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(江苏专用)2020届高考生物一轮复习专题26基因工程课件

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2020版高考生物一轮复习第1讲基因工程课件苏教版选修3

2020版高考生物一轮复习第1讲基因工程课件苏教版选修3

2．根据质粒的特点确定限制酶的种类 (1)所选限制酶要与切割目的基因的限制酶相一致， 相同的黏性末端。 (2)质粒作为载体必须具备标记基因等，所以所选择 量不要破坏这些结构，如图乙中限制酶 SmaⅠ会破坏标 果所选酶的切点不止一个，则切割重组后可能丢失某些 失的片段含复制起点区，则切割重组后的片段进入受体 自主复制。
图(c) (3)DNA 连接酶是将两个 DNA 片段连接起来的酶
___________和______________，其中既能连接黏性末端 末端的是________。
解
解析：(1)由题图可知，BamH Ⅰ 和 Sau3A Ⅰ 两种 酶的共同识别序列是错误！，二者切割可以形成相同的黏性 经 BamH Ⅰ酶切得到的目的基因可以与图(b)所示表达载 Ⅰ酶切后的产物连接。(2)在基因表达载体中，启动子应 因的首端，终止子应位于目的基因的尾端，这样基因才 录，再完成翻译过程，即顺利表达。图中甲所示的目的 启动子的上游，丙所示目的基因插入在终止子的下游， 基因均不能被转录，因此目的基因不能表达。(3)常见的 D 有 E·coliDNA 连接酶和 T4DNA 连接酶，其中 T4DNA 连接黏性末端又能连接平末端。
(2)限制酶和 DNA 连接酶的作用部位相同吗？DNA 连 用时，是否需要模板？
提示：相同，都是磷酸二酯键。不需要模板。
1．基因工程技术使用限制酶需注意的四个问题 (1)获取目的基因和切割载体时，经常使用同一种限制 用能切出相同末端的不同限制酶)，目的是产生相同的黏性 末端。 (2)获取一个目的基因需限制酶切割两次，共产生 4 个 或平末端。 (3)限制酶切割位点的选择，必须保证标记基因的完整 于检测。 (4)为避免目的基因和质粒的自身环化和随意连接，也 同的限制酶切割目的基因和质粒。

基因工程-高三高考生物一轮复习考点突破教学PPT课件

基因工程-高三高考生物一轮复习考点突破教学PPT课件

考纲链接
考点梳理
考点例析
课堂自测
第1课 基因工程
结束
◎考点一 基因工程的工具 1．限制性核酸内切酶(简称：限制酶)——“分子手术刀” (1)来源：主要是从原核生物中分离纯化。 (2)特点：能够识别双链 DNA 分子某种特定核苷酸序列，并且使每一条 链特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。 (3)切割后末端的种类：黏性末端和平末端。 2．DNA 连接酶——“分子缝合针” (1)作用：将双链 DNA 片段“缝合”起来，恢复被限制酶切开的两个核 苷酸之间的磷酸二酯键。 (2)种类：按来源可分为 E·coli_DNA 连接酶(来自大肠杆菌)和 T4DNA 连 接酶(来自 T4 噬菌体)。 3．载体——“分子运输车” (1)条件：能在受体细胞中复制并稳定保存；具有一个至多个限制酶切割 位点；具有标记基因。
考纲链接
考点梳理
考点例析
课堂自测
第1课 基因工程
结束
3．将目的基因导入受体细胞
生物种类
植物
动物
微生物
常用方法
农杆菌转化法
显微注射技术 感受态细胞法
受体细胞
体细胞
受精卵
原核细胞
转化过程
将目的基因插入到 将含有目的基因的 Ca2＋处理细胞→
感受态细胞→
Ti 质粒的 T­DNA 上 表达载体提纯→取 重 组 表 达 载 体
第十二单元 现代生物科技专题
结束
最新考纲
考纲解读
备考建议
基因工程的诞生(Ⅰ) 基因工程的原理及技术(Ⅱ) 基因工程的应用(Ⅱ) 蛋白质工程(Ⅰ) 植物的组织培养(Ⅱ) 动物的细胞培养与体细胞克隆 (Ⅰ) 细胞融合与单克隆抗体(Ⅱ) 动物胚胎发育的基本过程与胚胎 工程的理论基础(Ⅰ) 胚胎干细胞的移植(Ⅰ) 胚胎工程的应用(Ⅱ) 转基因生物的安全性(Ⅰ) 生物武器对人类的威胁(Ⅰ) 生物技术中的伦理问题(Ⅰ) 简述生态工程的原理(Ⅱ) 生态工程的实例(Ⅰ)

高考生物一轮复习专题26基因工程课件高三全册生物课件

高考生物一轮复习专题26基因工程课件高三全册生物课件
定。图2所示为甲、乙、丙3条引物在正确重组质粒中的相应位置,PCR鉴定时应选择的一对
引物是
段,原因是
12/9/2021
图2
。某学生尝试用图中另外一对引物从某一菌落的质粒中扩增出了400 bp片
。
答案 (8分)(1)平
(2)胸腺嘧啶(T) DNA连接
(3)B A类菌落含有P0
C类菌落未转入质粒
(4)乙丙 目的基因反向连接
4.(2017江苏单科,33,8分)金属硫蛋白(MT)是一类广泛存在的金属结合蛋白,某研究小组计划
通过多聚酶链式反应(PCR)扩增获得目的基因,构建转基因工程菌,用于重金属废水的净化处
理。PCR扩增过程示意图如下,请回答下列问题:
(1)从高表达MT的生物组织中提取mRNA,通过
获得
用于PCR扩增。
限制酶
BamHⅠ
识别序列及
ATCC
G G
ATCA
T G
切割位点
G G
CCTA

G T
ACTA


图1
12/9/2021
BclⅠ
Sau3AⅠ



GCTT
A A
CTAG

A A
TTCG

GATC
图2
HindⅢ
(1)用图中质粒和目的基因构建重组质粒,应选用
目的基因片段,通过
两种限制酶切割,酶切后的载体和
(2)设计一对与MT基因两端序列互补配对的引物(引物1和引物2),为方便构建重组质粒,在引物
12/9/2021
中需要增加适当的
位点。设计引物时需要避免引物之间形成
,而造成引物自连。
(3)图中步骤1代表

高中生物专题复习基因工程 PPT课件 苏教版

高中生物专题复习基因工程 PPT课件 苏教版

32、命好不如习惯好。养成好习惯，一辈子受用不尽。
•
33、比别人多一点执着，你就会创造奇迹。
•
15、如果没有人为你遮风挡雨，那就学会自己披荆斩棘，面对一切，用倔强的骄傲，活出无人能及的精彩。
•
16、成功的秘诀在于永不改变既定的目标。若不给自己设限，则人生中就没有限制你发挥的藩篱。幸福不会遗漏任何人，迟早有一天它会找到你。
基因的剪刀（分子手术刀） ——限制性核酸内切酶（限制酶）
到哪里去寻找这种酶
基因的针线（分子缝合针） ——DNA连接酶
基因的运输工具（分子运输车） ——运载体
（1）限制酶
与我们学过的 DNA酶相同吗？
①分布：主要在原核生物中。
作用是什么
②作用特点:专一性，识别特定核苷酸序列， 切割特定切点。
•
5、付出努力却没能实现的梦想，爱了很久却没能在一起的人，活得用力却平淡寂寞的青春，遗憾是每一次小的挫折，它磨去最初柔软的心智、让我们懂得累积时间的力量；那些孤独沉寂的时光，让我们学会守候内心的平和与坚定。那些脆弱的不完美，都会在努力和坚持下，改变模样。
•
11、失败不可怕，可怕的是从来没有努力过，还怡然自得地安慰自己，连一点点的懊悔都被麻木所掩盖下去。不能怕，没什么比自己背叛自己更可怕。
1.1 DNA重组技术的基本工具
分析概念：
为什么 要加工
是在生物体外，通过对DNA分子进行人工
工 “剪切” 和“拼接”，对生物的基因进行 具 改造和重新组合，然后导入受体细胞内进行
无性繁殖，使重组基因在受体细胞内表达，
产 品生出人类所需用导什要入么的新的生物类什型表么达和是生物产
基因操作的工具
2、现状：成功的例子不多，主要是因为蛋白质 发挥其功能需要依赖于正确的空间结构，而科 学家目前对大多数蛋白质的空间结构了解很少。

苏教版高考生物一轮复习选修3第一章基因工程概述共59张PPT[可修改版ppt]

苏教版高考生物一轮复习选修3第一章基因工程概述共59张PPT[可修改版ppt]

2.载体的作用和条件 (1)作用： ①作为运载工具，将目的基因转移到宿主细胞内。 ②利用它在宿主细胞内对目的基因进行大量复制。 (2)具备的条件： ①能在宿主细胞内稳定保存并大量复制。 ②有一个至多个限制性核酸内切酶切割位点，以便与外源基因 连接。 ③具有特殊的标记基因，以便进行筛选。
【高考警示】 载体的酶切位点及与膜载体的区别 (1)切割质粒需使用限制性核酸内切酶1次，切割目的基因则需 要使用相同的限制性核酸内切酶2次。因为质粒是环状DNA， 而目的基因在DNA分子链上。 (2)质粒DNA分子上限制性核酸内切酶切割位点的选择必须保 证至少有一个标记基因是完整的，如果标记基因全部被切开则 不便于鉴定与选择。
考点 一 基因工程的工具 1.工具酶与其他酶的比较 (1)几种酶的比较：
项目 种类
限制性核 酸内切酶
DNA连接酶
作用底物
DNA分子 DNA分子
片段
Hale Waihona Puke 作用部位 磷酸二酯键 磷酸二酯键
作用结果
形成黏性末 端或平末端
形成重组 DNA分子
种类
项目
作用底物
作用部位
DNA聚合酶 脱氧核苷酸 磷酸二酯键
DNA(水 解)酶
1.基因工程是利用重组DNA技术将外源DNA直接导入有机体的生 物技术。( × ) 【分析】不一定是直接导入，现在大部分是将目的基因与载体 DNA相连成为重组载体，然后再把这种重组DNA分子导入受体 细 胞。 2.(2010浙江×T2A)用限制性核酸内切酶可以切割烟草花叶病毒 的核酸。( ) 【分析】限制性核酸内切酶是用来切割DNA分子的，而烟草花 叶病毒的核酸是RNA。
(2)质粒运载体用EcoRⅠ切割后产生的片段如下：
为使载体与目的基因相连，含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ

高三生物一轮复习基因工程课件

高三生物一轮复习基因工程课件

多细胞生物的检测，将每个受体细胞单独培 养并诱导发育成完整个体，检测这些个体是否摄 入目的基因，摄入的基因是否表达（是否表现出 相应的性状）。淘汰无变化的个体，保留有相应 变化的个体进一步培养、研究。 例：用棉铃饲喂棉 铃虫，如虫吃后不出现 中毒症状，说明未摄入 目的基因或摄入目的基 因未表达。如虫吃后中 毒死亡，则说明摄入了 抗虫基因并得到表达。
• 步骤一：目的基因的提取 3）根据已知的氨基酸序列合成DNA法 ： 根据已知蛋白质的氨 蛋白质的氨基酸序列 基酸序列，推测出相应的 推测 信使RNA序列，然后按 mRNA的核苷酸序列 照碱基互补配对原则，推 推测 测出它的结构基因的核苷 结构基因的核苷酸序列 酸序列，再通过化学方法， 化学合成 以单核苷酸为原料合成目 目的基因 的基因。
基因工程的成果在实际生产、生活中的应用有哪些？
医药卫生 基因诊断：用同位素或荧光分子制备DNA探针，利用DNA
分子杂交的原理检验被试样品的遗传信息
利用转基因的工程菌等生产基因工程药品
基因治疗：用健康的外源基因导入有基因缺陷的细胞
培育优良品质的转基因作物或抗逆性转基因作物 农牧业 培育优良品质的转基因动物
（三）基因操作的基本步骤
• 上述三种目的基因提取的方法有何优缺点？
优点 鸟枪法 操作简便 广泛使用 专一性强 缺点 工作量大，盲目，分 离出来的有时并非一 个基因 操作过程麻烦，mRNA 很不稳定，要求的技 术条件较高
反转录法
根据已知氨基酸 专一性最强 仅限于合成核苷酸对 较少的简单基因 合成DNA法
重播
DNA被限制酶切断后有两个反向互补的“黏 性末端”。被同一种限制酶切断的几个DNA具有 相同的黏性末端，能够通过互补进行配对。
• 什么叫黏性末端？

高考生物大一轮复习第一部分基因工程课件苏教版选修

尊重个体在基因工程研究和应用中的自 主选择权，包括知情同意、隐私保护等
。
利益公正分配原则
确保基因工程研究和应用产生的利益 得到公平分配，关注弱势群体的权益
。
不伤害原则
确保基因工程研究和应用不对个体或 群体造成伤害，避免基因歧视和基因 优化的滥用。
可持续发展原则
确保基因工程研究和应用符合可持续 发展要求，促进人类和生态系统的长 期健康发展。
国际合作与交流
加强国际合作与交流，共同 探讨基因工程伦理问题，推 动全球范围内基因工程伦理 准则和规范的制定和实施。
伦理审查机制
建立健全的伦理审查机制， 对基因工程研究和应用项目 进行严格的伦理审查，确保 符合伦理原则和规范。
05
高考生物中基因工程考点 解析
考点梳理
基因工程的原理及技术基础
基因工程的原理、基因工程的基本操作步骤 、基因工程所需的工具等。
基因工程的基本原理
基于分子生物学和遗传学原理，通过基因操作技 术，将外源基因插入到生物体的基因组中，实现 基因的表达和调控。
基因工程的主要技术手段
包括基因克隆、载体构建、基因导入、基因表达 和检测等。
基因工程发展历程
1973年
美国科学家伯格首次成功地将外源基因导入 大肠杆菌，标志着基因工程的诞生。
重组蛋白的功能分析
对表达的重组蛋白进行生化活性分析 ，如酶活性检测、抗原抗体反应等。
重组DNA分子的序列分析
对阳性克隆的重组DNA分子进行序 列分析，验证目的基因的正确性。
实验结论总结
根据实验结果，总结实验结论，分析 实验的成功与不足之处，提出改进意 见。
04
基因工程伦理问题
基因工程的伦理原则
尊重自主性原则

2020高考生物一轮复习：第十一单元专题二十六 基因工程(共71张PPT)


基因工程的应用与蛋
白质工程 一、基因工程的应用 用转基因改良植物的品质。
重 点
1.植物基因工程:培育抗虫、抗病、抗逆转基因植物,利
2.动物基因工程:提高动物生长速度、改善畜产品的品质、 用转基因动物生产药物、用转基因动物作器官移植的供 体。
生物 第十一单元 现代生物科 技专题
3.基因治疗与基因诊断 基因治疗
生物 第十一单元 现代生物科 技专题
四、PCR技术
生物 第十一单元 现代生物科 技专题
五.体内DNA复制与PCR技术的比较 DNA复制 解旋方式 区 场所 解旋酶催化
PCR技
DNA在高温作用
细胞内(主要在细胞核内) 细胞外(主要在PC
酶
温度条件
解旋酶、DNA聚合酶等
细胞内温和条件 DNA分子
热稳定DNA聚合
方法2 基因工程操作程序的分析 C考法帮·考向全扫描
考向1
考向2
基因工程的基本工具
基因工程的基本操作步骤
考向3
考向4
基因工程的应用
蛋白质工程
考纲要求 考情精解读
命题规律
核心素养聚焦
命题分析预测
考纲要求 1.基因工程的诞生Ⅰ;
2.基因工程的原理及技术(含PCR技术)Ⅱ ;
3.基因工程的应用Ⅱ;
4.蛋白质工程Ⅰ。
基因工程操作程序的分
方法1 基因工程操作工具 的分析 方法解读 1.图解法辨析黏性末端和平末端 DNA分子经限制酶切割产生的DNA片段末端通常 有两种形式——黏性末端和平末端(如图所示)。
生物 第十一单元 现代生物科 技专题
2.表格法辨析限制酶、DNA连接酶、DNA聚合酶等相关
酶
种类 限制酶 DNA连接酶 项目 作用底物 DNA分子 DNA分子片段

高三一轮复习：基因工程正式ppt课件


达到治疗疾病的目的。病人细胞中既有缺陷基因，也有
正常基因。
高考总复习.生物
二、 植物基因工程与动物基因工程的成果
外源基因类型及举例
成果举例
抗虫转基 因植物
抗虫基因：Bt毒蛋白基 因、蛋白酶抑制剂基因、 淀粉酶抑制剂基因
抗虫水稻、抗虫棉、 抗虫玉米
抗病转基 因植物
抗病毒基因：病毒外壳 蛋白基因、病毒的复制 酶基因抗真菌基因：几 丁质酶基因
3．PCR技术扩增目的基因
高考总复习.生物
(3)PCR技术扩增目的基因 ①原理：_D_N__A_复__制___。 ②过程 第一步：变性：_D__N_A__解__链__；第二步：复性：引物结合到 互补DNA链；第三步：延伸：在热稳定DNA聚合酶作用下， 从引物起始合成互补链。 2.基因表达运载体的构建 (1)目的：使目的基因在受体细胞中_稳__定__存__在___，并且可以 _遗_传__至__下_一__代_，使目的基因能够__表__达__和_发__挥_。作用 (2) 组 成 ： 目__的__基__因____ ＋ __启__动__子____ ＋ ___终__止__子___ ＋ __标__记__基__因__
三、将目的基因导入受体细胞
生物 种类
植物细胞
动物细胞
常用 农杆菌转化 显微注射技
方法 法
术
受体 细胞
体细胞
受精卵
高考总复习.生物
微生物细胞
感受态细胞 法
原核细胞
转化 过程
将目的基因 插入Ti质粒 的TDNA上→ 农杆菌→导 入植物细胞 →整合到受 体细胞的
将含有目的 基因的表达 载体提纯→ 取卵(受精卵 )→显微注射 →受精卵发 育→获得具 有新性状的
用是（ ）C
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答案 D 胰岛素基因表达质粒导入大肠杆菌,获得的工程菌可将胰岛素基因遗传给子代,A 不符合题意;B、C培育的转基因植物和转基因动物的每个细胞均含有目有基因,后代可表现 转基因性状,B、C不符合题意;将转入目的基因的淋巴细胞回输患者体内后,患者的生殖细胞 不含目的基因,故子代不表现转基因性状,D符合题意。 素养解读 本题以基因工程为信息载体,考查考生运用所学知识,对某些生物学问题进行解 释、推理得出正确结论的能力;试题通过基因工程技术遗传性分析,体现了对科学思维素养中 的分析与判断要素的考查。
高考生物 (江苏专用)
专题26 基因工程
五年高考
A组 自主命题·江苏卷题组
考点1 基因工程的工具与操作程序
1.(2019江苏单科,16,2分)下列生物技术操作对遗传物质的改造,不会遗传给子代的是 ( ) A.将胰岛素基因表达质粒转入大肠杆菌,筛选获得基因工程菌 B.将花青素代谢基因导入植物体细胞,经组培获得花色变异植株 C.将肠乳糖酶基因导入奶牛受精卵,培育出产低乳糖牛乳的奶牛 D.将腺苷酸脱氨酶基因转入淋巴细胞后回输患者,进行基因治疗
端加上限制性酶切位点,
且常在两条引物上设计加入不同的限制性酶切位点,主要目的是
。
(3)进行扩增时,反应的温度和时间需根据具体情况进行设定,下列选项中
的设定与引物
有关,
的设定与扩增片段的长度有关。(填序号)
①变性温度 ②退火温度 ③延伸温度 ④变性时间
⑤退火时间 ⑥延伸时间
(4)如图表示筛选获得的工程菌中编码α-淀粉酶的mRNA 的部分碱基序列:
ห้องสมุดไป่ตู้
组合扩增 片段(bp) 连接方向
引物
甲乙
乙丙
甲丙
正向
0
350
450
反向
400
0
450
由表可知,PCR鉴定时应选择的一对引物是乙丙。若扩增出了400 bp片段,则原因是目的基因 反向连接。
素养解读 本题借助基因工程相关知识,考查考生从表格、图形等提取信息并运用这些信息 解决相关问题的能力;通过构建重组质粒的过程图示和菌落生长情况分析等体现了科学思维 素养中的演绎与推理要素。 知能拓展 PCR过程中,目的基因扩增n次,共产生2n个DNA,其中1个DNA上含引物Ⅰ,1个DNA 上含引物Ⅱ,2n-2个DNA既含引物Ⅰ,也含引物Ⅱ。该过程共需要2n-1个引物Ⅰ和2n-1个引物Ⅱ。
菌落,其生长情况如下表(“+”代表生长,“-”代表不生长)。根据表中结果判断,应选择的菌
落是
(填表中字母)类,另外两类菌落质粒导入情况分别是
、
。
菌落类型平板类型
A
B
C
无抗生素
+
+
+
氨苄青霉素
+
+
-
四环素
+
-
-
氨苄青霉素+四环素
+
-
-
(4)为鉴定筛选出的菌落中是否含有正确插入目的基因的重组质粒,拟设计引物进行PCR鉴
(2)用Taq DNA聚合酶进行PCR扩增获得的目的基因片段,其两端各自带有一个腺嘌呤脱氧核
苷酸。载体P1用酶处理,在两端各添加了一个碱基为
的脱氧核苷酸,形成P2;P2和
目的基因片段在
酶作用下,形成重组质粒P3。
(3)为筛选出含有重组质粒P3的菌落,采用含有不同抗生素的平板进行筛选,得到A、B、C三类
3.(2018江苏单科,32,8分)为生产具有特定性能的α-淀粉酶,研究人员从某种海洋细菌中克隆了 α-淀粉酶基因(1 656个碱基对),利用基因工程大量制备α-淀粉酶,实验流程见图。请回答下列 问题:
(1)利用PCR技术扩增α-淀粉酶基因前,需先获得细菌的
。
(2)为了便于扩增的DNA片段与表达载体连接,需在引物的
5'-AUGCCAUCAACAAAUACUAACACUU……-3'
图中虚线框内mRNA片段包含
个密码子,如虚线框后的序列未知,预测虚线框后的第
一个密码子最多有
种。
(5)获得工程菌表达的α-淀粉酶后,为探究影响酶活性的因素,以浓度为1%的可溶性淀粉为底
物测定酶活性,结果如下:
缓冲液 50 mmol/L Na2HPO4 -KH2PO4
2.(2019江苏单科,33,8分)图1是某基因工程中构建重组质粒的过程示意图,载体质粒P0具有四 环素抗性基因(tetr)和氨苄青霉素抗性基因(ampr)。请回答下列问题:
图1
(1)EcoR Ⅴ酶切位点为GAT ATC,EcoR Ⅴ酶切出来的线性载体P1为 CTA TAG
末端。
答案 (8分)(1)基因组DNA (2)5' 使DNA片段能定向插入表达载体,减少自连 (3)② ⑥ (4)8 13 (5)pH为8.5,缓冲液为50 mmol/L Tirs-HCl
50 mmol/L Tris-HCl
50 mmol/L Gly-NaOH
pH
6.0
6.5
7.0
7.5
7.5
8.0
8.5
9.0
9.0
9.5
10.0 10. 5
酶相对 25.4 40.2 49.8 63.2 70.1 95.5 99.5 85.3 68.1 63.7 41.5 20.8 活性%
根据上述实验结果,初步判断该α-淀粉酶活性最高的条件为 。
定。图2所示为甲、乙、丙3条引物在正确重组质粒中的相应位置,PCR鉴定时应选择的一对
引物是
。某学生尝试用图中另外一对引物从某一菌落的质粒中扩增出了400 bp片
段,原因是
。
图2
答案 (8分)(1)平 (2)胸腺嘧啶(T) DNA连接 (3)B A类菌落含有P0 C类菌落未转入质粒 (4)乙丙 目的基因反向连接 解析 (1)EcoRⅤ从识别序列的中心轴线处切割,所以产生的末端为平末端。(2)由于载体和目 的基因要连接成DNA分子,所以目的基因片段的两端各自带有一个腺嘌呤脱氧核苷酸时,载体 P1的两端应各添加一个胸腺嘧啶脱氧核苷酸。在DNA连接酶的作用下,可将P2和目的基因连 接,形成重组质粒P3。(3)重组质粒P3上有完整的氨苄青霉素基因,所以含有重组质粒P3的菌 落在无抗生素和添加氨苄青霉素的培养基上能生长,而在添加四环素的培养基上不能生长,所 以应选择的是B类菌落。A类菌落在添加氨苄青霉素、四环素、氨苄青霉素+四环素的培养 基上均能生长,说明A类菌落导入了P0。C类菌落在添加氨苄青霉素、四环素、氨苄青霉素+ 四环素的培养基上均不能生长,说明C类菌落未导入质粒。(4)选择的一对引物组合、目的基 因与重组质粒的连接方向及扩增片段长度的可能情况如表: