电阻抗法血液分析仪检测原理

电阻法血液分析仪原理2007-08-09 13:24:25| 分类：检验知识| 标签：|字号大中小订阅一、库尔特原理（电阻法原理）根据上图所示，当定量的血液被吸取并被定量的导电溶液所稀释之后，就被送到检测室。

在每一个检测室都有一个小的开口，叫做检测小孔。

在检测小孔的两侧有通有恒流直流电的正负电极。

当稀释的血细胞通过恒定负压的作用通过检测小孔的时候，电极之间的直流电阻就会发生变化。

这种电阻会形成一种同血细胞体积大小成比例的脉冲变化。

这些被收集到的关于脉冲变化的数据可以用来画一个反映血细胞大小的颗粒分布曲线。

根据上图所示，这是一个收集到的脉冲图，横坐标是时间，纵坐标是电压，这样，经过检测小孔的细胞脉冲就被连续的记录下来，然后根据平行于横坐标的鉴别线来进行检波分类。

这是一个总体的概念，下面详细说明。

二、试剂的功能和作用；1。

稀释液：稀释血液细胞，防止血液细胞聚集和粘连；保持一定的PH值和渗透压，根据设计理念不同，有高PH，中性PH，等渗，低渗，高渗的区别还有离子强度的差异，这就直接导致血液细胞在稀释液的作用下是保持原有的细胞形态还是收缩细胞或者适度扩张细胞，这也是在直方图上以WBC直方图为例，有的仪器可以将横坐标图形延伸到450FL 甚至更远，而有的仪器只能延伸到300--350FL的原因之一；2。

溶血剂：溶血红细胞，打破红细胞，以利于白细胞计数；不让红细胞碎片发生聚集和粘连，防止干扰白细胞计数；让白细胞穿孔，白细胞胞浆流失，白细胞收缩（检测内核）（在其他不同的设备中也有不使白细胞穿孔，而是保持细胞形态的完整）；与红细胞中的血红蛋白结合，快速形成稳定的Fe3+（血红蛋白是Fe2+）用于比色换算出血红蛋白含量；人体血液白细胞当中淋巴细胞最小，中性粒细胞稍大，单核细胞最大，但是从内容物来讲，中性粒细胞的核质比要大于单核细胞，在溶血剂的作用下，细胞收缩至核，所以这个时候淋巴细胞最小，单核细胞稍大，中性粒细胞反而以大细胞形式存在。

血细胞分析仪五分类检测技术及原理血细胞分析仪是医院临床检验应用非常广泛的仪器之一，随着科学技术日新月异的发展，血细胞分析的技术也从几年前的三分类转向现在的五分类，从二维空间进而转向三维空间，同时现代血细胞分析仪的五分类技术许多采用了先进的技术，如鞘流技术、激光技术等。

下面就五分类血细胞分析仪器的检测方法及其应用加以说明。

1 采用阻抗、激光散射和荧光染色技术检测法直流电阻抗法（DC）用于测量细胞体积大小。

激光散射产生的前向散射光、侧向散射光和侧向荧光可用于探测白细胞体积大小、细胞内含物的情况（细胞核以及颗粒情况），侧向荧光则可以反映细胞内脱氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA）的含量，特有的嗜酸性粒细胞检测溶血剂Str-matolyzer-EO可将除了嗜酸细胞以外的所有细胞溶解或萎缩，含有完整嗜酸细胞的液体通过小孔可以按照电阻法计数技术进行计数。

在嗜碱细胞通道中，使用特殊溶血剂Strmatolyzer-BA可将除了嗜碱细胞以外的所有细胞溶解或萎缩，含有完整嗜碱细胞的液体通过小孔可以按照电阻法计数技术进行计数。

幼稚细胞检查通道（IMI）可以根据幼稚细胞膜比成熟细胞膜表面含有脂质较少的现象，在细胞稀释悬液中加入硫化氨基酸，由于占位不同，结合在幼稚细胞表面的氨基酸较多，对溶血剂有抵抗作用，当加入溶血剂后成熟细胞易被溶解，而幼稚细胞不易被破坏，可通过电阻法检测出来。

综合各个测量方法，得到白细胞五分类的图形和数据。

这种技术主要应用在Sysmex研制和开发的SE-9000、SE-9500、XE-2100、XT-1800等系列血液分析仪中。

2 电阻抗和射频电导联合检测法这种方法是分别采用四个检测系统来检测不同类型的细胞:（1）淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞检测系统:在细胞悬浮液中加入溶血剂使红细胞溶解，而使白细胞保持完整，细胞浆及核形态近似于生理状态，当这些细胞通过检测系统时，对白细胞进行电阻抗法（测量细胞体积）和射频电导法（检测细胞核和颗粒密度）的联合检测，结果将细胞分成淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞三个群体。

第三节仪器法血细胞检查前面章节已经介绍了手工操作的血细胞计数方法。

可发看出，由于操作地程的随机误差，实验器材的系统误差及测方法本身的固有误差，手工法细胞良数不但费时费力，实验结果的精神桷性、准确性也受影响。

50年代初期，美国的库尔特研制了电阻抗血细胞分析仪器开创了血细胞分析的新纪元，随着基础医学的发展、高科技技术的应用，特别是计算机技术的引用，血细胞分析仪的测量水平不断得高，测量参数不断增加。

不但得高了医学检验水平，还为临床提供了更多的有用的实验指标，对于某些疾病的诊断与治疗具有重要的临床意义。

一、电阻抗法血细胞分析仪测试原理（一）白细胞分析原理50年代初，库尔特（W。

H。

Coulter）发避孕药并申请了粒子计数技术的设计专利，其理是根据血细胞埋传导的怀质，以电解质溶液中悬浮的白细胞在通过计数时引起的电阻变化进行检查为基础，进行血细胞计数和体积的测定，这种方法称为电阻抗法，也称为库尔特原理（图2-7）图2-7 电阻抗法血细胞计数原理把用等渗电解质溶液（被称为稀释液,diluent）稀释的细胞悬液侄入一个不导电的容器中，将小孔管插到细胞悬液中。

小孔管是电阻抗法细胞计数的一个重要的组成部分，其内侧充满了稀释液，并有一个内电极，外侧细胞悬液中有一个外电极。

检测期间，当电流以接通通后，位于小孔两侧的电极产生稳定的电流。

稀释液通过小孔孔管壁上固有的小孔（直径一般<100μm.厚度为75μm左右）向小孔内部流动。

因为小孔这壁充满了具有专导性的液体，其电子脉冲是稳定的。

如果供给电流I和阻抗Z是稳定的，根据欧姆定期律通过小孔的电压E 也是不变的（这时E=IZ）。

当有一个细胞通过小孔时，由于细胞的导电性质比稀释液要低，在电路中小孔感应区内的电阻的增加，于瞬间能上能下起了电压变化而出现一个脉冲信号，自然数为通过脉冲。

电压增加的变化的程度取决于非传导的细胞占据小孔感应区的体积，即细胞体积越大，引起的脉冲越，产生的脉冲振幅越高，脉冲信号经过下列步骤，得出细胞计数结果。

血细胞分析仪五分类检测技术及原理血细胞分析仪是医院临床检验应用非常广泛的仪器之一，随着科学技术日新月异的发展，血细胞分析的技术也从几年前的三分类转向现在的五分类，从二维空间进而转向三维空间，同时现代血细胞分析仪的五分类技术许多采用了先进的技术，如鞘流技术、激光技术等。

下面就五分类血细胞分析仪器的检测方法及其应用加以说明。

1 采用阻抗、激光散射和荧光染色技术检测法直流电阻抗法（DC）用于测量细胞体积大小。

激光散射产生的前向散射光、侧向散射光和侧向荧光可用于探测白细胞体积大小、细胞内含物的情况（细胞核以及颗粒情况），侧向荧光则可以反映细胞内脱氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA）的含量，特有的嗜酸性粒细胞检测溶血剂Str-matolyzer-EO可将除了嗜酸细胞以外的所有细胞溶解或萎缩，含有完整嗜酸细胞的液体通过小孔可以按照电阻法计数技术进行计数。

在嗜碱细胞通道中，使用特殊溶血剂Strmatolyzer-BA可将除了嗜碱细胞以外的所有细胞溶解或萎缩，含有完整嗜碱细胞的液体通过小孔可以按照电阻法计数技术进行计数。

幼稚细胞检查通道（IMI）可以根据幼稚细胞膜比成熟细胞膜表面含有脂质较少的现象，在细胞稀释悬液中加入硫化氨基酸，由于占位不同，结合在幼稚细胞表面的氨基酸较多，对溶血剂有抵抗作用，当加入溶血剂后成熟细胞易被溶解，而幼稚细胞不易被破坏，可通过电阻法检测出来。

综合各个测量方法，得到白细胞五分类的图形和数据。

这种技术主要应用在Sysmex研制和开发的SE-9000、SE-9500、XE-2100、XT-1800等系列血液分析仪中。

2 电阻抗和射频电导联合检测法这种方法是分别采用四个检测系统来检测不同类型的细胞:（1）淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞检测系统:在细胞悬浮液中加入溶血剂使红细胞溶解，而使白细胞保持完整，细胞浆及核形态近似于生理状态，当这些细胞通过检测系统时，对白细胞进行电阻抗法（测量细胞体积）和射频电导法（检测细胞核和颗粒密度）的联合检测，结果将细胞分成淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞三个群体。

电阻抗法血液分析仪检测原理电阻抗电阻抗法血液分析仪检测原理 2009-8-7 9:52 【大中小】电阻抗法血细胞计数原理又名库尔特原理。

1. 红细胞检测原理：将等渗电解质溶液稀释的细胞悬液置入不导电的容器红细胞检测原理中，将小孔管（也称传感器）插进细胞悬液中。

小孔管内充满电解质溶液，并有一个内电极，小孔管的外侧细胞悬液中有一个外电极。

当接通电源后，位于小孔管两侧电极产生稳定电流，稀释细胞悬液从小孔管外侧通过小孔管壁上宝石小孔（直径<100um，厚度约75um）向小孔管内部流动，使小孔感应区内电阻增高，引起瞬间电压变化形成脉冲信号，脉冲振幅越高，细胞体积越大，脉冲数量越多，细胞数量越多，由此得出血液中血细胞数量和体积值。

三分类血球分析仪工作原理示意图2. 白细胞分类计数原理根据电阻抗法原理，经溶血剂处理的、脱水的、不同体积的白细胞通过小孔时，脉冲大小不同，将体积为35～450fl 白细胞，分为256 个通道，其中，淋巴细胞为单个核细胞、颗粒少、细胞小，位于35～90fl 的小细胞区，粒细胞（中性粒细胞）的核分多叶、颗粒多、胞体大，位于160fl 以上的大细胞区，单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、原始细胞、幼稚细胞等，位于90～160fl 的单个核细胞区，又称为中间型细胞。

仪器根据各亚群占总体的比例，计算出各亚群细胞的百分率，医学教育网整理并同时计算各亚群细胞的绝对值，显示白细胞体积分布直方图。

3.血红蛋白测定原理当稀释血液中加入溶血剂后，红细胞溶解并释放出血红蛋白，血红蛋白与溶血剂中的某些成分结合形成一种血红蛋白衍生物，在特定波长（530～550nm）下比色，吸光度变化与稀释液中Hb 含量成正比，最终显示Hb 浓度。

不同类型血液分析仪，溶血剂配方不同，所形成血红蛋白衍生物不同，吸收光谱不同，如含氰化钾的溶血剂，与血红蛋白医学教育网整理作用后形成氰化血红蛋白，其最大吸收峰接近540nm。

血球产品全球技术支持部 Hematology Global Technical Support Dept.目录一、 库尔特原理...............................................................................................................2 二、 比色法.......................................................................................................................3 三、 半导体激光流式细胞术...........................................................................................4 四、 判断血细胞分析仪性能的参数...............................................................................61. 准确性.......................................................................................................................6 2. 重复性.......................................................................................................................7 3. 携带污染率...............................................................................................................8 4. 线性...........................................................................................................................9 五、 溯源性与质控、校准 .............................................................................................10 1. 溯源性.....................................................................................................................10 2. 校准.........................................................................................................................13 3. 质控.........................................................................................................................15文件编号：MXQ-12044-血球五分类版本：V1.01of22一、 库尔特原理血球产品全球技术支持部 Hematology Global Technical Support Dept.20 世纪 50 年代初，库尔特先生利用电阻抗原理设计了血细胞计数仪。

第四章血液分析仪及其临床应用考纲·检测原理·检测参数·血细胞直方图·方法学评价·临床应用检测原理（一）电阻抗法（库尔特原理）1.库尔特原理将等渗电解质溶液稀释的细胞悬液置入不导电的容器中，将小孔管插进细胞悬液中。

小孔管内充满电解质溶液，并有一个内电极，小孔管的外侧细胞悬液中有一个外电极。

当接通电源后，位于小孔管两侧的电极产生稳定电流，稀释细胞悬液从小孔管外侧通过小孔管壁上宝石小孔（直径＜100μm，厚度约75μm）向小孔管内部流动，使小孔感应区内电阻增高，引起瞬间电压变化形成脉冲信号，脉冲振幅越高，细胞体积越大，脉冲数量越多，细胞数量越多，由此得出血液中血细胞数量和体积值。

2.白细胞分类计数原理根据电阻抗法原理，经溶血剂处理的、脱水的、不同体积的白细胞通过小孔时，脉冲大小不同，将体积为35～450fl白细胞分为256个通道。

3.血红蛋白测定原理当稀释血液中加入溶血剂后，红细胞溶解并释放出血红蛋白，血红蛋白与溶血剂中的某些成分结合形第 1 页共11 页成一种血红蛋白衍生物，在特定波长（530～550nm）下比色，吸光度变化与稀释液中Hb含量成正比，最终显示Hb浓度。

如含氰化钾的溶血剂，与血红蛋白作用后形成氰化血红蛋白，其最大吸收峰接近540nm。

（二）光散射法血液分析仪检测原理1.白细胞计数和分类计数原理（1）激光与细胞化学法（2）容量、电导、光散射法（3）电阻抗与射频法（4）多角度偏振光散射（MAPSS）法2.红细胞检测原理3.血小板检测原理4.网织红细胞计数原理（1）激光与细胞化学法1）过氧化物酶检测通道：2）嗜碱性粒细胞/分叶核检测通道血液与酸性表面活性剂反应，不仅红细胞溶解，而且除嗜碱性粒细胞外，其他所有白细胞膜均被破坏，胞质溢出，仅剩裸核。

当激光束照射到细胞时，产生不同强度的散射光，形成二维细胞图，其中，嗜碱性粒细胞呈高狭角散射，定位于细胞图上部，裸核细胞则位于细胞图下部。

血细胞分析仪测定原理与参数解析血细胞分析仪是一种医学仪器，用于测量血液中各种细胞的数量、形态和功能。

它是现代医疗检验中非常重要的设备之一，可帮助医生诊断各种疾病和监测患者的健康状况。

本文将介绍血细胞分析仪的测定原理和常见参数，并对其进行解析。

细胞计数是指测量血液中各种细胞的数量。

该测定原理基于电阻法或者光学法。

在电阻法中，血液样品通过微细通道时，细胞会引起导电液体阻抗的变化，可以通过测量阻抗的变化来计算细胞的数量。

在光学法中，血液样品经过光束时，细胞会散射或吸收光线，通过测量散射或吸收光线的强度来计算细胞的数量。

细胞分类是指根据细胞的特性将其分为不同的类型。

该测定原理基于光散射法和荧光染色法。

光散射法通过测量细胞在光束中散射的光线强度和角度，来判断细胞的大小和形状。

荧光染色法使用特殊的荧光染料，通过测量细胞对荧光染料的发光情况，来判断细胞的免疫表型或染色体情况。

1.血细胞计数：包括白细胞计数、红细胞计数和血小板计数。

这些参数可以帮助医生判断患者是否存在感染、贫血或凝血障碍等状况。

2.血细胞形态：包括红细胞形态、白细胞形态和血小板形态。

这些参数可以帮助医生判断患者是否存在红细胞变形、白细胞异形或血小板减少等异常情况。

3.血细胞分布宽度（RDW）：表示红细胞体积大小的变异程度。

RDW值较高可能表示红细胞体积分布不均匀，可能与贫血、骨髓异常或其他疾病相关。

4.中性粒细胞与淋巴细胞比值（NLR）：表示中性粒细胞数量与淋巴细胞数量之比，可用于判断感染、炎症或免疫功能异常的程度。

5.血细胞压积（HCT）：表示血液中红细胞的比例。

HCT值高或低可能表示患者存在贫血或血液浓缩等情况。

除了上述参数之外，血细胞分析仪还可以提供更详细的细胞计数和分类结果，如不同种类的白细胞数量、红细胞体积分布等。

总结起来，血细胞分析仪通过电阻法、光学法、光散射法和荧光染色法等原理来测定血液中细胞的数量、形态和功能。

常见的参数有血细胞计数、血细胞形态、RDW、NLR和HCT等。

血液分析仪的工作原理•血液分析仪的功能：细胞计数及细胞分类•血液分析仪的检测原理：①电阻抗法②光散射法•电阻抗原理：根据血细胞相对不导电的性质，使悬浮在电解质溶液中的血细胞颗粒，在通过计数小孔时可引起电阻变化。

信号发生变化的大小与细胞体积成正比，信号发生的频率用于测量细胞数量。

（库尔特原理）库尔特细胞分类•经溶血素作用后细胞体积大小取决于细胞内有形物质的多少。

淋巴细胞：颗粒少，体积小35~98fl单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞及原始、幼稚、异型淋巴细胞等：中间细胞群体积98~135fl中性粒细胞：核分叶多，颗粒多，胞体大135~350fl光散射法•体积、电导和激光散射原理(VCS):先加入红细胞溶血剂溶解掉红细胞，然后加入稳定剂来中和红细胞溶解剂的作用，使白细胞表面、胞浆和细胞体积保持稳定不变。

应用鞘流技术将细胞推进到流动细胞计数池(Flowcell)中。

•V 代表体积，采用经典的库尔特专利技术，用低频电流准确分析细胞体积•C 代表高频电导性，采用高频电磁探针原理测量细胞内部结构间的差异•S 代表激光散射，采用氦氖激光源发出的单色激光照射于每个细胞上，收集细胞在10ⅹ~70ⅹ角度内出现的散射光(MALS) 信号。

可以区分出颗粒特性不同的细胞群体。

XE-2100•采用半导体激光流式细胞技术结合核酸荧光染色技术进行白细胞计数和分类。

半导体激光照射在通过鞘流技术处理的细胞上，可根据每个细胞所产生的三种信号来鉴别细胞类别。

前向散射光(FSC) 信号可反应细胞体积大小；侧向散射光(SSC) 信号可反应细胞的颗粒和细胞核等内含物的信息；侧向荧光(SFL) 强度信号则用于分析细胞内脱氧核糖核酸(DNA) 和核糖核酸(RNA) 的含量散点图•VCS 技术可通过DF1、DF2、DF3 三个散点图将五种类型白细胞明显区分开。

三个散点图的纵坐均定义为细胞体积。

DF1 为细胞体积和激光散射的方图，DF2 和DF3 为细胞体积和高频电导性的直图，DF3 为除去粒细胞群体后显示出淋巴细胞后面的碱性粒细胞图像•在白细胞分析上主要采用两个通道进行细胞计数和分类，两通道均采用鞘流进样方式和激光测定。

电阻法血液分析仪原理一、库尔特原理（电阻法原理）根据上图所示，当定量的血液被吸取并被定量的导电溶液所稀释之后，就被送到检测室。

在每一个检测室都有一个小的开口，叫做检测小孔。

在检测小孔的两侧有通有恒流直流电的正负电极。

当稀释的血细胞通过恒定负压的作用通过检测小孔的时候，电极之间的直流电阻就会发生变化。

这种电阻会形成一种同血细胞体积大小成比例的脉冲变化。

这些被收集到的关于脉冲变化的数据可以用来画一个反映血细胞大小的颗粒分布曲线。

根据上图所示，这是一个收集到的脉冲图，横坐标是时间，纵坐标是电压，这样，经过检测小孔的细胞脉冲就被连续的记录下来，然后根据平行于横坐标的鉴别线来进行检波分类。

这是一个总体的概念，下面详细说明。

二、试剂的功能和作用；1。

稀释液：稀释血液细胞，防止血液细胞聚集和粘连；保持一定的PH值和渗透压，根据设计理念不同，有高PH，中性PH，等渗，低渗，高渗的区别还有离子强度的差异，这就直接导致血液细胞在稀释液的作用下是保持原有的细胞形态还是收缩细胞或者适度扩张细胞，这也是在直方图上以WBC直方图为例，有的仪器可以将横坐标图形延伸到450FL甚至更远，而有的仪器只能延伸到300--350FL的原因之一；2。

溶血剂：溶血红细胞，打破红细胞，以利于白细胞计数；不让红细胞碎片发生聚集和粘连，防止干扰白细胞计数；让白细胞穿孔，白细胞胞浆流失，白细胞收缩（检测内核）（在其他不同的设备中也有不使白细胞穿孔，而是保持细胞形态的完整）；与红细胞中的血红蛋白结合，快速形成稳定的Fe3+（血红蛋白是Fe2+）用于比色换算出血红蛋白含量；人体血液白细胞当中淋巴细胞最小，中性粒细胞稍大，单核细胞最大，但是从内容物来讲，中性粒细胞的核质比要大于单核细胞，在溶血剂的作用下，细胞收缩至核，所以这个时候淋巴细胞最小，单核细胞稍大，中性粒细胞反而以大细胞形式存在。

3。

清洗剂：每测试使用或者关机使用或者定时使用都是根据仪器的设计理念来决定的，作用是彻底清除管道，计数池，检测小孔周围的蛋白沉积，污染，以及不能将清洗剂残液遗留到上述地方影响下次计数结果。

血小板光学法、电阻抗法和荧光法都是常用的血小板检测方法，它们各自有着不同的特点和优缺点。

1. 血小板光学法
光学法是一种通过测量血小板对光的吸收和散射特性来检测血小板数量和功能的方法。

这种方法通常使用激光和光学传感器，可以测量血小板的体积、散射光和透射光等参数。

光学法的优点是快速、准确、无创，而且可以同时检测多个参数。

但是，光学法的缺点是需要专业人员操作，且对仪器的精度要求较高。

2. 电阻抗法
电阻抗法是一种通过测量血液电阻抗的变化来检测血小板数量和功能的方法。

这种方法通常使用电阻抗测量仪，可以测量血液的电阻、流速和压力等参数。

电阻抗法的优点是简单、方便、无创，而且可以实时监测血小板数量和功能变化。

但是，电阻抗法的缺点是对仪器的精度要求较高，而且不能同时检测多个参数。

3. 荧光法
荧光法是一种通过测量荧光信号的变化来检测血小板数量和功能的方法。

这种方法通常使用荧光探针和激光扫描技术，可以测量血小板的荧光强度和分布等参数。

荧光法的优点是灵敏度高、特异性强、可以实时监测血小板数量和功能变化，而且可以同时检测多个参数。

但是，荧光法的缺点是需要专业人员操作，而且荧光探针的制备和使用成本较高。