中药生物活性测定的指导原则

中药注射剂生物学活性测定的指导原则（讨论纲要）中药注射剂具有成分复杂多变，活性成分和未知成分多，功能和主治面广，作用部位和作用靶点多等特点。

为保障中药注射剂临床用药的有效性和质量可控性，在质量标准中理化分析的基础上增加与功能主治、主要药效相关的”生物学活性测定”项目,可进一步完善质量标准、提高药品质量。

中药注射剂可参考本指导原进行设立”生物学活性测定”项方法学研究和适用性研究。

一．方法选择：应选择与功能主治相关的1-2(或更多)种主要药效学动物模型作为生物学活性测定方法，方法力求设计合理、操作简便、指标明确、灵敏度高、重现性好，尽可能使用小动物，以限度试验为主。

可用体内试验，也可用离体器官、血清、培养细胞、微生物等进行试验。

试验设计：可采对照组和给药组进行比较、或给药前后比较的方法，用质反应或量反应指标进行统计学处理。

小动物5～10只一组、也可根据试验要求用更少的动物。

初试时可仅设阴性对照组和给药组比较，结果统计学处理如为阳性（差异显著）则符合要求。

结果评价：如结果为阴性或可疑阳性（差异不显著），在复试中再增加动物数并增设阳性对照组，复试结果可单独评价，也可与初试结果合并统计计算综合评价,如阳性对照组结果阳性而供试品仍为阴性，则生物学活性测定结果”阴性”。

鉴于中药注射剂成分及生物学活性测定方法的复杂性和变异性，在试行标准生物活性测定项目中可考虑采用2项以上生物活性测定方法，规定其中有1项阳性即为结果”阳性”而符合规定。

生物学活性测定方法内容：内容一般包括试验设计、操作方法、供试品配制、给药限值剂量、阳性对照品、观察指标、结果评价（初试和复试）二．剂量限值：按临床用药剂量（平均公斤剂量）的30倍以下（一般20倍以下）计算最大给药剂量，以不同剂量静脉注射或其他注射途径，一次或多次给药，按观察指标观察量效反应关系，选择作用明显和确切的剂量作为剂量限值。

限值一般应低于急性毒性试验的最小致死量（MLD）。

中药生物活性测定指导原则生物活性测定法是以药物的生物效应为基础，以生物统计为工具，运用特定的实验设计，控制药物有效性的一种方法，从而达到控制药品质量的作用。

其测定方法包括生物效价测定法和生物活性限值测定法。

中药的药材来源广泛、多变，制备工艺复杂，使得中药制剂的质量控制相对困难，此外，中药往往含有多种活性成分和具有多种药理作用，因此，仅仅控制少数成分不能完全控制其质量和反映临床疗效。

为了使中药的质量标准能更好地保证每批药品的临床使用安全有效，有必要在现有对指标成分“含量测定”的基础上增加生物活性测定，以综合评价其质量的可靠性和可控性。

本指导原则的目的是规范中药生物活性测定研究，为该类实验设计、方法学建立等过程和测定方法的适用范围提供指导性的原则要求。

基本原则符合药理学研究基本原则 建立的生物活性测定方法应符合药理学研究的随机、对照、重复的基本原则；具备简单、精确的特点；应有明确的判断标准。

体现中医药特点 鼓励应用生物活性测定方法探索中药质量控制，拟建立的方法的测定指标应与该中药的“功能与主治”相一致。

品种选择合理 拟开展生物活性测定研究的中药材或中成药应功能主治明确，其中，优先考虑治疗适应症明确单一的中药注射剂品种，对急重症用药、保护品种应重点进行研究。

方法科学可靠 优先选用生物效价测定法，不能建立生物效价测定的品种可考虑采用生物活性限值测定法，待条件成熟后可进一步研究采用生物效价测定法。

基本内容1.实验条件试验系选择 生物活性测定所用的试验系，包括整体动物、离体器官、血清、微生物和组织、细胞、亚细胞器、受体、离子通道和酶等。

试验系的选择与试验原理和测定指标密切相关，应选择背景资料清楚、影响因素少、检测指标灵敏和成本低廉的试验系统。

应尽量研究各种因素对试验系的影响，采取必要的措施对影响因素进行控制。

如采用实验动物，尽可能使用大鼠和小鼠等来源多，成本低的实验动物，并说明其种属、品系、性别和年龄。

实验动物的使用，应符合“优化、减少、替代”的“3R”原则。

《中华人民共和国药典（2015年版）》（四部）通则中有关生物测定部分的增、修订情况介绍作者：唐黎明陈桂良来源：《上海医药》2016年第07期摘要《中华人民共和国药典（2015年版）》将前版药典一、二、三部分别收载的附录整合归为四部，作为药典的通用要求。

四部中有关生物测定部分除整合了热原检查法、异常毒性检查法等原附录外，还新增了组胺物质检查法等，同时对部分原附录进行了修订。

本文介绍相关情况。

关键词《中华人民共和国药典（2015年版）》生物测定通则增、修订中图分类号：R921.2 文献标识码：C 文章编号：1006-1533（2016）07-0009-02Introduction of the revised information about the biologic test in general principle（volume IV）of the Pharmacopoeia of the People’s Republic of China （2015 version）TANG Liming*， CHEN Guiliang（Division of Pharmacology and Toxicology， Shanghai Institute for Food and Drug Control，Shanghai 201203， China）ABSTRACT The appendices in the Pharmacopoeia of the People’s Republic of China （ChP）（2010 version） volume I， II and III were integrated into volume IV in ChP （2015 version），which can be served as the common requirement for pharmacopoeia standards. The histamine test and so on were added in the biological test of volume IV besides the intergradation of pyrogens test and abnormal toxicity test and meanwhile some appendices on bioassay were revised as well. In this paper， the relevant information is introduced for reference.KEY WORDS Pharmacopoeia of the People’s Republic of China （2015 version）； biologic test； general principle； revision《中华人民共和国药典（2015年版）》（以下简称为“2015年版《中国药典》”）已自2015年12月1日起正式实施。

生物活性物质药理活性鉴定与药物设计原则药物设计是一门十分重要的科学，它旨在开发出具有理想药理活性的化合物，以用于治疗或预防疾病。

对于药物设计的研究，主要集中在发现和开发具有生物活性的化合物，并研究其与生物分子的相互作用。

本文将介绍生物活性物质药理活性鉴定和药物设计原则的相关内容。

生物活性物质的药理活性鉴定是在发现新的药物分子之前的关键步骤。

药理活性鉴定旨在确定化合物对特定生物目标的药理效应。

这个过程通常包括体外和体内实验，以评估化合物的活性、选择性和效能。

1. 体外活性鉴定体外活性鉴定是通过使用细胞系或酶系统来测试化合物对生物靶标的作用。

这些实验可以提供初步的药理活性信息，帮助筛选和优选化合物。

常用的体外活性鉴定方法包括：a. 细胞增殖和细胞凋亡实验 - 通过检测化合物对细胞增殖和生长的影响，评估其抗癌或抗炎症活性。

b. 结合实验 - 通过测定化合物与目标生物分子的相互作用来评估其亲和力和选择性。

例如，药物分子与蛋白质的结合可以通过放射性标记药物分子或荧光标记药物分子等方法进行测定。

c. 酶抑制实验 - 检测化合物对特定酶的抑制活性，以确定其潜在的药理效应。

例如，抗生素通常通过抑制细菌细胞壁合成酶来发挥抗菌活性。

2. 体内活性鉴定体内活性鉴定是通过使用动物模型来评估化合物的生物活性。

这些实验提供了更接近人体内环境的信息，并可以评估化合物对整个生物系统的影响。

常用的体内活性鉴定方法包括：a. 动物模型 - 使用小鼠、大鼠或其他动物模型，在实验条件下评估化合物的药理活性。

例如，使用小鼠模型来评估化合物在抗癌治疗中的疗效。

b. 药动学和药效学实验 - 评估化合物在体内的吸收、分布、代谢和排泄（ADME）特性，以及对疾病模型的药理活性。

这些实验可以提供化合物的生物利用度、血浆半衰期和最佳剂量等信息。

药物设计的原则是在药理活性鉴定的基础上，进一步优化化合物的结构和活性。

以下是一些常见的药物设计原则：1. 靶点选择 - 确定适合治疗疾病的生物分子靶点，并设计具有高亲和力和选择性的化合物。

生物制品生物活性/效价测定方法验证指导原则一、前言对药品质量控制分析方法进行验证的目的是证明采用的方法适合于相应检测要求。

生物制品质量控制中生物活性/效价为反映生物制品有效性的关键质量属性，对相应的测定方法进行规范的验证是保障其适用性的前提。

本指导原则从验证方案的制定、各验证指标的具体验证策略、验证结果的记录和方法的监控及再验证的角度阐述了生物活性/效价测定方法验证相关的要求，旨在对新建的或拟修订的生物制品生物活性/效价测定方法所开展的验证工作进行规范与指导。

本指导原则中的生物活性/效价测定主要是指相对效价测定，该法系将供试品的生物反应与已知标准品产生的反应相比较，从而定量测定供试品相对于标准品的效价。

二、方法验证的基本要素1.验证方案方法验证需根据验证方案来完成。

验证方案不仅应包括验证设计、验证指标、合理的可接受标准和数据分析计划，还应涵盖不符合可接受标准时可采取的措施等。

1.1验证设计验证设计主要涉及样品的选择、实验变异来源的考量及试验重复策略等。

应采用具有代表性的样品进行验证试验，并在验证方案中注明所需样品的类型及数量。

实验变异的来源主要包括样品的制备、试验内和试验间的影响因素。

试验内变异可能受方法开发阶段所确定的实验条件（温度、pH、孵育时间等）、实验设计（动物数量、稀释度组数、每个稀释组的重复数、稀释度间隔等）、试验过程、系统适用性和样品适用性要求、统计分析等因素的影响。

而试验间变异主要受不同分析人员、不同试验时间、不同仪器设备和试剂批次等因素的影响。

因此，一个设计良好的验证方案应综合考量试验内和试验间变异的来源。

此外，每轮验证试验中标准品和供试品均应独立制备。

验证中使用的重复策略应尽量反映影响效价测定结果的实验因素。

1.2验证指标与可接受标准由于相对效价测定方法各具特点，并随分析对象而变化，因此需视具体方法拟订具体的验证指标，关于常见验证指标的具体讨论见本节“2.各验证指标的验证策略”项下。

中药药效物质的生物活性评价技术中药药效物质的生物活性评价技术是研究中药药效的一种重要方法，通过对中药中的活性成分进行评价，以确定其在治疗疾病方面的作用机制和潜在的药理活性。

本文将从实验步骤、评价方法和应用前景三个方面对中药药效物质的生物活性评价技术进行详细介绍。

一、实验步骤中药药效物质的生物活性评价通常包括以下几个步骤：提取纯化中药成分、制备样品溶液、选择合适的实验模型、确定实验参数、进行实验和数据分析。

1. 提取纯化中药成分首先，从中药中提取需要评价的活性成分。

这通常包括溶剂提取、分离纯化等步骤，以得到纯净的活性成分。

2. 制备样品溶液提取得到的纯净活性成分需要制备成适当浓度的样品溶液以供后续实验使用。

溶解剂的选择要考虑到活性成分的化学性质和生物学特性。

3. 选择合适的实验模型根据需求和研究目的，选择合适的实验模型进行生物活性评价。

常见的实验模型包括原代细胞、细胞系、动物模型等。

4. 确定实验参数在实验前需要确定实验的参数，包括溶液浓度、实验时间、实验温度、实验剂量等。

这些参数的选择要根据前期的文献调研和实验经验来确定，以确保实验结果的可靠性和可重复性。

5. 进行实验和数据分析根据实验设计进行实验操作，并记录实验数据。

实验结束后，对实验数据进行统计分析，评估活性成分的生物活性。

二、评价方法中药药效物质的生物活性评价通常采用多种方法从不同角度评价其活性。

常见的评价方法包括体内药理学评价、体外细胞实验和体外化学实验。

1. 体内药理学评价体内药理学评价是指将活性成分在动物体内进行药理学研究，通过测定生物体内的代谢变化、生理指标的影响等来评价其生物活性。

常用的方法包括药效学、毒理学和药代动力学等。

2. 体外细胞实验体外细胞实验是通过将活性成分添加到细胞培养基中，观察和测定细胞对该成分的生物学响应，评价其活性。

常见的细胞实验包括细胞增殖实验、细胞凋亡实验、细胞迁移实验等。

3. 体外化学实验体外化学实验主要通过评估活性成分对一系列化学反应的影响来评价其活性。

中药生物效应检测研究技术指导原则（征求意见稿）2020年9月目录一、概述 (1)二、基本原则 (1)（一）体现中医药特点，反映有效性和安全性 (1)（二）与现有理化检测方法相互补充 (2)（三）方法应科学可行 (2)三、基本内容 (2)（一）检测方法的选择 (3)（二）供试品的制备 (4)（三）参照物的选择和标定 (4)（四）试验系的选择 (5)（五）检测指标的选择 (5)（六）其他 (6)四、参考文献 (6)五、著者 (6)中药生物效应检测研究技术指导原则1（征求意见稿）23一、概述4生物效应检测是利用药物对试验系所产生的生物效应，5以生物统计为工具，运用特定的实验设计，测定药物有效性、6安全性的一种方法，从而达到评价药品质量的作用。

7中药具有多成份、多靶点，整体发挥作用等特点。

目前8以指标性成份检测为主的质量控制方法与药品9的有效性和安全性关联性不强，难以充分反映药品的整体质10量，需研究探索反映中药有效性、安全性及整体质量的控制11方法。

生物效应检测能够弥补指标性成份检测的不足，与现12有方法互为补充。

13为鼓励探索研究中药生物效应检测方法，完善中药质量14控制体系，制定本技术指导原则。

随着科学技术的进步和中15医药研究的不断深入，本指导原则的相关内容将不断完善。

16二、基本原则17（一）体现中医药特点，反映有效性和安全性18生物效应检测研究应尽可能体现中药多成份、多靶点、19多功效及整体作用等特点，反映中药的有效性、安全性和质20量一致性。

由于中医的病证、症候及中药的功效难以用单一21指标表达，开展中药生物效应检测研究时，应尽可能考虑采22用多个指标进行研究，可通过加权拟合使其成为具有中医药23特点的评价指标。

24（二）与现有理化检测方法相互补充25中药成份复杂、药效物质基础研究薄弱，现行以化学成26份检测为主的质量控制方法虽简单易行，但不能较好地反映27中药的安全性、有效性以及整体质量；生物效应检测方法相28对复杂，但可以较好弥补指标性成份检测的不足，两种方法29互为补充，提高中药质量可控性，较为全面地反映中药的整30体质量。

中药生物活性测定的指导原则一、选择合适的生物实验模型生物实验模型的选择应该与中药的性质、药理作用和临床应用相符。

常见的生物实验模型包括细胞模型、动物模型和人体试验。

细胞模型可以通过细胞毒性试验、细胞增殖试验和细胞凋亡试验来评估中药的抗癌活性、细胞保护作用等。

动物模型可以通过体内实验评估中药的药效和毒副作用。

临床试验则可以通过人体试验来评估中药的疗效和安全性。

二、确定适当的实验方法和指标根据中药的药理作用和预期效果，选择合适的生物实验方法和指标。

常见的实验方法包括含量测定法、生物活性测定法和分子生物学技术等。

指标可以是中药的化学成分浓度、药效、毒副作用等。

在进行实验前，需要对实验方法和指标进行合理的选择和验证，确保其可重复性和可比性。

三、确定适当的实验条件和操作方法四、考虑配伍效应和多组分相互作用中药常常以多组分的形式出现，并常常进行配伍使用。

在进行生物活性测定时，需要考虑到不同组分之间的相互影响和相互作用。

可以通过对中药单一组分和复方的比较，或者对复方中每个组分的单独测定，来分析单一组分和多组分的药效之间的差异。

五、注重数据的科学性和可靠性中药生物活性测定的结果应该是科学的、可靠的和可重复的。

因此，在进行实验时，需要按照一定的规范和标准操作，记录实验过程和数据，包括实验条件、实验操作、实验结果等。

此外，还需要进行统计分析和数据处理，以获得准确的结论和可靠的科学依据。

总之，中药生物活性测定的指导原则包括选择合适的生物实验模型、确定适当的实验方法和指标、确定适当的实验条件和操作方法、考虑配伍效应和多组分相互作用，以及注重数据的科学性和可靠性。

遵循这些原则，可以提高中药生物活性测定的准确性和可靠性，为中药的研究和应用提供科学依据。

生物制品生物活性效价测定方法验证指导原则1.实验原则：(1)合理设计实验方案，确保实验步骤正确并满足测定目的。

(2)严格控制实验条件，包括温度、湿度、pH值等，以确保实验结果的可比性和可重复性。

(3)定义实验规模，即所需实验样本的数量和重复次数，以确保实验结果的统计学意义。

2.验证原则：(1)验证方法应根据不同的生物活性效价指标进行优化，比如细胞毒性、抗菌活性、细胞增殖活性等。

(2)验证方法应包括特异性、线性范围、精密度、重复性、稳定性等指标的测定。

(3)验证方法应与已验证方法进行比较，以确保新方法的可靠性和准确性。

(4)验证方法的结果应可重复，以便其他实验室或研究人员能够再现实验结果。

3.数据分析原则：(1)采用适当的统计学方法分析数据，以确定实验结果的显著性。

(2)应选择合适的数据分析软件，以确保数据的准确性和可信度。

(3)对于重复测定数据，应计算平均值和标准偏差，并绘制误差线图，以展示数据的可靠性和可重复性。

(4)对于不同样品之间的比较，应采用合适的统计学方法，如t检验、方差分析等。

4.结果解释原则：(1)结果应清晰地呈现于报告中，包括数据表、图表等。

(2)结果应与先前的验证结果进行比较，以确定方法的可靠性和稳定性。

(3)结果应与已确定的指标进行比较，以确定生物制品的生物活性效价。

(4)结果应进行合理的解释，尽量避免过度解释或夸大结果的意义。

综上所述，生物制品生物活性效价测定方法验证指导原则涉及实验设计、验证方法、数据分析和结果解释等多个方面。

通过严格按照这些原则进行实验，可以确保生物制品生物活性效价测定方法的准确性和可靠性，从而为生物制品的质量控制和安全性评估提供有力的科学依据。