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免疫学检测技术ppt课件

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免疫学检验概论 ppt课件

免疫学检验概论 ppt课件
（Introduction)
免疫学检验 （ immunological test）
湖北中医药高等专科学校医学基础部 （Hubei college of Chinese medicine）
胡慧琼
(HuHuiQiong)
免疫学检验
我们为什么 会感冒 ？
抵抗力低
注射青霉素后休克
未皮试就注射青霉素后的过敏反应
土重来，后世学者估计，共有多达2亿 人死于这场瘟疫。
1820年代，英国发明了预防天花病的牛 痘疫苗。天花病患者的死亡率仍高达三 分之一。后来，发达国家逐步控制了这 种疾病，但非洲农村仍有流行。
（二）典型成就：
1、中国古代医师 创用了“人痘”疫苗预防天花。
• 湖北中医药高等专科学校
• （Hubei college of Chinese medicine）
型
来源：是人在出生以后才产生的。
特异性免疫 特点：只能对某一特定的病原体 （获得性免疫/适 或异物起防御作用，对其它的病
应性免疫） 原体无效。（专一性）
返回章目录
1.固有免疫与适应免疫
• 一、概念
• 非特异性免疫（固有免疫）-----是指机体对异物的无 选择性地阻挡，排斥和清除
• 适应免疫(特异性免疫)-----免疫系统可以准确地识别对自
(HuHuiQiong)
推动现代生命科学前进的三架马车
• 分子生物学（Molecular Biology） • 免疫学（Immunology） • 细胞生物学（Cell Biology）
3、1901年“免疫学”首先出现在Index Medicus
4、1916年Journal of Immunology创刊 标
（二）典型成就

《elisa检测技术》ppt课件(2024)

《elisa检测技术》ppt课件(2024)

拓展ELISA检测技术在生物医学、环境监测 、食品安全等领域的应用，推动相关产业的 发展。
2024/1/28
22
06 ELISA实验操作技巧与注 意事项
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23
实验前准备工作建议
01
仔细阅读试剂盒说明书 ，了解实验原理、操作 步骤和注意事项。
2024/1/28
02
准备好所需的试剂、耗 材和仪器，确保它们的 质量和性能符合要求。
去除异常值、缺失值等， 保证数据质量。
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数据转换
对数据进行对数转换、归 一化等处理，以满足后续 分析需求。
统计分析
采用t检验、方差分析等统 计方法，对实验组和对照 组数据进行比较，评估差 异显著性。
13
结果解读与报告撰写
结果解读
根据统计分析结果，结合专业知 识对实验数据进行解读，如判断 样品中目标物质的含量是否超标
《elisa检测技术》ppt课件
2024/1/28
1
目 录
2024/1/28
• ELISA检测技术概述 • ELISA实验方法与步骤 • ELISA实验数据分析与解读 • ELISA技术在生物医学领域应用 • ELISA技术挑战与发展趋势 • ELISA实验操作技巧与注意事项
2
01 ELISA检测技术概述
发展多重ELISA检测技术，实现对多个目标物的同时检测，提高检 测效率。
20
新型ELISA技术发展趋势
数字化ELISA
利用微流控、微阵列等技术，实现ELISA检测的数字化、自 动化和智能化。
免疫荧光ELISA
结合免疫荧光技术，提高ELISA检测的灵敏度和特异性。
化学发光ELISA

免疫学检测技术的基本原理及其应用PPT

免疫学检测技术的基本原理及其应用PPT

免疫反应链
了解单克隆和多克 隆抗体在免疫反应 中的作用。
信号放大
揭示检测技术如何 利用信号放大机制 来增强检测敏感性。
检测方法
介绍常见的免疫学 检测方法，如 ELISA、免疫印迹 和流式细胞术。
免疫学检测技术的主要应用领域
探索免疫学检测技术在医学领域中的主要应用领域，包括诊断疾病、疫苗开发和药物监测。
1 定义
免疫学检测技术是一组用于检测和测量免疫反应的实验细胞生物学的深入研究。
免疫学检测技术的基本原理
深入了解免疫学检测技术的基本原理和机制，包括抗原-抗体相互作用、免疫反应链、信号放大和检测 方法。
抗原-抗体相 互作用
抗原与特定抗体之 间的相互作用是这 些技术的基础。
诊断疾病
了解免疫学检测技术在早期疾病诊断和监测中的重要作用。
疫苗开发
探索免疫学检测技术在疫苗研发和效力评估中的应用。
药物监测
了解如何利用这些技术来监测药物治疗的有效性和副作用。
免疫学检测技术的具体方法和步骤
深入了解免疫学检测技术的具体方法和步骤，包括样本收集、试剂准备、标记和检测分析。
1
样本收集
收集样本是免疫学检测的第一步，通常涉及血液、尿液或组织样本。
免疫学检测技术在医学领域的应用案例
探索免疫学检测技术在医学领域中的实际应用案例，包括癌症诊断、自身免疫疾病和传染病。
癌症诊断
了解如何利用免疫学检测技术 来识别和分类不同类型的癌症 细胞。
自身免疫疾病
探索免疫学检测在自身免疫疾 病诊断和治疗中的关键作用。
传染病
了解免疫学检测技术在传染病 预防、控制和治疗中的应用。
免疫学检测技术的基本原 理及其应用
本演示文稿将介绍免疫学检测技术的基本原理及其在医学领域中的应用。了 解这些关键概念和案例将有助于您更好地理解和应用免疫学检测技术。

elisa检测技术 ppt课件

elisa检测技术 ppt课件
生物素是一种生长因子，广泛分布于动、植物体内，又称辅 酶R或维生素H。亲和素由四个亚单位组成，对生物素具有高度 亲和力，即一个亲和素可以结合4个生物素分子。因此，本方法 具有信号放大功能（特点）。
该方法可用于抗原、抗体以及DNA和RNA（生物素）检测。
BAS-ELISA实验原理
竞争法ELISA
竞争法ELISA的实验原理：将包被了抗体的酶标板的微孔分 为测定孔和对照孔，在对照孔中加入已知浓度的系列标准品溶液 和酶标记物（酶标抗原）；在测定孔中同时加入酶标抗原和待检 样本（抗原），酶标抗原和样品互相竞争包被抗体的结合点，形 成酶标记的抗原-抗体复合物固定在微孔内，没有吸附的酶标抗 原通过洗涤去除，加入底物后，复合物上的酶催化底物生成有色 产物。当测定孔内的样本不含抗原时，固相上的抗体将和酶标抗 原结合，加入底物后显色较深；当样本含有抗原时，样本中的抗 原和酶标抗原共同竞争抗体的结合位点。酶标抗原结合的比例越 高，说明结合在固相抗体上的待测抗原就越少，反之亦然；在一 定的条件下，复合物上酶的量和酶产物呈现的色泽成正比，用分 光光度计进行测定，从而计算出参与反应的抗原和抗体的量，从 而进一步得知样本中抗原的多少。
37℃, 30min
洗涤3次, 拍干 加底物溶液 (空孔除外) 避光 37℃, 10-30min 加终止液 (空孔除外)
上机检测、绘制标准曲线 (空孔调零)
从标准曲线上 读取样品含量
ELISA试验中的注意事项
必须设立阳性、阴性和空孔对照孔，控制试验条件并检验 试剂盒的质量； 待测样品应设立双复孔或三复孔； 酶标板洗涤时确保洗涤干净，避免假阳性过氧化物酶(horseradish peroxidase, HRP)
DH2+ H2O2
D + H2O

临床免疫学检查ppt课件

临床免疫学检查ppt课件
临床免疫学检查
上海交通大学医学院 季育华 教授
1范、感畴染(性c疾a病t(eignfoerctyio)n：disease)
2、自身免疫性疾病(autoimmune ～) 3、超敏反应性疾病(hypersensitivity ～ ) 4、免疫缺陷/增殖性疾病 (immunoabnormal ～ deficiency/proliferation) 5、肿瘤(tumour) 6、移植(transplantation)
测定抗原抗体反应达平衡时～ ，终点（end）
测定单位时间内抗原抗体形成最大量时～，速
率（rate）
临床意义（significance）：
1.血清多克隆Ig水平增高 患者血清中各型Ig均升高，常见于各种
感染特别是慢性(chronic)细菌感染，如肺结 核、慢性支气管炎、慢性肝病自身免疫性 (autoimmune)疾病。SLE患者以IgG、IgA升高 较多见，类风湿性关节炎——IgM增高为主。
effect monitor)和预防(prevent)。
内容1、(体co液nt免e疫nt检)测：(humoral～)
2、细胞免疫检测(cellular ～) 3、相关临床疾病的免疫检测
感染性疾病 自身免疫性疾病 超敏反应性疾病 免疫缺陷/增殖、肿瘤与移植
（一一、）体血液清免免疫疫检球测蛋(～白t检es测t) (human serum immunoglobulin ～) （二）血清补体检测
2 岁 4.7～12.3 0.21～1.45 0.41～1.75
8 岁 6.3～15.0 0.46～2.51 0.47～2.20
12岁 7.0～15.5 0.58～2.91 0.49～2.40
18岁 7.3～15.5 0.70～3.21 0.51～2.61

免疫学全套PPT课件

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详细描述
免疫学作为一门科学经历了漫长的发展历程。早在古代 ，人们就已经开始利用免疫接种技术预防传染病。随着 科学技术的发展，人们对免疫系统的认识越来越深入， 免疫学逐渐发展成为一门独立的学科。现代免疫学已经 广泛应用于疾病预防、诊断和治疗等领域，如疫苗的研 发、肿瘤免疫疗法和免疫细胞治疗等。同时，随着基因 组学、蛋白质组学等新兴学科的不断发展，免疫学的研 究领域也在不断扩大和深化。
肿瘤免疫治疗方法
肿瘤免疫治疗的方法包括免疫检查点抑制剂、肿瘤疫苗、细胞免疫治疗等。这 些方法可以单独使用，也可以联合使用，以达到最佳的治疗效果。
06 免疫学研究展望
免疫学与其他学科的交叉研究
免疫学与生物信息学
利用生物信息学方法，对免疫相关基因组、转录组和蛋白 质组数据进行深入挖掘和分析，揭示免疫应答的调控机制 和免疫相关疾病的发病机制。
杀伤。
固有免疫分子
补体、激肽、溶菌酶等，参与病 原体的溶解和杀伤。
适应性免疫应答
抗原识别
T细胞和B细胞通过其受体识别特异性抗原。
细胞增殖与分化
抗原刺激后，淋巴细胞增殖并分化为效应细胞。
产生免疫记忆
部分淋巴细胞成为记忆细胞，在再次接触相同抗 原时迅速增殖分化。
免疫应答的调节
自身调节
免疫系统内部存在负反馈调节机制， 如抑制性受体等。
亲合力
抗体与抗原结合后产生的生物学效应。
亲和力
抗体与抗原结合的强度和稳定性。
抗原-抗体复合物的形成
多个抗体分子与多个抗原分子结合形成网状 结构，可被吞噬细胞吞噬清除。
04 免疫应答
固有免疫应答
非特异性防御机制
皮肤、黏膜等屏障结构，阻止病 原微生物侵入。
固有免疫细胞
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抗菌、抗病毒、抗真菌、抗寄生虫免疫
2. 自身稳定（Homeostasis）：机体在新陈代谢过 程中，产生大量的衰老死亡细胞，免疫的第二个功能 就是清除这些细胞，维持机体的生理平衡。
3. 免 疫监视（Immunological surveillance）：机
体细胞会因物理、化学和病毒等生物因素的影响，使
脾脏淋巴细胞
（ HGPRT-TK- )
（HGPRT+TK+）
在HAT中不能生长
体外培养过程中死亡
↓←PEG
杂交瘤细胞
(HGPRT+、TK+)
↓
在HAT中大量长期繁殖
↓
克隆化
↓
产生单抗
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第一节 免疫学检测技术原理
• 抗原或抗体检测原理：
抗原抗体的结合具有高度专一性 借助抗原和抗体在体外特异结合后出现的各种
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抗体（Antibody)
一、概念 是抗原刺激B淋巴细胞, 使之增殖分化成
浆细胞而产生的能与抗原发生特异性反应 的免疫球蛋白(Immunoglobulin, Ig)
16
抗体（Antibody)
一、概念
二、免疫球蛋白的基本结构 免疫球蛋白：在人和动物血液、组织液及其
他分泌液中的一类结构相似的球蛋白。 1. 由4 条肽链组成： 2 条重链， 2 条轻链 2. 一个抗体单分子： 2 个抗原结合位点
蛋白、精子蛋白、甲状腺蛋白
2. 大分子胶体：一般在10 kD以上 。
3. 具有复杂的立体结构或空间构象.
如明胶分子量虽然为100 kD，但结构简单，免疫原性差。
11
抗原如何被识别
抗原的特异性
抗原决定簇：抗原分子表面具有免疫活 性的化学基因,是抗原与抗体结合的部位。
抗原分子中抗原的特异性由抗原决定簇
17
抗体（Antibody)
18
抗体（Antibody，Ab)
• 免疫球蛋白的双重性 免疫球蛋白是一种蛋白质，是抗体
( Ab1 )；同时又可引起机体产生抗体（抗抗
体,Ab2 ），所以既是抗体又是抗原。
Ag
Ab1
Ab2
19
20
抗体（Antibody，Ab)
• 免疫球蛋白的双重性 • 免疫球蛋白的功能
细胞发生癌变，形成肿瘤等，机体可识别、清除这些
细胞，这是免疫系统的第三个功能。当这一功能低下
或失调时，会导致肿瘤或癌症。
9
抗原 （Antigen）
抗原概念 凡能刺激机体产生特异性抗体和致敏淋巴细胞，
并能与相应抗体或致敏淋巴细胞在体内或体外发生 反应的物质。
抗原性（Antigenicity）：包括免疫原性和反应原性
决定。
12
13
一种细菌可以刺激多少种抗体产生？
抗原
14
一种细菌可以刺激多少种抗体产生？
根据抗原的化学性质分： • 天然抗原：微生物及其产物抗原如 • 菌体抗原（O 抗原） • 鞭毛抗原（H 抗原） • 表面抗原（如大肠杆菌的K 抗原） • 细菌的毒素抗原 • 病毒抗原（V 抗原） • 人工抗原：人工合成多肽、蛋白等
特异性抗体的血清。 • 多克隆抗体 (PAb)： 多个抗原决定簇免疫机体
所产生的多种抗体的混合物。 • 单克隆抗体（monoclonal antibody，MAb） ： 只针对某一特定的抗原决定簇，纯度高的抗体。
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多克隆抗体与单克隆抗体
28
多克隆抗体与单克隆抗体的制备
29
单克隆抗体的制备
骨髓瘤细胞
现象，对标本中的抗原或抗体进行定性或定量的 检测。
31
对抗原或抗体进行定性或定量的检测的原理
Ab excess
Ag excess
Equivalence – Lattice formation 32
对抗原或抗体进行定性或定量检测的原理 根据抗原抗体形成的免疫复合物的浓度进
行定量检测。 P 312
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抗原或抗体检测原理
7
• 免疫学（Immunology）： 是研究抗原性物质、免疫系统、免疫应
答的规律及免疫应答的调节的一门科学。
• 免疫的定义（Immunity）：免疫是机体识 别自我与非自我的过程。排除异己，维护 自身稳定的生理反应。
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免疫的功能： 1. 抵抗感染（Defense）：机体能抵抗病原微生物 侵袭的能力。又称免疫防御。
第十四章 免疫学检测技术
1
2
抗原和抗体可以发生高度专一性的结合
3
抗原和抗体可以发生高度专一性的结合
4
抗原和抗体可以发生高度专一性的结合
5
抗原和抗体可以发生高度专一性的结合
• 抗原或抗体检测原理： 借助抗原和抗体在体外特异结合后出现的
各种现象，对标本中的抗原或抗体进行定 性或定量的检测。
Equivalence – Lattice formatio6 n
第一节 免疫学检测技术原理
可作为抗原进行检查的物质：
微生物及其大分子产物 人和动物细胞 人和动物体内的各种大分子 各种半抗原
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抗原或抗体检测原理
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较早的抗原抗体反应检测方法
1、凝集反应 （Agglutination) 2、沉淀反应 (Precipitation) 3、补体结合试验 (Complement fixation test ) 4、中和试验 (Neutralization test)
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一、凝聚反应(Agglutination) 二、沉淀反应
1、溶液中的沉淀反应 2、凝胶扩散沉淀 3、免疫电泳
血清免疫电泳 火箭电泳 对流免疫电泳
三、补体参与的反应 四、免疫标记的抗原抗体技术
酶联免疫吸附（ELISA）
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一、凝集反应
凝集反应是指颗粒抗原与相应抗体结合 反应出现的可见性现象。颗粒抗原如完整 的细菌、红细胞等与相应抗体相混合，在 一定条件下出现凝集。凝集反应中抗原称 为凝集原，抗体称为凝集素。
二个方面 • 免疫原性：抗原能刺激机体产生抗体和致敏淋巴细
胞的性能。 • 反应原性：抗原与特异性抗体或致敏淋巴细胞在体
内或体外发生反 应的性能。
10
抗原 （Antigen）
构成抗原的条件 1. 异物性：机体免疫细胞能识别自身和异己物质，只
有外源性的物质才具有免疫原性，产生免疫反应。 亲缘关系越远，差异越大，抗原性越强。 自身抗原：自身组织发生异常变异、免疫功能紊乱、眼球晶体
1. 与抗原结合 2. 激活补体 3. 组织结合 4. 调理作用 5. 抗体依赖细胞介导的细胞毒作用(ADCC）
21
免疫球蛋白的功能
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抗体（Antibody) 的产生与功能
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抗体产生的主要过程
抗体
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抗体的制备
注射
抗原（如类毒素）
抗体？ 抗原？
血清
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抗体的制备 • 抗血清：指抗原人工免疫实验动物，获得含