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脂肪肝的轻重度判断标准
脂肪肝的轻重度，可以通过以下几种检查进行判断：
1、肝细胞脂肪样变比例：如果肝细胞脂肪样变的比例达到
5%-32%，称之为轻度脂肪肝。
如果比例达到33％-65％，称之为中度脂肪肝。
如果肝细胞脂肪样变的比例达到66%以上，就称为重度脂肪肝；
2、B超检查：比较便捷，可以比较粗略的判断脂肪肝的轻重度。
通过B超检查看整个肝脏的回声情况的改变，可以做出轻度、中度、重度脂肪肝的判断，同时也可以看是否存在肝硬化的表现；
3、CT检查：CT检查比较客观，通过看肝脏和脾脏密度的比值进行判断。
如果肝脏与脾脏的密度比值在1.0-0.7，属于轻度脂肪肝，如果比值达到0.7-0.5，称之为中度脂肪肝。
如果比值达到0.5以下，称之为重度的脂肪肝；
4、肝穿刺活检：比较准确还是做肝穿刺活检，通过病理检查判断脂肪肝的轻重度。
脂肪肝怎么判别一、脂肪肝的判别脂肪肝是指肝细胞内脂肪含量增加到一定程度的一种肝脏疾病。
根据脂肪的含量和病理表现，可将其分为以下几类：1.肝脏为黄色，质地柔软，脂肪细胞内脂肪的含量占据大部分细胞的空间，可称为脂质肝。
2.红色肝，与正常肝脏相比色彩较浅，脂肪小滴散在细胞质之间，可称为水泡肝。
3.整个肝脏呈灰白色，质地坚硬，脂肪小滴散在各个部位，可称为混合型肝。
判别脂肪肝的方法有以下几种：1.超声检查：超声检查是判别脂肪肝的首要方法。
脂肪肝可以通过超声波影像来描述肝内脂肪的程度。
2.肝硬度检查：肝硬度检查可以通过声波传导，化学共振和磁共振成像等方法来判别脂肪肝。
3.肝功能检测：脂肪肝早期，肝功能一般不受影响，但随着病情加重，肝功能会迅速下降，血清肝酶水平显著升高，通过血清肝酶水平来判断脂肪肝的程度。
二、脂肪肝的治疗方法根据脂肪肝的病因、病程和病情的不同，医生会采用不同的治疗方法：1.病因治疗：对于由于饮食习惯、饮酒、糖尿病等因素引发的脂肪肝，需要规范饮食、即时戒酒，控制糖尿病等病因，以预防和治疗脂肪肝。
2.药物治疗：重度脂肪肝患者可以靠药物帮助恢复肝细胞功能，但药物治疗需要医生根据患者身体及病情来选择适合的药物。
3.手术治疗：对于脂肪肝进一步发展成肝硬化和肝癌等情况，可能需要进行肝移植等手术治疗。
三、脂肪肝的注意事项1.保持健康饮食：脂肪肝患者应该控制脂肪、糖类和盐的摄入，多吃蔬菜水果和粗粮，避免过食油腻和甜食。
2.适量运动：适量运动可以增强身体的代谢能力，促进脂肪代谢，有利于改善脂肪肝病情。
3.戒烟戒酒：吸烟、饮酒等习惯会加速脂肪肝的发展，患者应戒烟戒酒。
4.保证充足睡眠：保证充足睡眠对于恢复身体健康有很大的帮助。
5.定期体检：脂肪肝患者要进行定期的体检，包括肝功能指标、血脂、血糖等检查，及时掌握自身的健康情况。
总之，脂肪肝早期就应该引起重视，及时去医院检查和治疗，遵守医生的指导和建议，积极调整自己的生活习惯，才能更好地预防和治疗脂肪肝。
鱼类肝胆病变症状及防治法
鱼类病毒病、细菌病、营养代谢病、水质污染以及长期大剂量使用同一种抗菌药物等，都会引起鱼类肝胆发生病变，尤其是二龄草鱼患此病的几率较高，往往给广大养殖户造成巨大的经济损失。
一、症状
鱼类患肝胆病后，通常外表正常，主要问题发生于内脏。
其主要症状表现为：
1.颜色变化。
肝脏表现为白色、粉红色、土黄色、黄褐色、紫黑色或红、黄色交叉，甚至变为绿色。
2.病理变化。
肿大、水肿、萎缩、或变为网状，肝脏组织中有白色颗粒，或肝脏呈豆腐渣样。
3.肝脏有出血点，出现肝硬化，脾脏肿大有出血点。
4.胆囊变大、胆汁由正常的绿色变成黑色；有的胆囊变小或萎缩。
二、防治方法
首先应正确诊断鱼类的肝胆疾病是由什么病因引起的病变，然后有针对性地选择药物进行治疗。
1.发生此病通常与饲料有关，在投喂药饵前应改变饲料配方，选择营养均衡的全价饲料投喂，有助治疗。
2.如肝胆病发生时伴有外部疾病，如烂鳃、赤皮等，请对症使用外用消毒剂。
3.治疗肝胆病变建议采取内服药治疗，内服药宜选用复方中草药等药品。
如三黄粉、黄莲解毒散、保肝灵等药物按
包装说明添加拌饲，病情严重时可加大剂量，每天1～2次，连续投喂5～7天，由于这些复方中草药具有清热解毒、止血调理之功效，且不会引起耐药性，其治疗效果较明显。
笔者最近采取上述方法成功治愈2例草鱼肝胆病，为养殖户挽回了一定的经济损失。
草鱼脂肝病的诊断及防治草鱼生长快、养殖成本低，是我国养殖的主要品种之一。
但是，草鱼的病害多，每年由于病害的原因给养殖户造成巨大损失，特别一种营养性疾病――脂肝病，发病草鱼外表无症状，给养殖户的防治增加了难度，根据多年的防治探索，将其防治方法总结如下，供养殖户参考。
1、草鱼脂肝病的诊断(1)发病原因此病属于营养性疾病，主要是由于营养过剩引起。
当草鱼摄食超过其营养需求的配合饲料后，其营养不能完全转化，肝脏的负荷过大，脂肪堆积，就会引起脂肝。
(2)病鱼症状发病鱼外表无明显症状，就是在投饲的过程中陆续出现死亡，解剖鱼体，草鱼的肝脏明显增大、增厚，肝脏颜色发生变化，肝为白色、粉红色、土黄色、黄褐色或红黄交叉呈花色，甚至为绿色。
胆囊变大，胆汁变黑，肠外部及内部脂肪堆积，将解剖的鱼放在水中，水表面将会浮起一层油脂。
(3)诊断如果草鱼发病死亡，首先检查其外表、鳃、鳍等处，如无症状，草鱼长势良好，然后解剖鱼体，检查肝、脾、胆囊、肠等，如与上述症状相同，即可诊断为草鱼脂肝病。
2、草鱼脂肝病的治疗及预防(1)预防方法草鱼的饲养过程中要注意饲料搭配，有些养殖户用鲤鱼饲料投喂草鱼，鲤鱼饲料蛋白质含量高，容易造成草鱼脂肝。
一般提倡用草鱼专用配合饲料，在7～9月份，草鱼生长高峰期，每天必须搭配青草，增加饲料中的粗纤维含量，减少蛋白质含量。
当草鱼得此病后，应停止投喂商品饲料，转投青草，同时每隔15天，投喂一些保肝降脂的药物，加强预防。
草鱼脂肝病应以预防为主，在饲养过程中注意饲料中蛋白质和粗纤维的含量，注意商品饲料和青草的搭配，防止此病的发生。
(2)治疗方法①用鱼肝宝，每100千克饲料加200～400克，每日投喂2次，连用5～7天；②减少配合饲料的投喂，增加青草的投喂量；③也可用中药进行治疗，枸杞子100～200克/100千克鱼，五倍子25～50克/100千克鱼，拌饲投喂，连用5～7天，对病鱼有一定疗效。
一文读懂加州鲈脂肪肝、花肝、白肝、绿肝、黄肝，对症下药不要耽误治疗！在养殖加州鲈的过程中，养殖朋友都会注意保肝，但是有很多时候保肝的方向错了，是怎么回事？01这里先跟大家聊聊一个误区首先肝脏出现问题，并不是一定有细菌感染了，有很多朋友看到肝脏不好，就用抗菌药、消炎药，结果大大耽误治疗进度，同时还导致了肝脏负担更加严重！02肝脏病变都有哪几种？1、脂肪肝也就是花肝，这个是在加州鲈养殖过程中比较常见的，因为加州鲈本身就因其糖类代谢障碍很容易发生脂肪肝，同时投喂饲料都是高蛋白、高油脂的，长期高投喂，营养消化吸收不掉，就蓄积在脂肪。
此种肝脏问题，会大大影响肝脏正常功能，鱼也会出现慢料等问题，也会容易引起其他继发疾病，但花肝的根因是脂肪代谢问题，并不是细菌感染。
在日常养殖过程中一定要做好保健，保证肝脏的红润。
2、绿肝绿肝主要是胆管受阻或者胆囊破裂导致，这种情况相对较少，很多都是由于营养代谢出现血脂过高等造成，也会有细菌感染造成的情况。
3、白肝白肝主要就是长期用药导致的，这就是起初跟大家说的问题，很多养殖朋友遇到病就直接用药，忽视了“健康病”，是药三分毒，长期用药毒素蓄积就会出现白肝问题，出现此问题要注意保肝促排毒。
4、黄肝细菌感染、脂肪肝都会出现肝脏发黄，如果用手摸着感觉油那么大概率还是脂肪肝的问题，如果不是就是细菌感染了，这种在高温期比较高发一些。
在养殖过程中还是要定期消毒，注意降低病原密度。
5、肝胆综合征肝胆综合征引发的原因有很多，最大的诱因就是脂肪肝，因此在加州鲈养殖过程中一定要注意好脂肪肝的防控，毕竟肝脏好了，鱼无论从吃食、卖相、健康、养殖顺利的角度都是会更好的，日常保健一定不要忽视！建议大家用胆汁酸，作为胆汁中的有效活性成分，可以多方面提升、解决肝脏出现的问题，同时没有副作用，用的也放心。
浙江大学学报（农业与生命科学版） ３７（５）：５５７～５６４，２０１１ＪｏｕｒｎａｌｏｆＺｈｅｊｉａｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（Ａｇｒｉｃ畅＆ＬｉｆｅＳｃｉ畅）文章编号：１００８‐９２０９（２０１１）０５‐０５５７‐０８ＤＯＩ：１０．３７８５／ｊ．ｉｓｓｎ．１００８‐９２０９．２０１１．０５．０１４ 收稿日期：２０１０‐１１‐２３基金项目：２００７年公益性行业（农业）科研专项经费资助项目（ｎｙｈｙｚｘ０７‐０４４）； 罗非鱼现代产业技术体系建设＂资助项目（ｎｙｃｙｔｘ‐４８‐９）．作者简介：田娟（１９８３—），女，湖北蕲春人，硕士，研究实习员，主要从事鱼类组织学和分子营养学研究．Ｔｅｌ：０２７‐８１７８０１５７；Ｅ‐ｍａｉｌ：ｔｉａｎｊｕａｎ０３０３＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｍ．ｃｎ．通信作者：文华，男，博士，研究员，硕士生导师，主要从事鱼类营养与饲料研究．Ｔｅｌ：０２７‐８１７８０２５８；Ｅ‐ｍａｉｌ：ｗｅｎｈｕａ．ｈｂ＠１６３．ｃｏｍ．草鱼食用鱼不同颜色肝脏脂肪肝程度的判断田娟，文华，曾令兵，吴凡，蒋明，刘伟（中国水产科学研究院长江水产研究所农业部淡水生物多样性保护与利用重点开放实验室，湖北武汉４３０２２３）摘 要：通过测定草鱼（Ｃｔｅｎｏｐｈａｒｙｎｇｏｄｏｎｉｄｅｌｌａ）食用鱼不同颜色肝脏的水分和粗脂肪含量，并运用冰冻组织切片油红Ｏ染色技术对肝细胞进行染色，观察肝细胞脂肪滴的变化，利用Ｉｍａｇｅ‐ｐｒｏｐｌｕｓ６畅０软件测定其阳性面积率，判断不同颜色肝脏的草鱼食用鱼脂肪肝程度．结果表明：与草鱼正常肝相比，花肝、发白肝和发黄肝的水分含量分别降低６畅３０％、１０畅０１％和１４畅１７％（Ｐ＜０畅０５），粗脂肪含量分别升高１９８畅２５％、３３１畅００％和４８５畅５９％（Ｐ＜０畅０５）；参照人肝细胞脂肪变性级别的判断标准，正常肝、花肝、发白肝和发黄肝的级别分别评为１畅１０±０畅３０、２畅３０±０畅２０、３畅４０±０畅５０和４畅００±０畅２０；经Ｉｍａｇｅ‐ｐｒｏｐｌｕｓ６畅０软件分析，花肝、发白肝和发黄肝阳性面积率分别是正常肝的３畅９２、６畅３１和７畅３２倍；以上指标经回归分析得到的回归方程为：肝脏粗脂肪含量（Ｙ）与水分（Ｘ）：Ｙ＝－１畅０８９９Ｘ＋８２畅０３５７，Ｒ２＝０畅９８９（Ｐ＜０畅０１）；阳性面积率（Ｙ）与粗脂肪含量（Ｘ）：Ｙ＝０畅９７０２Ｘ－０畅２０９０，Ｒ２＝０畅９７３（Ｐ＜０畅０５）；粗脂肪含量（Ｙ）与肝细胞脂肪变性级别（Ｘ）：Ｙ＝３畅６６２４Ｘ－１畅７８８６，Ｒ２＝０畅９８５（Ｐ＜０畅０１）；阳性面积率（Ｙ）与肝细胞脂肪变性级别（Ｘ）：Ｙ＝３畅６２２４Ｘ－２畅１３０６，Ｒ２＝０畅９９６（Ｐ＜０畅０１）．结果证实，冰冻组织切片油红Ｏ染色技术对鱼类脂肪肝的判断具有较好的参考价值，结合阳性面积率与肝脏粗脂肪含量、肝细胞脂肪变性级别具有显著的正相关，本试验建议将草鱼肝细胞阳性面积率＞２％定义为脂肪肝，其级别评定标准：２％～７％为轻度脂肪肝，７％～１２％为中度脂肪肝，＞１２％为重度脂肪肝．关 键 词：脂肪肝；油红Ｏ染色法；阳性面积率；草鱼中图分类号：Ｓ８５２畅３１；Ｓ９６３畅７３ 文献标志码：ＡＴＩＡＮＪｕａｎ，ＷＥＮＨｕａ，ＺＥＮＧＬｉｎｇ‐ｂｉｎｇ，ＷＵＦａｎ，ＪＩＡＮＧＭｉｎｇ，ＬＩＵＷｅｉ（ＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＦｒｅｓｈｗａｔｅｒＢｉｏｄｉｖｅｒｓｉｔｙＣｏｎｓｅｒｖａｔｉｏｎａｎｄＵｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ，ＭｉｎｉｓｔｒｙｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ，ＹａｎｇｔｚｅＲｉｖｅｒＦｉｓｈｅｒｉｅｓＲｅｓｅａｒｃｈＩｎｓｔｉｔｕｔｅ，ＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙｏｆＦｉｓｈｅｒｙＳｃｉｅｎｃｅｓ，Ｗｕｈａｎ４３０２２３，Ｃｈｉｎａ）Ｊｕｄｇｍｅｎｔｏｎｔｈｅｄｅｇｒｅｅｏｆｆａｔｔｙｌｉｖｅｒｉｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔｃｏｌｏｒｌｉｖｅｒｓｆｏｒｅｄｉｂｌｅｇｒａｓｓｃａｒｐ，Ｃｔｅｎｏｐｈａｒｙｎｇｏｄｏｎｉｄｅｌｌａ．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＺｈｅｊｉａｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（Ａｇｒｉｃ畅＆ＬｉｆｅＳｃｉ畅），２０１１，３７（５）：５５７‐５６４Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅｄｅｇｒｅｅｏｆｆａｔｔｙｌｉｖｅｒｉｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔｃｏｌｏｒｌｉｖｅｒｓｆｏｒｅｄｉｂｌｅｇｒａｓｓｃａｒｐ（Ｃｔｅｎｏｐｈａｒｙｎｇｏｄｏｎｉｄｅｌｌａ）ｗａｓｄｉｓｃｕｓｓｅｄ畅Ｌｉｖｅｒｍｏｉｓｔｕｒｅｗａｓｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙｆｒｅｅｚｅ‐ｄｒｙｉｎｇｍｅｔｈｏｄ，ａｎｄｌｉｖｅｒｃｒｕｄｅｆａｔｗａｓｍｅａｓｕｒｅｄｇｒａｖｉｍｅｔｒｉｃａｌｌｙａｆｔｅｒｅｔｈｅｒｅｘｔｒａｃｔｕｓｉｎｇＳｏｘｈｌｅｔｍｅｔｈｏｄ畅ＴｈｅｈｅｐａｔｏｃｙｔｅｌｉｐｉｄｄｒｏｐｌｅｔｓｗｅｒｅｏｂｓｅｒｖｅｄｂｙｌｉｇｈｔｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙｉｎｏｉｌｒｅｄＯｓｔａｉｎｉｎｇｆｏｒｆｒｏｚｅｎｓｅｃｔｉｏｎｓ畅Ｂａｓｅｄｏｎｔｈｅｃｒｉｔｅｒｉｏｎｏｆｈｕｍａｎ ｓ浙江大学学报（农业与生命科学版）ｆａｔｔｙｌｉｖｅｒ，ｔｈｅｄｅｇｒｅｅｏｆｆａｔｔｙｌｉｖｅｒｉｎｅｄｉｂｌｅｇｒａｓｓｃａｒｐｗａｓｔｈｅｎｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙｔｈｅｐｏｓｉｔｉｖｅａｒｅａｒａｔｉｏ畅Ｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｎｏｒｍａｌｌｉｖｅｒｓｏｆｇｒａｓｓｃａｒｐ，ｔｈｅｍｏｉｓｔｕｒｅｃｏｎｔｅｎｔｓｏｆｍｏｔｌｅｙｌｉｖｅｒｓ，ｂｌｕｓｈｉｎｇｌｉｖｅｒｓａｎｄｙｅｌｌｏｗｉｎｇｌｉｖｅｒｓｗｅｒｅｄｅｃｒｅａｓｅｄｂｙ６畅３０％，１０畅０１％ａｎｄ１４畅１７％（Ｐ＜０畅０５），ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ；ｔｈｅｃｒｕｄｅｆａｔｃｏｎｔｅｎｔｓｗｅｒｅｉｎｃｒｅａｓｅｄｂｙ１９８畅２５％，３３１畅００％ａｎｄ４８５畅５９％（Ｐ＜０畅０５），ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ；ｔｈｅｎｕｍｂｅｒｏｆｈｅｐａｔｏｃｙｔｅｌｉｐｉｄｄｒｏｐｌｅｔｓｗｅｒｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｉｎｃｒｅａｓｅｄｗｉｔｈｔｈｅｐｅａｋｉｎｙｅｌｌｏｗｉｎｇｌｉｖｅｒｓ，ａｎｄｔｈｅｐｏｓｉｔｉｖｅａｒｅａｒａｔｉｏｓｗｅｒｅ３畅９２，６畅３１ａｎｄ７畅３２ｔｉｍｅｓｏｆｔｈｅｎｏｒｍａｌｌｉｖｅｒ（Ｐ＜０畅０５），ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ畅Ｔｈｅｄｅｇｒｅｅｏｆｈｅｐａｔｏｃｙｔｅｆａｔｔｙｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎｉｎｎｏｒｍａｌｌｉｖｅｒ，ｍｏｔｌｅｙｌｉｖｅｒ，ｂｌｕｓｈｉｎｇｌｉｖｅｒａｎｄｙｅｌｌｏｗｉｎｇｌｉｖｅｒｗａｓ１畅１０±０畅３０，２畅３０±０畅２０，３畅４０±０畅５０ａｎｄ４畅００±０畅２０，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ畅Ａｆｔｅｒｄｏｉｎｇｌｉｎｅａｒｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎａｎａｌｙｓｉｓ，ｌｉｖｅｒｆａｔｃｏｎｔｅｎｔｓ（Ｙ）ｗｅｒｅｎｅｇａｔｉｖｅｌｙｃｏｒｒｅｌａｔｅｄｗｉｔｈｉｔｓｍｏｉｓｔｕｒｅｃｏｎｔｅｎｔｓ（Ｘ）：Ｙ＝－１畅０８９９Ｘ＋８２畅０３５７，Ｒ２＝０畅９８９（Ｐ＜０畅０１）；ｔｈｅｐｏｓｉｔｉｖｅａｒｅａｒａｔｉｏ（Ｙ）ｗｅｒｅｐｏｓｉｔｉｖｅｌｙｃｏｒｒｅｌａｔｅｄｗｉｔｈｉｔｓｃｒｕｄｅｆａｔｃｏｎｔｅｎｔ（Ｘ）：Ｙ＝０畅９７０２Ｘ－０畅２０９０，Ｒ２＝０畅９７３（Ｐ＜０畅０５）；ｔｈｅｃｒｕｄｅｆａｔｃｏｎｔｅｎｔ（Ｙ）ｗｅｒｅｐｏｓｉｔｉｖｅｌｙｃｏｒｒｅｌａｔｅｄｗｉｔｈｔｈｅｄｅｇｒｅｅｏｆｈｅｐａｔｏｃｙｔｅｆａｔｔｙｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ（Ｘ）：Ｙ＝３畅６６２４Ｘ－１畅７８８６，Ｒ２＝０畅９８５（Ｐ＜０畅０１）；ｔｈｅｐｏｓｉｔｉｖｅａｒｅａｒａｔｉｏｓ（Ｙ）ｗｅｒｅａｌｓｏｐｏｓｉｔｉｖｅｌｙｃｏｒｒｅｌａｔｅｄｗｉｔｈｔｈｅｄｅｇｒｅｅｏｆｈｅｐａｔｏｃｙｔｅｆａｔｔｙｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ（Ｘ）：Ｙ＝３畅６２２４Ｘ－２畅１３０６，Ｒ２＝０畅９９６（Ｐ＜０畅０１）畅ＴｈｅｓｅｒｅｓｕｌｔｓｃｏｎｆｉｒｍｔｈａｔｔｈｅｏｉｌｒｅｄＯｓｔａｉｎｉｎｇｍｅｔｈｏｄｆｏｒｆｒｏｚｅｎｓｅｃｔｉｏｎｓｉｓｓｕｉｔａｂｌｅｆｏｒｅｖａｌｕａｔｉｎｇｔｈｅｄｅｇｒｅｅｏｆｆｉｓｈｆａｔｔｙｌｉｖｅｒ畅Ａｓａｒｅｓｕｌｔ，ａｃｃｏｒｄｉｎｇｔｏｔｈｅｐｏｓｉｔｉｖｅｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｂｅｔｗｅｅｎｔｈｅｐｏｓｉｔｉｖｅａｒｅａｒａｔｉｏａｎｄｔｈｅｃｒｕｄｅｆａｔｃｏｎｔｅｎｔｏｒｔｈｅｄｅｇｒｅｅｏｆｈｅｐａｔｏｃｙｔｅｆａｔｔｙｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ，ｉｔｉｓｓｕｇｇｅｓｔｅｄｔｈａｔｔｈｅｌｉｖｅｒｉｎｇｒａｓｓｃａｒｐｃａｎｂｅｄｅｆｉｎｅｄａｓｆａｔｔｙｌｉｖｅｒｗｈｅｎｉｔｓｐｏｓｉｔｉｖｅａｒｅａｒａｔｉｏｅｘｃｅｅｄｓ２％畅Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇｌｙ，ｔｈｅｄｅｇｒｅｅｏｆｆａｔｔｙｌｉｖｅｒｃａｎｂｅｄｅｆｉｎｅｄａｓｍｉｌｄｗｈｅｎｉｔｓｐｏｓｉｔｉｖｅａｒｅａｒａｔｉｏｒａｎｇｅｓｆｒｏｍ２％ｔｏ７％，ａｓｍｅｄｉｕｍｗｈｅｎｒａｎｇｉｎｇｆｒｏｍ７％ｔｏ１２％，ａｎｄａｓｓｅｒｉｏｕｓｗｈｅｎｅｘｃｅｅｄｉｎｇ１２％畅Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｆａｔｔｙｌｉｖｅｒ；ｏｉｌｒｅｄＯｓｔａｉｎｉｎｇ；ｐｏｓｉｔｉｖｅａｒｅａｒａｔｉｏ；ｇｒａｓｓｃａｒｐ 脂肪肝指脂肪在肝细胞中过度蓄积的临床病理综合征，其主要特点为肝组织中蓄积大量脂肪（大多是三酰甘油），肝细胞发生显著脂肪变性和临床上出现血脂变化等［１］．油红Ｏ是脂溶性染料，在脂肪内能高度溶解，可以特异性的使三酰甘油等中性脂肪呈橘红色，从而可直观的显示细胞中脂肪滴的位置与变化［２］．在对人和其他动物脂肪肝的研究中常应用冰冻组织切片油红Ｏ染色技术对脂肪肝的程度进行判断［３‐６］，在鱼类上目前此技术仅见用于观察组织中的脂肪细胞或脂质［７‐８］． 肝脏是鱼体内脂肪代谢最主要的器官之一，但由于集约化养殖、饲料营养不均衡、缺少降脂因子和滥用药物等原因，养殖鱼肝脏损伤严重并诱变为脂肪肝，因免疫和代谢机能下降，最终大批死亡，经济损失严重，此现象在草鱼中表现尤为严重［９‐１０］．目前对于鱼类脂肪肝的判断主要凭借解剖目测、测定血清中某些指标、肝脂含量、常规组织切片的苏木精‐伊红（ＨＥ）染色和电镜观察等［１１‐１４］，关于油红Ｏ染色技术在鱼类脂肪肝判断上的应用尚未见报道；因此，本试验通过应用改良后的油红Ｏ染色技术对草鱼肝细胞染色［１５‐１６］，观察肝细胞中脂肪滴的变化，参照人脂肪肝程度的判断标准［１７‐１８］，并依据肝细胞阳性面积率，对肝脏颜色不同的草鱼食用鱼脂肪肝程度进行判断，以期为鱼类脂肪肝的判断提供相对直观、简单的判断依据．１ 材料与方法１畅１ 材 料 均质量（２畅５±０畅５）ｋｇ的试验草鱼为２０１０年９月—２０１０年１０月分批次从湖北省荆州市某菜市场购得，解剖观察其肝脏颜色，选择肝脏颜色正常的草鱼５尾，肝脏颜色花色、发白和发黄的草鱼各５尾；本试验将其肝脏分别定义为正常肝、花肝、发白肝和发黄肝（图１）．１畅２ 方 法１畅２畅１ 肝脏水分和脂肪的测定 水分含量采用冷冻干燥法，使用ＣＨＲＩＳＴ型冷冻干燥机，冷冻干燥４８ｈ；粗脂肪含量按照索氏抽提法测定（ＧＢ／Ｔ５００９畅６‐２００３）．８５５第３７卷 田娟，等：草鱼食用鱼不同颜色肝脏脂肪肝程度的判断Ａ：正常肝；Ｂ：花肝；Ｃ：发白肝；Ｄ：发黄肝．图１ 草鱼４种不同颜色的肝脏Ｆｉｇ．１ Ｆｏｕｒｃｏｌｏｒｌｉｖｅｒｓｏｆｇｒａｓｓｃａｒｐ１畅２畅２ 冰冻组织切片油红Ｏ染色 将草鱼致死后，速剪大小约为２ｍｍ×５ｍｍ×５ｍｍ的中间部位肝脏，经淡水鱼用生理盐水冲洗后，放入甲醛‐钙固定液中．固定好的肝脏组织经冷冻包埋后，进行冰冻切片，厚度为１０μｍ，稍干燥后（约３ｍｉｎ），７０％乙醇稍洗（约２０ｓ），浸入油红Ｏ中染色８ｍｉｎ，７０％乙醇分化（约１５ｓ），在蒸馏水中浸洗３ｍｉｎ，在苏木精中染色（时间视显微镜下的观察细胞核是否染色为准），流水冲洗杂色后，在蒸馏水中浸洗３ｍｉｎ，用甘油明胶封片．分别在１０×４０和１０×１００倍光学显微镜下观察并拍照．１畅３ 图片分析 对１０×１００倍光学显微镜下拍摄的图片进行肝细胞脂肪变性级别与阳性面积率分析．肝细胞脂肪变性级别参照非酒精性脂肪性肝病诊疗指南［１７］，将脂肪肝定义为３０％以上的肝细胞发生脂肪变性和脂肪贮积；脂肪变性肝细胞占肝细胞总量的５％～３０％为１度脂肪变性；３０％～５０％为２度脂肪变性（轻度脂肪肝）；５０％～７５％为３度脂肪变性（中度脂肪肝）；７５％以上者或肝细胞弥漫脂肪变性呈鱼网状者为４度脂肪变性（重度脂肪肝）．采用Ｉｍａｇｅ‐ｐｒｏｐｌｕｓ６畅０软件进行平均光密度、总阳性面积分析，阳性面积率＝总阳性面积／图片总面积×１００％，肝细胞中细胞质被染为橘红色被定义为呈阳性反应．１畅４ 数据处理 试验结果用平均数±标准差表示，采用邓肯多重比较法分析试验结果平均数的差异显著性，Ｐ＜０畅０５为差异有统计学意义．各项指标之间的相关性用Ｐｅａｒｓｏｎ相关系数法，回归方程采用曲线估计（ｃｕｒｖｅｅｓｔｉｍａｔｉｏｎ）法建立，所有统计分析均采用Ｓｔａｔｉｓｔｉｃａ６畅０软件．９５５ 第５期浙江大学学报（农业与生命科学版）２ 结 果２畅１ 不同颜色草鱼肝脏形态特征 不同颜色草鱼肝脏外形特征见图１．发白肝和发黄肝出现肝贫血，发黄肝明显萎缩且极脆易碎．除正常肝外，其他颜色肝均观察到明显的脂肪，发黄肝被大量脂肪浸润．２畅２ 不同颜色草鱼肝脏水分和粗脂肪含量 由表１可见：与正常肝相比，花肝、发白肝和发黄肝的水分含量显著降低，分别降低６畅３０％、１０畅０１％和１４畅１７％（Ｐ＜０畅０５）；粗脂肪含量显著升高，分别升高１９８畅２５％、３３１畅００％和４８５畅５９％（Ｐ＜０畅０５）．表１ 不同颜色草鱼肝脏水分和脂肪含量Ｔａｂｌｅ１ Ｍｏｉｓｔｕｒｅａｎｄｃｒｕｄｅｆａｔｃｏｎｔｅｎｔｓｉｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔｃｏｌｏｒｌｉｖｅｒｓｏｆｇｒａｓｓｃａｒｐｗ／％指标正常肝花肝发白肝发黄肝水分７３畅３６±０畅６３ａ６８畅７４±０畅３０ｂ６６畅０２±０畅８５ｃ６３畅２２±０畅９８ｄ粗脂肪２畅２９±０畅１９ｄ６畅８３±１畅１８ｃ９畅８７±０畅３４ｂ１３畅４１±０畅６８ａ 注：表中数据按湿质量计；同行数据后的不同小写字母表示在Ｐ＜０畅０５水平差异有统计学意义．２畅３ 不同颜色草鱼肝脏冰冻组织切片油红Ｏ染色结果 不同颜色草鱼肝脏油红Ｏ染色见图２．图中肝细胞被染成蓝色的为细胞核，被染成橘红色的为脂肪滴，其中橘红色的深浅代表脂肪含量水平．在４种不同颜色的肝脏中，正常肝脂肪滴极少，面积小、颜色浅，且发生脂肪变性的肝细胞占整个肝细胞的比例＜３０％，其他３种颜色肝细胞脂肪滴的数量明显增多，面积大、颜色深，肝细胞脂肪变性比例也逐渐增大，细胞核偏移，部分细胞膜出现破裂，且发黄肝肝细胞被大量脂肪浸染，细胞界限模糊．４种颜色的肝脏肝细胞脂肪变性级别分别被评为１畅１０±０畅３０、２畅３０±０畅２０、３畅４０±０畅５０和４畅００±０畅２０． 利用Ｉｍａｇｅ‐ｐｒｏｐｌｕｓ６畅０软件分析和经统计分析，结果（表２）表明不同颜色的肝脏阳性面积率和平均光密度的差异有统计学意义（Ｐ＜０畅０５），其中花肝、发白肝和发黄肝阳性面积率分别是正常肝的３畅９２、６畅３１和７畅３２倍（Ｐ＜０畅０５）；平均光密度分别较正常肝提高５１畅７５％、４３畅８６％和３１畅２０％（Ｐ＜０畅０５）．２畅４ 脂肪肝判断指标间的相关性分析 对表１、表２中各指标间的相关性进行分析，其结果见表３．肝脏水分含量、粗脂肪含量、肝细胞阳性面积率、肝细胞脂肪变性级别这４个指标间存在显著相关性，得到的回归方程为：肝脏粗脂肪含量（Ｙ）与水分（Ｘ）：Ｙ＝－１畅０８９９Ｘ＋８２畅０３５７，Ｒ２＝０畅９８９（Ｐ＜０畅０１）；阳性面积率（Ｙ）与粗脂肪含量（Ｘ）：Ｙ＝０畅９７０２Ｘ－０畅２０９０，Ｒ２＝０畅９７３（Ｐ＜０畅０５）；粗脂肪含量（Ｙ）与肝细胞脂肪变性级别（Ｘ）：Ｙ＝３畅６６２４Ｘ－１畅７８８６，Ｒ２＝０畅９８５（Ｐ＜０畅０１）；阳性面积率（Ｙ）与肝细胞脂肪变性级别（Ｘ）：Ｙ＝３畅６２２４Ｘ－２畅１３０６，Ｒ２＝０畅９９６（Ｐ＜０畅０１）．表２ 不同颜色草鱼肝脏肝细胞油红Ｏ染色结果分析Ｔａｂｌｅ２ ＲｅｓｕｌｔａｎａｌｙｓｉｓｆｏｒｈｅｐａｔｏｃｙｔｅｓｓｔａｉｎｅｄｂｙｏｉｌｒｅｄＯｉｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔｃｏｌｏｒｌｉｖｅｒｓｏｆｇｒａｓｓｃａｒｐ指标正常肝花肝发白肝发黄肝脂肪变性级别１畅１０±０畅３０ｄ２畅３０±０畅２０ｃ３畅４０±０畅５０ｂ４畅００±０畅２０ａ阳性面积率／％１畅６５±０畅２８ｄ６畅４７±１畅０１ｃ１０畅４１±０畅８２ｂ１２畅０７±０畅１９ａ平均光密度７９畅６９±８畅６５ｃ１２０畅９３±７畅１４ａ１１４畅６５±６畅２９ａｂ１０４畅５５±５畅１９ｂ 注：同行数据后的不同小写字母表示在Ｐ＜０畅０５水平差异有统计学意义．０６５第３７卷 田娟，等：草鱼食用鱼不同颜色肝脏脂肪肝程度的判断 （Ａ，Ｂ）：正常肝，（Ｃ，Ｄ）：花肝，（Ｅ，Ｆ）：发白肝，（Ｇ，Ｈ）：发黄肝；Ａ、Ｃ、Ｅ、Ｇ为在１０×４０倍光镜下拍摄，Ｂ、Ｄ、Ｆ、Ｈ为在１０×１００倍光镜下拍摄；图中红色为脂肪滴，蓝色为细胞核．图２ 草鱼４种颜色肝脏肝细胞冰冻组织切片油红Ｏ染色Ｆｉｇ．２ ＨｅｐａｔｏｃｙｔｅｓｏｆｆｏｕｒｃｏｌｏｒｌｉｖｅｒｓｏｂｓｅｒｖｅｄｉｎｏｉｌｒｅｄＯｓｔａｉｎｉｎｇｆｒｏｚｅｎｓｅｃｔｉｏｎｓ１６５ 第５期浙江大学学报（农业与生命科学版）表３ 脂肪肝判断指标间的相关性分析Ｔａｂｌｅ３ Ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎａｎａｌｙｓｉｓａｍｏｎｇｃｒｉｔｉｃａｌｉｎｄｅｘｅｓｏｆｆａｔｔｙｌｉｖｅｒ相关系数水分脂肪变性级别平均光密度阳性面积率粗脂肪－０畅９９８１倡倡０畅９９２７倡倡０畅５５１３０畅９８６３倡阳性面积率－０畅９９２３倡倡０畅９９８１倡倡０畅６２４６平均光密度－０畅５９９３０畅５７９２脂肪变性级别－０畅９９４９倡倡 注：倡在Ｐ＜０畅０５水平相关性显著；倡倡在Ｐ＜０畅０１水平相关性极显著．３ 讨 论３畅１ 鱼类脂肪肝的判断方法与特征 林鼎等［１１］依据肝脂、血清部分指标（三酰甘油、胆固醇、谷丙转氨酶和谷草转氨酶）、常规组织切片ＨＥ染色和电镜观察等结果，将草鱼脂肪肝发生过程分为３个阶段：肝脂肪贮存阶段、肝脂肪浸润阶段和肝细胞核心区萎缩阶段．其第１个阶段特征为：肝脂５％～１０％（湿质量），较正常肝肝细胞变大且脂肪滴增多，脂肪渗透级别为 ＋＂或 ＋＋＂，血清部分指标升高；第２阶段特征：肝脂１０％～１５％，肝细胞中充满脂滴，细胞核偏离至一端，肝细胞脂肪渗透级别为 ＋＋＋＂，线粒体肿胀，较正常肝血清部分指标均降低；第３个阶段：肝脂＞１５％，肝细胞脂肪渗透级别为 ＋＋＋＋＂，细胞界限模糊，线粒体数减少，细胞膜消失，细胞核心区域萎缩，较正常肝血清部分指标均显著降低． Ｍｏｓｃｏｎｉ‐Ｂａｃ［１９‐２０］报道：在光学显微水平上，黑鲈（Ｄｉｃｅｎｔｒａｃｈｕｓｌａｂｒａｘ）脂肪肝症状为肝细胞排列不规则，肝细胞索不明显，细胞核从肝细胞中央移向边缘，肝内积累了大量的脂肪颗粒等；在电子超微水平上，病鱼肝的细胞质分离，线粒体肿胀，内质网和高尔基体内充满了大量的脂肪颗粒，细胞核偏离，核膜破裂．冯健等［１３］在电镜下观察红姑鱼（Ｓｃｉａｅｎｏｐｓｏｃｅｌｌａｔｕｓ）的脂肪肝症状为肝细胞线粒体、内质网与细胞浆内有大量微细至大颗粒状的脂滴出现． 根据以上对脂肪肝的判断方法，本试验选择其中的肝脏粗脂肪含量作为草鱼是否患有脂肪肝的初步判断依据．因常规组织切片ＨＥ染色只观察到肝细胞的大小，对肝细胞中的脂肪滴无法准确识别判断，而电镜因其前期处理非常繁琐且费用高，这些限制了以上２种方法在细胞水平上对脂肪肝程度判断的广泛应用．研究发现，正常肝经油红Ｏ染色后只有极少量的肝细胞质被染为橘红色，只有当肝细胞发生脂肪变性才观察到明显的橘红色［４］，因此本试验首次选择了相对准确、简单的冰冻切片油红Ｏ染色技术对鱼类脂肪肝程度进行判断．３畅２ 不同颜色肝脏粗脂肪含量的变化与脂肪肝程度 在对人脂肪肝的诊断上，通常认为，肝脏粗脂肪含量５％～１０％为轻度脂肪肝，１０％～２５％为中度脂肪肝，超过２５％为重度脂肪肝［１８］．依照此标准，在本试验中花肝、发白肝的脂肪含量在５％～１０％范围内，可能属于轻度脂肪肝（草鱼脂肪肝第１阶段），这与其外表观察较为吻合；发黄肝脂肪含量为１３畅４１％，可能属于中度脂肪肝（草鱼脂肪肝第２阶段）．证明通过测定肝脏脂肪含量来判断脂肪肝的程度对鱼类脂肪肝的判断有一定的参考意义，但与哺乳类不同，鱼类缺乏皮下脂肪层，其主要脂肪蓄积部位是腹腔肠系膜脂肪组织、肝脏及肌肉，由于肝脏是动物脂肪酸β代谢的重要部位，因而它是鱼类随营养状况而改变脂肪蓄积的主要调节性贮脂器官［２１‐２２］，同时，鱼肝脏粗脂肪含量还与食性［２３‐２４］、生长阶段［２４‐２５］等有关，因此以肝脏粗脂肪含量作为鱼类脂肪肝的判断指标存在一定的局限性．３畅３ 不同颜色肝脏肝细胞脂肪滴的变化与脂肪肝程度 依据肝脏肝细胞脂肪变性级别，本试验对草鱼肝细胞脂肪滴的染色观察显示，花色肝为２６５第３７卷 田娟，等：草鱼食用鱼不同颜色肝脏脂肪肝程度的判断轻度脂肪肝，发白肝为中度脂肪肝，发黄肝为重度脂肪肝．这与依据肝脏粗脂肪含量进行判断的结果存在出入，因肝细胞经油红Ｏ染色后，可直接观察到脂肪滴的大小以及细胞的变化，同时肝细胞脂肪变性级别是统计大量切片后得出的结论，因此相对肝脏粗脂肪含量，本试验认为依据此方法判断鱼类脂肪肝的程度更可靠． 阳性面积率和平均光密度主要是免疫组织化学中用来反映阳性物质的数量和水平，其中阳性面积率主要反映阳性物质的总量，平均光密度反映阳性物质的数量与染色程度的整体水平，即阳性物质的质量水平［２６］．本试验将细胞质被染为橘红色定义为呈阳性反应，利用Ｉｍａｇｅ‐ｐｒｏｐｌｕｓ６畅０软件测定阳性面积率，将其作为考核不同颜色草鱼肝脏脂肪肝程度的指标，从而减小实验者在对肝细胞脂肪变性级别判断时造成的人为误差．经大量图片分析统计，发现花肝、发白肝和发黄肝阳性面积率较正常肝显著提高（Ｐ＜０畅０５），进一步说明运用油红Ｏ染色技术对鱼类脂肪肝进行判断可靠、可信．因阳性面积率可反映不同颜色肝脏在同一个视野下肝细胞脂肪滴的整体数量水平，同时经回归分析发现肝细胞阳性面积率与肝脏粗脂肪含量、肝细胞脂肪变性级别存在显著的相关性，因此本试验建议在１０×１００倍光学显微镜观察下，将草鱼肝细胞阳性面积率＞２％定义为脂肪肝，２％～７％为轻度脂肪肝，７％～１２％为中度脂肪肝，＞１２％为重度脂肪肝．４ 结 论 本试验结果表明，应用冰冻组织切片油红Ｏ染色技术对肝细胞脂肪滴染色，依据其脂肪变性级别和阳性面积率，对鱼类脂肪肝程度进行判断，方法可行，结果可靠．本试验建议在１０×１００倍光学显微镜观察下，将草鱼肝细胞阳性面积率＞２％定义为脂肪肝，２％～７％为轻度脂肪肝，７％～１２％为中度脂肪肝，＞１２％为重度脂肪肝．Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅｓ：［１］ ＦＡＮＸｉ‐ｃｈｅｎｇ，ＨＵＡＮＧＹｉｎｇ，ＨＵＡＮＧＹｉ‐ｑｉ，ｅｔａｌ．（樊希承，黄颖，黄亦琦，等）．ＳｔｕｄｙｏｆｔｈｅｒｅｌａｔｉｖｉｔｙｂｅｔｗｅｅｎｂｌｏｏｄｌｉｐｉｄａｎｄｌｉｖｅｒｆａｔｏｆＮＡＦＬｒａｔｓ［Ｊ］．ＳｈｉｙｏｎｇＹｉｊｉＺａｚｈｉ（实用医技杂志），２００６，１３（２０）：３５３１‐３５３３．（ｉｎＣｈｉｎｅｓｅ）［２］ 徐维蓉．组织学试验技术［Ｍ］．上海：科学出版社，２００９：２７‐２８．［３］ ＫＡＮＧＳｕ‐ｙａ，ＤＥＮＧＭｉｎ，ＳＨＥＮＹｉｎ‐ｆａｎｇ，ｅｔａｌ．（康苏娅，邓敏，沈吟芳，等）．Ｃｌｉｎｉｃａｌａｎａｌｙｓｉｓｏｆ８ｅｘａｍｐｌｅｓｏｆｆａｔｔｙｌｉｖｅｒｉｎｐｒｅｇｎａｎｃｙ［Ｊ］．ＳｕｚｈｏｕＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＪｏｕｒｎａｌｏｆＭｅｄｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅ（苏州大学学报：医学版），２００４，２４（５）：７４４‐７４５．（ｉｎＣｈｉｎｅｓｅ）［４］ ＷａｄａＳ，ＹａｍａｚａｋｉＴ，ＫａｗａｎｏＹ，ｅｔａｌ．Ｆｉｓｈｏｉｌｆｅｄｐｒｉｏｒｔｏｅｔｈａｎｏｌａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎｐｒｅｖｅｎｔｓａｃｕｔｅｅｔｈａｎｏｌ‐ｉｎｄｕｃｅｄｆａｔｔｙｌｉｖｅｒｉｎｍｉｃｅ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＨｅｐａｔｏｌｏｇｙ，２００８，４９：４４１‐４５０．［５］ ＣＡＯＮｉｎｇ‐ｆｅｎ，ＺＨＡＮＧＡｉ‐ｙｕｎ，ＹＵＡＮＹｉｎｇ‐ｃｈｕｎ（曹宁芬，张爱芸，袁迎春）．Ｉｎｔｅｒｖｅｎｉｎｇｅｆｆｅｃｔｏｆａｓｐａｒｔｉｃａｃｉｄ‐ｄｉａｍｉｎｏｖａｌｅｒｉｃａｃｉｄｏｎｔｈｅｎｏｎ‐ａｌｃｏｈｏｌｉｃｆａｔｔｙｌｉｖｅｒｄｉｓｅａｓｅｉｎｒａｂｂｉｔ［Ｊ］．ＭｅｄｉｃａｌＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＰｅｏｐｌｅ ｓＨｅａｌｔｈ（中国民康医学），２００９，２１（２４）：３０８７‐３０８８．（ｉｎＣｈｉｎｅｓｅ）［６］ ＬＩＡＯＹｕ，ＬＩＬｏｎｇ‐ｈｕｉ，ＺＵＯＧｕｏ‐ｑｉｎｇ，ｅｔａｌ．（廖于，李龙辉，左国庆，等）．Ｅｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔａｎｄｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆａｌｃｏｈｏｌｉｎｄｕｃｅｄｓｔｅａｔｏｔｉｃｈｅｐａｔｏｃｙｔｅｓｍｏｄｅｌ［Ｊ］．ＣｈｏｎｇｑｉｎｇＭｅｄｉｃｉｎｅ（重庆医学），２０１０，３９（８）：９０２‐９０４．（ｉｎＣｈｉｎｅｓｅ）［７］ ＪｏｈｎＷ，ＷｉｌｌｉａｍＡ，ＧｒｅｇｏｒｙＫ，ｅｔａｌ．Ｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｓｔａｒｔｅｒｄｉｅｔｓｗｉｔｈｄｉｆｆｅｒｅｎｔｌｅｖｅｌｓｏｆｓｏｙｂｅａｎｏｒｍｅｎｈａｄｅｎｏｉｌｏｎｒｅｄｄｒｕｍ（Ｓｃｉａｅｎｏｐｓｏｃｅｌｌａｔｕｓ）［Ｊ］．Ａｑｕａｃｕｌｔｕｒｅ，１９９７，１４９：３２３‐３３９．［８］ ＮａｎｔｏｎＤＡ，ＶｅｇｕｓｄａｌＡ，Ｒ宝ｒ狈ＡＭＢ，ｅｔａｌ．Ｍｕｓｃｌｅｌｉｐｉｄｓｔｏｒａｇｅｐａｔｔｅｒｎ，ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ，ａｎｄａｄｉｐｏｃｙｔｅｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎｉｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔｐａｒｔｓｏｆＡｔｌａｎｔｉｃｓａｌｍｏｎ（Ｓａｌｍｏｓａｌａｒ）ｆｅｄｆｉｓｈｏｉｌａｎｄｖｅｇｅｔａｂｌｅｏｉｌ［Ｊ］．Ａｑｕａｃｕｌｔｕｒｅ，２００７，２６５：２３０‐２４３．［９］ ＬＩＵＱｉａｎ，ＴＡＮＱｉｎｇ‐ｓｏｎｇ，ＣＨＥＮＸｉａｏ‐ｘｕａｎ，ｅｔａｌ．（刘迁，谭青松，陈孝煊，等）．Ｃｈａｎｇｅｓｏｆｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓａｎｄｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎｓｔｒｕｃｔｕｒｅｉｎｌｉｖｅｒｏｆｇｒａｓｓｃａｒｐ（Ｃｔｅｎｏｐｈａｒｙｎｇｏｄｏｎｉｄｅｌｌｕｓ）ｗｉｔｈｈｅｐａｔｏｂｉｌｉａｒｙｓｙｎｄｒｏｍｅ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｎｈｕｉＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅＳｃｉｅｎｃｅ（安徽农业科学），２００９，３７（１４）：６４６３‐６４６５，６４６７．（ｉｎＣｈｉｎｅｓｅ）［１０］ ＹＵＹｕｎ‐ｚｈｅｎ，ＷＡＮＧＸｉａｏ‐ｌｉｎｇ（喻运珍，王小玲）．Ｅｆｆｅｃｔｏｆｄｉｅｔａｒｙｂａｉｃａｌｉｎｏｎｌｉｖｅｒｆｕｎｃｔｉｏｎａｎｄｉｍｍｕｎｅｆｕｎｃｔｉｏｎｏｆｇｒａｓｓｃａｒｐ，Ｃｔｅｎｏｐｈａｒｙｎｇｏｄｏｎｉｄｅｌｌａ［Ｊ］．ＦｒｅｓｈｗａｔｅｒＦｉｓｈｅｒｉｅｓ（淡水渔业），２００６，２６（３）：９７‐９８．（ｉｎＣｈｉｎｅｓｅ）［１１］ ＬＩＮＤｉｎｇ，ＭＡＯＹｏｎｇ‐ｑｉｎｇ，ＣＡＩＦａ‐ｓｈｅｎｇ（林鼎，毛永庆，蔡发盛）．ＮｕｔｒｉｔｉｏｎａｌｌｉｐｉｄｌｉｖｅｒｄｉｓｅａｓｅｏｆｇｒａｓｓｃａｒｐＣｔｅｎｏｐｈａｒｙｎｇｏｄｏｎｉｄｅｌｌｕｓ（Ｃ．ｅｔＶ．）［Ｊ］．３６５ 第５期浙江大学学报（农业与生命科学版）ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌＯｃｅａｎｏｌｏｇｙａｎｄＬｉｍｎｏｌｏｇｙ（中国海洋湖沼学报：英文版），１９９０，８：３６３‐３７４．（ｉｎＣｈｉｎｅｓｅ）［１２］ ＣＨＥＮＦａｎｇ，ＹＡＮＧＤａｉ‐ｑｉｎ，ＦＡＮＧＣｈａｎｇ，ｅｔａｌ．（陈芳，杨代勤，方长，等）．ＥｆｆｅｃｔｏｆｄｉｅｔａｒｙｃｈｏｌｉｎｅｏｎｔｈｅｇｒｏｗｔｈａｎｄｌｉｐｉｄｃｏｎｔｅｎｔｓｉｎｍｕｓｃｌｅａｎｄｌｉｖｅｒｏｆＭｏｎｏｐｔｅｒｕｓａｌｂｕｓ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＨｕｂｅｉＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＣｏｌｌｅｇｅ（湖北农学院学报），２００２，２２（４）：３２７‐３２９．（ｉｎＣｈｉｎｅｓｅ）［１３］ ＦＥＮＧＪｉａｎ，ＪＩＡＧａｎｇ（冯健，贾刚）．ＳｔｕｄｉｅｓｏｎｔｈｅｆａｔｔｙｌｉｖｅｒｄｉｓｅａｓｅｓｒｅｓｕｌｔｅｄｆｒｏｍｄｉｆｆｅｒｅｎｔｌｉｐｉｄｌｅｖｅｌｓｉｎＳｃｉａｅｎｏｐｓｏｃｅｌｌａｔｕｓｄｉｅｔｓ［Ｊ］．ＡｃｔａＨｙｄｒｏｂｉｏｌｏｇｉｃａＳｉｎｉｃａ（水生生物学报），２００５，２９（１）：６１‐６４．（ｉｎＣｈｉｎｅｓｅ）［１４］ ＦＥＮＧＪｉａｎ，ＬＩＵＹｏｎｇ‐ｊｉａｎ，ＬＩＵＤｏｎｇ‐ｈｕｉ，ｅｔａｌ．（冯健，刘永坚，刘栋辉，等）．ＲｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｂｅｔｗｅｅｎｄｉｅｔａｒｙｌｉｐｉｄｌｅｖｅｌｓａｎｄｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎｏｆｌｉｐｉｄａｃｉｄｓｏｎｆａｔｔｙｌｉｖｅｒｄｉｓｅａｓｅｉｎｊｕｖｅｎｉｌｅＳｃｉａｅｎｏｐｓｏｃｅｌｌａｔｕｓ［Ｊ］．ＭａｒｉｎｅＳｃｉｅｎｃｅｓ（海洋科学），２００４，２８（６）：２８‐３１．（ｉｎＣｈｉｎｅｓｅ）［１５］ ＴＩＡＮＹｕ‐ｗａｎｇ，ＬＩＬｉｎ，ＬＩＬｉ，ｅｔａｌ．（田玉旺，李琳，李丽，等）．ＩｎｔｒｏｄｕｃｅｏｎｅｉｍｐｒｏｖｅｄｍｅｔｈｏｄｏｆｏｉｌｒｅｄＯｓｔａｉｎｉｎｇ［Ｊ］．ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＨｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙａｎｄＣｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ（中国组织化学与细胞化学杂志），２００７，１６（６）：７３６．（ｉｎＣｈｉｎｅｓｅ）［１６］ ＴＡＮＧＨａｉ‐ｌｉｎ，ＴＡＮＧＲｏｎｇ‐ｊｕｎ，ＳＯＮＧＹｉｎｇ，ｅｔａｌ．（唐海林，唐荣军，宋颖，等）．Ｏｎｅｉｍｐｒｏｖｅｄｍｅｔｈｏｄｏｆｌｉｐｉｄｓｔａｉｎｉｎｇ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＤｉａｇｎｏｓｅＰａｔｈｏｌｏｇｙ（诊断病理学杂志），２００６，１３（２）：１５３‐１５４．（ｉｎＣｈｉｎｅｓｅ）［１７］ ＦａｔｔｙＬｉｖｅｒａｎｄＡｌｃｏｈｏｌｉｃＬｉｖｅｒＤｉｓｅａｓｅＳｔｕｄｙＧｒｏｕｐｏｆｔｈｅＣｈｉｎｅｓｅＬｉｖｅｒＤｉｓｅａｓｅＡｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ（中华医学会肝脏病学分会脂肪肝和酒精性肝病学组）．Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓｆｏｒｄｉａｇｎｏｓｉｓａｎｄｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆｎｏｎａｌｃｏｈｏｌｉｃｆａｔｔｙｌｉｖｅｒｄｉｓｅａｓｅｓ［Ｊ］．ＭｏｄｅｒｎＤｉｇｅｓｔｉｏｎａｎｄｉｎｔｅｒｖｅｎｔｉｏｎ（现代消化及介入诊疗），２００７，１２（４）：２６６‐２６９．（ｉｎＣｈｉｎｅｓｅ）［１８］ ＮＩＹａｎ‐ｊｕｎ，ＬＩＵＨｏｕ‐ｙｕ（倪燕君，刘厚钰）．Ｔｈｅｐｒｏｇｒｅｓｓｏｆｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ，ｄｉａｇｎｏｓｉｓａｎｄｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆｆａｔｔｙｌｉｖｅｒｄｉｓｅａｓｅ［Ｊ］．ＦｏｒｅｉｇｎＭｅｄｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ：ＳｅｃｔｉｏｎｏｆＤｉｇｅｓｔｉｖｅＤｉｓｅａｓｅ（国外医学：消化系疾病分册），１９９７，１７（３）：１９７‐１６２．（ｉｎＣｈｉｎｅｓｅ）［１９］ Ｍｏｓｃｏｎｉ‐ｂａｃａＮ．Ｈｅｐａｔｉｃｄｉｓｔｕｒｂａｎｃｅｓｉｎｄｕｃｅｄｂｙａｎａｒｔｉｆｉｃｉａｌｆｅｅｄｉｎｔｈｅｓｅａｂａｓｓ（Ｄｉｃｅｎｔｒａｃｈｕｓｌａｂａｘ）ｄｕｒｉｎｇｔｈｅｆｉｒｓｔｙｅａｒｏｆｌｉｆｅ［Ｊ］．Ａｑｕａｃｕｌｔｕｒｅ，１９８７，６７：９３‐９９．［２０］ Ｍｏｓｃｏｎｉ‐ｂａｃａＮ．Ｒｅｖｅｒｓｉｂｉｌｉｔｙｏｆａｒｔｉｆｉｃｉａｌｆｅｅｄ‐ｉｎｄｕｃｅｄｈｅｐａｔｏｃｙｔｅｄｉｓｔｕｒｂａｎｃｅｓｉｎｃｕｌｔｕｒｅｄｊｕｖｅｎｉｌｅｓｅａｂａｓｓ（Ｄｉｃｅｎｔｒａｃｈｕｓｌａｂａｘ）：ａｎｕｌｔｒａｓｔｒｕｃｔｕｒａｌｓｔｕｄｙ［Ｊ］．Ａｑｕａｃｕｌｔｕｒｅ，１９９０，８８：３６３‐３７０．［２１］ ＡｎｄｏＳ，ＭｏｒｉＹ，ＮａｋａｍｕｒａＫ，ｅｔａｌ．Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｏｆｌｉｐｉｄａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎｔｙｐｅｓｉｎｆｉｖｅｓｐｅｃｉｅｓｏｆｆｉｓｈ［Ｊ］．ＮｉｐｐｏｎＳｕｉｓａｎＧａｋｋａｉｓｈｉ，１９９３，５９：１５５９‐１５６４．［２２］ ＡｎｄｏＳ，ＭｏｒｉＹ．Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｏｆｓｅｒｕｍｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎｆｅａｔｕｒｅｓａｓｓｏｃｉａｔｅｄｗｉｔｈｌｉｐｉｄｌｅｖｅｌｓｏｆｍｕｓｃｌｅａｎｄｌｉｖｅｒｆｒｏｍｆｉｖｅｓｐｅｃｉｅｓｏｆｆｉｓｈ［Ｊ］．ＮｉｐｐｏｎＳｕｉｓａｎＧａｋｋａｉｓｈｉ，１９９３，５９：１５６５‐１５７１．［２３］ ＷａｎｇＪＴ，ＬｉｕＹＪ，ＴｉａｎＬＸ，ｅｔａｌ．Ｅｆｆｅｃｔｏｆｄｉｅｔａｒｙｌｉｐｉｄｌｅｖｅｌｏｎｇｒｏｗｔｈｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ，ｌｉｐｉｄｄｅｐｏｓｉｔｉｏｎ，ｈｅｐａｔｉｃｌｉｐｏｇｅｎｅｓｉｓｉｎｊｕｖｅｎｉｌｅｃｏｂｉａ（Ｒａｃｈｙｃｅｎｔｒｏｎｃａｎａｄｕｍ）［Ｊ］．Ａｑｕａｃｕｌｔｕｒｅ，２００５，２４９：４３９‐４４７．［２４］ ＤｕＺＹ，ＣｌｏｕｅｔＰ，ＨｕａｎｇＬＭ，ｅｔａｌ．Ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔｄｉｅｔａｒｙｌｉｐｉｄｓｏｕｒｃｅｓａｔｈｉｇｈｌｅｖｅｌｉｎｈｅｒｂｉｖｏｒｏｕｓｇｒａｓｓｃａｒｐ（Ｃｔｅｎｏｐｈａｒｙｎｇｏｄｏｎｉｄｅｌｌａ）：ｍｅｃｈａｎｉｓｍｒｅｌａｔｅｄｔｏｈｅｐａｔｉｃｆａｔｔｙａｃｉｄｏｘｉｄａｔｉｏｎ［Ｊ］．ＡｑｕａｃｕｌｔｕｒｅＮｕｔｒｉｔｉｏｎ，２００８，１４：７７‐９２．［２５］ ＴＩＡＮＪｕａｎ，ＬＥＮＧＸｉａｎｇ‐ｊｕｎ，ＬＩＸｉａｏ‐ｑｉｎ，ｅｔａｌ．（田娟，冷向军，李小勤，等）．Ｅｆｆｅｃｔｏｆｄｉｅｔａｒｙｃａｒｎｉｔｉｎｅｏｎｇｒｏｗｔｈｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ，ｂｏｄｙｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎａｎｄｌｉｐｉｄｍｅｔａｂｏｌｉｓｍｅｎｚｙｍｅｓｏｆｇｒａｓｓｃａｒｐ，Ｃｔｅｎｏｐｈａｒｙｎｇｏｄｏｎｉｄｅｌｌａ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＦｉｓｈｅｒｉｅｓｏｆＣｈｉｎａ（水产学报），２００９，３３（２）：２９５‐３０２．（ｉｎＣｈｉｎｅｓｅ）［２６］ ＬＩＴａｏ，ＦＡＮＹｕ，ＬＩＵＦａｎｇ（李涛，范妤，刘芳）．Ｔｈｅｓｔａｎｄａｒｄｉｚｅｄｍｅｔｈｏｄｏｆｍｅａｎｏｐｔｉｃａｌｄｅｎｓｉｔｙａｎａｌｙｓｉｓｉｎｆｉｇｕｒｅｏｆｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌｒｅａｃｔｉｏｎ［Ｊ］．ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｎａｔｏｍｙ（解剖学杂志），２００８，３１（５）：７２７‐７２８．（ｉｎＣｈｉｎｅｓｅ）４６５第３７卷 。
