2 . 2 . 2 昆布多糖的化学性质。M olish 反应呈阳性, 有紫色环 产生。苯酚 - 硫酸反应呈阳性。 Feh ling 试剂反应水解前呈 阴性, 加酸水解后呈阳性, 说明粗多糖中存在还原糖; 咔唑 硫酸反应呈玫瑰红, 说明含有糖醛酸; 碘 - 碘化钾反应呈阴 性, 说明不含有淀粉多糖。以葡萄糖为标准糖测得粗多糖中 总糖含量为 66 . 58 % , 由海藻粉中提取多糖得率为 18. 31% 。 2 . 2 . 3 硫酸基含量测定。由明胶 - 氯化钡法测得标准曲线 为 y= 2 . 312 1x - 0 . 029 3( R = 0 . 998), 由标准曲线得到昆布 多糖硫酸基含量为 48. 67% ( 质量分数 ) 。 2 . 2 . 4 紫外光谱分析。 紫外吸收光谱表明, 在 260 nm 和 280 nm 处均无特征吸收峰, 说明除蛋白完全, 初步纯化的多糖不 含有核酸与蛋白质。 3 昆布多糖的药理作用与临床应用概况及其作用机理 昆布多糖的药理作用与临床应用概况及其作用机理如 表 1所示 :
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3-
取昆适量布多糖样及 LAM S, 用
D2 O 溶解并进行测定。由 C NMR 图谱可知 , 在 LAM S样品 的碳谱中发现糖环上大多数碳化学位移发生了明显变化, 与 昆布多糖相比, 其 C1、 C3 、 C6 化学位移向高场移动, 但峰强度 未发生显著变化, 推测可能是糖环上硫酸基团的引入对邻碳 产生影响; 而 C4、 C5化学位移和峰强度均未变化, 说明 C 4位 未发生取代; C2 信号移向低场, 并且峰强度降低, 表示 C 2位 已经被硫酸基团取代。由此可见, 硫酸酯化的过程主要发生 在 C2 OH 处。 2 昆布多糖的提取分离及理化性质研究 2 . 1 昆布多糖的提取分离 目前昆布多糖大多是从海带中提 取, 随着提取工艺的改良, 得率从 1 %
表 1 昆布多糖的药理作用与临床应用概况及其作用机理 Table 1 Pharm acological action , clin ica l application and mechan ism of lam inarin 药理作用 Phar m acological action 临床应用概况及其作用机理 C lin ical app lication and m echan ism
昆布又名海带 , 其主要含有多糖、 天然蛋白质、 纤维素、 脂肪、 矿物质及核酸等, 具有显著的临床药理作用, 而药理作 用与其含有的多糖量紧密相关。研究表明, 昆布多糖主要有 褐藻 ( 如褐藻酸钠, 又称褐藻胶 , 在海带中含量约为 19 . 7 % )、 褐藻淀粉 ( 又称昆布多糖、 海藻硫酸多糖、 褐藻多糖, 在海带 中含量约为 1 % )、 褐藻糖胶 ( 又称岩藻糖胶, 主要成分为岩 藻多糖, 又称岩藻聚糖 ) 。多糖昆布中还含有少量的木糖、 半乳糖、 葡萄糖醛酸和蛋白质。笔者从昆布多糖的结构研 究、 提取分离及理化性质的研究、 药理作用与临床应用概况 等 3个方面阐述昆布多糖的研究进展, 以期为昆布多糖的研 究提供理论依据。 1 昆布多糖的结构研究 目前研究昆布多糖结构的常用方法是对昆布多糖进行 硫酸酯化, 并对其产物的纯度及结构进行分析。一般用氯磺 酸 - 吡啶法先对昆布多糖进行硫酸酯化, 同时使用 HPLC ELSD 法测定其反应产物的纯度与分子量, 然后利用硫酸钡 比浊法测定昆布多糖硫酸酯中 SO4 含量, 再利用波谱法研 究其具体结构。 [ 1] 1. 1 硫酸酯化分析 昆布多糖的硫酸酯化研究方法步骤
摘要 从昆布多糖的结构研究、 昆布多糖的提取分离及理化性质的研究、 昆布多糖的药理作用与临床应用概况等 3个方面阐述昆布多 糖的研究进展, 以期为昆布多糖的研究提供理论依据。 关键词 昆布多糖 ; 结构分析 ; 分离提取 ; 药理作用 中图分类号 R 915 文献标识码 A 文章编号 0517- 6611( 2010) 27- 15447- 02 R esearch Progress of Lam inarin YUAN X iu li et al ( College of L ife Science and Engineering , ShaanxiU niversity of Science and Technology , X i an, Shaanx i 710021) A bstract The research advance of la m inarin were discussed fro m aspects o f structure , extraction , isolation and physical and che m ical proper ties , phar m aco logica l e ffects and c linica l application , which am i ed to prov ide theoretica l basis for studying la m inarin . K ey w ords Lam inar in ; Structural analysis ; Separation and ex traction; Phar m aco logy
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曲线的制作。首先称取适量标准葡萄糖置于容量瓶中 , 加水 至刻度; 然后准确吸取葡萄糖标准溶液, 加水补至一定刻度; 再加入质量分数为 6 % 的苯酚及浓硫酸, 摇匀, 室温放置 20 m in后于 490 nm 测光密度, 以适量水按同样显色操作为空白 对照, 纵坐标为光密度值, 横坐标为多糖浓度, 即可得到标准 曲线。 # 待测多糖样品含量的测定。称取昆布多糖样品, 加 蒸馏水至刻度, 配成样品溶液; 吸取样品液 1 . 0 m l 按上述步 骤操作 , 测得光密度, 根据标准曲线计算多糖含量。 ∃ 多糖 得率的计算。多糖得率 ( m /m ) = [ 粗多糖干品中的总糖质量 ( g) /原料干粉质量 ( g) ] ∋ 100 %。 2. 1. 3 昆布粗多糖的初步纯化。按 2. 1 . 1!方法得到昆布 粗多糖, 加水溶解, 并用氨水调节 pH 值至 8 ; 在温度低于 50 ( 条件下 , 滴加 20 % H 2 O 2, 直至溶液呈淡黄色, 然后保温 2 h; 将所得溶液用蒸馏水透析 3 d, 3 d后对未透过的部分采 用 Sevag 法去除蛋白质
安徽农业科学, Journ al ofAnhu iAgr.i Sc. i 2010 , 38( 27): 15447- 15448 , 15452
责任编辑
马树梅
责任校对
李岩
昆布多糖的研究进展
袁秀丽 , 吕嘉枥 , 肖 静 , 马 强
1 1 2 1 ( 1. 陕西科技大学生命科学与工程学院, 陕西西安 710021 ; 2. 长安大学理学院, 陕西西安 710064)
95 % 乙醇进行沉淀, 并于 4 ( 静置过夜 ; 次日离心, 并收集
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安徽农业科学
2010年
沉淀, 真空冷冻干燥即可得初步纯化的白色纤维状昆布粗 多糖。 2. 1 . 4 昆布多糖的提取与精制。称取昆布粗粉置于圆底烧 瓶中 , 加石油醚 ( 60~ 90 ( ) 浸泡 2 h; 回流提取 1 h, 滤过; 滤 渣挥干溶媒, 以 95% 乙醇回流提取 2次, 每次 1 h , 滤过; 滤渣 置于圆底烧瓶中, 加蒸馏水浸泡 1 h后回流提取 2 h, 滤过; 再 加蒸馏水回流 提取 2 h, 滤 过; 合 并滤液, 浓缩 至适量, 用 Sevage法去除蛋白后加入 95% 乙醇使含醇量为 80% , 静置过 夜, 抽滤; 滤渣用无水乙醇、 丙酮依次洗涤多次, 得精制多糖 , 冷冻干燥备用。 2. 2 昆布多糖的理化性质 2. 2 . 1 昆布多糖的物理性质。粗多糖干品为黄褐色块状固 体, 有海腥味。经 H2 O2 脱色后冻干得到白色纤维状固体, 可 溶于水, 易溶于热水, 难溶于酸碱, 不溶于高浓度乙醇、 甲醇、 丙酮等有机溶剂 , 无挥发性, pH 值为 6 . 5, 比旋光度为 [ ] D20= - 1. 25)( c= 0 . 80, H 2 O ) 。
[ 10 ]
调节免疫功能 Regu lating i m 昆布多糖能够显著影响机体非特异性免疫功能, 褐藻多糖对机体特异性免疫功能也具有显著增强作用 mune function
。
调 节 血 脂 作 用 R egulating 昆布多糖能够降低血浆中胆固醇喝低密度脂蛋白的含量, 增加高密度脂蛋白含量, 还可减少动脉粥样硬化指数, 降低 [ 11] b lood lip id 血浆中脂质过氧化物浓度 。 降血糖作用 H ypog lycem ic 抗凝血作用 An ticoagulants 抗氧化作用 An ti oxidan t 抗肿瘤作用 An tineop lastic 昆布多糖能够降低糖尿病小鼠的血糖含量, 调节糖尿病小鼠的蛋白质代谢, 降糖时还能促进胰岛细胞分泌胰岛素
[ 7]
为: ∀ 取昆布多糖适量, 采用氯磺酸 - 吡啶法进行硫酸酯化 ; # 对硫酸酯化反应所得产物进行透析、 醇沉及干燥, 获得昆 [ 2- 3] 布多糖硫酸化产物 ( LAM S ); ∃ 利用 H PLC ELSD 法 对 LAM S 进行纯度检测, 结果表明, LAM S 呈单一对称峰, 利用 归一化法计算其纯度; % 采用硫酸钡比浊法 [ 4] 测定 SO42- 含 量。紫外光谱检测结果表明, 昆布多糖在 260 nm 和 280 nm 处无吸收, 说明昆布多糖样品中不含蛋白质和核酸; 另外 2LAM S 在 260 nm 处有最大吸收, 说明样品中含有 SO 4 。昆 布多糖及 LAMS 的红外光谱图显示其在 3 400 cm 处有强 峰, 说明存在 OH 基团; 昆布多糖在 2 918 cm 处有弱吸收 , 说明存在 - CH 3 或 - CH2 基团的 C H 键伸缩振动; LAM S 在 1 649 cm 处有强吸收, 说明有 C = O 的伸缩振动和非对称 - 1 伸缩振动, 在 1 001 c m 处的强吸收峰是 C O C 的伸缩振