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pcr 操作中最应该注意的事项1.严格遵守无菌操作规程，避免污染。
Strictly adhere to aseptic operation procedures to avoid contamination.2.注意标本的正确识别和处理，确保实验准确性。
Pay attention to the correct identification and handling of specimens to ensure the accuracy of the experiment.3.定期检查PCR仪器的运行状态，确保设备正常工作。
Regularly check the operation status of the PCR instrument to ensure the normal operation of the equipment.4.认真核对试剂盒的配制和使用说明，保证实验的顺利进行。
Carefully check the preparation and usage instructions of the reagent kit to ensure the smooth progress of the experiment.5.注意控制实验环境温度和湿度，避免影响PCR反应结果。
Pay attention to control the temperature and humidity of the experimental environment to avoid affecting the PCR reaction results.6.遵循PCR反应体系的比例和配制规定，严格按要求操作。
Follow the proportion and preparation requirements of the PCR reaction system, and operate strictly as required.7.防止交叉污染，每次操作需更换吸头和手套。
pcr 操作中最应该注意的事项PCR（Polymerase Chain Reaction）是一种常用的分子生物学技术，用于扩增DNA片段。
在进行PCR操作时，有一些非常重要的事项需要特别注意，以确保实验的准确性和可靠性。
以下是在PCR操作中最应该注意的事项：1. 实验室操作规范：在进行PCR操作之前，需要做好实验室操作规范的准备工作，包括戴好实验手套、穿好实验服、清洁操作台面等。
避免在实验室中进食、饮水或使用手机等。
2. 检查实验仪器和试剂：在开始PCR实验之前，需要确保PCR仪器的正常运转和试剂的完整性。
检查PCR仪器的温控系统、离心机的转速、试剂的保质期等，确保实验条件的准确性。
3. 建立阳性和阴性对照：在每次PCR实验中，都要包括阳性对照和阴性对照，以验证实验的准确性。
阳性对照应包括已知的阳性样品，而阴性对照则应该是未添加DNA模板的反应混合物。
4. 采用单独的PCR实验室：为了避免PCR实验中的污染，最好在专门的PCR实验室中进行实验，避免与其他实验室中的DNA样品混合。
5. 严格控制实验条件：在PCR实验中，需要严格控制实验条件，包括温度、时间、试剂比例等。
确保PCR反应体系的均匀混合、温度梯度的准确性和反应时间的精确控制。
6. 避免污染：PCR实验非常容易受到外源DNA的污染，因此需要避免在实验室中的DNA样品和PCR产物的交叉污染。
实验中应该使用滤器枪头、一次性试剂盒等措施，避免污染的发生。
7. 定期维护PCR仪器：PCR仪器的维护对实验的准确性非常重要。
定期清洁PCR仪器的加热盖、检查温度控制系统的准确性、更换磁力搅拌器的磁子等，确保PCR仪器的正常运转。
8. 标记实验样品：在进行PCR实验时，需要对实验样品进行正确的标记，包括样品的编号、实验日期、PCR程序名称等。
避免实验样品的混淆和实验结果的不准确。
9. 注意PCR产物的保存和处理：PCR产物的保存和处理对实验结果的可靠性有着重要的影响。
PCR的操作及注意事项一、PCR简介PCR（Polymerase Chain Reaction）是一种常用的分子生物学实验技术，用于扩增特定的DNA片段。
PCR技术的广泛应用，使得其操作和注意事项变得尤为重要。
本文将介绍PCR的操作步骤以及需要注意的事项。
二、PCR的操作步骤1. DNA提取首先，需要从样本中提取目标DNA。
常用的提取方法包括酚氯仿法、热碱法和商业DNA提取试剂盒。
在提取DNA的过程中，应注意减少污染，保持工作区域清洁。
2. PCR反应液的配制将PCR反应液的各种试剂按照实验方案的要求配制好，主要包括模板DNA、引物、dNTPs、缓冲液和聚合酶。
保持试剂的新鲜和纯净，避免重复冻融。
3. PCR反应的设置将PCR反应液分装到反应管中，可根据需要设置多个反应管。
注意反应管的密封性，避免样品蒸发和污染。
同时，设定PCR反应的温度程序，包括变性、退火和延伸的温度和时间。
4. PCR反应的程序将反应管放入PCR仪中，启动PCR程序。
确保PCR仪的温度控制准确可靠，保持反应过程的稳定性。
根据目标DNA片段的大小，调整PCR的循环次数，一般为25-35个循环。
5. PCR产物的分析PCR反应结束后，可以通过各种方法对PCR产物进行分析，常用的方法包括琼脂糖凝胶电泳和DNA测序。
分析结果能够验证PCR扩增的特异性和产物的纯度。
三、PCR操作的注意事项1. 高品质的DNA模板PCR反应的成功与否与DNA模板的质量有很大关系。
因此，在进行PCR实验前，应确保使用高质量的DNA模板，如通过琼脂糖凝胶电泳进行检测。
2. 引物的设计和质量PCR反应中使用的引物应具有较高的特异性和准确性。
在设计引物时，应避免引物间的互补性，以免出现非特异扩增。
同时，引物的质量也很重要，选择高纯度的引物可以提高PCR反应的成功率。
3. 操作区域的消毒与隔离为了避免PCR反应过程中的污染，应定期对实验区域进行消毒，如操作台面、工作台和仪器表面。
pcr实验中的注意事项PCR 实验中的注意事项PCR（聚合酶链式反应）实验是一种在分子生物学领域广泛应用的技术，用于扩增特定的 DNA 片段。
在进行 PCR 实验时，有许多注意事项需要牢记，以确保实验结果的准确性和可靠性。
一、实验前的准备1、设计合适的引物引物的设计是 PCR 实验成功的关键之一。
引物的长度一般在 18 25 个碱基之间，GC 含量应在 40% 60%之间，并且要避免引物自身形成二级结构和引物之间的互补。
可以使用在线引物设计软件来辅助设计，但设计完成后需要进行仔细的评估和验证。
2、准备高质量的模板 DNA模板 DNA 的质量和纯度对 PCR 结果有很大影响。
DNA 应尽量纯净，避免蛋白质、RNA 等杂质的污染。
可以使用 DNA 提取试剂盒来提取 DNA，并通过分光光度计测量其浓度和纯度。
3、选择合适的 PCR 试剂包括 DNA 聚合酶、dNTPs（脱氧核苷酸三磷酸）、缓冲液等。
不同的 DNA 聚合酶具有不同的特性，如保真度、延伸速度等，应根据实验需求进行选择。
dNTPs 的浓度要合适，过高或过低都会影响 PCR 反应。
缓冲液的成分和 pH 值也会影响反应的效率。
4、准备干净的实验器具PCR 实验对污染非常敏感，因此使用的移液器、离心管、PCR 管等器具都要经过严格的清洗和灭菌处理，以避免外源 DNA 的污染。
二、实验中的操作1、严格控制反应体系的配制按照实验方案准确地加入各种试剂和模板 DNA，注意移液器的使用规范，确保加样的准确性和一致性。
在加样过程中，要避免试剂和模板的交叉污染。
2、设置对照实验对照实验对于判断 PCR 结果的可靠性非常重要。
常见的对照包括阳性对照（含有已知目标 DNA 片段的样品）、阴性对照（不含目标DNA 片段的样品）和无模板对照（只含反应试剂而不含模板 DNA 的样品）。
通过对照实验，可以检测试剂是否污染、反应体系是否正常以及是否存在非特异性扩增等问题。
精品文档报批细节1、技术档案：技术人员简历表、培训档案、要求有实质性文件如每人的学历证书、上岗证、科研成果（课题）、技术文章、获奖证书等的复印件2、仪器档案：实验室所有仪器的购买、使用、校正、放置地点、出厂编号、说明书复印件等实验室所有仪器维护校正记录如：加样器、温度计、温湿度计需出具计量局校正报告文件（可每种只校正一套作为标准）。
扩增仪需有仪器厂家专业技术人员维护校正报告，和校正后的参数。
加样器的出厂编号、使用时间、校正记录。
5700维护后验证记录—用同一公司或校准试剂或用自制质控血清并记录数值3、其他细节:垃圾处理：按生物污染性制品，交医院统一处理。
仪器简单操作流程标记笔、枪头盒等一些小物品都要标明分区。
仪器的申请、采购、使用、验证程序样本采集（针对临床医护人员）、运输、收集程序样品的唯一编号原则—应区分开不同天、不同种类的标本标本的保存程序—包括处理前、刚处理后、报告发放后的原始标本（原则上至少保留一周）应有专人负责。
检测结果的保存、备份记录、质控记录保存，除电脑记录外应有相应的手抄记录（类似于基因日检测统计表类型的）。
抱怨记录—应有时间、事件（项目）、接待人、处理方法、处理结果、处理人签字确认.精品文档注意事项1、回答任何问题都应与自己写的SOP文件相一致尮写你所做的,做你所写的.2、SOP文件不能写的太虚,无法做到的东西不要写,比如公司版的SOP文件里的加样器的校准一般实验室就做不到.模棱两可也不要写,比如消毒时间一到两小时不能这样写,多少就是多少.3、处理标本要在生物安全柜内,而加样则在柜外.4、各区门口要贴有各区的工作制度,限入标志.还要准备两个登记本,一个来记录紫外消毒,一个来记录工作人员出入.区内还要有一个工作记录本,用来记录各区每天的工作内容,便于监测每天的工作全过程.5、每把枪的用途要清楚,不能弄乱.比如稀释阳模的枪和处理标本的枪不可混用.6、普通离心机处理分泌物标本时应在离心后静置20分钟才能开盖.(许斌这样认为)7、所有仪器、设备都要有档案卡.8、所有的清洁消毒要在实验结束后马上进行,尤其是仪器、设备.像扩增仪，每天都要清洁，做完的反应管决对不能留在样品槽内。
PCR实验室报批细节、注意事项、常见问题问答第一篇：PCR实验室报批细节、注意事项、常见问题问答报批细节1、技术档案：技术人员简历表、培训档案、要求有实质性文件如每人的学历证书、上岗证、科研成果（课题）、技术文章、获奖证书等的复印件2、仪器档案：实验室所有仪器的购买、使用、校正、放置地点、出厂编号、说明书复印件等实验室所有仪器维护校正记录如：加样器、温度计、温湿度计需出具计量局校正报告文件（可每种只校正一套作为标准）。
扩增仪需有仪器厂家专业技术人员维护校正报告，和校正后的参数。
加样器的出厂编号、使用时间、校正记录。
5700维护后验证记录—用同一公司或校准试剂或用自制质控血清并记录数值3、其他细节: 垃圾处理：按生物污染性制品，交医院统一处理。
仪器简单操作流程标记笔、枪头盒等一些小物品都要标明分区。
仪器的申请、采购、使用、验证程序样本采集（针对临床医护人员）、运输、收集程序样品的唯一编号原则—应区分开不同天、不同种类的标本标本的保存程序—包括处理前、刚处理后、报告发放后的原始标本（原则上至少保留一周）应有专人负责。
检测结果的保存、备份记录、质控记录保存，除电脑记录外应有相应的手抄记录（类似于基因日检测统计表类型的）。
抱怨记录—应有时间、事件（项目）、接待人、处理方法、处理结果、处理人签字确认注意事项1、回答任何问题都应与自己写的SOP文件相一致.“写你所做的,做你所写的”.2、SOP文件不能写的太虚,无法做到的东西不要写,比如公司版的SOP文件里的加样器的校准一般实验室就做不到.模棱两可也不要写,比如“消毒时间一到两小时”不能这样写,多少就是多少.3、处理标本要在生物安全柜内,而加样则在柜外.4、各区门口要贴有各区的工作制度,限入标志.还要准备两个登记本,一个来记录紫外消毒,一个来记录工作人员出入.区内还要有一个工作记录本,用来记录各区每天的工作内容,便于监测每天的工作全过程.5、每把枪的用途要清楚,不能弄乱.比如稀释阳模的枪和处理标本的枪不可混用.6、普通离心机处理分泌物标本时应在离心后静置20分钟才能开盖.(许斌这样认为)7、所有仪器、设备都要有档案卡.8、所有的清洁消毒要在实验结束后马上进行,尤其是仪器、设备.像扩增仪，每天都要清洁，做完的反应管决对不能留在样品槽内。
PCR实验操作注意事项及PCR实验室试剂配制要求PCR实验操作注意事项如果操作不规范，样品间的交叉污染是很容易出现的，从而产生假阳性问题。
因此，不仅要在进行扩增反应时要谨慎对待，在样品的收集、抽提和扩增的所有环节都应谨慎操作，一般需做到以下几点：1、检测人员必须通过国家临检中心业务培训并取得合格证书;PCR实验室内工作人员必须参加由国家卫生部或各省临床检验中心举办的临床基因扩增培训班，并持证上岗。
PCR实验室通过验收，实验室至少必须应有两个以上持有“临床基因检测上岗证”。
2、戴一次性手套，若不小心溅上反应液，应立即更换手套，避免反应液飞溅，若不小心溅到手套或桌面上，应立刻更换手套并用稀酸擦拭桌面;3、检测设备必须符合标准PCR荧光实验室设置要求荧光定量PCR仪+实时荧光定量试剂+通用电脑+自动分析软件，构成PCR-DNA/RNA实时荧光定量检测系统。
4、使用一次性吸头，严禁与PCR产物分析室的吸头混用，吸头不要长时间暴露于空气中，避免空气中气溶胶的污染;5、操作多份样品时，制备反应混合液，先将dNTP、缓冲液、引物和酶混合好，然后再分装，这样既可以减少操作次数，避免污染，又可以增加反应的度；6、加入反应模板，加入后盖紧反应管;7、操作时设立空白对照和阴阳性对照，既可验证PCR反应的可靠性，又可以协助判断扩增系统的可信性;8、由于实际操作时加样器很容易受产物气溶胶或标本DNA的污染，所以操作者好使用高压处理过的或可替换的加样器。
假如没有这种特殊的加样器，至少在PCR操作过程中加样器应该专用，严禁交叉使用，尤其是PCR产物分析所用加样器不能拿到其它两个相邻区域使用;9、重复实验，验证结果，慎下结论。
PCR实验室试剂配制要求：PCR扩增所需要的试剂均应在装有紫外灯的负压工作台或超净工作台进行配制和分装，所有的吸头和加样器都需固定放于其中，吸头不能用来吸取扩增后的DNA和其它来源DNA：1、PCR用水应为高压的双蒸水;2、引物和d-NTP用高压的双蒸水在无PCR扩增产物区配制;3、引物和d-NTP应分装储存，分装时应标明分装时间，以备发生污染时及时查找原因和追溯污染源头;。
pcr实验室的操作流程及注意事项下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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报批细节1、技术档案：技术人员简历表、培训档案、要求有实质性文件如每人的学历证书、上岗证、科研成果（课题）、技术文章、获奖证书等的复印件2、仪器档案：实验室所有仪器的购买、使用、校正、放置地点、出厂编号、说明书复印件等实验室所有仪器维护校正记录如：加样器、温度计、温湿度计需出具计量局校正报告文件（可每种只校正一套作为标准）。
扩增仪需有仪器厂家专业技术人员维护校正报告，和校正后的参数。
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5700维护后验证记录—用同一公司或校准试剂或用自制质控血清并记录数值3、其他细节:垃圾处理：按生物污染性制品，交医院统一处理。
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检测结果的保存、备份记录、质控记录保存，除电脑记录外应有相应的手抄记录（类似于基因日检测统计表类型的）。
抱怨记录—应有时间、事件（项目）、接待人、处理方法、处理结果、处理人签字确认注意事项1、回答任何问题都应与自己写的SOP文件相一致."写你所做的,做你所写的".2、SOP文件不能写的太虚,无法做到的东西不要写,比如公司版的SOP文件里的加样器的校准一般实验室就做不到.模棱两可也不要写,比如"消毒时间一到两小时"不能这样写,多少就是多少.3、处理标本要在生物安全柜内,而加样则在柜外.4、各区门口要贴有各区的工作制度,限入标志.还要准备两个登记本,一个来记录紫外消毒,一个来记录工作人员出入.区内还要有一个工作记录本,用来记录各区每天的工作内容,便于监测每天的工作全过程.5、每把枪的用途要清楚,不能弄乱.比如稀释阳模的枪和处理标本的枪不可混用.6、普通离心机处理分泌物标本时应在离心后静置20分钟才能开盖.(许斌这样认为)7、所有仪器、设备都要有档案卡.8、所有的清洁消毒要在实验结束后马上进行,尤其是仪器、设备.像扩增仪，每天都要清洁，做完的反应管决对不能留在样品槽内。
9、各区的拖把、抹布不得混用,标记清楚.10、生物防护意识要强,手套要随时更换.生物防护安全的保证要从三个方面:制度、硬件、意识。
11、爆管如何处理:立即停止实验,水浴里的水要倒掉,冲洗.所有可能污染的地方要用消毒液擦洗,紫外照射,通风排风.12、各区应有日常工作核查表,做为每天工作记录的补充.13、各区要有泡有消毒液的生物污物桶,用来处理生物垃圾.14、验收组带来的标本要按平时对待临床标本一样处理,要有接收记录,结果登记等.15、拒绝电话或代领等非正常方式发放报告单.16、存放标本的冰箱要上锁,钥匙及电脑资料的密码要由本科室人员专人保管.17、报告单上要注明试剂的检测下限,不能写成参考范围.除了有操作者,还要有核校者,且两者姓名除了电子打印还要用手签.定量结果不能有阴阳性提示,只能报数值.18、SOP文件中PE5700的温湿度要求应该为温度15－30℃、湿度为< 80％。
19、SOP中医院申报实验室注意事项专家组参观实验室回答的问题1，“你们的冰箱的铁链我可以从底下抽上来，实验室能做好保密性吗？可以的，你们能做到就行，注意保密！2，实验室需要配置冷冻离心机，生物安全柜，如果做HCV时,注意重新添置新实验室。
3，生物防护中是否有锐器的防护注意事项？4，实验室的温湿度计的放置位置？最好放在实验室内。
5，实验室中如何做好离心管抑制物的检测？而非爆管、裂管的检测！6，在做HCV时规定从抽血化验到送达实验室要几个小时要有明规定！3小时左右！7，溶血标本有何具体的判断标准？脂血呢实验室末次会议的提问1，你们单位（达安）试剂，当我们新鲜标本做HBV时，提取中40微升+40微升提取液处理，待放置过夜后，第二天加样时，有的标本特难取样，有何处理办法？2，实验室中垃圾你们如何处理的？3，实验室中阴性标准检测后变成阳性你怎么办？（我们实验室一共有三管阴性阴性对照，第一个阴性检测管是试剂什么都不加，直接上机，第二个阴性检测管是试剂中加入在实验开始时打开盖的1.5离心管带有蒸馏水的，第三个阴性检测管是与实验一起提取的阴性血清。
）4，实验中如果阳性质控，阳性梯度，标本呈阴性请分别解释？5，实验室必须配置生物安全柜，高速离心机！临床基因扩增检验实验室技术验收现场问卷（口试和/或笔试）一. 现有一个患者向你提出：“我在你们医院检测HBV DNA为阳性，但在另一家医院检测为阴性，你们医院是怎么做的检测？”，此时，你怎么办？（该题主要是考实验室人员是否知道并遵守所制定的抱怨处理程序）二．现有一个临床大夫拿着几张HBV DNA定量PCR检验报告单找到PCR实验室，说：“你们的PCR结果到底准不准，我这个病人刚开始检测，HBV DNA是5×107拷贝数/ml，用了拉米呋啶治疗后二周，再检测结果为3×107拷贝数/ml，降了不少，但再过二周检测，又变成了6×107拷贝数/ml，升高不少，这到底是怎么回事？”，如果这个大夫刚好问的是你，你怎么办？并如何解释其提出的问题？(该题除了考实验室人员是否知道并遵守所制定的抱怨处理程序外，还要求其对特定PCR检验的批间变异有充分的认识)回答思路：这两题分别对应患者和临床医生提出的抱怨。
考点为你是否按照所制定的程序来处理：无论是患者还是医生提出抱怨，我们都应该“按照”程序先记录抱怨人姓名、抱怨内容等，然后等问题解决后记录处理结果等，最后记录反馈意见等。
注意：一般问题中出现“此时，你怎么办？”，其考核的重点均为“形式”而非“内容”。
所以题目中无论病人抱怨的是服务态度不好还是结果报告不准，医生抱怨的是检测结果和临床诊断不符还是报告发放不及时，回答的方向都应该是：“我们接待他们后，先在登记表上记录抱怨的什么什么相关信息，做相应处理，解决后记录处理结果，最后填反馈表，归档总结，跟着以后改进等等等等”。
对各种具体问题的处理就按照实际情况来回答就行。
如果题目中出现要你具体“解释某某提出的问题”时，这时是具体考察某一“内容细节”了。
第二题中看你对PCR检验的批间变异有否充分的认识：一般PCR检测试剂盒存在着一定的批间甚至批内差异，而且PCR检测前处理也存在着一定的误差，分析软件相关参数的选择也会使定量结果发生变动，这是方法学造成的不可避免的事实。
同一操作人、同一仪器、同一批号试剂、同一份标本同时做多份平行管，得到的结果都会不尽相同。
所以我们都会允许结果存在一定范围的偏差，一般为一个数量级的拷贝数。
5×107、3×107和6×107均在允许的误差范围内，排除了各种影响因素后，出现这种情况很正常，这说明了该病人用药效果不佳。
若定量结果有1～2个数量级甚至更大的变化才能反映用药疗效。
三．现有一人打电话到科室，说：“我孩子在你们医院做了一项丙肝的PCR 检测，名字叫XXX，请你告诉我检测结果好吗？”。
如果是你刚好接了这个电话，你会怎样去做？（该题考的是实验室人员在患者要求以电子邮件、电话、传真等方式传递报告时，是否能按相应的程序去做）回答思路：也是考形式。
“对于这种非正常的报告发放形式，我们按照程序，是这样这样处理的。
”因为各个医院实际情况不同，所以无论你怎样处理，只要程序中体现了对患者结果的保密原则，具体细节不会太要求。
在程序中按以下几个方式写都是可以的：1、我们均不以任何非正常形式发放报告。
（最干脆！就是有点不近人情，不过对我们来说省事）2、实在有特殊情况，可以电话查结果，其它发放形式不行。
但必须确认身份，包括核对其所查询的患者姓名、性别、年龄、检测项目、送检医生、送检日期、病区床号等情况，并提供患者ID号。
3、可以通过电话、图文传真、电子邮件等形式传送结果，和上面一样，需要核实身份。
（最宽松了，不过麻烦了很多）要注意的是：这些情况均应明确告知查询者，这几种非正常形式发放的报告均仅为临床提供参考，实验的最终结果以正式检测报告单为准。
特殊情况报告发放后需详细登记，签署报告人姓名，实验室负责人签字。
“报告的正确发放”为考核重点，一般可能还会引申出“你们是如何发放检测结果报告？”之类的问题，按照程序中写的实际情况回答就行的了。
只要遵循保密原则就OK。
最简单的无非把事情都推给医院：说门诊患者报告单送至服务台门诊报告发放处，由那里的医生确认身份后发放。
（具体她们是怎么确认、确不确认这已经不关我们的事了）。
若写病人到科室领报告也行，只是“我们怎么确认病人身份”要在程序中体现：询问相关信息、根据收费单或病历唯一条形码（若医院采用计算机网络系统）确认等等。
四．现有你科室同事，拿了一份血清标本给你，说：“这是我一个熟人的标本，他要做HCV RNA检测，刚好他还做生化和免疫检测，我从生化标本分了一些出来，给你做HCV RNA。
”你觉得这样行吗？为什么？（该题主要是考实验室人员对有关标本的收集程序是否清楚并遵守）回答思路：问到了“为什么？”表示具体考到细节了。
按照我们的收集程序，做PCR 尤其是RNA项目需要独立取血，不能从其它检测的标本中分出一些来做。
而且对RNA标本的采集、保存、运输都有严格的要求。
一般验收组会对这类问题加以引申。
问你每天标本在哪儿采集？采血的人员有否经过专门培训？采集的标本如何保存？还可以顺便问你结果发放后的标本如何保存、保存在哪儿？保存多久？甚至要你把这多久多久前的标本拿出来给他们看。
五．某一天，你在做HBV DNA荧光定量PCR检测（方法的定量测定范围为103～107拷贝数/ml）中，发现有1份标本的测定Ct值超出方法的测定上限，此时你怎么办？对于没有特异扩增曲线的标本你又怎么报告结果？回答思路：此为具体问题：题目已经假设了方法的定量测定范围为103～107拷贝数/ml，我们就按照这个假设来考虑。
先看是否为特异扩增的曲线（即看曲线是否为标准的S形曲线），若为标准S形曲线表示的确为阳性标本，Ct值超出检测上限，表示未知标本HBV DNA浓度过大，不在检测线性范围内，应该进行浓度梯度稀释（1/10、1/100、1/1000……），重做实验，看哪个梯度处于线性范围内，得到原始浓度乘以相应稀释倍数即得。
若不是特异扩增的曲线（也就是常见的那种前面翘、与阈值线有交点的阴性曲线，计算机不会具体分析，见有交点就给Ct值，而且Ct值还很小，小于测定上限的Cycle数），按阴性报。
六．在PCR检测的核酸提取离心中，如发现有一管离心管出现破裂，此时你怎么办？（该题是考实验室人员对于其制定的实验室及仪器设备消毒清洁程序是否知道并遵守）回答思路：按照离心机的消毒清洁程序：必须先停止实验，将破裂管密封放入生物垃圾桶，再用75%酒精擦拭离心室消毒，用移动紫外灯照射30～60分钟后才能开始实验。
