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肌酐检测标准化 徐国超

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肌酐项目检测标准操作规程

肌酐项目检测标准操作规程

测定的操作程序，确保肌酐测定结果准确。
2.检验方法
肌氨酸氧化酶法(终点法）
3.检验原理
肌酐+H2O肌酸
肌酐+H2O肌氨酸+尿素
肌氨酸+O2+H2O甘氨酸+HCHO+H2O2
H2O2+4AAP+ESPMT醌亚胺+H2O
在546nm波长处比色，吸光度ΔA与CR浓度成正比。
4.临床意义
三羟甲基氨基甲烷0.1mol/L，二硫苏糖醇0.25g/L,防腐剂1g/L
8.6储存条件及有效期
校准品在2-8℃避光保存可稳定1.5年。校准品复溶后，于-20℃避光保存可稳定1个月;于2-8℃避光密封保存时，二氧化碳可稳定8小时，胆红素可稳定一天，其他项目可稳定一周。
8.7复溶方法
使用时，小心打开瓶盖，开启橡胶塞，每瓶准确加入5ml蒸馏水或去离子水，盖好橡胶塞，室温放置30分钟，同时避免阳光直射。轻轻旋转，使冻干品充分溶解，避免泡沫形成。随后即可与常规标本同时取样进行测定。每次吸取后及时盖好瓶盖，并于-20℃避光密封保存。
12.2肌酐测定只是临床医师对患者进行诊断的指标之一，临床医师还要根据患者的体征、病史及其他的诊断项目、诊断手段进行综合判断。
13.性能指标
13.1线性范围：在（30-1760）umol/L范围内：a)线性相关系数（r）应>0.995;b)（30-70）umol/L范围内，线性偏差应≦7umol/L;（70-1760）umol/L范围内，线性偏差应该≦10.0%。
二磷酸腺苷
1.5mmol/L
三羟甲基氨基甲烷缓冲液
100mmol/L
试剂2
还原型辅酶I（NADH)
0.3mol/l
肌酐检测标准化 徐国超52页PPT

肌酐检测标准化 徐国超52页PPT


56、书不仅是生活，而且是现在、过 去和未 来文化 生活的 源泉。 ——库 法耶夫 57、生命不可能有两次，但许多人连一 次也不 善于度 过。— —吕凯 特 58、问渠哪得清如许，为有源头活水来 。—— 朱熹 59、我的努力求学没有得到别的好处， 只不过 是愈来 愈发觉 自己的 无知。 ——笛 卡儿
拉
60、生活的道路一旦选定，就要勇敢地 走到底 ，决不 回头。 基础有两个，而且只有两个……公平和实用。——伯克 7、有两种和平的暴力，那就是法律和礼节。——歌德
8、法律就是秩序，有好的法律才有好的秩序。——亚里士多德 9、上帝把法律和公平凑合在一起，可是人类却把它拆开。——查·科尔顿 10、一切法律都是无用的，因为好人用不着它们，而坏人又不会因为它们而变得规矩起来。——德谟耶克斯
临床生化检验技术

临床生化检验技术

生化检验技术生化实验室徐国超概述●1.生化分析仪分类和发展●2.生化分析仪的原理●3.生化试验的方法●4.自动生化分析仪参数的设置●4.如何保证试验的准确性？分类管道连续流动式●按结构原理分分立式——常用离心式干片式——急诊常用小型●按测定速度分中型大型超大型（模块式）●按自动化程度分半自动全自动功能特点●特点：自动化——机械化的仪器设备模仿代替手工操作●优点：提高了工作效率减少了主观误差●灵敏准确快速标准化分立式自动生化分析仪的基本结构和功能●一、操作部分：主要由计算机和操作软件组成。

●二、测定部分：●1）样品盘和样品架：用于放置标本、空白和标准液，大多数生化分析仪可直接放入标本试管而不用吸出血清；●2）注射器：分标本针和试剂针两种，分别向反应杯中加入标本和试剂；●3）反应盘：带有反应杯的转盘，反应杯作为标本反应的场所，同时作为比色杯进行比色，常用的有塑料和石英两种；●4）试剂盘：用于放置实验项目所用到的试剂，试剂箱供放置试剂盘用，多有冷藏功能（4℃-15℃）；●5）恒温装置：保证反应在合适的温度下进行，常用的温度有25 ℃ 、30℃ 、37 ℃，常见的恒温装置有水浴、油浴和空气浴三种；●6）清洗单元：清洗反应完成后的反应杯，供下一测定使用；●7）测定单元：监测反应液的吸光度，由光源、分光系统、检测器组成；常见的光源有氙灯和卤素灯，分光系统有前分光和后分光两种，现在多采用后分光技术，后分光的优点是可以同时选用双波长或多波长进行测定。

概述●1.生化分析仪分类和发展●2.生化分析仪的原理●3.试验方法●4.自动生化分析仪参数的设置●4.如何保证试验的准确性？常用的生物化学检验技术●在临床生检验和临床生化科研中常应用多种分析技术、包括光谱分析技术、电化学分析技术、电泳分析技术、层析和离心分析技术及自动化分析技术等●其中光谱分析技术是最基本和最常用的，它具有灵敏、准确、快速、简便、选择性好和不破坏等特点而被广泛应用，生化分析仪采用的就是光谱技术中的吸收光谱法和比浊法。

18.6.25徐国超肾脏标志物解读与应用

18.6.25徐国超肾脏标志物解读与应用


NGAL 能确切反 映CKD 患者肾脏 损害的程度，同 时也可作为CKD 患者肾功能恶化 的一个新的预测 指标
尿NGAL水平可用于监 测不同肾脏疾病的状况 和治疗反应，并反映出 这些疾病的肾小球滤过 屏障、近端肾小管重吸 收和远端肾单位的损害
NGAL的临床应用
• 急性肾损伤新的早期诊断标志物 • 对慢性肾脏病、继发性肾脏病具有诊断 及预警意义 • 检测肾脏病治疗效果及病变程度评估 • 肿瘤性疾病中具有明确的组织特异性 • 与心血管疾病的发生发展相关
断肾小球损伤的一个重要指标。
尿中微量白蛋白的稳定性
尿中微量白蛋白4℃贮存可稳定1-8周 冷冻后一些尿样偏低 冷藏或冷冻复溶后应充分混匀（至少3-4次颠倒混合） 尿样有浑浊应充分离心沉淀后取上清液测定，否则结果偏高
糖尿病患者首次阳性则应在3-6个月内再测2次以上； 如其中有2次阳性则为早期糖尿病肾病；
胱抑素C: 不受年龄、性别、体重、炎症等影响：特异性高
胱抑素C: 分子量小，带正电荷，仅经肾小球滤过而被清除，并 在近曲小管重吸收，但重吸收后被完全代谢分解，不返回血液
胱抑素C: 敏感性好 正常情况，胱抑素C在血清和血浆中的浓度为0.51-1.09mg/L；
肾衰时, 肾小球滤过率下降，胱抑素C浓度可增加10多倍； 若肾小球滤过率正常，而肾小管功能失常时，会阻碍胱抑素C
肾脏病与肥胖” 2018年3月8日是第13个“世界肾脏病日”“关注肾脏病，关爱女性健
康”
肾脏生理学
血液： 水，矿物质，电解质
肾脏：滤过 & 重吸收
尿液
膀胱
排尿
肾单位
肾小体 肾小管
肾小球 肾球囊 近端小管
细段 远端小管
滤过功能
干化学速率法检测肌酐在临床的应用分析

干化学速率法检测肌酐在临床的应用分析

每份标 本 一个 吸头 ， 有效 防止 了标 本 间的交 叉污 染网 。因此 ， 对ｉ ｔ ｓ床具 有很 高 的使 用 价值 。
取 ５ ０份 标 本 分 别 在 Ｏ Ｙ Ｕ — Ｕ ４ Ｌ ＭＰ Ｓ Ａ ６ ０自动 生 化 分 析
仪 用苦 味酸 速率 法 和 Ｖｎ＇Ｏ ． Ｒ Ｓ５１自动 生 化分 析仪 上 用干 化
１ ６ｓ读 取 吸 光 度 的 变 化 。 ２ ， ２结 果
２１不 精 密 度 试 验 ．
确 。如 胰 淀粉 酶干 片 ， 辅助 层含 有抗 唾 液淀 粉酶 的单 克 隆抗 体 ， 样 品 中 的唾 液淀 粉 酶与 之 结合 留在 辅 助层 中 ， 只有 使 而
胰 淀 粉 酶转 运 至 反应 层 ， 这样 对 结 果 的准 确 、 差 更小 起 到 误 个 重要 的保证 。虽 然苦 味 酸 速率 法 比起终 点 法 是一 大 进
以消 除血 清 中维 生 素 Ｃ对 过 氧化 氢 的还 原 作用 ． 外 ， 该 另 在 层 还 可 以运用 免疫 沉淀 、 和过 滤 、 胶过 滤及 渗 析等 方法 ， 亲 凝
法 和干化 学 速率法 在 不 同仪器 上检 测 肌酐做 了对 比分析 。
１资 料 与 方 法
１１试 剂 ．
学 速 率 法 测 定 血 清 肌 酐 ，并 作 比较 。 干 化 学 速 率 法 均 值 ８ ．８ ｌ ｏ／ ，标 准 差 ８ ２， Ｖ ．５ ７２ ｍ ｌ ￣ Ｌ ． Ｃ ％９６ 。苦 味 酸 速 率 法 均 值 ４
８ ．８ Ｉ ｌ 标 准 差 ９８ ， Ｖ １ ３ ６５ ｍｏ／ ￣ Ｌ， ．１ Ｃ ％１ ． 。相 关 系数 ｒ０９ ４６ ３ ＝ ．６ ，
［】《 ３ ｌ 临床检验操作技术 系列 丛书》 编委会． 生物化学检验分册【 ． Ｍ】 北京 ：
同型半胱氨酸检测试剂盒性能分析

同型半胱氨酸检测试剂盒性能分析

同型半胱氨酸检测试剂盒性能分析
徐国超
【期刊名称】《国际检验医学杂志》
【年(卷),期】2015(000)004
【摘要】目的：分析生之源同型半胱氨酸测定试剂的性能。

方法通过采用全自动
生化分析仪对质控品及血清样本中的同型半胱氨酸进行检测，进而对同型半胱氨酸检测试剂盒的稳定性、特异性、精密度、线性关系、灵敏度和准确度等特性进行系统的评价。

结果通过对高、中、低三个浓度的质控进行检测并对检测结果进行分析，发现生之源同型半胱氨酸检测试剂盒其检测偏差均小于厂家给出的标准，即小于5％，符合相关要求。

同时试剂盒的稳定性、线性关系、灵敏度、特异性和准确度等特性均与厂家的相关标准相符合。

结论生之源同型半胱氨酸检测试剂盒在稳定性、特异性、精密度、线性关系以及灵敏度和准确度等特性方面优于或符合相关标准的要求，可以用于临床诊断实验中检测样本中同型半胱氨酸的水平。

【总页数】2页(P564-565)
【作者】徐国超
【作者单位】新乡市中心医院，河南新乡 453000
【正文语种】中文
【相关文献】
1.可溶性人胎盘生长因子ELISA检测试剂盒的建立及性能分析
2.Getein1600荧光免疫定量分析仪及N-端脑利钠肽前体检测试剂盒性能分析
3.同型半胱氨酸检测试
剂盒性能评价4.同型半胱氨酸检测试剂盒方法学评价5.抗菌肽Sc-ly应用于肌酐酶法检测试剂盒性能分析
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血清中肌酐的检测方法及其进展

血清中肌酐的检测方法及其进展

血清中肌酐的检测方法及其进展摘要】血清肌酐的检测对临床诊断、治疗具有十分重要的意义。

目前，检测血清内肌酐的方法包括同位素稀释质谱法、拉曼散射法、毛细管电泳法、酶法以及Jaffe反应法等。

但是，目前关于血清内肌酐的检测方法尚未有统一的定论，本文旨在进一步了解血清内肌酐的检测方法及进步发展，为临床提供有效的参考依据。

【关键词】血清肌酐检测方法进展【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2014）31-0092-01肌酐，学名甲基胍基乙酸内酰胺，其相对分子量很小，属于极性有机含氮化合物的一种[1]。

机体肌肉中肌酐由磷酸肌酸不可逆转化或自发性的形成。

在正常条件下，人体中肌酐水平相对稳定，通常其水平范围为3.0-14.0 mg/L。

当肾脏机能受到损伤时，肌酐的正常排泄功能受到一定阻碍，血清内肌酐水平升高。

所以，血清内肌酐水平是体现肾脏功能的一项重要指标。

现针对血清内肌酐的检测方法进行深入了解，综述如下。

1.检测方法1.1 Jaffe 检测法Jaffe就是碱性苦味酸肌酐反应，早在1886年便有研究发现苦味酸、肌酐在碱性环境中发生反应时，可产生一种红色物质。

Green-wold通过试验Jaffe反应观察发现[2]，这种红色产物是肌酐与苦味酸之间反应产生的1:1、1:2的络合物。

有的肌酐衍生物或同系物，例如乙内酰脲、胆红素、丙酮酸等物质可与苦味酸相互反应，统称为假肌酐，可导致血清肌酐的检测结果偏高，由于血清红细胞中含有大量的假肌酐，所以肌酐检测不宜选用全血。

随着自动化设备的普及应用，人们对Jaffe 反应试验进行了许多改进[3]，以利于提高检测结果的准确性，同时实现自动化分析，但是仍然没有从根本上解决非特异性反应的问题，血清内血红蛋白、抗坏血酸等物质对反应有所影响，导致结果偏低或偏高。

Junge等人又对Jaffe进行了进一步改良[4]，通过气相色谱一同位素稀释质谱法对大量混合血清标本进行了检测，结果发现为了达到与酶法的相似结果，一定要用21.0 ?mol/L对该法给予补偿校正。

OLYMPUS AU2700生化分析仪酶法肌酐检测性能验证

OLYMPUS AU2700生化分析仪酶法肌酐检测性能验证

OLYMPUS AU2700生化分析仪酶法肌酐检测性能验证摘要】目的：对OLYMPUS AU2700全自动生化分析仪酶法测定肌酐进行多要素方法学性能验证。

方法：针对正确度、精密度、线性、临床可报告范围四个主要性能指标进行验证。

正确度验证：通过测定卫生部临检中心2014年度小分子代谢物正确度验证质评物，评估偏倚；精密度参照美国临床实验室标准化协会（CLSI） EP15-A[1]文件，评估批内不精密度、日间精密度；临床可报告范围参照行业标准WS/T 408-2012[2] 验证线性范围，稀释度验证按一定稀释比例进行验证。

结果：批内精密度低值样本CV 0.6%、高值样本CV 0.6%；天间精密度低值样本CV 1.8%、高值样本 CV 1.4%。

卫生部临检中心2014年度小分子代谢物正确度验证物检测偏倚分别为: 低值样本-2.56%、高值样本-2.14%。

精密度、正确度指标符合行业标准要求。

肌酐线性检验结论为符合一阶线性方程（统计学标准线性），检测高限为8819.3 umol/l，临床可报告范围最高浓度为88193 umol/l。

结论：AU2700肌酐检测几项主要性能指标符合国家行业要求，可用于临床检测。

【关键词】性能验证；肌酐；行业标准【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2015）11-0077-02现代临床实验室开展的项目越来越多，为了保障检测结果的可靠性，按《医疗机构临床实验室管理办法》需对新增项目或变更项目进行性能验证，通过验证后该项目方可用于临床检测。

本实验室在采用酶法肌酐试剂用于临床检测前，按照相关要求对其正确度、精密度、线性及稀释度等主要性能指标进行了评价，以确定是否采用该试剂。

1.材料与方法1.1 实验材料检测所用样本来源于本院临床样本（无溶血、无黄疸、无脂浊）。

校准品：日本世诺肌酐校准品（批号：E314），质控品：RANDOX多项目质控血清（LOT：921UN，703UE）。

肌酐测定标准操作规程

肌酐测定标准操作规程

肌酐测定标准操作规程1.检验原理：（肌氨酸氧化酶法）血样中原有肌酸通过试剂除去后，肌酐在肌酐酶的作用下生产肌酸，肌酸又在肌酸酶作用下转化为肌氨酸。

肌氨酸氧化酶将生成的肌氨酸氧化，生成甘氨酸、甲醛和过氧化氢。

过氧化氢与4-氨基安替比林（4-AA ）、N-乙基-间甲基苯胺-2-羟丙基磺酸钠（TOOS ）在过氧化物酶（POD ）作用下反应下生成红色醌类物质。

在546nm 处，其显色程度与血液中的肌酐成正比。

肌酐+O H 2−−→−肌酐酶肌酸 肌酸+O H 2−−→−肌酐酶肌氨酸 肌氨酸+2O +O H 2−−→−SOD甘氨酸+甲醛+过氧化氢 过氧化氢+TOOS+4+AA −−→−POD红色醌类物质+O H 2 2.试剂主要组成成分3.样本要求：新鲜无溶血血清、肝素或EDTA 抗凝血浆。

在18～25℃保存6小时，2～8℃保24小时，-20℃保存7天，样本不可反复冻融！4.检验方法；仪器法（详见DF-603/DI-600标准操作规程）5.参考范围：6.检验结果的解释：6.1样本含量超出线性范围时，建议用0.9%（W/V ）的氯化钠溶液稀释样本。

通常稀释2倍，当样本浓度较大时提高稀释倍数，建议最大稀释不超过10倍6.2.单位换算：mg/dL=umol/L ×0.01137.检验方法的局限性7.1结果的准确性依赖于仪器的校正和测定温度、时间的控制。

7.2若试剂浑浊，或以水空白在546nm处吸光度大于0.300时不能使用。

7.3检验结果仅供参考，不作为临床诊断唯一依据。

8.产品性能指标8.1线性范围：在给定的样本/试剂比例和条件下测定时，本试剂线性范围可达0-5000umol/L。

线性相关系数r≥0.99008.2试剂空白吸光度：在546nm处，光径1cm时，空白吸光度A≤0.300。

8.3准确度：相对偏差≤10%。

8.4精密度8.4.1重复性CV≤3%8.4.2批间差：R≤10%8.5分析灵敏度：在给定的样本/试剂比例和条件下测定时，1umol/L的肌酐对应的△A不低于2×4108.6干扰试验无明显干扰：添加干扰物后的测定值与初始测定值的相对偏差处于±10%以内。

肌酐纯度标准物质的定值方法及其不确定度评定研究

肌酐纯度标准物质的定值方法及其不确定度评定研究

肌酐纯度标准物质的定值方法及其不确定度评定研究黄亮;张伟;黄挺;戴新华;李红梅;陈炜庆【摘要】通过定性及定量分析,研究了肌酐纯度标准物质的定值方法,并进行了定值分析的不确定度评定.首先使用三重四极杆质谱仪及核磁共振谱仪(氢谱)对肌酐样品进行定性分析,然后采用质量平衡法(包括液相色谱法、水分、灰分、挥发性物质和无机元素分析)与定量核磁共振法共同对肌酐纯度标准物质进行准确定值,最后对定值结果进行不确定度评定.肌酐的定值结果为99.7％,扩展不确定度为0.4％.该研究对于实际检测中肌酐的准确测定及临床上相关疾病的正确诊断治疗具有重要意义,且经过定值的肌酐纯品还可做定量核磁共振法的定量内标使用.定量分析后的肌酐经过均匀性检验和稳定性考察后可申报为国家标准物质.【期刊名称】《分析测试学报》【年(卷),期】2014(033)007【总页数】7页(P840-846)【关键词】肌酐;纯度定值;质量平衡法;定量核磁共振法【作者】黄亮;张伟;黄挺;戴新华;李红梅;陈炜庆【作者单位】广州计量检测技术研究院,广东广州510030;中国计量科学研究院化学计量与分析科学研究所,北京100013;中国计量科学研究院化学计量与分析科学研究所,北京100013;中国计量科学研究院化学计量与分析科学研究所,北京100013;中国计量科学研究院化学计量与分析科学研究所,北京100013;广州计量检测技术研究院,广东广州510030【正文语种】中文【中图分类】O657.3;TQ460.72肌酐是一种白色结晶物质，分子式为C4H7N3O，分子量较小(为113.118 8)，能溶于水，微溶于乙醇，几乎不溶于乙醚、丙酮和氯仿等有机溶剂。

由于肌酐是由肌肉中的磷酸肌酸通过不可逆的方式转化而形成，当人体中肌酐的浓度超过一定量时，就会通过肾脏排泄随尿液排出体外，尿中尿酸和肌酐的比值测定与某些疾病的诊断及病理研究有关，因此肌酐水平的测定在临床上对这些疾病，特别是肾病的确认具有重要的指导意义［1－2］。

肌酐检测--检测技术

肌酐检测--检测技术

迪信泰检测平台
肌酐检测
肌酐（Creatinine），化学式是C4H7N3O，是肌肉在人体内代谢的产物，主要由肾小球滤过排出体外。

每20g肌肉代谢可产生1mg肌酐，在肉类食物摄入量稳定时，身体的肌肉代谢又没有大的变化，肌酐的生成就会比较恒定。

血中肌酐来自外源性和内源性两种，外源性肌酐是肉类食物在体内代谢后的产物；内源性肌酐是体内肌肉组织代谢的产物。

迪信泰检测平台采用Thermo Scientific液相质谱联用(LC-MS)的方法检测肌酐的含量变化。

此外，我们还提供其他氧化三甲胺及相关代谢物检测服务，以满足您的不同需求。

LC-MS测定肌酐样本要求：
1. 请确保样本量大于0.2g或者0.2mL。

周期：2~3周。

项目结束后迪信泰检测平台将会提供详细中英文双语技术报告，报告包括：
1. 实验步骤（中英文）。

2. 相关参数（中英文）。

3.质谱图片。

4. 原始数据。

5. 肌酐含量信息。

迪信泰检测平台可根据需求定制其他物质测定方案，具体可免费咨询技术支持。

临床常用血脂检验项目应用评价徐国超

了解体内血脂状况的检测项目因而成为临床医学
检验中的重要检测内容
心血管疾病具有多种危险因素
肥胖 高血压
高血脂
缺乏运动 冠心病家族史
动脉粥样硬化
吸烟
高龄
糖尿病
房颤
血脂
血浆所含脂类（脂质）统称血脂（lipids） 总胆固醇(TC)＝游离胆固醇＋胆固醇 酯 中性脂肪——甘油三酯(TG) 非酯化脂肪酸（游离脂肪酸，FFA） 磷脂、糖脂
TG测定的决定性方法为放射性核素稀释质谱法 参考方法为二氯甲烷抽提，变色酸显色法 常规方法为酶法（GPO-PAP）法,国内外均推荐酶法（
GPO-PAP）法作为临床测定方法。
甘油三酯
甘油三酯测定初级参考方法和初级参考物质分别为 ID-MS法和NIST的SRM 1595
次级参考方法和次级参考物质分别为美国CDC的二氯 甲烷-硅酸-变色酸法和 NIST SRM 1951a[8]
高水平
2.26～5.63 mmol/L (200～499 mg/dl)
很高水平
≥5.64 mmol/L (500 mg/dl)
酶法（GPO-PAP）法的特点：
1、干扰因素。胆红素＜205umol/L;Hb＜6g/L，抗凝用量的EDTA 、肝素对结果无明显干扰。
2、标本类型以及稳定性。血清和血浆均可用于TG的测定，但后 者结果比前者低百分之三，国内习惯用血清做标本,如用血浆应C 乘以校准系数1.03或在报告单上注明。血清和血浆储存于密闭瓶 内2-8℃，一周内甘油三酯水平保持稳定，-20℃数月内稳定。
水平并不自动等于脂蛋白颗粒数
脂蛋白
1．低密度脂蛋白胆固醇（LDL-c）
LDL是非均相的多分散组份，其密度在1.006～1.063 kg/L 间，主 要结构蛋白为Apo B-100

一种肌酐的检测方法[发明专利]

专利名称：一种肌酐的检测方法
专利类型：发明专利
发明人：徐国宝,塞玛·韩霓芙,启黎明,皮特·约翰申请号：CN201510028246.4
申请日：20150120
公开号：CN104568926A
公开日：
20150429
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明提供一种肌酐的检测方法为：将钴离子溶液、过氧化氢溶液、碳酸钠/碳酸氢钠缓冲液及待测肌酐溶液在流动注射分析装置中混合反应，检测得到反应产物的发光强度；根据预定的标准曲线，得到待测肌酐溶液中的肌酐含量。

本发明利用钴离子催化过氧化氢氧化肌酐，导致发光。

由于该方法的发光物为肌酐本身反应的产物，而且没有肌酐存在时钴离子和过氧化氢反应产生的背景信号较低，因此，本发明检测方法的灵敏度高。

其次，本发明利用了流动注射分析装置，保证了混合过程与反应时间的高度重现性，在非平衡状态下高效的完成了试样的在线处理与测定，从而使得检测快捷方便。

申请人：中国科学院长春应用化学研究所
地址：130022 吉林省长春市人民大街5625号
国籍：CN
代理机构：北京集佳知识产权代理有限公司
代理人：赵青朵
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一种快速测定尿液中肌酐的超声方法[发明专利]

专利名称：一种快速测定尿液中肌酐的超声方法
专利类型：发明专利
发明人：白云,李川,刘杰,陈志强,陈旭东,喻其炳,姚行艳,余婷梃
申请号：CN201710413657.4
申请日：20170605
公开号：CN107247088A
公开日：
20171013
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明公开了一种快速测定尿液中肌酐的超声方法，属于尿液样本的理化检验技术领域。

包括如下步骤：(1)样品处理，将待测的尿液用甲酸酸化，离心分离，离心后的溶液过0.25μm聚醚砜水相滤膜，将过滤后的溶液用纯水稀释5000倍；(2)标准曲线的配置，用纯水配制不同浓度的肌酐标准曲线溶液，根据肌酐溶液的标准浓度与峰高的比值，建立肌酐的线性回归方程；(3)样品测定，将处理后的样品用超声诊断仪分析，测得分析物与峰高的比值，代入该方程，求得样品待测液中的肌酐的含量。

本发明提供的方法针对尿液样本优化了前处理方法，并用超声诊断仪进行分析，灵敏度更高，前处理简单，需要的样品量少，操作简便、快速、准确、灵敏度及重复性好的优点。

申请人：重庆工商大学
地址：400067 重庆市南岸区学府大道19号
国籍：CN
代理机构：重庆百润洪知识产权代理有限公司
代理人：高姜
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肌酐检测标准化 徐国超共52页

肌酐检测标准化 徐国超
1、纪律是管理关系的形式。——阿法 纳西耶 夫 2、改革如果不讲纪律，就难以成功。
3、道德行为训练，不是通过语言影响 ，而是 让儿童 练习良 好道德 行为， 克服懒 惰、轻 率、不 守纪律 、颓废 等不良 行为。 4、学校没有纪律便如磨房里没有水。 ——夸 美纽斯
5、教导儿童服从真理、服从集体，养 成儿童 自觉的 纪律性 ，这是 儿童道 德教育 最重要 的部分 。—— 陈鹤琴
6、最大的骄傲于最大的自卑都表示心灵的最软弱无力。——斯宾诺莎 7、自知之明是最难得的知识。——西班牙 8、勇气通往天堂，怯懦通往地狱。——塞内加 9、有时候读书是一种巧妙地避开思考的方法。——赫尔普斯 10、阅读一切好书如同和过去最杰出的人谈话。——笛卡儿
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2种测定血清肌酐方法的比较

2种测定血清肌酐方法的比较
陈会良
【期刊名称】《畜牧与兽医》
【年(卷),期】2003(35)11
【总页数】1页(P36-36)
【关键词】血清肌酐;测定方法;兽医临床检验;肾小球滤过率;去蛋白终点法;直接法;比较研究
【作者】陈会良
【作者单位】安徽技术师范学院
【正文语种】中文
【中图分类】S854.43
【相关文献】
1.两种测定血清肌酐方法偏倚的比较 [J], 陈雪梅;王亚平;王芳
2.同位素稀释质谱法、酶法和碱性苦味酸法测定血清肌酐方法比较 [J], 宋云霄;欧美贤;李水军;张海晨;余琛
3.酶法和Jaffe速率法测定血清肌酐的方法学比较 [J], 居漪;曾芝如
4.血清肌酐两种测定方法偏倚的比较 [J], 程开书;孙建民;方兰
5.不同的检测方法对测定血清肌酐结果的比较 [J], 阎正才;张成山
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根据Jaffé （雅费氏）反应原理发展 而来的动力学方法，基于肌 酐和上述非肌酐色原在反应速度上的差异，即后者与苦味酸发生反应 比前者要慢，利用这一点来避开非特异反应的干扰（但不能根本消 除）。此法干扰和影响因素较少，速度快，适用于自动分析，近年已 被普遍采用。
⑶肌酐测定。 1)Jaffe反应法：测定肌酐最常用的方法是尿、血清中的肌酐与苦味 酸盐作用，生成黄红色的苦味酸肌酐复合物。 此法的缺点是 特异性不高，维生素C、丙酮酸、丙酮、葡萄糖、乙酰醋酸、果 糖、氨基马尿酸、蛋白质、胍基醋酸酰胺及许多化合物也能与碱 性苦味酸盐生成红色。这些能起反应的物质称为假肌酐，相当数 量的假肌酐存在于红细胞中。
三）内生肌酐清除率（CCr）
1.
定义：肾脏在单位时间内将若干ml血液中的内生肌酐全部清除
出去
2.
。
方法： 收集24小时尿并计尿量，试验前应给受试者无肌酐饮食（禁肉 类、鱼类）3天，并限蛋白入量（每日低于40g），避免剧烈运动， 以排除外源性肌酐的干扰。留取24小时尿，其间保持适当的水分入 量，禁服咖啡、茶等利尿性物质。准确计量全部尿量V（ml）。同 时抽病人血约2-3ml。

Filler公式
国际上有很多对MDRD方程的评价、改良和验证（谌贻璞. 正确应用肾小 球滤过功能检验十分重要.中华检验医学杂志，200730（4）：374-276 ），国内也作了相关的研究，对于各个方程在各期慢性肾脏病中应用研 究正在进行当中。我们的研究结果发现，以简化的MDRD方程作为模型计 算CKD患者eGFR，当其小于29ml/min时，SCr, CCr和Cystatin C三者 异常率为100%，在39-59ml/min之间时，三者为84%、91%和98%，在6089ml/min之间时，三者则为6.8%、70%和86%。在这项普通的研究中，虽 然没有进行GFR金指标的检测，但结果提示： ①与其他两项具较好诊断特异性和敏感度的常规指标CCr、Cystatin C比 较，eGFR<60ml/min时符合率很高，进一步说明<60ml/min作为CKD的诊断阈 值具有较好的特异性； ②eGFR在39-59ml/min之间患者的SCr阳性率为84%，SCr可能有16%的假阴性 ，说明SCr不应该单独应用。 ③eGFR在60-89ml/min，甚至大于在大于90ml/min的CKD患者组中，仍有相 当高比例的CCr和Cystatin C异常。进一步说明，综合分析病人病史、治疗 史和危险因素，联合检测SCr，eGFR，CCr和Cystatin C，对于高危患者进 行动态监测，将有助CKD的早期诊断
3. 计算：
体表面积的计算： logA(m2)＝0.425log[体重kg]＋ 0.725log[身高cm]－2.144
参考值： 根据体表面积校正后， 范围为80-120ml/min/1.73m2。







1999年美国肾脏病基金会（NKF）公布的K-DOQI（Kidney DiseaseOutcome Quality Initiative）指南提出了新的CKD定义，确 定CKD的诊断应基于肾小球滤过率（GFR）和/或肾损伤的证据。CKD的诊 断标准为： （1）肾脏损伤（肾脏结构或功能异现 常）≥3个月，可以有或无GFR下 降，可表现为以下任何一条①病理学检查异常；②肾损伤的指标：包括 血、尿成分异常或影像学检查异常； （2）GFR＜60ml/min/1.73m 2 ≥3个月，有或无肾脏损伤证据。根据肾 小球滤过率，K-DOQI指南将CKD分为五期 I期，GFR≥90，伴有其他慢性肾损伤证据； II期，GFR 60～89 伴有其他慢性肾损伤证据； III期，GFR 30～59； IV期，中度异常；GFR 15～29； V期，已确定有肾功能衰竭；GFR<15或正在接受透析。不同分期CKD患者 的症状及各种合并症的发生率不同分期对于临床处治具有一定指导价值

注意事项： 1.日内生理变动幅度通常在10%以内，但与个体肌肉量有关。肌肉发 达者与消瘦者（尤其是肌肉萎缩者）肌酐的生理浓度可有明显差异。 2.妊娠期内因生理原因GFR可上升，但肌酐生成速度不变，Scr因血浆 稀释作用而比常人偏低，据调查多在35.2～52.8μmol/L水平。如孕妇 Scr>70.4μmol/L应视为有升高倾向。 3.剧烈肌肉活动后血肌酐和尿肌酐都有一过性增加。 4.进肉食对Scr和Ucr有一定影响。根据对健康人观察，摄取烹饪肉食后24小时内Scr可增加34-44μmol/L，可超出正常值上限，约12小时后接近 正常水平。 5. Jaffé （雅费氏）法主要缺点是特异性差，血中丙酮、丙酮酸、叶酸、 抗坏血酸、葡萄糖、乙酰乙酸等都能在此反应中呈色，因而被称为“非 肌酐色原”。此外，一些头孢类药物如甲氧噻吩头孢菌素也可与苦味酸 反应显色而引起正干扰。
4
5
GFR严重下降
肾衰竭
15-29
<15

1999年，LeveyAS等利用了1628例CKD病人的资料，以碘酞酸盐清 除率作为金标准，考虑了病人年龄、性别、血清肌酐（Scr）、 尿素、白蛋白等因素，进行数学运算和方程模拟，开发了一系列 GFR的评估方程，用来估算GFR，其中方程7因其结果相对准确而 被广泛采用。2000年，作者又将方程7进行简化，得出主要基于 血清肌酐的简化的“四变量”（年龄，性别，种族以及血清肌酐 ）MDRD计算方程，该计算方程仅需测量Scr，结合病人的年龄性 别，即可推断出GFR。该方程中肌酐的单位为mg/dl。
肌酐 ( Cr) 和内生肌酐清除率（ CCr）测定
肌酐的代谢: 1．代谢：肌酐是由肌肉酸脱水而生成，肌酸在肾、肝、 由精氨酸、甘氨酸合成，贮于肌肉、脑中，在肌肉收缩时， 可进一步代谢生成肌酐。
肌酸激酶（运动） 肌酸+ATP 磷酸肌酸+ADP 脱水 自动去P 肌酐
90% 以上由肾小球滤过而从尿中排出，仅 7—10% 由肾小管分 泌排出，但肾小管对肌酐不重吸收。

我国目前尚无大规模、权威性的调查报道，北京 大学第一医院王海燕教授牵头进行的流行病学调 查研究报告显示，慢性肾病的发病率占普通人群 的9.4%，据此推算我国慢性肾病的患者已经超过 一亿人。


在临床实践中慢性肾病的早期诊断、早期检测和 早期治疗就显得非常重要诊断、治疗以及监测慢 性肾病的前提为正确判断肾功能。 美国肾脏基金协会（NKF）将慢性肾病定义为：除 外其他原因，肾脏的结构或肾功能受到损害或者 肾小球滤过率下降到低于来对慢性肾病的严重程 度进行分级。因此，肾小球滤过率是目前监测肾 功能的最好指标。
GFR(ml/
分期
描述
min/1.73m
≥90
方案 筛查；减少慢性肾病 危
险因素 诊断并治疗合并症； 减 少CVD患病危险
慢性肾脏病危险增加 肾损伤、GFR正常或增 加 肾损伤、GFR轻度下降 GFR中度下降
1
2 3
≥90
60-89 30-59
评估进展 评估治疗并发症 为肾脏替代治疗作准 备 肾脏替代治疗

对于血清肌酐测定，大家已有共识：只有当GFR下降50%时才开始 升高。我们以99mTc-DTPA清除率测得的肾小球滤过率（GFR）作 为诊断评价的金指标，用受试者工作特征曲线（ROC）观察到肌 酐最佳诊断界值为107μmol/L ，与参考区间上限的 99% 分位值 （男性 110μmol/L ，女性93μmol/L）接近，其诊断肾小球滤 过功能受损的的灵敏度、特异性分别为74.6%、90%。如果诊断界 值移到133μmol/L，灵敏度会提高，但灵敏度则下降到50%。建 议以99%双侧作为血清肌酐的参考区间，但必须清楚诊断界点的 诊断效能。
正常人每天更新是恒定的，约更新2%，由肾排出，人体血液中 肌酐 的生成可有内、外源性两种如在严格控制饮食条件和肌肉活动 相对稳定的情况下，血浆肌酐 的生成量和尿的排出量较为恒定。 肌酐的测定 在控制外源性来源、未进行剧烈运动的条件下，肌酐的血中浓度主 要取决于GFR，在肾功能受损，GFR下降到临界水平时血中肌酐浓度 明显上升，随损害程度加重上升速度也加快。 反映GRF减退的后期指标。当肾小球滤过功能减退至50%时，cr仍 可正常。 cr在临床应用中应注意动态观察和结合其他实验室指标来 分析。
为去除假肌酐的影响，现在常用速率法来测定血肌酐。
乙酰乙酸在20s内已与碱性苦味酸反应完成，其他多数干扰物 则在80s后才与苦味酸有较快的反应，而20-80s之间主要是肌酐的 反应。因此，血清与苦味酸混合后，分别读取510nm在20s及80s 时的吸光度检验肌别适用于自动分析。但 工具酶过多、价格昂贵。

血清肌酐测定方法间的偏差及其对eGFR值的影响
影响eGFR估算值估计不确定度（estimated uncertainty）的来源 有： ①肾脏滤过功能本身的生物学变异。肾脏滤过功能受到运动、体位、血压变化、妊 娠、血糖控制、细胞外液、急性或慢性肾脏病等的影响。 ②血肌酐的生物学变异。肾脏滤过功能本身的生物学变异等因素影响血循环或尿中 各个标志物的浓度水平，包括估算方程中各个参数的浓度。有研究报告，非CKD患者 血清肌酐的生物变异可以达到4.1%-4.3%。 ③建立模型所用“金标准的重复性和方程中各参数测定方法的准确性、重复性及其 抗干扰能力（特别是肌酐测定方法的不确定度和抗干扰能力）。



研究表明，MDRD方程的开发对象是CKD患者，适用于评估西方CKD 人群GFR，其准确性和方便性均优于肌酐清除率（Ccr）对于糖尿 病和非糖尿病患者的应用诊断效能类似。 MDRD的应用应该注意： ①对于健康人或GFR≥90mL min -1 的CKD患者此研究公式的性能 不明。此研究公式应用于儿童，75岁以上的老年人，孕妇，有严 重并发症的患者或体型极端，肌肉量大或营养不良的人可能会产 生估算 GFR 的误差。不推荐应用于健康个体或所有住院患者肾 功能的评价。 ②估算儿童GFR多采用Schwartz（施瓦兹）和Filler方程，因为 考虑了GFR和身高/血肌酐之间的比例关系。Schwart公式： GFR=k×身高(cm)/血肌酐(μmol/L)，k为常数（0-18个月正常婴 儿k为40，2-16岁女孩及2-13岁男孩k均为49，13-16岁男孩k为62 ）。