对同一种酶来讲,比活力愈高则表示酶的纯度越高(含 杂质越少)。
比活力是评价酶纯度高低的一个指标。
问题?
现有1g淀粉酶制剂,用水稀释1000mL,从中吸取0.5mL 测定该酶的活力,得知5分钟分解0.25g淀粉。计算每 克酶制剂所含的淀粉酶活力单位数。
(淀粉酶活力单位规定为:在最适条件下,每小时分 解1g淀粉的酶量为1个火力单位。)
(五)、 Km和Vmax的测定
双倒数作图法,又称为林-贝氏(Lineweaver- Burk)作图法
Vmax[S]
1/V
V= Km+[S]
两边同时取倒数
Km
1/V=
Vmax
1/[S] + 1/Vmax
-1/Km
(林-贝氏方程)
1/Vmax
1/[S]
二、酶浓度对反应速度的影响
V
*当[S]>>[E],反应 速度与酶浓度成正比。
(一) 、不可逆性抑制作用
*概念:
以共价键与酶活性中心的必需基团相结合,使酶失活,
不能用透析、超滤等方法予以除去。
*举例:
有机磷化合物 羟基酶 解毒 -- -- -- 解磷定(PAM)
重金属离子及砷化合物 巯基酶 解毒 -- -- -- 二巯基丙醇(BAL)
RO X
P + E OH R'O O 有机磷化合物 羟基酶
四、酶的分类
1、氧化还原酶类(oxidoreductases) 2、转移酶类 (transferases ) 3、水解酶类 (hydrolases) 4、裂解酶类 (lyases) 5、异构酶类( isomerases) 6、合成酶类 (ligases,synthetases)
五、酶的活性和活性单位