浸提方式对绿茶沉淀胶体特性与理化组成的影响
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农技服务2022,39(4):45~47投稿网址http://浸提温度对绿茶粉主要品质成分及儿茶素组分含量的影响廖向前,吴胜彬(安顺市西秀区茶叶产业发展办公室,贵州安顺561000)[摘要]为速溶绿茶粉的生产加工提供理论参考,以同一绿茶产品为材料,设置10℃、55℃、100℃3个不同浸提温度,测定不同浸提温度下茶汤主要品质成分和儿茶素组分含量,分析不同浸提温度对茶汤品质的影响。
结果表明:10℃、55℃、100℃3个温度梯度浸提茶汤的水浸出物、游离氨基酸、茶多酚、咖啡碱含量随浸提温度升高而显著(P<0.05)增加。
55℃浸提的茶汤酚/氨比、儿茶素苦涩味指数均最低,分别为9.08和7.18,分别显著(P<0.05)低于10℃、100℃处理;简单儿茶素/酯型儿茶素比值最高,达0.21,显著(P<0.05)高于10℃、100℃处理。
浸提温度对茶汤品质具有重要影响,浸提温度过高或过低都会使茶汤苦涩,在加工绿茶粉时应合理设置浸提温度。
[关键词]浸提温度;绿茶粉;品质速溶茶粉具备携带方便、饮用快捷及种类丰富等优点,在各类饮茶活动中深受广大消费者喜爱[1],特别在欧美市场颇受欢迎,具有很好的生产开发前景[2]。
速溶茶粉不仅具有常规茶叶中的营养物质,在茶汤风味方面也能与常规茶叶媲美,具有与常规茶产品一样的保健效果,能够满足消费者对方便、营养、健康的需求[3]。
浸提是加工绿茶粉的重要工序,对形成优质的速溶茶粉品质具有关键作用[4]。
浸提温度、茶水比和浸提时间是影响速溶绿茶粉获得率的主要因素,其中浸提温度影响最大[1]。
以同一绿茶产品为材料,在浸提过程中设置不同浸提温度,探究不同浸提温度对绿茶粉主要品质成分和儿茶素组分含量的影响,旨在为速溶绿茶粉的生产加工提供理论依据。
1材料与方法1.1试验材料1.1.1供试茶叶为用于生产速溶茶的茶叶,由贵州高山有机茶开发有限公司提供。
1.1.2试剂福林酚、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、碱式乙酸铅、浓盐酸、浓硫酸、茚三酮、氯化亚锡、香荚兰素,以上试剂均为分析纯;儿茶素组分标样购自美国Sigma公司;乙腈、甲醇为色谱纯,购自德国Merck公司。
文章编号:1671-9646(2011)07-0044-03绿茶浸提影响因素的研究吴威1,郑博2,孙明哲1,*逯家富1(1.长春职业技术学院食品与生物技术分院,吉林长春130033;2.吉林省科技厅知识产权中心,吉林长春130000)摘要:我国纯绿茶饮料的产品较少,主要的技术原因是高品质原料的浸提和品质保持技术等不够完善。
在浸提时间、浸提温度、茶水比例对浸提效果影响的单因素试验基础上,通过正交试验确定的最佳浸提时间为20min ,浸提温度为85℃,茶水比为1∶180,对提出最佳的绿茶浸提工艺条件具有重要的指导作用。
关键词:绿茶;浸提时间;浸提温度;茶水比中图分类号:TS207.3文献标志码:A doi :10.3969/jissn.1671-9646(X ).2011.07.012Extraction Influence Factors of Green TeaWu Wei 1,Zheng Bo 2,Sun M ingzhe 1,*Lu Jiafu 1(1.Jilin Agricultural University,Changchun,Jilin 130118,China ;2.Intellectual Property Center ,Jilin Science and Technology Agency ,Changchun ,Jilin 130118,China )Abstract :In recent years ,pure green tea drink is less and less in our county.The mainly reason that the quantity of extraction and preservation technology is not perfect.This paper studies the influence factors of extraction ,such as defining the extraction time is 20min ,extraction temperature is 85℃,rate of tea and water is 1∶180.Key words :green tea ;extraction time ;extraction temperature ;tea water rate影响茶水浸提的主要因素有茶水比、浸提温度、浸提时间、茶叶颗粒大小等。
绿茶冲泡浸提的影响因素分析及数学模型的建立摘要以绿茶为研究对象,用保温杯冲泡,探讨冲泡浸提时间A、冲泡水温度B和溶媒浓度C等3个参数对水液中氨基酸浓度、可溶性固形物含量和pH值的影响,构建数学模型。
并比较热风干燥绿茶及充氮降氧干燥绿茶的多级冲泡效果。
分析表明:冲泡浸提时间是影响绿茶水液中氨基酸浓度及可溶性固形物含量的主要因素;冲泡浸提10min时,氨基酸较多地浸出,且有相当部分的可溶性固形物浸出;增大溶媒浓度可提高冲泡浸提过程的推动力,加快水溶性成分浸出速度,但水液中的营养成分浓度或含量比例下降。
多级冲泡浸提试验表明,充氮降氧干燥绿茶明显优于热风干燥绿茶。
关键词绿茶;冲泡浸提;影响因素;数学模型近年来随着饮料业的发展,以茶为原料的液态茶饮料相继问世,并逐渐成为主流饮料,因为茶饮料无盐、无糖、无脂肪,含有多种有益于人体健康的活性物质,且还具有快速、方便、冷饮热饮皆宜等优点,符合现代生活快节奏的需要。
中国茶叶原料丰富,开发茶饮料的潜力很大。
目前国内外已报道了有关绿茶饮料的浸提方法与化学成分浸出量的关系,但多限于浸提过程中各浸出成分的种类、数量,或局限于特别的品种级别。
本研究以热风干燥绿茶及充氮降氧干燥绿茶为原料,探讨绿茶中的几种主要品质在浸提过程中的动态变化,并在多级冲泡浸提过程中,从可溶性固形物含量、AA浓度及茶多酚含量等主要内含成分方面说明降氧干燥绿茶明显优于热风干燥绿茶,以期为绿茶饮料的加工及绿茶干制新技术气调提供试验依据。
1材料与方法1.1材料与仪器供试材料为福建农林大学茶厂提供的福鼎大白茶,仪器有QTM(小型气调干燥机)试验设备(自制)、101型电热鼓风机干燥机(上海产),UV751GD型紫外/可见分光光度计(上海产)等。
1.2干制工艺要点1.2.1采叶。
按1芽1叶或1芽2叶的标准采摘。
鲜叶平摊在阴凉、清洁、气温低于25℃的室内,平摊厚度不超过10cm。
1.2.2杀青。
杀青的主要目的是利用高温钝化酶的活性,以保持茶的绿色和风味。
超声波浸提对绿茶饮料茶汤品质的影响
茶饮料在加工贮藏过程中保持原有的色泽和品质是最基本的要求。
浸提作为茶饮料生产的首要工序,直接影响茶饮料的品质,好的浸提工艺不仅可以降低企业生产成本,而且可以提高产品的品质和保质期。
针对当前绿茶饮料生产需要出现了许多新的浸提方法,好的浸提方法对于提高茶饮料的品质很有意义。
本研究采用高温浸提(90℃)、低温浸提(50℃)和超声波浸提(50℃)三种不同方法浸提,测定茶汤主要生化成分和色差,并对茶汤进行感官审评。
探讨了不同浸提方法对茶饮料品质的影响,结果表明: 1、不同浸提方法对固型物提取率和生化成分的影响:高温浸提所获得的固型物提取率最高,超声波浸提比低温浸提的提取率有显著提高,超声波对茶叶主要化学成分的浸出也有促进作用,茶多酚、氨基酸、咖啡碱的含量分别明显超过常规低温浸提法,浸出率和高温浸提接近。
2、不同浸提方法对茶汤儿茶素含量的影响:高温下提取的茶汤,提取时间短时儿茶素总量最高,但提取时间达到30min后,超声波提取的茶汤中儿茶素总量最高,而且儿茶素主要成分EGCG所站比例最高,这可能是由于高温条件下儿茶素发生了氧化损失或EGCG在高温条件下发生了异构化。
3、色差测试结果表明:高温提取(90℃)茶汤明度低。
低温浸提(50℃)和低温超声波辅助浸提茶汤明度高,超声波对茶汤色泽贡献不明显,可能和超声波浸提对细胞的破坏作用导致茶叶中色素物质大量溶出有关;感官审评结果表明,超声波对提高茶饮料的感官品质有积极帮助。
因此,低温超声波辅助浸提是一种优质茶饮料生产的有效浸提方法。
超声波浸提联合β-环糊精包埋提高绿茶饮料品质的研究瓶装或罐装的绿茶饮料因其天然健康、方便快捷、对人体有益等优点而受到广大消费者的青睐。
绿茶饮料在加工和储藏过程中保持良好的色泽和品质是最基本的要求。
然而在茶饮料热处理(浸提和杀菌)加工过程中,茶汤易发生褐变,香气成分易流失,同时功能因子儿茶素亦大量损失,因而绿茶饮料品质下降。
本文采用超声波辅助浸提以及β-环糊精(β-CD)包埋的方法提高绿茶饮料浸提率,增加绿茶饮料有效功能成分的含量,改善其风味品质及储藏稳定性。
首先对绿茶饮料的超声浸提工艺条件进行了优化。
以色泽、有效功能成分(茶多酚、儿茶素、氨基酸等)和固形物含量为指标,对浸提功率、温度、时间、茶水比进行优化,并采用SPSS统计软件对其进行相关性分析,得出最佳浸提工艺条件为:超声功率90 W、浸提温度为50℃、浸提时间20 min、茶水比1:100。
在茶水比1:100,浸提时间20min条件下,进一步比较了低温浸提(50℃)、超声波浸提(50℃)以及高温浸提(90℃)三种方式对茶汤色泽,浸提效率及挥发性的成分的影响。
研究发现超声波浸提效率与高温浸提方法相似,且明显两者均优于低温浸提。
同时,超声波浸提有助于香气成分的保留,而高温浸提导致挥发性香气成分流失严重。
通过热重分析表明β-CD显著延迟了茶多酚的高温分解,对茶多酚有一定保护作用。
在超声条件下,通过HPLC检测证明超声对儿茶素有一定程度的破坏作用,其中EGCG含量下降了28.6%,而添加β-CD的茶多酚溶液经超声后,茶多酚含量为未超声组的93.5%,β-CD对儿茶素的包埋能起到有效的保护作用。
然后以茶多酚、蛋白质含量及感官评定为主要指标,考察β-CD对绿茶浸提及贮藏过程中品质的影响,通过HPLC测定儿茶素( EGC、EC、EGCG、ECG )及咖啡碱的含量,确定了β-CD的最适添加量为0.2%。
通过SPME-GC/MS对茶汤的挥发性物质进行分析,发现添加0.2%β-CD能有效减少挥发性成分的挥发,掩盖不良气味。
茶饮料汤色褐变机理及其护色技术摘要:关键字:茶饮料;褐变;护色技术茶饮料是以茶叶的水提取液或浓缩液、速溶茶粉等为主要原料,经过滤、调配、罐装、灭菌等工序加工而成,含有一定量的茶叶有效成分,且具有茶风味的液体制品。
茶叶饮料以其解渴、保健、便捷的特点受到人们越来越广泛的青睐,茶已成为世界上消费量最大的饮品之一。
近年来,我国茶饮料的开发和消费十分活跃,呈现出巨大的发展空间。
尽管如此,在茶饮料的加工贮藏过程中存在三大技术难点:茶汤的浑浊沉淀、香气成分的流失及汤色的褐变[1]。
其中,茶饮料在加工或贮藏中色泽的变化在一定程度上影响了消费者对茶饮料产品的选择。
茶汤是一种不稳定体系,容易受氧化、高温等因素的影响使颜色发生褐变、滋味变苦涩,尤其是绿茶茶汤氧化还原电位低,体系更不稳定,经热加工(如杀菌处理)后其感官品质变化会很大[2]。
如何解决绿茶饮料变色的问题一直是科学工作者关注的热点。
1 绿茶饮料的褐变机理我国茶饮料生产技术主要有两种,一是采用茶叶直接提取,然后进行调配和加工;二是采用速溶茶或茶浓缩汁进行调配和加工。
方元超等[3]认为,构成绿茶汤色的物质主要为叶绿素和黄酮类物质,而儿茶素和花青素则对绿茶茶汤色泽有重要影响。
另有研究表明,构成绿茶汤色的物质主要包括黄酮醇、花青素、黄烷酮和黄烷醇类的氧化衍生物等水溶性色素,叶绿素及其降解产物对绿茶汤色也有影响[4]。
绿茶饮料的褐变主要有二个原因: 一是茶多酚类的氧化,二是叶绿素的破坏。
由于绿茶中儿茶素类多酚物质和叶绿素的含量较高,在浸提、高温杀菌、热罐装等需要高温处理工序中容易造成多酚物质的氧化和叶绿素的破坏,从而导致茶水汤色褐变,影响绿茶特有的品质[5]。
绿茶原料如果经高温灭菌、贮藏过久或杀青不彻底,均会在贮藏过程中形成多酚类色素(如茶黄素、茶红素),使绿茶汤色发红甚至发暗、褐变。
茶多酚的氧化过程为:茶多酚→邻醌→茶黄素→茶红素→茶褐素。
其中,邻醌、茶黄素和茶红素为中间产物,稳定性由强到弱依次为茶红素、茶黄素、邻醌。
不同浸提条件对绿茶多糖清除自由基活性的影响孙世利,庞式,凌彩金,张婷,曾琼,赵超艺,潘顺顺,苗爱清(广东省农科院茶叶研究所/广东省茶树资源创新利用重点实验室,广东广州510640)摘要:在固定浸提时间1.5h 、浸提温度80℃及固定料液比1∶20、浸提温度80℃的条件下,研究了不同料液比(1∶5、1∶10、1∶15、1∶20、1∶25、1∶30)提取和不同浸提时间(0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0h )提取的金萱绿茶多糖体外清除自由基的活性。
结果表明,水浸提的绿茶多糖具有较好的清除DPPH 自由基和ABTS 自由基的效果,对亚铁离子具有较强的络合能力,提取绿茶多糖的最佳条件为料液比1:25、浸提时间2.5h 。
关键词:绿茶多糖;料液比;浸提时间;自由基中图分类号:R285文献标识码:A文章编号:1004-874X (2012)24-0101-03Effects of different extract conditions on scavenging free radical activity of green tea polysaccharideSUN Shi-li,PANG Shi,LING Cai-jin,ZHANG Ting,ZENG Qiong,ZHAO Chao-yi,PAN Shun-shun,MIAO Ai-qing(Tea Research Institute,Guangdong Academy of Agricultural Sciences/Guangdong Key Laboratory ofTea Plant Resources Innovation &Utilization,Guangzhou 510640,China )Abstract:In order to study the effects of different solid-liquid ratio and extraction time on scavenging free radical activity of Jinxuan green tea polysaccharide,extraction time,temperatures and solid-liquid ratio were set to 1.5h,80℃,1∶5,1∶10,1∶15,1∶20,1∶25,1∶30,and 0.5h,1.0h,1.5h,2.0h,2.5h,3.0h,80℃,1∶20respectively.The results showed that green tea polysaccharide had significant free radical scavenging abilities including 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH)radical scavenging ability,2,2-azinobis-(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid)(ABTS)radical scavenging ability and ferrous-ion chelating (FIC)ability.And,it was recommended that the optimum solid-liquid ratio of green tea polysaccharide was 1∶25,the optimum extraction time was 2.5h.Key words:green tea polysaccharide;solid-liquid ratio;extraction time;free radical茶叶起源于我国,是我国古代文献记载中被提及最早的天然药物之一。
绿茶饮料沉淀的产生及防沉淀技术研究进展摘要:沉淀的产生是绿茶饮料在加工及贮存过程中的主要问题之一,严重制约了绿茶饮料生产的发展。
本文试对我国绿茶饮料沉淀产生的原因及解决方法进行综述,并对绿茶饮料的防沉淀技术进行了展望。
关键词:绿茶饮料沉淀解决方法近年来随着科学技术的发展,大量的先进技术应用到茶饮料的生产发展中来,推动了茶饮料的发展,但是,茶饮料在加工技术方面,还存在一些有待解决的问题,尤其是绿茶饮料品质不稳定,容易出现汤色褐变、乳状沉淀及香气成分的流失,制约了绿茶饮料生产的发展。
本文试对我国绿茶饮料沉淀产生的原因及解决方法进行综述。
1 沉淀形成的机理绿茶液沉淀的主要成分是茶多酚、咖啡碱,其次是蛋白质、糖、灰分及少量氨基酸[1]。
绿茶饮料沉淀的形成是茶汤中的茶多酚、咖啡碱、蛋白质、少量多糖以及疏水性脂质、叶绿素、金属离子等物质间相互作用而形成浑浊沉淀的复杂过程[2]。
2 沉淀的解决方法针对茶饮料的沉淀机理,目前采用的防沉淀技术有:2.1 酶法酶类可使绿茶汤中的大分子物质分解,从而减少混浊沉淀现象,提高茶汤的澄清度。
在茶汤中添加蛋白酶水解部分水溶性蛋白质,不仅在一定程度上减少了蛋白质与多酚类形成复合物浑浊的机会,更重要的是增加茶汤中氨基酸含量,从而增加茶饮料的鲜爽滋味[3]。
宁井铭等[4]研究了单宁酶、果胶酶、木瓜蛋白酶等酶类对绿茶茶汤抗沉淀的作用,结果表明,单宁酶的澄清淀效果最好,最佳作用时间为2小时,并且在一定范围内,随着单宁酶作用时间的延长,茶汤的透光率不断增大。
而谭平[7]等则对单宁酶、果胶酶、木瓜蛋白酶三种酶四种组合方式对绿茶饮料质量的影响进行研究,结果发现三种酶复合处理防沉淀效果最好。
2.2 包埋法利用包埋剂对茶汤中参与沉淀形成的物质进行包埋以阻止和其它物质生成沉淀的方法。
研究表明,β- CD可包埋茶汁中可溶成分,阻止茶多酚、蛋白质、金属离子的相互反应,从而达到抑制沉淀的目的[11],并且茶汤的透光度随β-CD添加量提高而增加,以萃取前加入为更好[6]。
浸提方式对绿茶沉淀胶体特性与理化组成的影响摘要:为探究浸提方式对绿茶沉淀形成的影响及其可能机制,本研究以云南大叶种绿茶为材料,采用微波、超声波、水浴浸提,利用动态光散射和激光多普勒测速技术分析茶汤与沉淀胶粒直径、表面电荷等胶体特性,利用高效液相色谱等技术测定茶汤与沉淀儿茶素、生物碱等理化组成,利用逐步回归法分析各组分沉淀浓度与茶汤浓度、相对比例的线性相关性,结果表明:①微波、超声波浸提显著抑制绿茶汤胶粒形成、提高沉淀胶粒稳定性;②与水浴浸提相比,微波浸提绿茶更易沉淀、沉淀量更大,超声波浸提促进酯型儿茶素沉淀、抑制非酯型儿茶素沉淀;③微波、超声波浸提绿茶沉淀形成与茶汤酯型/非酯型儿茶素比例正相关,水浴浸提绿茶沉淀形成与茶汤生物碱、水浸出物浓度相关。
结论:浸提方式不仅影响绿茶沉淀胶体特性与理化组成,并可能改变沉淀形成的量效机制。
关键词:绿茶;茶沉淀;微波浸提;超声波浸提;水浴浸提Impacts of Extraction Methods on Formation of Green Tea Cream: Physicochemical Profiles and Phytochemical NatureAbstract: To explore the impacts of extraction methods on formation of green tea cream and its possible underlying mechanism, a comparative study on physicochemical profiles and phytochemical nature of tea cream in green tea extracted with water bath, microwave and ultrasonic were performed. Firstly, diameters and Zeta potentials of colloidal particles in original infusions and tea cream were analyzed via dynamic light scattering and laser Doppler velocimetry. Microwave and ultrasonic inhibited the formation of colloidal particles in tea infusion and significantly advanced the stability of creaming particles. In addition, catechins, methylxanthines, and proteins in original infusions and tea cream were determined with high performance liquid chromatography and ultraviolet visible spectrometry. Though few significant differences were suggested in original concentrations of tea components between boiling water bath and microwave, the latter infusion produced more tea cream and showed higher creaming affinities. Compared with water bath extraction, creaming affinities of gallated catechins of green tea extracted with ultrasonic were significantly increased, while those of non-gallated catechins were markedly decreased. Finally, creaming concentrations of major components of green teas extracted with microwave and ultrasonic were linearly correlated to the ratio of gallated catechins to non-gallated catechins in original infusions. However, original concentrations of methylxanthines and total solid played vital roles in tea cream formation from green tea extracted with water bath. In conclusion, remarkable distinctions were preliminarily confirmed in colloidal features and chemical composition of tea cream, and their concentration-based formation mechanisms among green tea infusions extracted with different methods in the present study.Keywords: green tea; tea cream; water bath extraction; microwave assisted extraction; ultrasonic assisted extraction.茶沉淀是制约茶饮料产业发展的三大技术瓶颈之一,是热浸提茶汤冷却时自发形成浑浊与沉淀的现象,其物理化学过程表现为胶粒间相互絮凝或聚沉,化学本质是茶汤理化成分相互作用增强,广泛存在于红茶[1]、乌龙茶[2]和绿茶[3, 4]等茶类,但近年来以绿茶沉淀特性研究最受关注。
绿茶沉淀胶粒呈球状,直径为0.4~3.5 μm[3],表面带负电荷[5],并以儿茶素、蛋白质和生物碱为主体成分[6, 7]。
由儿茶素、茶汤蛋白质和咖啡碱混合模拟的绿茶饮料,其体系透光率取决于儿茶素、蛋白质浓度及相对比例[8];向绿茶汤外加生物碱不仅增加绿茶沉淀总量,并显著促进儿茶素、蛋白质等沉淀[6]。
可见,绿茶茶汤儿茶素、蛋白质、生物碱浓度和相对比例对沉淀胶体特性和理化组成均具有重要影响。
在茶饮料生产中,改变绿茶原料品种[9]、采摘部位[10]、浸提温度[11]、茶汤固形物含量[12]以控制茶汤理化组成,均可显著影响绿茶沉淀形成。
水浴浸提是传统茶叶浸提方式,近年来,微波浸提以其加热时间短、提取率高、能耗低等特点在茶叶高温浸提方面备受重视,超声波浸提利用其空化效应加速溶剂扩散、促进组分浸出,在茶饮料低温浸提上展现优势。
相较于水浴浸提,微波、超声波浸提绿茶的茶多酚、氨基酸和咖啡碱浸提率更高,而蛋白质、果胶浸出率较低[13]。
说明改变茶叶浸提方式可调控绿茶茶汤理化成分浓度与相对比例,但对于不同浸提方式对绿茶沉淀形成的影响仍鲜见报道。
为探究浸提方式对绿茶沉淀形成的影响及其可能机制,本研究以云南大叶种绿茶为原料,以微波(640 W、3 min)、沸水浴进行高温浸提,以超声波(225 W、40℃、30 min)、40℃水浴进行低温浸提,对原始茶汤和沉淀:①利用动态光散射与激光多普勒测速技术分析胶粒直径、表面电荷等参数,探讨浸提方式对绿茶沉淀胶体特性的影响;②采用高效液相色谱等技术测定儿茶素、生物碱、蛋白质等浓度,研究浸提方式对绿茶沉淀理化组成的影响;③系统分析不同微波功率与时间、超声波功率与时间、水浴温度条件下绿茶原始茶汤、沉淀的理化组成,采用逐步回归法分析各理化成分沉淀浓度与茶汤浓度、相对比例的线性相关性,探讨浸提方式影响绿茶沉淀形成的量效机制,以期为在茶饮料生产中更好应用微波、超声波技术,解决茶饮料沉淀难题奠定胶体化学与化学理论研究基础。
1 材料与方法1.1 原料1.1.1 绿茶原料云南大叶种蒸青绿茶购自广东省华海糖业发展有限公司,磨碎筛取20~30目粒径茶样。
1.1.2 主要试剂儿茶素(C,≥98%)、表儿茶素(EC,≥98%)、没食子儿茶素(GC,≥98%)、表没食子儿茶素(EGC,≥98%)、儿茶素没食子酸酯(CG,≥98%)、表儿茶素没食子酸酯(ECG,≥98%)、没食子儿茶素没食子酸酯(GCG,≥98%)、表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG,≥95%)、可可碱(TB,≥99.0%)和茶碱(TP,≥99.0%)购自Sigma-Aldrich(上海)贸易有限公司。
咖啡碱(CAF,99.9%)购自上海生工生物工程有限公司。
色谱纯甲醇购自韩国Honeywell Burdick & Jackson公司。
色谱纯甲酸(96%)购自美国Tedia有限公司。
牛血清蛋白组分Ⅴ与福林酚试剂(2 mol/L)购自北京普博欣生物科技有限公司。
所有实验用水均为Milli-Q超纯水(电阻率≥18.2 MΩ·cm)。
1.1.3 主要仪器设备Agilent 1200高效液相系统(包括G1322A真空脱气装置、G1311A四元泵、G1329A标准自动进样器及G1315D二极管阵列检测器)与Agilent Eclipse XDB-C18色谱柱(4.6×250 mm,5μm)购自美国Agilent公司;Centrifuge 5804R冷冻离心机购自德国Eppendorf A G公司;Milli-Q Integral 3超纯水系统购自Merk-Millipore公司;UV-2102C紫外可见分光光度计购自上海尤尼科有限公司;Zetasizer Nano ZS 90纳米粒度仪购自英国Malvern公司;G80W23CSL-A6家用微波炉(800 W)购自格兰仕集团;SB-5200DTD超声波清洗仪(300 W,40 kHz)购自宁波新芝生物科技股份有限公司。
1.2 实验方法1.2.1 绿茶浸提与沉淀分离称取9.0 g磨碎绿茶样:①水浴浸提:加入90 mL经30、40、50、60、70、80、90、100℃预热水,并于对应温度水浴中浸提30 min;②微波浸提:加入90 mL水(40℃),分别以微波功率160、480、640 W浸提3 min,另以微波功率800 W浸提1、3、5 min;③超声波浸提:加入90 mL水(40℃),分别以超声波功率165、225 W浸提30 min,另以超声波功率285 W浸提10、20、30 min。