LF-I分子杂交炉和分子杂交炉价格
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DIG Northern Starter KitDIG Northern标记及杂交检测试剂盒说明书版本:Version 8.0 (2010年8月)利用体外转录法进行地高辛标记的RNA探针合成反应,采用酶联免疫方法及即用型化学发光底物CDP-Star进行杂交分子的检测。
利用本试剂盒可进行10次标记反应,和10次杂交检测反应(10×10cm2杂交膜)。
产品目录号:12 039 672 910试剂盒于-15 ~ -25℃保存1. 概况1.1 说明书内容1. 概况 (2)1.1说明书内容 (2)1.2试剂盒组成 (3)2. 介绍 (5)2.1 产品概述 (5)3. 实验步骤和需要的材料 (7)3.1 实验开始前准备 (7)3.2 实验流程 (7)3.3 DNA模板制备 (7)3.4 DIG-RNA标记 (9)3.5定量标记反应效率 (10)3.6 适用于DIG Northern bolts的凝胶系统 (12)3.7 RNA转膜和固定 (13)3.8 杂交 (14)3.9 免疫检测 (15)3.10探针洗脱和重探 (17)4 附录 (18)4.1 疑难问题解决 (18)4.2参考文献 (19)1.2 试剂盒组成杂交反应所需的仪器和其他反应试剂请根据您的实验操作流程准备杂交反应所需的仪器和其他试剂,参见下表,请注意所有试剂应使用DMPC或DEPC处理的水配置:带*的试剂为罗氏应用科学部提供的试剂。
2.1 产品概述反应原理DIG Northern标记及杂交检测试剂盒采用体外转录法,以地高辛(DIG,一种甾类半抗原)标记的UTP为底物,进行RNA探针的标记合成,所获得的单链RNA探针用于后续的杂交反应,带有地高辛分子的杂交子通过酶联免疫反应和CDP-Star底物进行化学发光检测。
应用尼龙膜上的Northern blots杂交反应样本•线性化质粒,质粒上含相应的RNA聚合酶启动子序列(SP6,T3,T7)注意:质粒上待转录的目标片段长度应在200-1000 bp。
中国人常见G6PD基因突变的快速检测肖奇志;李哲;周玉球;郑勤【摘要】目的葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(glucose-6-phosphate dehydrogenase,G6PD)缺乏症是世界上最常见的遗传性红细胞酶缺陷病.本文探讨建立一种简便快速、准确可靠、经济实用的G6PD缺乏症分子诊断技术.方法采用DNA测序技术通过双盲法对所建立的单管多重PCR结合分子杂交技术进行方法学评价.结果所建立的新技术可成功地检出上述中国人常见的G6PD基因突变并能清楚区分男性杂合子、女性杂合子或纯合子或双重杂合子.盲法分析结果显示,该技术对经DNA直接测序确诊的G6PD标本的诊断准确度和重复性均达到100%.结论单管多重PCR结合分子杂交技术可准确、快速地检测中国人常见的G6PD基因突变且具有经济和实用的优点,非常适合于G6PD缺乏症的大人群分子筛查和临床样品的基因诊断.【期刊名称】《分子诊断与治疗杂志》【年(卷),期】2011(003)004【总页数】5页(P222-226)【关键词】葡萄糖-6-磷酸脱氢酶;基因突变;单管多重聚合酶链反应;反向点杂交【作者】肖奇志;李哲;周玉球;郑勤【作者单位】珠海市妇幼保健院检验科,珠海市医学遗传研究所,广东,珠海,519001;珠海市金湾区三灶医院检验科,广东,珠海,519040;珠海市妇幼保健院检验科,珠海市医学遗传研究所,广东,珠海,519001;珠海市妇幼保健院检验科,珠海市医学遗传研究所,广东,珠海,519001【正文语种】中文葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(glucose-6-phosphate dehydrogenase, G6PD)广泛存在于各种生物体内,它是糖酵解磷酸戊糖旁路中的一个关键酶和限速酶,其主要的功能是产生NADPH。
而NADPH对于维持细胞的正常生理功能和形态具有极为重要的作用。
G6PD缺乏症是世界上最常见的一种遗传性红细胞酶缺陷病,全球约有4亿人受累,该病高发于热带和亚热带地区,中国南方也是该病的高发区[1]。
新芝分子杂交炉使用方法介绍:新芝分子杂交炉是一种用于分子生物学实验的仪器,可以用于DNA 或RNA的杂交反应。
本文将介绍新芝分子杂交炉的使用方法,包括仪器的准备、操作步骤以及注意事项。
一、仪器准备1.1 清洁:使用前应先清洁新芝分子杂交炉,确保无尘和杂质。
可使用无菌棉球蘸取75%酒精擦拭内外表面,然后用干净的纸巾擦干。
1.2 加热元件:将加热元件(通常为玻璃棒或石英管)插入芯座。
检查加热元件是否完好,如有损坏应及时更换。
1.3 温度控制器:将温度控制器连接到新芝分子杂交炉的电源上,并将探头插入加热元件的中心位置。
二、操作步骤2.1 样品准备:根据实验需要,准备好待杂交的DNA或RNA样品。
样品应具备高纯度和浓度,以确保杂交反应的准确性和灵敏度。
2.2 杂交缓冲液:根据实验方案,准备好适当的杂交缓冲液。
常用的杂交缓冲液包括SSC缓冲液、Denhardt's缓冲液等。
注意确保缓冲液的pH值和离子浓度符合实验要求。
2.3 杂交条件设置:根据实验需求和样品特性,设置好杂交的温度和时间。
通常情况下,杂交温度在50-70°C之间,时间为2-24小时。
2.4 杂交反应:将杂交缓冲液和样品混合均匀,加入到预先清洁的杂交炉中。
确保样品完全浸泡在缓冲液中。
关闭杂交炉的盖子,并将温度控制器设定到所需的温度。
2.5 杂交结束:杂交时间结束后,将温度控制器设定为室温。
小心打开杂交炉的盖子,取出样品。
注意避免样品受到外界污染。
三、注意事项3.1 安全操作:在操作过程中,应遵守实验室安全规范,戴上实验手套和口罩,避免接触有害物质和高温表面。
3.2 温度控制:在设定杂交温度时,注意不要超过杂交元件的最高温度承受范围。
过高的温度可能导致杂交效果不理想或破坏杂交元件。
3.3 缓冲液浓度:在准备杂交缓冲液时,确保离子浓度和pH值的准确性。
过高或过低的离子浓度可能影响杂交反应的效果。
3.4 杂交时间:根据实验需求设置合适的杂交时间。
生物化学实验室主要仪器设备配置情况清单(doc X页)以下为生物化学实验室主要仪器设备配置情况清单:1.高效液相色谱仪(进口):购买时间2003.02,数量1台,单价17.23万元,总值17.23万元。
2.液相色谱仪(国产):购买时间2008.9,数量1台,单价15万元,总值15万元。
3.原子吸收分光光度计(国产):购买时间2004.08,数量1台,单价11.25万元,总值11.25万元。
4.凝胶成像系统(进口):购买时间2006,数量1台,单价8.8万元,总值8.8万元。
5.紫外可见分光光度计(国产):购买时间2006,数量1台,单价8.6万元,总值8.6万元。
7.气相色谱仪(国产):购买时间2003.08,数量1台,单价6.16万元,总值6.16万元。
8.自动核酸蛋白层析仪(国产):购买时间2004.08,数量1台,单价5.94万元,总值5.94万元。
9.石墨炉自动进样器(国产):购买时间2004.11,数量1台,单价4.62万元,总值4.62万元。
12.酶标仪(进口):购买时间2006,数量1台,单价2.8万元,总值2.8万元。
14.高速冷冻离心机(国产):购买时间2006,数量1台,单价2.63万元,总值2.63万元。
15.人工气候箱(国产):购买时间2006,数量2台,单价2.56万元,总值5.12万元。
17.低速冷冻离心机(国产):购买时间2006,数量1台,单价2.31万元,总值2.31万元。
18.旋转蒸发仪(国产):购买时间2008.9,数量1台,单价2.05万元,总值2.05万元。
19.基因枪(国产):购买时间2006,数量1台,单价2万元,总值2万元。
20.自动核酸蛋白层析仪(国产):购买时间2006,数量1台,单价2万元,总值2万元。
21.电子精密天平(国产):购买时间2006,数量1台,单价1.99万元,总值1.99万元。
25.紫外分光光度计(国产):购买时间2003.12,数量1台,单价1.47万元,总值1.47万元。