罗非鱼排二段酶解工艺优化及其对酶解液风味物质的影响
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酶解法制备罗非鱼油工艺研究李梦凡;陶宁萍;刘承初;潘镜;沈菊泉;肖琨;黄昭【期刊名称】《中国油脂》【年(卷),期】2015(040)007【摘要】采用酶解法提取冷冻罗非鱼头中的鱼油.以鱼油提取率为评价指标,利用单因素实验结合响应面分析法对酶解提鱼油工艺进行优化.确定的酶解最佳工艺条件为:酶解时间2.5h、复合蛋白酶添加量1.25%、料液比1∶1、酶解温度56℃,在此条件下得到的鱼油提取率为81.3%,经小试实验鱼油提取率达到80.4%.粗鱼油经过活性白土脱色和过滤除杂,得到的精制鱼油理化指标除碘值外均符合SC/T 3502-2000精制鱼油一级标准.采用气相色谱法测定精制鱼油的脂肪酸组成,结果表明,鱼油以不饱和脂肪酸为主(72.15%),其中单不饱和脂肪酸占36.04%,主要为油酸;多不饱和脂肪酸占36.11%,主要为亚油酸.【总页数】6页(P6-11)【作者】李梦凡;陶宁萍;刘承初;潘镜;沈菊泉;肖琨;黄昭【作者单位】上海海洋大学食品学院,上海201306;上海海洋大学食品学院,上海201306;上海海洋大学食品学院,上海201306;云南海王水产有限公司,云南普洱654800;上海市食品研究所,上海200235;上海海洋大学食品学院,上海201306;上海海洋大学食品学院,上海201306【正文语种】中文【中图分类】TS224;TQ644【相关文献】1.酶解法提取柞蚕蛹油的工艺研究 [J], 刘颖;刘爱莲;宫淑兰;邹瑞;高岩2.采用控制酶解法从罗非鱼肉中制备血管紧张素转化酶抑制肽 [J], 朱志伟;曾庆孝;林奕封;张立彦;阮征3.酶解法提取鱿鱼内脏油的工艺研究及其脂肪酸分析 [J], 王丹;俞吕;周晶;陈小娥;代小凤;刘书云4.酶解法提取大鲵尾部油的工艺研究 [J], 王苗苗;罗庆华;王海磊;宋英杰;王建文;向建国5.酶解法脱除大豆混合油中磷脂的工艺研究 [J], 凌秀菊;万端极;吴正奇因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
酶法水解罗非鱼肉条件优化的研究赵珊珊(华南理工大学轻工与食品学院,广东广州510641)摘要:选择木瓜蛋白酶、Alcalase2.4L、Protamex、Neutrase1.5MG和Flavourzyme酶解罗非鱼肉,分析了不同酶、酶解时间、固液比、加酶量E/S和pH值对酶解的影响,以游离氨基酸态氮含量(Cn)、蛋白质利用率和氨基酸生成率为指标对酶解过程进行分析,综合实验结果和生产成本,确定了最佳的工艺条件为:选用Flavourzyme酶在温度为50℃、pH值为7.0、固液比1:1、加酶量为500U/g、水解时间7h,此时Cn值为0.277g/100mL、蛋白质利用率为30.12%、氨基酸生成率为31.45%。
关键词:罗非鱼;酶解;风味蛋白酶中图分类号:Q814.9文献标识码:A文章编号:0254-5071(2008)09-0036-04OptimizationconditionforhydrolysisoftilapiabyenzymeZHAOShanshan(CollegeofLightIndustryandFoodScience,SouthChinaUniversityofTechnology,Guangzhou510641,China)Abstract:Hydrolysisoftilapiameatbypapain,Alcalase2.4L,Protamex,Neutrase1.5MGandFlavourzymewerestudied.Effectsofseveralfactorsincludingenzymevariety,hydrolysistime,solidtoliquidratio,enzymequantityandpHonhydrolizationwereinvestigated.Theenzymaticprocesswasanalyzedintermsofnitrogencontentoffreeaminoacids(Cn),proteinutilityratioandaminoacidformationrate.Withacomprehensiveconsiderationofexperimentalresultsandproductioncost,theoptimumhydrolyticconditionsweredeterminedasfollowing:temperature50℃,pH7.0,solidtoliquidratio1:1,enzymequantity500U/g,hydrolysistime7h.Byapplyingtheseoptimalparameters,thevalueofCnreach0.277g/100mL,proteinutilityandaminoacidformationratewere30.12%and31.45%,respectively.Keywords:tilapia;hydrolysis;flavourzyme我国是罗非鱼养殖、加工及出口大国,广东省是罗非鱼加工和出口大省。
罗非鱼肉酶解液美拉德反应产物风味成分的分析
黄国宏;沈要林;钟华锋
【期刊名称】《中国调味品》
【年(卷),期】2007(000)008
【摘要】以罗非鱼肉酶解液和葡萄糖与木糖的复合糖为主要基质进行美拉德反应,反应产物采用高效液相色谱技术和气-质联用技术分别分析了游离氨基酸组成和主要风味成分.结果表明,反应产物游离氨基酸中人体必需氨基酸含量达到40.92%,鲜味氨基酸含量达到75.33%.此外还鉴定出34种风味成分,其中含量最大主要为:2,5-哌嗪二酮、乙酸、2,3-二氢-3,5-二羟基-6-甲基--4H-吡喃-4-酮、顺-2,7-壬二烯酸-3,8-二甲基酯、糠醛等.
【总页数】3页(P68-70)
【作者】黄国宏;沈要林;钟华锋
【作者单位】广西职业技术学院,南宁,530226;华南理工大学轻工与食品学院,广州,510640;华南理工大学轻工与食品学院,广州,510640;广西职业技术学院,南宁,530226
【正文语种】中文
【中图分类】TS201.2
【相关文献】
1.温度对鸡骨酶解液美拉德反应产物光谱特性和挥发性风味成分的影响 [J], 郑晓杰;林胜利;聂小华;许丹
2.蚕蛹酶解液美拉德反应产物的制备和风味成分分析 [J], 鲁珍;穆利霞;刘军;邹宇晓;廖森泰
3.吉富罗非鱼胶原蛋白酸解液美拉德反应产物风味成分的分析 [J], 王浩;纪丽丽;李瑞伟;王辉;宋文东;黄翔鹄
4.鸡骨素及其酶解液的美拉德反应产物挥发性风味成分比较分析 [J], 孙红梅;李侠;张春晖;董宪兵;李银;贾伟
5.奥利亚罗非鱼胶原蛋白酸解液美拉德反应产物风味成分分析 [J], 王浩;纪丽丽;李瑞伟;王辉;宋文东;黄翔鹄
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罗非鱼鱼排蛋白酶解液美拉德反应生香工艺优化研究熊何健;操龙飞;鄢庆枇;马英【期刊名称】《中国农学通报》【年(卷),期】2013(29)5【摘要】为了对罗非鱼鱼排蛋白酶解液美拉德反应生香工艺进行研究,以风味总体接受性为指标,对反应温度、时间、pH值、还原糖添加量4个因素采用响应面法进行多元回归拟合,优化美拉德反应条件,并用HPLC、GC-MS对反应产物进行分析。
结果表明:美拉德反应最佳工艺条件为反应时间57min,反应温度111℃,pH6.0,还原糖(葡萄糖:木糖=2:1)添加量2.0%;反应产物中有机酸含量较反应前酶解液中有机酸含量丰富,核酸关联物较反应前多了呈味的鸟苷酸;反应产物中挥发性成分包括68种风味化合物,分别是醇类6种、醛类7种、酮类5种、芳香族7种、酯类11种、呋喃8种、吡嗪9种、吡咯1种、烃类7种、酸类5种和含硫化合物2种。
罗非鱼鱼排蛋白酶解液经美拉德反应,产物呈透明红褐色,具有独特的鱼香味(香味浓郁)。
【总页数】10页(P58-67)【关键词】罗非鱼鱼排;酶解液;美拉德反应;响应面法【作者】熊何健;操龙飞;鄢庆枇;马英【作者单位】集美大学生物工程学院;集美大学水产学院【正文语种】中文【中图分类】TS201.1【相关文献】1.花生粕蛋白酶解液与还原糖共热发生美拉德反应产生浓香花生油风味物的工艺研究 [J], 邹凤;于炟;金青哲;王兴国;王珊珊;李秋2.罗非鱼下脚料酶解液美拉德反应制备肉类风味物工艺研究 [J], 陈军;熊彬3.罗非鱼下脚料酶解液美拉德反应制备肉类风味物工艺研究 [J], 陈军;熊彬4.基于美拉德反应的狭鳕鱼排复配酶解工艺优化 [J], 闫虹;许瑞红;范选娇;林琳;姜绍通;陆剑锋5.咸蛋清蛋白酶解液美拉德反应条件优化及挥发性风味物质分析 [J], 罗章;辜雪冬;张玉凤;黄群因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
罗非鱼排酶解工艺的研究叶韬;林琳;叶应旺;姜绍通;陆剑锋【期刊名称】《肉类工业》【年(卷),期】2013(000)007【摘要】选用中性蛋白酶酶解罗非鱼排,制备蛋白水解液.以水解度为优化指标,考察初始pH值、酶解温度、料液比、加酶量、酶解时间对水解度的影响,在单因素试验的基础上,采用Box-Behnken中心组合设计和响应面分析法,确定最佳工艺条件;并在最佳工艺条件下,考察水浴、高压蒸汽、超声波和微波等预处理方式对水解度的影响.结果表明:最佳工艺条件为温度49℃,加酶量1 824U/g,水解时间6h,此时罗非鱼排水解度(DH)可达33.7%;除了110℃的高压蒸汽和180w功率的超声波预处理有助于罗非鱼排的进一步水解,其它的预处理方式均不利于罗非鱼排的后续水解.【总页数】6页(P31-36)【作者】叶韬;林琳;叶应旺;姜绍通;陆剑锋【作者单位】合肥工业大学生物与食品工程学院安徽合肥230009;合肥工业大学生物与食品工程学院安徽合肥230009;合肥工业大学生物与食品工程学院安徽合肥230009;合肥工业大学生物与食品工程学院安徽合肥230009;合肥工业大学生物与食品工程学院安徽合肥230009【正文语种】中文【相关文献】1.罗非鱼肉水解蛋白Alcalase酶解工艺优化 [J], 方细娟;曾庆祝;许庆陵;战宇;刘鹏;林金鹰;顾采琴2.Plackett-Burman法和中心组合法优化罗非鱼下脚料酶解工艺 [J], 张桢;杨贤庆;马海霞3.响应面法优化罗非鱼(Oreochromis niloticus)鱼排蛋白分段酶解工艺 [J], 操龙飞;游华军;陈子涵;马英;熊何健;鄢庆枇4.罗非鱼排二段酶解工艺优化及其对酶解液风味物质的影响 [J], 叶韬;林琳;张永进;王伟;姜绍通;陆剑锋5.响应面法优化罗非鱼鳞钙结合肽酶解工艺及其特性表征 [J], 黄文;余可楠;廖婉雯;钟瑞敏;曹庸;苗建银因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
第33卷第1期湖南文理学院学报(自然科学版) V ol.33 No.1 2021年3月 Journal of Hunan University of Arts and Science(Science and Technology) Mar. 2021 doi: 10.3969/j.issn.1672–6146.2021.01.008酶解时间对罗非鱼鱼皮胶原蛋白酶解物抗氧化活性的影响王晴, 石程宇, 钱玉梅, 李红侠, 陈红玲, 陈嶍嶍, 曹稳根(宿州学院生物与食品工程学院, 安徽宿州, 234000)摘要: 为了探究酶解时间对罗非鱼鱼皮胶原蛋白酶解物抗氧化活性的影响, 采用酸法提取罗非鱼鱼皮胶原蛋白, 胃蛋白酶酶解3、6、9、12和24 h制备酶解物, 进行紫外光谱扫描, 水解度测定, 以DPPH·、·OH和O2−·清除率为指标评价抗氧化活性。
结果表明: 最大紫外吸收峰相似, 水解度与酶解时间呈正相关; 9 h酶解物对三种自由基清除效果最好; 罗非鱼鱼皮胶原蛋白酶解物抗氧化活性与酶解时间有关, 为罗非鱼鱼皮进一步加工利用提供理论依据。
关键词: 罗非鱼鱼皮; 胶原蛋白; 酶解; 抗氧化活性中图分类号:TS 254.9文献标志码: A文章编号: 1672–6146(2021)01–0036–06Effects of hydrolysis time on antioxidant activity of tilapia skin collagenproteolyticWang Qing, Shi Chengyu, Qian Yumei, Li Hongxia, Chen Hongling, Cao Wengen, Zang Feng(School of Biology and Food Engineering, Suzhou University, Suzhou 234000 China)Abstract: To investigate the effect of enzymolysis time on the antioxidant activity of collagen protein hydrolysate of tilapia fish skin. Acidic extraction of tilapia fish skin collagen, pepsin enzymolysis for 3, 6, 9, 12 and 24 h to prepare enzymatic hydrolysate, UV spectrum scanning, hydrolysis degree determination, using DPPH, OH and O2−·.The clearance rate is an index to evaluate antioxidant activity. The maximum UV absorption peak was similar, and the degree of hydrolysis was positively correlated with the enzymolysis time. 9 h enzyme hydrolysate has the best effect on scavenging three free radicals. Conclusion: The antioxidant activity of collagen proteolytic products of tilapia fish skin is related to the time of enzymolysis, which provides a theoretical basis for further processing and utilization of tilapia fish skin.Key words: tilapia skin; collagen; enzymatic hydrolysis; antioxidant activity鱼类来源胶原蛋白相比于哺乳动物来源的胶原蛋白具有生物安全性更高、材料来源更广、生产成本更低廉等优势[1], 因此近年来人们对胶原蛋白来源的研究逐渐从哺乳动物转移到鱼类上。
罗非鱼酶解肽抑制冷藏鱼糜中油脂和蛋白质氧化能力
郭利平;荣婧;杨宁;郭善广
【期刊名称】《食品科学》
【年(卷),期】2016(037)005
【摘要】将罗非鱼的酶解产物及其超滤组分(<5 kD酶解肽)加入罗非鱼鱼糜制品中,研究其在冷藏(0~4℃)期间对油脂和蛋白质的抗氧化效果.结果表明:酶解产物及超滤组分均可以改善鱼糜的色泽(P<0.05),尤其是超滤组分的效果接近于一定剂量的VC;酶解产物对鱼糜中的油脂、蛋白质均表现出较强的抗氧化能力(P<0.05),其中超滤组分优于酶解液;酶解肽可以有效地保持鱼糜在冷藏期间的品质,超滤分离富集的<5kD的小分子肽显示出更好的抗氧化效果.
【总页数】5页(P89-93)
【作者】郭利平;荣婧;杨宁;郭善广
【作者单位】广东轻工职业技术学院轻化工程系,广东广州 510300;华南农业大学食品学院,广东广州 510642;广东省对外科技交流中心,广东广州 510033;华南农业大学食品学院,广东广州 510642
【正文语种】中文
【中图分类】TS254.4
【相关文献】
1.茶多酚对冷藏鱼糜油脂抗氧化作用的研究 [J], 刘焱;姜佳星;阮林浩;朱旗
2.罗非鱼下脚料蛋白酶解物及其锌螯合盐对油脂的氧化抑制研究 [J], 赵阳;杨萍;李
同刚;洪鹏志
3.关于鱼糜在冷藏过程中蛋白质变性的研究——冷藏过程中Ca++-ATPase活性变化的探讨 [J], 陈焕铨;韩名竹;陶江萍;金中林
4.茶多酚对冷藏鱼糜油脂抗氧化作用的研究 [J], 刘焱; 姜佳星; 阮林浩; 朱旗
5.罗非鱼的鱼糜类增值产品的冷藏研究 [J],
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罗非鱼下脚料酶解工艺的研究的开题报告一、选题背景罗非鱼是一种适应性强的淡水鱼类,广泛分布于亚洲、非洲和美洲等地区。
罗非鱼富含蛋白质、多种氨基酸和不饱和脂肪酸等健康营养成分,具有高营养、高附加值和广泛的市场前景。
而在罗非鱼加工过程中,鱼骨、鱼鳞等废弃物料所含的蛋白质和酶,能够通过酶解技术转化为功能性肽和氨基酸等高附加值产品,具有经济和环境效益。
因此,罗非鱼下脚料酶解工艺的研究具有一定的理论和应用价值。
二、研究目的本研究以罗非鱼下脚料为原料,利用酶解技术制备功能性多肽和氨基酸等高附加值产品,研究其工艺条件、酶源选择、理化特性等关键问题,为罗非鱼资源的综合利用提供科学依据。
三、研究内容和方法1. 罗非鱼下脚料的处理:去鳞、去皮、清洗、切割等操作,制备成符合酶解工艺的原料。
2. 酶解工艺的优化:比较不同酶源的酶解效果,对酶解参数(pH、温度、酶用量、加酶时间等)进行优化,确定最佳酶解条件。
3. 酶解产物的分离和纯化:通过离心、滤液、凝胶过滤等手段分离出酶解产物,利用离子交换、凝胶过滤、透析等技术进一步纯化。
4. 酶解产物的理化特性分析:使用高效液相色谱、质谱等技术对酶解产物进行理化特性分析,包括分子量分布、氨基酸序列等方面。
四、研究意义1. 研究罗非鱼下脚料酶解工艺,可以将鱼类资源的浪费降低到最低限度,使得鱼类加工利用得到最优化。
2. 酶解产物中具有多肽和氨基酸等高营养成分,可以广泛应用于保健食品、医药、饲料等领域,具有广阔的市场前景。
3. 本研究的酶解工艺、理化特性分析方法等对于其他淡水鱼类资源的综合利用也具有一定的借鉴意义。
五、研究难点1. 罗非鱼下脚料中多种酶的作用机制复杂,如何在不影响酶解效果的前提下选择最适宜的酶源和酶解参数,是本研究中的难点之一。
2. 酶解产物的分离和纯化工艺需要综合考虑效率和成本问题,解决好这一问题也是研究的难点之一。
六、预期结果和实际应用通过对罗非鱼下脚料的酶解工艺研究,预计可以获得具有多肽和氨基酸等高附加值的酶解产物,其特殊的营养成分有望在保健食品、医药、饲料等领域得到应用。
第44卷第5期Vol.44No.5淡水渔业Freshwater Fisheries2014年9月Sep.2014收稿日期:2013-12-05;修订日期:2014-05-15资助项目:省部产学研结合重点项目(2012B091000121);安徽省115产业创新团队计划(2012d5t146)第一作者简介:叶韬(1988-),男,硕士研究生,专业方向为水产品加工及贮藏。
通讯作者:陆剑锋(1976-),男,教授,博士,主要从事水产动物资源保护及综合利用研究,E-mail :lujf@罗非鱼排二段酶解工艺优化及其对酶解液风味物质的影响叶韬,林琳,张永进,王伟,姜绍通,陆剑锋(合肥工业大学生物与食品工程学院,合肥230009)摘要:为获知二段(或分步)酶解工艺对罗非鱼排水解液中风味物质的影响,通过响应面分析法研究了风味蛋白酶二段酶解罗非鱼排的最佳工艺,并分析比较一段酶解液以及二段酶解液中的游离氨基酸种类及含量,同时采用顶空—固相微萃取(HS-SPME )结合气质联用(GC-MS )技术对酶解液挥发性风味物质组成进行分析研究。
结果显示:在温度为55ħ,pH 为7.0,加酶量为1315U /g 时,水解4h ,水解度可达47.22%,显著高于一段酶解液(33.70%);二段酶解液的游离氨基酸总量及必需氨基酸含量分别提高224.39mg /100mL 和114.15mg /100mL ,呈鲜味及甜味的氨基酸所占比例提高3.26%;二段酶解液挥发性风味成分中醛类物质的相对含量提高了9.0%,愈创木酚、1-辛烯-3-醇等特征风味物质相对含量有所降低。
研究表明,二段酶解工艺不仅可以提高罗非鱼排水解度,还可改善酶解液的风味成分。
关键词:罗非鱼排;二段酶解;游离氨基酸;风味成分中图分类号:TS254.1;S986.1文献标识码:A文章编号:1000-6907-(2014)05-0087-08Optimization of two-step enzymatic hydrolysis of Tilapia frame andits effect on the flavor compounds of hydrolysatesYE Tao ,LIN Lin ,ZHANG Yong-jin ,WANG Wei ,JIANG Shao-tong ,LU Jian-feng(College of Biotechnology and Food Engineering ,Hefei University of Technology ,Hefei 230009,China )Abstract :In order to learn the effect of two-step enzymatic hydrolysis on the flavor compounds of Tilapia frame hydroly-sates ,the optimal conditions of the two-step enzymatic hydrolysis were obtained by using Response Surface Analysis ,and then the free amino acids and the volatile flavor components in one-step and two-step hydrolysates were analyzed.Results indicated that the optimal conditions for two-step hydrolysis by flavourzyme were as follows :pH value was 7.0,time was 4h ,temperature was 55ħ,enzyme dosage was 1315U /g.The degree of hydrolysis could reach 47.22%,13.52%high-er than that of one-step enzymatic hydrolysis under the optimum values.Total free amino acids and essential amino acids content combined with the proportion of delicious amino acid (sweet or umami )in the two-step hydrolysates increased by 224.39mg /100mL ,114.15mg /100mL and 3.26%,respectively.Meanwhile ,the relative ratio of aldehydes in the volatile flavor components from the two-step hydrolysates increased 9.0%.However ,the contents of some characteristic flavor compounds such as guaiacol and 1-octene-3-alcohol were significantly reduced.Therefore ,two-step enzymatic hy-drolysis methodology could not only improve the degree of hydrolysis ,but also improve the flavor compounds of hydroly-sates.Key words :Tilapia frame ;two-step enzymatic hydrolysis ;free amino acid ;flavor component鱼类水解蛋白是一种人类优质蛋白资源,它不仅含有丰富的必需氨基酸,同时也具有一定的保健和药用价值,被世界卫生组织推荐为必需氨基酸的一种重要来源[1]。
罗非鱼片加工过程中产生大量的副产物(如鱼排等),水解副产物制取蛋白,逐渐成为罗非鱼副产物利用的主流方式[2]。
前期我DOI:10.13721/ki.dsyy.2014.05.017们已开展了罗非鱼排的一段酶解工艺研究[3],从木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶和胃蛋白酶中筛选出水解效果较好的中性蛋白酶进行酶解,并通过响应面法(RSM )优化了酶解工艺条件,制备出水解度可达33.7%的水解液。
然而,一段酶解液往往具有较多的苦味或腥味物质,令消费者难以接受,因而制约其产品的市场推广。
二段(或分步)酶解技术不仅可以大大提高水解度,而且可以有效降低酶解液的苦味或腥味。
Liaset 等[4]采用碱性蛋白酶和Kojizyme 酶对大西洋鳕(Gadus morhua )和大西洋鲑(Salmo salar )鱼排进行二段酶解制备鱼蛋白水解液(FPH ),显著提高了水解度(分别达到48%和50%),同时减弱了酶解液的苦味;孟昌伟等[5]选用碱性蛋白酶和风味蛋白酶对斑点叉尾(Ictalurus punctatus )鱼骨进行分步酶解制备骨胶原多肽,水解度可达47%,水解产物的风味在一定程度上也得到了改善。
此外,分步酶解技术也有助于提高酶解液短肽得率,增强水解产物的生物活性和功能特性。
Je 等[6]分别使用碱性蛋白酶、中性蛋白酶和复合蛋白酶对金枪鱼(Thunnus albacares )肝脏进行一段酶解,再采用风味蛋白酶进行二段酶解制备多肽酶解液,二段酶解液对氧化DNA 裂解的抑制性以及抗氧化性显著增强;Kim 等[7]采用碱性蛋白酶和风味蛋白酶对铠平鮋(Sebastes hubbsi )鱼皮胶原蛋白进行分步酶解,获得抗氧化性和ACE 抑制性均强的液化蛋白,可作为功能保健食品原料运用到食品工业中。
目前,分步酶解已发展成为现代食品加工工程一种重要的酶解工艺,但分步酶解工艺对水产品加工副产物酶解液风味物质影响的相关研究仍然较少。
鉴于此,本研究在罗非鱼排一段酶解工艺研究的基础上,进一步优化罗非鱼排的二段酶解工艺,并考察和比较了二段酶解对游离氨基酸和挥发性成分风味物质的影响,为综合开发利用罗非鱼排及其酶解液提供理论基础。
1材料与方法1.1材料与试剂罗非鱼排,取自广东云浮明基水产品有限公司;风味蛋白酶,购于北京拜尔迪生物技术有限公司;甲醛,氢氧化钠,盐酸等,购于合肥美丰化工仪器有限公司,均为分析纯。
1.2仪器与设备HH 数显恒温水浴锅,江苏金坛市文华仪器有限公司;PHS-3C 精密pH 计,上海大普仪器有限公司;L-8900氨基酸分析仪,日本日立公司;QP-2010气相色谱-质谱联用仪,日本岛津公司;萃取头DVB /CAR/PDMS50/30um (二乙烯基苯/碳分子筛/聚二甲基硅氧烷)、SPME 手动进样器,美国Supelco 公司;DB-5MS 毛细管色谱柱,美国Agilent 公司;15mL EPA /VOA 螺口样品瓶,美国Supe-Tech 公司。
1.3一段酶解液制备实验室自制[3]:将罗非鱼排洗净,沥干,绞碎,调节料液比为1ʒ4,pH 7.5,在温度为49ħ条件加入1824U /g 的中性蛋白酶水解6h ,沸水浴灭酶10min ,制得一段水解液。
1.4二段酶解工艺一段酶解液→调节初始pH →加酶控温酶解(风味蛋白酶)→沸水浴灭酶(10min )→离心10min (4000r /min )→取上清液→抽滤→分步水解液(二段酶解液)1.5水解度的测定参照叶韬等[3]的方法:水解度DH =酶解后α-氨态氮含量-酶解前α-氨态氮含量原料总蛋白氮含量-原料中非蛋白氮含量ˑ100%。
氨态氮含量:参照GB /T 5009.39-2003《酱油卫生标准的分析方法》中甲醛值法测定;非蛋白氮含量:参照《水产食品化学分析手册》中三氯乙酸沉淀法。
1.6水解液中游离氨基酸含量测定参照Zhou 等[8]的方法,略有修改:准确移取1mL 酶解液于离心管中,并加入2mL 质量分数为5%的磺基水杨酸溶液,静置1h ,用以去除蛋白,再加入1mL 质量分数为1%的EDTA 溶液,用以络合金属离子,混匀,在转速为5000r /min 离心机上离心5min ,取上清液并调节pH 值,最后用pH 为2.2的缓冲溶液定容,用0.45μm 微孔滤膜过滤后上机。
1.7水解液中挥发性风味物质检测固相微萃取条件[9]:取水解液2mL 放置于螺口进样瓶中,插入萃取头于60ħ水浴萃取40min ;色谱条件:DB-5MS 毛细管色谱柱(60m ˑ0.32mm ,1μm ,Agilent 公司);升温程序:起始柱温35ħ,保持1min ,以5ħ/min 上升至120ħ,无保留;再以6ħ/min 上升至180ħ,无保留;再以10ħ/min 上升至250ħ;保留5min 。