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沙门氏菌检测实验报告沙门氏菌检测实验报告一、引言沙门氏菌是一种常见的细菌，可以引起人类和动物的食物中毒。
为了确保食品安全，及时检测沙门氏菌的存在非常重要。
本实验旨在通过检测食品样品中的沙门氏菌，探究食品安全的保障措施。
二、实验材料和方法1. 实验材料：- 食品样品：我们选取了市场上常见的鸡蛋作为实验样品。
- 培养基：使用含有沙门氏菌生长所需营养物质的培养基。
- 实验器材：培养皿、移液管、显微镜等。
2. 实验方法：- 样品处理：将鸡蛋表面消毒后，取一部分样品涂抹在培养皿上。
- 培养：将培养皿置于恒温培养箱中，以适宜的温度孵育。
- 观察：观察培养皿上是否有沙门氏菌的生长。
- 显微镜观察：将培养皿中的细菌取出，放在显微镜下观察其形态特征。
三、实验结果经过一段时间的培养，我们观察到培养皿上出现了一些类似沙门氏菌的菌落。
为了确认这些菌落是否真的是沙门氏菌，我们进行了显微镜观察。
结果显示，这些菌落具有沙门氏菌的典型形态特征，包括短而粗的杆状细胞和鞭毛等。
四、讨论通过本实验，我们成功地检测出了食品样品中的沙门氏菌。
这一结果表明，市场上的鸡蛋存在沙门氏菌的污染风险。
沙门氏菌是一种能够在人体内引起食物中毒的致病菌，因此，我们需要采取相应的措施来确保食品安全。
目前，食品安全已成为社会关注的焦点之一。
为了减少沙门氏菌的污染，我们可以从以下几个方面入手：1. 加强食品生产环节的卫生管理，包括饲养环境的清洁和规范、饲料的质量监控等。
2. 提高消费者的食品安全意识，教育大众正确处理和烹饪食品的方法，避免生食或未煮熟的食物。
3. 增加食品检测的频率和范围，加强对食品生产企业的监管，及时发现和处理存在问题的食品。
综上所述，沙门氏菌检测实验的结果表明鸡蛋存在沙门氏菌的污染风险。
为了保障食品安全，我们需要加强对食品生产环节的管理和监督，提高消费者的食品安全意识，并加强食品检测的力度。
只有通过全社会的共同努力，才能确保食品的安全和健康。
实验六食品中沙门氏菌的检验一、概述：1.沙门氏菌的形态特征：革兰氏阴性，两端钝圆的短杆菌，无芽孢，一般无荚膜，周身鞭毛，运动力强，具菌毛。
2.沙门氏菌需氧或兼性，10-42℃都可生长，最适生长温度为37℃，最适pH 为6.8-7.8。
3.沙门氏菌食物中毒的食品主要为动物性食品，特别是畜肉类及其制品，污染肉类食物的几率很高。
冷冻对沙门氏菌无杀灭作用，即使在-25℃低温仍可存活10个月左右。
意义：沙门氏菌是引起食物中毒的重要病原菌。
在世界各国各类细菌性的食物中毒中，沙门氏菌常居前列。
因此，沙门氏菌的检测是各国检验机构对多种进出口食品的必检项目之一。
二、操作步骤：1．前增菌——第一步使食物样品在含有营养的非选择性培养基中增菌，使受损伤的沙门氏菌细胞恢复到稳定的生理状态。
2．选择性增菌——在含选择性抑制剂的促生长培养基中间，样品进一步增菌的一个步骤。
此培养基允许沙门氏菌持续增殖，同时阻止大多数其他细菌的增殖。
3．选择性平板分离——这一步采用固体选择性培养基，抑制非沙门氏菌的生长，提供肉眼可见的疑似沙门氏菌纯菌落的识别。
4．生化鉴定——排除大多数非沙门氏菌，提供了沙门氏菌培养物菌属的生理生化鉴定结果。
5．血清学技术——对沙门氏菌属培养物进行血清学分型鉴定，确定菌型。
主要沙门氏菌有2000多个血清型，可先用多价血清鉴定，再用单因子血清鉴定，先有常见菌型的血清鉴定，再用不常见菌型的血清鉴定。
三、实验过程：1.前增菌将样品鸡蛋壳用灭菌棉签查拭蛋壳后，将棉签上部剪掉，下部放入前增菌培养基BPW中，5个棉签放入150mL前增液中，将制备好的预增菌液于37℃培养8-18h。
（样品液变浑浊即可）2.选择性增菌轻轻摇动培养过的样品混合物，移取4mL前增菌液转种于40mL TTB选择性增菌液内，于42 ℃±1 ℃培养18h-24h。
如果菌株生长过慢（TTB 培养基需现配现用，每组制备40ml增菌液，需加入816uL的碘液后再加入前增液）。
食品沙门氏菌测试方法标准
食品沙门氏菌测试方法标准主要包括以下步骤：
1.样品采集：从待检测的食品中采集适量样品，确保样品的代表性。
2.样品处理：将采集的样品进行适当处理，如破碎、研磨等，以便后续的
检测操作。
3.增菌培养：将处理后的样品接种到选择性培养基中，进行增菌培养。
选
择性培养基可以抑制其他微生物的生长，促进沙门氏菌的增殖。
4.分离培养：将增菌培养后的样品划线接种到鉴别培养基上，进行分离培
养。
鉴别培养基可以进一步筛选出沙门氏菌，并对其进行鉴别。
5.生化鉴定：对分离培养得到的沙门氏菌进行生化鉴定，以确定其是否为
沙门氏菌。
常用的生化鉴定方法包括API 20E、三糖铁试验等。
6.血清学鉴定：对生化鉴定为沙门氏菌的菌株进行血清学鉴定，以确定其
具体血清型。
常用的血清学鉴定方法包括玻片凝集试验、试管凝集试验等。
7.药敏试验：对分离得到的沙门氏菌进行药敏试验，以确定其对不同药物
的敏感性，为临床治疗提供参考。
需要注意的是，食品沙门氏菌测试方法标准可能因不同国家和地区而有所差异。
因此，在实际操作中，应根据当地的标准和法规进行相应的调整和操作。
沙门氏菌检验及分析一、简介沙门氏菌是一种能引起人类和动物肠道感染的细菌，也可以引起食品中毒。
它主要通过食品、饮用水和接触感染物传播。
对于食品中的沙门氏菌进行检验和分析，对保障食品安全至关重要。
二、检验方法1.纳氏肠杆菌培养基法用纳氏肠杆菌培养基法检验食品中的沙门氏菌，是一种常用的方法。
它利用富含养分的培养基，使得沙门氏菌能够在培养基中迅速生长，并形成典型的菌落。
检验人员可以根据菌落的形态、颜色和大小等特征来识别沙门氏菌的存在。
2.血液平板培养法血液平板培养法是另一种常用的检验方法。
将待测样品涂抹在富含养分的血液平板上，再将平板置于恒温培养箱中培养一段时间，观察是否有典型的沙门氏菌菌落的产生。
3. PCR法PCR法是一种较为快速、敏感的检验方法。
通过PCR技术可以快速对样品中的沙门氏菌进行检测，结果准确可靠。
这种方法对实验条件和检验人员的要求较高，但可以提高检测的速度和准确性。
三、分析结果通过上述方法进行检验后，需要进行有关分析。
针对检验结果，进行有关的分析可以有效地判断食品中是否存在沙门氏菌污染，并确定污染的程度。
1. 菌落计数通过检验方法得到的菌落数可以反映食品中的沙门氏菌污染程度。
一般来说，菌落数越多，说明沙门氏菌污染越严重。
2. 菌株鉴定对分离出的菌株进行鉴定，可以确定其是否为沙门氏菌。
根据鉴定结果，可以进一步分析菌株的来源和特性。
3. 毒素检测有些沙门氏菌会产生毒素，对食品中的毒素进行检测，可以确定食品中是否存在具有毒素产生能力的沙门氏菌。
四、实验注意事项在进行沙门氏菌检验及分析时，有一些实验注意事项需要遵守。
1. 实验室操作检验和分析工作要在严格的实验室条件下进行，保证实验室内的环境洁净，避免交叉污染。
2. 操作规范操作人员要求严格遵守相关操作规程，使用消毒剂对实验仪器、培养基和工作台进行处理。
3. 实验安全在进行检验和分析实验时，要注意个人防护，避免因接触致病菌而导致感染。
五、应用领域沙门氏菌检验及分析在食品安全领域具有广泛的应用。
沙门氏菌的实验报告沙门氏菌的实验报告引言：沙门氏菌是一种常见的细菌，广泛存在于自然环境中，尤其是在动物体内。
它是引起人类食物中毒的主要病原菌之一。
为了更好地了解沙门氏菌的特性和对人类健康的影响，我们进行了一系列的实验。
实验一：沙门氏菌的分离与培养我们从市场购买了一份新鲜鸡蛋，并在实验室中进行了分离与培养的操作。
首先，我们将鸡蛋表面进行消毒处理，然后用无菌的工具将鸡蛋壳上的细菌刮取到培养基上。
接着，我们将培养基置于恒温箱中，控制温度和湿度，以促进沙门氏菌的生长。
经过一段时间的培养，我们成功地分离出了纯净的沙门氏菌菌落。
实验二：沙门氏菌的形态观察为了观察沙门氏菌的形态特征，我们使用了光学显微镜对其进行了观察。
在显微镜下，我们发现沙门氏菌呈杆状或球状，大小约为0.5至1.5微米。
沙门氏菌具有鞭毛，使其能够在液体中快速移动。
此外，我们还观察到沙门氏菌菌落呈灰白色或淡黄色，有时会形成粘液。
实验三：沙门氏菌的生长条件为了确定沙门氏菌的适宜生长条件，我们进行了一系列的实验。
首先，我们将沙门氏菌接种于不同温度的培养基上，发现其最适宜生长的温度为37摄氏度。
此外，我们还研究了沙门氏菌在不同pH值下的生长情况，结果显示其最适宜生长的pH值为6.5至7.5。
这些实验结果为控制沙门氏菌的生长提供了重要的参考。
实验四：沙门氏菌的致病机制为了研究沙门氏菌对人类健康的影响，我们进行了一系列的实验来探索其致病机制。
首先，我们将沙门氏菌接种于小鼠体内，并观察其对小鼠的影响。
结果显示，被感染的小鼠出现了食欲不振、腹泻和发热等症状。
进一步的实验表明，沙门氏菌通过侵入人体细胞并释放毒素来引起病症。
这些实验结果为预防和治疗沙门氏菌感染提供了重要的依据。
实验五：沙门氏菌的控制方法为了控制沙门氏菌的传播和感染，我们进行了一些实验来研究其控制方法。
首先，我们发现煮沸可以有效地杀死沙门氏菌，因此在食物加工过程中要确保充分的加热。
此外，我们还研究了一些抗生素对沙门氏菌的抑制作用，结果显示某些抗生素可以有效地抑制其生长。
沙门氏菌方法验证报告一、引言沙门氏菌是一种常见的食物中毒病原菌，其感染会导致严重的胃肠道疾病，给人们的健康带来了威胁。
因此，对食品中的沙门氏菌进行快速、准确的检测非常重要。
本报告旨在介绍沙门氏菌方法验证的步骤和结果，以及验证的可靠性和适用性。
二、实验步骤2.1 样品准备1.收集食品样品，如鸡肉、鸡蛋等，确保样品来源真实可靠。
2.根据实验要求，将样品切割成适当大小的块状。
2.2 沙门氏菌培养1.取一定数量的样品，加入适量生理盐水中，进行均匀悬浮。
2.取适量悬浮液接种于沙门氏菌选择性富营养培养基上。
3.在37摄氏度下培养24小时，观察是否出现典型的沙门氏菌菌落。
2.3 DNA提取1.从培养基中取出沙门氏菌菌落，加入适量脱离剂，使细菌细胞破裂释放DNA。
2.使用离心机离心，将上清液转移到新的离心管中，加入适量蛋白酶K，进行蛋白酶消化。
3.加入适量异丙醇，沉淀DNA。
4.用去离子水洗涤沉淀，最终得到纯净的DNA样品。
三、实验结果3.1 沙门氏菌菌落观察在沙门氏菌选择性富营养培养基上进行培养后，观察到了典型的沙门氏菌菌落。
菌落呈灰白色，表面光滑，边缘整齐。
3.2 DNA提取结果经过DNA提取，成功获得了纯净的沙门氏菌DNA。
通过电泳检测，可见DNA条带清晰，无明显的降解或污染。
3.3 PCR扩增结果使用沙门氏菌特异性引物进行PCR扩增，得到了预期大小的DNA产物。
通过对PCR 产物进行测序，确认了其与沙门氏菌基因组序列完全匹配。
四、结果分析通过本实验的步骤，我们成功地从食品样品中分离出沙门氏菌，并获得了可靠的DNA提取和PCR扩增结果。
这表明所采用的方法能够准确、快速地检测沙门氏菌的存在。
五、验证的可靠性和适用性本实验使用的沙门氏菌方法验证步骤经过严格设计和实验，结果准确可靠。
该方法具有以下优点： 1. 简单易行：实验步骤简单，不需要复杂的设备和试剂。
2. 高效快速：从样品到结果的整个过程只需要24小时左右。
沙门氏菌检验国标检验步骤及接种方式沙门氏菌是一种常见的细菌引起的食源性疾病，可能会导致严重的胃肠道感染。
为了保障食品安全，确保公众的健康，我们需要进行沙门氏菌的国标检验。
下面是一份生动、全面且有指导意义的文章，详细介绍了沙门氏菌检验的国标检验步骤和接种方式。
第一步：样品准备在进行沙门氏菌检验之前，我们首先需要准备样品。
常见的样品包括食品、水、动物排泄物等，可能携带沙门氏菌。
样品应该收集自具有代表性的地点，并采取无菌采样容器进行收集。
收集样品时要注意避免污染，并确保样品的数量足够进行检验。
第二步：样品处理样品处理的目的是将潜在的沙门氏菌分离出来，并进行后续的检测。
可以采用不同的方法进行样品处理，常见的方法包括富集培养和选择性培养。
富集培养是将样品放入富集培养基中，利用培养基中的营养物质以及特定条件促使沙门氏菌生长。
选择性培养则是利用培养基中的特殊抑制剂抑制其他细菌的生长，从而使沙门氏菌生长出来。
第三步：菌落鉴定在样品处理后，我们需要对培养基上的菌落进行鉴定，确认是否为沙门氏菌。
常见的鉴定方法包括形态学鉴定、生理生化鉴定和分子生物学鉴定。
形态学鉴定主要通过观察菌落的形状、颜色和大小等特征来判断细菌的种类。
生理生化鉴定则是通过检测菌落对特定物质的代谢情况来确定细菌的种类。
分子生物学鉴定是利用特定的DNA序列来识别沙门氏菌的基因，通常使用PCR技术进行检测。
第四步：抗菌药敏试验沙门氏菌的抗菌药敏性检测是为了确定对何种抗生素具有敏感性。
通过抗菌药敏试验，我们可以选择合适的药物来治疗感染。
可以使用各种常见的抗生素盘进行试验，然后观察沙门氏菌对不同抗生素的反应。
根据抗生素的抑菌效果，可确定沙门氏菌的耐药性情况。
第五步：结果分析与报告最后一步是对检验结果进行分析，并撰写检验报告。
检验结果要结合国家标准进行评估，确定样品是否合格。
如果样品中检测到沙门氏菌，还需要评估其数量以及对公众健康可能造成的风险。
在撰写报告时，需要详细记录样品的来源、处理方法、检验步骤和结果，以及相应的建议和措施。
一、实验目的1. 学习沙门氏菌的分离方法。
2. 掌握沙门氏菌的鉴定技术。
3. 了解沙门氏菌的生物学特性。
二、实验原理沙门氏菌是一种革兰氏阴性杆菌，广泛存在于动物和人类肠道中。
沙门氏菌可以引起多种人类和动物疾病，如食物中毒、败血症等。
本实验通过分离和鉴定沙门氏菌，旨在了解其生物学特性，为食品安全和疾病防治提供依据。
三、实验材料1. 实验动物：小鼠。
2. 实验试剂：生理盐水、营养琼脂、麦康凯琼脂、革兰氏染色液、沙门氏菌诊断血清等。
3. 实验仪器：恒温培养箱、显微镜、离心机、高压灭菌器等。
四、实验方法1. 样品采集：采集疑似感染沙门氏菌的小鼠粪便、血液等样品。
2. 样品处理：将采集到的样品加入适量生理盐水，充分振荡，制成10^-1、10^-2、10^-3等不同稀释度的样品。
3. 分离培养：将不同稀释度的样品分别接种于营养琼脂和麦康凯琼脂平板，在37℃恒温培养箱中培养24小时。
4. 菌落观察：观察平板上的菌落特征，挑选典型的沙门氏菌菌落。
5. 革兰氏染色：将挑选出的菌落进行革兰氏染色，观察菌体形态。
6. 血清学鉴定：将革兰氏染色后的菌落进行血清学鉴定，确定菌种。
7. 生化试验：对鉴定出的沙门氏菌进行生化试验，进一步确定菌种。
五、实验结果1. 分离培养：在麦康凯琼脂平板上，观察到典型的沙门氏菌菌落，菌落呈红色，周围有透明圈。
2. 革兰氏染色：革兰氏染色结果显示，菌体呈革兰氏阴性，呈短小杆菌。
3. 血清学鉴定：血清学鉴定结果显示，该菌为鼠伤寒沙门氏菌。
4. 生化试验：生化试验结果显示，该菌能发酵葡萄糖、乳糖，不发酵蔗糖，不产生硫化氢，不形成吲哚。
六、实验讨论1. 本实验通过分离和鉴定沙门氏菌，成功从疑似感染小鼠样品中分离出鼠伤寒沙门氏菌。
2. 鼠伤寒沙门氏菌是一种常见的食源性病原菌，可引起人类和动物的食物中毒、败血症等疾病。
3. 实验过程中，要注意无菌操作，避免污染，确保实验结果的准确性。
七、实验结论1. 沙门氏菌可通过分离培养、革兰氏染色、血清学鉴定等方法进行鉴定。
包子中沙门氏菌的检测
一、实验目的
检测包子中是否有沙门氏菌的存在，以便更好的处理和解决包子在生产过程中在那些方面被金黄色葡萄球菌感染。
二、实验器材
无菌操作台、酒精灯、PH试纸，酸碱缓冲溶液、试管、锥形瓶、金黄色葡萄球菌试片、1ml移液管、酒精棉球、包子样品为2012年4月21日的梅干菜、生理盐水、高压蒸汽灭菌锅。
三、实验原理
根据金黄色葡萄球菌试片中含有选择性培养基，沙门氏菌特有辛酯酶的显色剂和高分子吸水凝胶，运用微生物特有的试片技术做快速检测的一种方法。
一般培养15到24小时，之后进行观察，紫红色的菌落为金黄色葡萄球菌；呈蓝色的菌落为其他大肠杆菌菌群。
四、实验步骤
取样品25g放入含有225ml的生理盐水的锥形瓶中，制成1：10的样品均液，再用1ml灭菌移液管吸取1：10样品均液1ml，注入含有9ml的生理盐水中进行稀释，摇匀为1:100的样品均液。
然后在无菌操作间内进行接种分别取1:10和1:100的样品均液1ml滴加到试片上，然后将上层缓慢盖上，静止10S左右培养基凝固。
同时做一个空白对照。
将试片叠加在一起放入自封袋内并封口，透明面朝上置于恒
温培养箱内，培养温度为36℃—1℃，培养15-24小时。
五、培养结果
根据上图现实，没有沙门氏菌检出，符合GB 19295-2011。
实验五食品中沙门氏菌的检验、实验目的要求1、了解食品的质量与沙门氏菌检验的意义。
2、掌握沙门氏菌的生物学特性。
3、掌握沙门氏菌检验的生化试验的操作方法和结果的判断。
4、掌握沙门氏菌属血清学试方法。
5、掌握食品中沙门氏菌检验的方法和技术。
、原理沙门菌属是一大群寄生于人类和动物肠道，其生化反应和抗原构造相似的革兰氏阴性杆菌。
种类繁多，少数只对人致病。
其他对动物致病，偶尔可传染给人。
主要引起人类伤寒，副伤寒以及食物中毒或败血症。
在世界各地的食物中毒中，沙门氏菌食物中毒常占首位或第二位。
食品中沙门氏菌的检验方法有五个基本步骤：1 前增菌；2 选择性增菌；3 选择性平板分离沙门氏菌；4 生化试验，鉴定到属；5 血清学分型鉴定。
目前检验食品中的沙门氏菌是按统计学取样方案为基础，25g 食品为标准分析单位。
三、试剂和仪器一)最先准备的器材规格名称数量1、500ml 广口瓶 1 个2、500ml 三角瓶 1 个3、250ml 三角瓶8 个4、15×150mm 试管18 支5、13×130mm 试管30 支6、1ml 移液管 5 支7、10ml 移液管 2 支8、直径为90 mm 平皿12 套9、250ml 量筒 1 支二)应灭菌的其它器材剪刀1 把不锈钢汤匙三)应准备的培养基和试剂1. 缓冲蛋白胨水(BP) ：2. 氯化镁孔雀绿(MM)增菌液：3. 亚硒酸盐胱氨酸(SC) 增菌液：4. 亚硫酸铋琼脂(BS) ：4 皿5. SS琼脂：6 皿用途稀释样品制缓冲蛋白胨水制增菌液、培养基制三糖铁培养基和PH7.2 尿素制蛋白胨水等制BS 、SS平板1把称量纸适量培养基总量所用容器1瓶225ml/瓶500ml 三角瓶1瓶100ml/瓶250ml 三角瓶1瓶100ml/瓶250ml 三角瓶1瓶60ml /瓶250ml 三角瓶1瓶100ml/瓶250ml 三角瓶沙门氏菌因子血清： 多价血清 ；11种因子血清。
按 26 种用于初步分型； 57种用于 进一步分型； 163 种用于详细分型。
四、实验内容样品处理→→前增菌→→选择性增菌→→选择性平板分离→→生化学试验→→血清 学试验鉴别→→结果报告第一天 样品处理和增菌培养（一）样品处理1、加工过的样品： 冻肉、蛋品、乳品及其他加工食品均应经过前增菌。
称取检样 25g ，加在装有 225mL缓冲蛋白陈水的 500mL 广口瓶内。
固体食品可先应用均质器以 8000～ 10000r/min 打碎 1min ， 或用乳钵加灭菌砂磨碎，粉状食品用灭菌匙或玻棒研磨使乳化，备用。
2、未加工样品 ： 鲜肉、鲜蛋、鲜乳或其他未经加工的食品不必经过前增菌。
各取 25g （25mL ） 加入灭菌生理盐水 25mL ，按前法做成检样匀液，备用。
（二）、前增菌和增菌1、加工过的样品 ： 冻肉、蛋品、乳品及其他加工食品均应经过前增菌。
接种操作： 将混均匀的稀释样液放在 36± 1℃培养 4h （ 干蛋品培养 18～ 24h ） ；移取 10mL ，转种于 100mL 氯化镁孔雀绿增菌液 （ MM ）或四硫酸钠煌绿增菌液内， 于 42℃培养 18～ 24h 。
同时，另取10mL ，转种于 100mL 亚硒酸盐肮氨酸增菌液 （SC ）内。
培养： 于 36± 1℃培养 18～24h 。
2、未加工样品： 鲜肉、鲜蛋、鲜乳或其他未经加工的食品不必经过前增菌。
接种操作： 取 25mL 匀液，接种于 100mL 氯化镁孔雀绿增菌液 （MM ） 或四硫磺酸钠 煌绿增菌液内，于 42℃培养 24h ；另取 25mL 接种于 100mL 亚硒酸盐胱氨酸增菌液 （SC ） 内 培养操作： 于 36±1℃培养 18～24h 。
第二天 接种选择性平板进行分离培养一）分离培养接种操作： 取前天增菌培养的增菌液 1 环，划线接种于一个亚硫酸铋琼脂平板 （ BS ） 和一个DHL 琼脂平板 （ 或 HE 琼脂平板、 WS 或 SS 琼脂平板 ） 。
两种增菌液可同时划线接种在 同一个平板上。
培养操作： 于 36± 1℃分别培养 18～24h （DHL 、HE 、WS 、SS ）或 40～48h （BS ） ，观察 各个平板上生长的菌落。
6. 7. 8. 9.10. 11.三糖铁琼脂： 尿素琼脂（pH7.2） ： 蛋白胨水：氰化钾 （KCN ）培养基： 氨基酸脱羧酶试验培养基氨基酸脱羧酶试验培养基6支 6ml/支 40 ml 15×150mm 试管 6支 4ml/支 25 ml 15×150mm 试管 6支 2ml/支 20 ml 13×100mm 试管 6支4ml/支 30 ml 13×130mm 试管赖氨酸）：6支1ml/支10 ml 13 ×130mm 试管不含赖氨酸） ： 6 支 1ml / 支 10 ml 13 ×130mm 试管12.第三天观察分离结果，从平板上挑取可疑菌落接种到：三糖铁琼脂、蛋白陈水、尿素琼脂（pH7.2）、氰化钾（KCN）和赖氨酸脱羧酶试验培养基（一）、观察分离结果典型的沙门氏菌菌落形态如下：A、在HEKTOEN氏肠道菌（HE）琼脂上。
菌落呈兰绿至兰色，带或不带黑色中心。
许多沙门氏菌培养物可呈现大的光泽黑色中心或几乎全部黑色的菌落。
B、亚硫酸铋（BS）琼脂上。
产硫化氢的菌落为黑色，有时带有金属光泽，呈褐色，灰色或黑色。
菌落周围的培养基通常开始呈褐色，但伴随培养时间的延长而变为黑色，并有所谓的晕环效应。
C、SS琼脂上：无色半透明；产硫化氢菌株，有的菌落中心带黑色。
（二）、五项生化试验接种操作：1、接种三糖铁琼脂：从选择性琼脂平板上，直接挑取2个或更多个菌落，分别接种三糖铁琼脂。
用一空白培养基作对照试验。
用灭菌接种针轻轻地接触每个菌落中心部位，接种TSI 斜面，先在斜面上划线，再于底层穿刺。
不需灼烧接种针，接种后面四项生化培养基。
2、接种蛋白陈水（供做靛基质试验）、尿素琼脂（pH7.2）、氰化钾（KCN）培养基和赖氨酸脱竣酶试验。
各用一空白培养基作对照试验。
接种三糖铁琼脂的同时，再接种蛋白陈水（供做靛基质试验）、尿素琼脂（pH7.2）、氰化钾（KCN）培养基和赖氨酸脱羧酶试验培养基及对照培养基各1 管。
培养操作：于36± 1℃培养18～24h，必要时可延长至48h。
革兰氏染色与镜检：从平板上挑取可疑菌落进行革兰氏染色与镜检第四天观察五项生化试验结果，判断沙门氏菌属性，做血清学试验（一）、观察五项生化试验结果1、在三糖铁琼脂内，符合沙门氏菌属种的反应结果见表1。
在三糖铁琼脂内只有斜面产酸并同时硫化氢(H 2S) 阴性的菌株可以排除，其他的反应结果均有沙门氏菌的可能，同时也均有不是沙门氏菌的可能。
2、符合沙门氏菌属的五项生化试按表2 判定结果，沙门氏菌属五项生化试的结果应符合A1、A2 和B1，其他反应结果均可以排除。
符合反应序号A1，为沙门氏菌属典型反应，判定为沙门氏菌属细菌。
如尿素琼脂(pH7.2) 、氰化钾(KCN)和赖氨酸脱羧酶试验三项中，有一项异常，按表3 可判定沙门氏菌：表31、抗原的准备一般采用1.5%琼脂斜面培养物作为玻片凝集试验用的抗原。
O血清不凝集时，将菌株接种在琼脂量较高的( 如2.5%一3%)培养基上再检查；如果是由于Vi 抗原的存在而阻止了O 凝集反应时，可挑取菌苔于1mL生理盐水中做成浓菌液，于酒精灯火焰上煮沸后再检查。
H 抗原发育不良时，将菌株接种在0.7%～0.8%半固体琼脂平板的中央，候菌落蔓延生长时，在其边缘部分取菌检查；或将菌株通过装有0.3%～0.4%半固体琼脂的小玻管1～2 次，自远端取菌培养后再检查。
2、O抗原的鉴定操作：用A～F多价O血清做玻片凝集试验，同时用生理盐水做对照。
在生理盐水中自凝者为粗糙形菌株，不能分型。
玻片凝集试验图被A～F 多价O血清凝集者，依次用O4；O3、10；O7；O8；O9；O2和O11因子血清做凝集试验。
根据试验结果，判定O群。
被O3、10 血清凝集的菌株，再用O10、O15、O34、O19单因子血清做凝集试验，判定E1、E2、E3、E4 各亚群，每一个O抗原成分的最后确定均应根据O单因子血清的检查结果，没有O单因子血清的要用两个O复合因子血清进行核对。
不被A～F多价O血清凝集者，先用57种或163 种沙门氏菌因子血清中的9种多价O 血清检查，如有其中一种血清凝集，则用这种血清所包括的O 群血清逐一检查，以确定O 群。
每种多价O 血清所包括的O因子如下：O 多价1 A，B，C，D，E，F群（并包括6，14 群）O多价213，16，17，18，21 群O多价328，30，35，38，39 群O多价440，41，42，43群O多价544，45，47，48群O多价650，51，52，53群O多价755，56，57，58群O多价859，60，61，62群O 多价9 63，65，66，67 群五、思考题1、如何提高沙门氏菌的检出率？2、沙门氏菌在三糖铁培养基上的反应结果如何？解释这些现象？3、沙门氏菌检验有哪5 个基本步骤？4、食品中能否允许有个别沙门氏菌存在？为什么？。
