高效液相色谱法测定郁李仁中苦杏仁苷的含量

欧李种仁中苦杏仁苷的提取及其抗氧化活性摘要：采用HPLC法测定欧李（Prunus humilis Bunge）种仁浓缩液中苦杏仁苷的含量，利用DPPH法测定苦杏仁苷的抗氧化性。

结果表明，提取液中苦杏仁苷的浓度为7.94 mg/mL；苦杏仁苷清除DPPH的能力随着其浓度的降低而下降，当苦杏仁苷溶液浓度为7.50 mg/mL时清除率最高，为90.9%。

欧李种仁浓缩液经氯仿、乙酸乙酯和加热处理均能提高水相中苦杏仁苷的纯度。

关键词：欧李（Prunus humilis Bunge）；种仁；苦杏仁苷；高效液相色谱；抗氧化性欧李（Prunus humilis Bunge）为蔷薇科樱桃属落叶小灌木，是我国特有的果实和药食兼用树种。

其茎叶、果实、根皮具有很高的经济和药用价值。

欧李种仁可以入药，具有利尿、助消化等功效，能治疗消化不良、水肿、肠胃停滞等疾病[1-3]。

欧李种仁中含有大量的苦杏仁苷，主要用于治疗慢性气管炎、急慢性呼吸道感染和脓疱病[4]，与其他药物合用还可治疗皮肤癌[5]；苦杏仁苷还具有抗凝血和抗氧化性的作用[6]。

苦杏仁苷具有明确的生理、药理活性。

关于苦杏仁苷分析检测的方法也比较完善，但国内对欧李苦杏仁苷分离提取工艺的深入研究还较少，所以本试验采用HPLC法测定欧李种仁浓缩液中苦杏仁苷的含量，利用DPPH法测定苦杏仁苷的抗氧化性，以期为欧李苦杏仁苷提取工艺的改进提供参考。

1 材料与方法1.1 材料试验于2012年6月在成都大学药食同源植物资源开发重点实验室进行。

欧李采自成都大学欧李种植基地。

将风干的欧李果实去果肉得到欧李种子，反复淘洗将果肉和种子分开，把得到的欧李种子放入烘箱中50 ℃干燥24 h。

干燥后人工去壳得到欧李种仁，将欧李种仁放入烘箱中50 ℃干燥48 h，备用。

1.2 仪器与试剂DIONEX-HPCL高效液相色谱仪；UV-1800紫外分光光度计。

苦杏仁苷标准品（纯度大于99.0%，中国药品生物制品检定所）；无水乙醇、甲醇和石油醚（成都市科龙化工试剂厂）；DPPH（成都康普泰科技有限公司），以上试剂均为分析纯。

2017年执业药师《中药学专业知识⼀》真题及答案解析2017年执业药师考试《中药学专业知识⼀》真题及答案⼀、最佳选择题（共40题，每题1分。

每题的备选项中，只有1个最符合题意。

）1.表⽰药物软坚散结，泻下通便作⽤的味是（）A.⾟B.苦C.酸D.咸E.⽢答案：D【解析】咸：能软、能下，有软坚散结、泻下通便作⽤2.依据⽅剂配⽅原则，下列关于使药作⽤的说法，正确的是（）A.引⽅中诸药直达病所B.消除君⾂药烈性C.协助君⾂药加强治疗作⽤D.直接治疗次要兼证E.与君药药性相反⽽⼜能在治疗中起相成作⽤答案：A【解析】使药意义有⼆：⼀是引经药，即引⽅中诸药直达病所的药物；⼆是调和药，即调和诸药的作⽤，使其合⼒祛邪。

使药的药⼒⼩于⾂药，⽤量亦轻。

3.莪术药材的适宜采收期是（）A.秋冬季地上部分枯萎后B.春末夏初时节C.植物光合作⽤旺盛期D.花完全盛开时E.花瓣由黄变红时答案：A【解析】莪术【来源】为姜科植物蓬莪术、⼴西莪术或温郁⾦的⼲燥根茎。

根及根茎类：⼀般执业药师QQ群：239024740后续资料更新进群查看，否则⽆法下载学习。

4.宜⽤酸⽔提取，加碱调⾄碱性后可从⽔中沉淀析出的成分是（）A.⾹⾖素类B.黄酮类C.⽣物碱类D.蒽醌类E.⽊脂素类答案：C【解析】利⽤酸碱性进⾏分离：对酸性、碱性或两性有机化合物来说，常可通过加⼊酸、碱以调节溶液的pH，改变分⼦的存在状态（游离型或解离型），从⽽改变溶解度⽽实现分离。

例如，⼀些⽣物碱类在⽤酸性⽔从药材中提出后，加碱调⾄碱性即可从⽔中沉淀析出（酸/碱法）。

5.川乌经炮制，其⽣物碱类成分结构改变，毒性降低。

所发⽣的化学反应是（）A.氧化反应B.还原反应C.⽔解反应D.聚合反应E.加成反应答案：C【解析】乌头碱、次乌头碱、新乌头碱等为双酯型⽣物碱，具⿇辣味，毒性极强，是乌头的主要毒性成分。

若将双酯型⽣物碱在碱⽔中加热，或将乌头直接浸泡于⽔中加热，或不加热仅在⽔中长时间浸泡，都可⽔解酯基，⽣成单酯型⽣物碱或⽆酯键的醇胺型⽣物碱。

F YY YW FYD ZYC ZW 04902005苦杏仁苦杏仁苷的测定高效液相色谱法F_YY_YW_FYD_ZYC_ZW _0490_2005苦杏仁－苦杏仁苷的测定-高效液相色谱法1范围本方法采用高效液相色谱法测定杏仁中苦杏仁苷的含量。

本方法适用于蔷薇科植物杏Prunus armeniaca L.或山杏Prunus armeniaca L.var.ansu Maxim.的干燥种子。

2原理供试品于索氏提取器中，甲醇回流，取滤液，进入高效液相色谱仪进行色谱分离，紫外检测器检测苦杏仁苷的吸收值，计算出其含量。

3试剂（除特殊注明外均为分析纯试剂）3.1甲醇（色谱醇）3.2乙腈（色谱醇）3.3水为双蒸水3.4苦杏仁苷对照品（中国药品生物制品检定所）4仪器及设备4.1仪器4.1.1高效液相色谱仪4.1.2化学工作站4.1.3色谱柱：YWG-C 18(4.6mm×250mm ，10µm)4.2色谱条件4.2.1流动相：甲醇+水+乙腈=25+70+54.2.2流速：0.6mL/min 4.2.3柱温：30℃4.2.4检测波长：225nm 5试样制备5.1对照品溶液的制备精密称取苦杏仁苷对照品1.64mg ，用甲醇溶解并稀释至2.0mL ，得0.82mg/mL 的对照品溶液。

5.2供试品溶液的制备称取各种干燥的杏仁适量，精密称定，粉碎，分别用甲醇浸泡0.5h ，用索氏提取器提取2.5h ，滤过，定容至100mL ，用微孔滤膜滤过，即得供试品溶液。

6操作步骤6.1标准曲线的建立精密量取苦杏仁苷对照品溶液0.5，1，2，3，4，5，10，15µL ，依法进样测定，以峰面积Y 对进样量X 作图，得工作曲线，回归方程为Y=299.9X-50.01，在0.41～12.30μg 成良好的线性关系6.2供试品的测定 中国分析网精密吸取上述供试品溶液10µL 注入高效液相色谱仪，依法测定苦杏仁苷的响应值，计算出其含量。

高效液相色谱法测定止咳化痰颗粒中苦杏仁苷含量刘彬果;张楠【摘要】目的建立测定止咳化痰颗粒中苦杏仁苷含量的高效液相色谱(HPLC)法.方法色谱柱采用ZORBAX SB-C18柱(250 mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-0.1％磷酸(30:70),流速1.0 mL/min,柱温室温,检测波长210 nm.结果苦杏仁苷进样量在0.4～4.0 μg(r =0.9997)范围内与峰面积积分值线性关系良好,平均加样回收率为101.38％,RSD为1.90％(n=6).结论该法快速、简便、准确、重复性好,结果可靠,可用于止咳化痰颗粒中苦杏仁苷的含量测定,可全面控制止咳化痰颗粒的质量.【期刊名称】《中国药业》【年(卷),期】2016(025)015【总页数】4页(P68-71)【关键词】止咳化痰颗粒;苦杏仁苷;高效液相色谱法;含量测定【作者】刘彬果;张楠【作者单位】中国人民解放军第二五四医院,天津 300142;中国人民解放军第二五四医院,天津 300142【正文语种】中文【中图分类】R284.1;R286.0止咳化痰颗粒为中国人民解放军第二五四医院的临床经验方，是由瓜蒌、前胡、苦杏仁、白茅根等8味药材组方的复方制剂，具有止咳化痰的功效，适用于急、慢性支气管炎，咳嗽多痰。

方中苦杏仁味苦性温，宣肺下气，止咳平喘，为方中主药药味之一［1-2］。

苦杏仁苷是苦杏仁中的有效成分，关于其含量测定方法已有相关报道［3-4］，该制剂现有质量标准中仅有中药定性鉴别的方法，而无主要药味的含量测定方法。

为了更好地控制止咳化痰颗粒的质量，笔者采用高效液相色谱（HPLC）法对方中苦杏仁的指标成分苦杏仁苷进行定量研究和方法学验证试验，以建立控制止咳化痰颗粒的质量标准。

现报道如下。

1.1 仪器Agilent 1260型高效液相色谱仪（美国安捷伦科技公司），OpenLAB CDS色谱工作站。

1.2 试药苦杏仁苷对照品（批号为120821-201212）购自中国药品生物制品检定所。

中药一决战六十六题1.成书于宋代具有极高的学术价值和文献价值的是A.《本草纲目》B.《新修本草》C.《本草经集注》D.《证类本草》E.《中华本草》【答案】D【解析】《经史证类备急本草》简称《证类本草》，为宋金元时期宋代的本草代表作。

全书载药1746种，附方3000余首。

该书图文对照，方药并收，医药结合，资料翔实，集宋以前本草之大成，使大量古代文献得以保存，具有极高的学术价值和文献价值。

2.不属于温热性药所示的功效是A.温里散寒B.回阳救逆C.补火助阳D.温经通络E.凉血解热毒【答案】E【解析】本题考查中药性能四气所示的效用。

关注“不属于”的“不”所强调的内涵。

温里散寒、补火助阳、温经通络、回阳救逆属于温热性药物所示效用；而清热、泻火、凉血、解热毒则属于寒凉性药物所示效用，用排除法即可选出。

相关内容除以最佳选择题出现外，还可以多项选择题和配伍选择题出现。

3、按上、中、下三品进行分类的本草著作是A、《神农本草经》B、《本草经集注》C、《本草纲目》D、《新修本草》E、《本草纲目拾遗》【答案】A【解析】本题考查《神农本草经》的学术价值。

《神农本草经》各论载药365种，以上、中、下三品进行分类。

故答案:为A。

[考点：《神农本草经》的学术价值]4、《中国药典》中，紫石英中氟化钙、石决明中碳酸钙、白矾中含水硫酸铝钾的含量测定均采用的方法是A、酸碱滴定法B、沉淀滴定法C、配位滴定法D、氧化还原滴定法E、挥发法【答案】C【解析】本题考查含量测定的方法。

滴定分析法包括酸碱滴定法、沉淀滴定法、配位滴定法和氧化还原滴定法。

《中国药典》中，紫石英中氟化钙、石决明中碳酸钙、白矾中含水硫酸铝钾的含量测定均采用配位滴定法。

[考点：含量测定的方法]5、粉末升华，升华物白色柱状、小片状的中药是A、斑蝥B、水蛭C、蜈蚣D、全蝎E、地龙【答案】A【解析】本题考查的是“斑蝥理化鉴定的微量升华”。

斑蝥升华物(在30～140℃)为白色柱状或小片状结晶(斑蝥素),加碱液溶解,再加酸液又析出结晶。

苦杏仁苷可作为液相色谱质谱联用技术血清多成分含量的内标马靖;张伯礼;梁乾德;高月;肖成荣;马增春;王宇光;刘明;谭洪玲;陆倍倍【期刊名称】《解放军药学学报》【年(卷),期】2011(27)5【摘要】Objective To investigate the feasibility of amygdalin being used as an IX)-ESI MS internal standard for serum multiple constituents quantitation. Methods Serum samples spiked with amygdalin were mixed with trichloroacetic acid (TCA) for protein precipitation, separated by the gradient mobile phase of acetonitrile-wa-ter containing formic acid on Waters Acquity HSS T3 column, and detected in both the positive and negative mode after electrospray ionization (ESI). Results In both the positive and negative mode, good linear correlation was shown between the peak area and concentrationin serum amygdalin. When serum paeoniflorin and feruljc acid were determined in both the positive and negative mode with amygdalin as the internal standard (IS), good linear correlation was shown between the peak area ratio (test compound to IS) and the poncentration of the test compound. Conclusion Amygdalin can be used as the LC-ESI MS internal standard for serum multiple constituents quantitation after drug administration.%目的考察苦杏仁苷作为液相色谱电喷雾电离质谱联用技术测定血清中多种成分含量的内标物使用的可行性.方法血清样品加入苦杏仁苷,经三氯乙酸沉淀蛋白,以含甲酸的乙腈-水为流动相梯度洗脱,用Waters Acquity HSS T3色谱柱分离,电喷雾电离,正、负离子模式分别检测.结果在正离子和负离子模式下,血清样品中苦杏仁苷本身的峰面积与浓度线性关系良好,苦杏仁苷作为内标物测定血清中的芍药苷和阿魏酸,待测物内标峰面积比值与待测物浓度线性关系良好.结论苦杏仁苷可以作为液相色谱电喷雾电离质谱联用技术测定药后血清中多种成分含量的内标物使用.【总页数】3页(P410-412)【作者】马靖;张伯礼;梁乾德;高月;肖成荣;马增春;王宇光;刘明;谭洪玲;陆倍倍【作者单位】300193 天津,天津中医药大学;300193 天津,天津中医药大学;100850 北京,军事医学科学院放射与辐射医学研究所;100850 北京,军事医学科学院放射与辐射医学研究所;100850 北京,军事医学科学院放射与辐射医学研究所;100850 北京,军事医学科学院放射与辐射医学研究所;100850 北京,军事医学科学院放射与辐射医学研究所;100850 北京,军事医学科学院放射与辐射医学研究所;100850 北京,军事医学科学院放射与辐射医学研究所;100850 北京,军事医学科学院放射与辐射医学研究所【正文语种】中文【中图分类】R927.2【相关文献】1.液相色谱-质谱/质谱联用技术在测定白酒中甜蜜素含量中的应用 [J], 陈海元;王永健2.气相色谱/质谱(GC/MS)联用技术对麝香的多成分含量分析 [J], 张皓冰;何昱;贾国惠;洪筱坤;王智华;叶愈青3.液相色谱-质谱/质谱联用技术在测定白酒中甜蜜素含量中的应用 [J], 陈海元;王永健;4.高效液相色谱-质谱联用法测定消癌平片中通关藤苷A、H、I含量 [J], 王祁民;孟璐;王小楠;付冉;丁琮洋;郭彩会;孙利民;许剑峰5.高效液相色谱-质谱联用法测定消癌平片中通关藤苷A、H、I含量 [J], 王祁民; 孟璐; 王小楠; 付冉; 丁琮洋; 郭彩会; 孙利民; 许剑峰因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。