PCR实验室报批细节、注意事项、常见问题问答
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pcr 操作中最应该注意的事项PCR(Polymerase Chain Reaction)是一种常用的分子生物学技术,用于扩增DNA片段。
在进行PCR操作时,有一些非常重要的事项需要特别注意,以确保实验的准确性和可靠性。
以下是在PCR操作中最应该注意的事项:1. 实验室操作规范:在进行PCR操作之前,需要做好实验室操作规范的准备工作,包括戴好实验手套、穿好实验服、清洁操作台面等。
避免在实验室中进食、饮水或使用手机等。
2. 检查实验仪器和试剂:在开始PCR实验之前,需要确保PCR仪器的正常运转和试剂的完整性。
检查PCR仪器的温控系统、离心机的转速、试剂的保质期等,确保实验条件的准确性。
3. 建立阳性和阴性对照:在每次PCR实验中,都要包括阳性对照和阴性对照,以验证实验的准确性。
阳性对照应包括已知的阳性样品,而阴性对照则应该是未添加DNA模板的反应混合物。
4. 采用单独的PCR实验室:为了避免PCR实验中的污染,最好在专门的PCR实验室中进行实验,避免与其他实验室中的DNA样品混合。
5. 严格控制实验条件:在PCR实验中,需要严格控制实验条件,包括温度、时间、试剂比例等。
确保PCR反应体系的均匀混合、温度梯度的准确性和反应时间的精确控制。
6. 避免污染:PCR实验非常容易受到外源DNA的污染,因此需要避免在实验室中的DNA样品和PCR产物的交叉污染。
实验中应该使用滤器枪头、一次性试剂盒等措施,避免污染的发生。
7. 定期维护PCR仪器:PCR仪器的维护对实验的准确性非常重要。
定期清洁PCR仪器的加热盖、检查温度控制系统的准确性、更换磁力搅拌器的磁子等,确保PCR仪器的正常运转。
8. 标记实验样品:在进行PCR实验时,需要对实验样品进行正确的标记,包括样品的编号、实验日期、PCR程序名称等。
避免实验样品的混淆和实验结果的不准确。
9. 注意PCR产物的保存和处理:PCR产物的保存和处理对实验结果的可靠性有着重要的影响。
精品文档报批细节1、技术档案:技术人员简历表、培训档案、要求有实质性文件如每人的学历证书、上岗证、科研成果(课题)、技术文章、获奖证书等的复印件2、仪器档案:实验室所有仪器的购买、使用、校正、放置地点、出厂编号、说明书复印件等实验室所有仪器维护校正记录如:加样器、温度计、温湿度计需出具计量局校正报告文件(可每种只校正一套作为标准)。
扩增仪需有仪器厂家专业技术人员维护校正报告,和校正后的参数。
加样器的出厂编号、使用时间、校正记录。
5700维护后验证记录—用同一公司或校准试剂或用自制质控血清并记录数值3、其他细节:垃圾处理:按生物污染性制品,交医院统一处理。
仪器简单操作流程标记笔、枪头盒等一些小物品都要标明分区。
仪器的申请、采购、使用、验证程序样本采集(针对临床医护人员)、运输、收集程序样品的唯一编号原则—应区分开不同天、不同种类的标本标本的保存程序—包括处理前、刚处理后、报告发放后的原始标本(原则上至少保留一周)应有专人负责。
检测结果的保存、备份记录、质控记录保存,除电脑记录外应有相应的手抄记录(类似于基因日检测统计表类型的)。
抱怨记录—应有时间、事件(项目)、接待人、处理方法、处理结果、处理人签字确认.精品文档注意事项1、回答任何问题都应与自己写的SOP文件相一致尮写你所做的,做你所写的.2、SOP文件不能写的太虚,无法做到的东西不要写,比如公司版的SOP文件里的加样器的校准一般实验室就做不到.模棱两可也不要写,比如消毒时间一到两小时不能这样写,多少就是多少.3、处理标本要在生物安全柜内,而加样则在柜外.4、各区门口要贴有各区的工作制度,限入标志.还要准备两个登记本,一个来记录紫外消毒,一个来记录工作人员出入.区内还要有一个工作记录本,用来记录各区每天的工作内容,便于监测每天的工作全过程.5、每把枪的用途要清楚,不能弄乱.比如稀释阳模的枪和处理标本的枪不可混用.6、普通离心机处理分泌物标本时应在离心后静置20分钟才能开盖.(许斌这样认为)7、所有仪器、设备都要有档案卡.8、所有的清洁消毒要在实验结束后马上进行,尤其是仪器、设备.像扩增仪,每天都要清洁,做完的反应管决对不能留在样品槽内。
PCR实验操作注意事项及PCR实验室试剂配制要求PCR实验操作注意事项如果操作不规范,样品间的交叉污染是很容易出现的,从而产生假阳性问题。
因此,不仅要在进行扩增反应时要谨慎对待,在样品的收集、抽提和扩增的所有环节都应谨慎操作,一般需做到以下几点:1、检测人员必须通过国家临检中心业务培训并取得合格证书;PCR实验室内工作人员必须参加由国家卫生部或各省临床检验中心举办的临床基因扩增培训班,并持证上岗。
PCR实验室通过验收,实验室至少必须应有两个以上持有“临床基因检测上岗证”。
2、戴一次性手套,若不小心溅上反应液,应立即更换手套,避免反应液飞溅,若不小心溅到手套或桌面上,应立刻更换手套并用稀酸擦拭桌面;3、检测设备必须符合标准PCR荧光实验室设置要求荧光定量PCR仪+实时荧光定量试剂+通用电脑+自动分析软件,构成PCR-DNA/RNA实时荧光定量检测系统。
4、使用一次性吸头,严禁与PCR产物分析室的吸头混用,吸头不要长时间暴露于空气中,避免空气中气溶胶的污染;5、操作多份样品时,制备反应混合液,先将dNTP、缓冲液、引物和酶混合好,然后再分装,这样既可以减少操作次数,避免污染,又可以增加反应的度;6、加入反应模板,加入后盖紧反应管;7、操作时设立空白对照和阴阳性对照,既可验证PCR反应的可靠性,又可以协助判断扩增系统的可信性;8、由于实际操作时加样器很容易受产物气溶胶或标本DNA的污染,所以操作者好使用高压处理过的或可替换的加样器。
假如没有这种特殊的加样器,至少在PCR操作过程中加样器应该专用,严禁交叉使用,尤其是PCR产物分析所用加样器不能拿到其它两个相邻区域使用;9、重复实验,验证结果,慎下结论。
PCR实验室试剂配制要求:PCR扩增所需要的试剂均应在装有紫外灯的负压工作台或超净工作台进行配制和分装,所有的吸头和加样器都需固定放于其中,吸头不能用来吸取扩增后的DNA和其它来源DNA:1、PCR用水应为高压的双蒸水;2、引物和d-NTP用高压的双蒸水在无PCR扩增产物区配制;3、引物和d-NTP应分装储存,分装时应标明分装时间,以备发生污染时及时查找原因和追溯污染源头;。
pcr实验操作流程及注意事项
哎呀呀,PCR 实验可真是个精细活儿!要想把这个实验做好,操作流程和注意事项可得牢记在心呀!
首先,准备工作得一丝不苟。
各种试剂、仪器都要准备齐全,就像战士上战场前要检查好装备一样。
然后,样品处理可不能马虎哟!得小心翼翼地提取样本中的核酸,这一步就如同在沙堆里寻找金子,需要耐心和细心。
接着,进行PCR 反应的设置,试剂的添加量要精准无误,温度和时间的设置更是关键。
嘿,这可不像随意做菜加盐,多一点少一点都不行呀!
反应过程中,要密切关注仪器的运行状态,稍有异常就得赶紧处理,千万别等到出了大问题才着急。
扩增完成后,产物的检测也不能掉以轻心哇!要确保检测方法准确可靠,不然前面的努力不都白费啦!
再说说注意事项。
实验环境得保持清洁无菌,不然杂菌会捣乱的呀!操作过程中要防止交叉污染,这就好比不能让不同的河流混在一起。
还有,试剂的保存要严格按照要求来,过期的试剂可不能用,就像过期的食品不能吃一样。
实验人员自身也要做好防护,保护自己的同时也是保证实验的准确性。
哇塞,PCR 实验可不简单,但只要严格按照流程,注意每一个细
节,就能取得成功,为科学研究贡献有价值的结果呀!
总之啊,PCR 实验操作流程和注意事项一定要牢记,这可不是闹着玩的,要以严谨的态度对待,才能得出可靠的实验结果哟!。
PCR检测常见问题与解决途径PCR 检测常见问题与解决途径利用 PCR 方法检测转基因成分时,经常出现假阳性、假阴性、非特异性扩增和涂抹带。
尤其是假阳性和假阴性可使检测结果得出错误结论,有时可造成严重后果。
为了提高转基因检测的准确性和可靠性,PCR 检测应尽量减少假阳性、假阴性、非特异性扩增和涂抹带现象的发生。
一个好的PCR 方法不但要求特异性好、灵敏度高、还要求具有高的可重复性、重现性、鲁棒性,尽量减少假阳性、假阴性和非特异性扩增。
本文对 PCR 检测中出现的假阳性、假阴性、非特异性扩增和涂抹带的原因及其解决方法予以综述。
一、假阳性:(一)假阳性现象假阳性是指检测阴性材料得到阳性结果。
如果一次实验中的几个阴性对照中出现一个或几个阳性结果,提示本次实验中其它标本的检测结果可能有假阳性。
实验中设立的阴性对照可提示有无假阳性结果出现。
(二)造成假阳性的原因1.样品间交叉污染:样本污染主要有收集样本的容器被污染,或样本放置时,由于密封不严溢于容器外,或容器外粘有样本而造成相互间交叉污染;样本核酸模板在提取过程中,由于吸样枪污染导致标本间污染;2.PCR 试剂的污染:主要是由于在 PCR 试剂配制过程中,由于加样枪、容器、双蒸水及其它溶液被 PCR 核酸模板污染。
3. PCR 扩增产物污染:这是 PCR 贝量大 (一般为 1013 拷贝 /ml),远远高于物污染,就可形成假阳性。
反应中最主要最常见的污染问题。
因为PCRPCR 检测数个拷贝的极限,所以极微量的产物拷PCR 产4. 气溶胶污染:在空气与液体面摩擦时就可形成气溶胶,在操作时比较剧烈地摇动反应管,开盖时、吸样时及污染进样枪的反复吸样都可形成气溶胶而污染。
据计算一个气溶胶颗粒可含 48000 拷贝,因而由其造成的污染是一个值得特别重视的问题。
5.实验室中克隆质粒的污染:由于克隆质粒在单位容积内含量相当高,另外在纯化过程中需用较多的用具及试剂,而且在活细胞内的质粒,由于活细胞的生长繁殖的简便性及具有很强的生命力,其污染可能性也很大。
pcr操作中最应该注意的事项PCR操作是分子生物学领域中常用的一种技术手段,可以对DNA进行扩增,是基因检测、基因工程等领域的重要工具。
然而,PCR操作需要严格的操作要求和技术技巧,以确保实验结果的准确性和可靠性。
本文将从PCR操作中最应该注意的事项展开讨论,包括实验前的准备工作、PCR反应的操作过程、结果分析及实验后的清洁工作等,希望对读者有所帮助。
一、实验前的准备工作1.1仪器与试剂准备在进行PCR反应之前,首先要检查PCR仪、恒温水浴、移液器、离心机等设备是否处于正常工作状态。
另外,准备好所需的试剂,包括DNA模板、引物、dNTPs、Taq酶和缓冲液等。
要确保试剂的新鲜性和质量,避免使用过期或受污染的试剂。
1.2实验操作区域的准备PCR反应对环境的洁净度要求较高,实验室操作台面、仪器表面和玻璃器皿等要进行彻底的清洁和消毒。
同时,保持实验室的通风良好,避免污染物进入实验区域。
1.3携带物品的准备进行PCR反应时,实验人员应穿戴实验服和手套,并保持良好的实验卫生习惯。
另外,要准备好一次性使用的移液器垫、废弃物箱等,以便及时清理实验过程中产生的废弃物。
二、PCR反应的操作过程2.1反应管的配制在进行PCR反应之前,需要按照实验方案准确计量引物、dNTPs、DNA模板、Taq酶和缓冲液等反应组分,将它们依次加入到反应管中,并轻轻摇匀,避免气泡的产生。
此外,要在反应管上标记好样品编号和反应组分,以免混淆。
2.2反应体系的设定PCR反应的反应体系包括反应液的配制、PCR管中样品的加入以及PCR管的密封等步骤。
在这些步骤中,要严格控制反应体系的配制,并确保各项反应组分加入的准确性和稳定性。
2.3 PCR反应条件的设定PCR反应的条件包括反应温度、反应时间、循环次数等,这些条件的设定对PCR扩增效果具有显著影响。
在进行PCR反应时,要根据引物的Tm值和DNA模板的特性,合理设置温度梯度和扩增循环次数,以获得理想的PCR产物。
pcr扩增实验注意事项-回复PCR扩增实验注意事项PCR(聚合酶链式反应)是一种在分子生物学研究中广泛应用的技术,可快速扩增特定DNA片段。
然而,进行PCR实验时需要注意一些关键事项,以确保实验的准确性和可重复性。
本文将一步一步回答关于PCR扩增实验的注意事项。
一、准备工作在进行PCR实验之前,确保已经做好以下准备工作:1. 搭建无菌工作环境:将实验室工作台面清洁消毒,并使用紫外灯照射,以消除可能存在的DNA污染。
2. 准备所需试剂:确保准备充足的PCR反应缓冲液、核酸模板、引物、dNTPs、MgCl2和聚合酶。
3. 校准PCR仪:使用一个已知序列的DNA模板进行校准,确保PCR仪能够准确地控制温度。
4. 分装试剂:根据实验计划,适当分装PCR反应液和试剂,以减少可能的污染和误操作。
二、引物设计PCR的成功与否与引物的选择和设计密切相关。
在设计引物时,请注意以下事项:1. 引物长度:引物通常应在18-25个碱基对之间,过短的引物可能导致非特异性扩增,而过长的引物则可能导致扩增效率降低。
2. 引物的碱基组成:尽量避免引物中含有多个连续的相同碱基,因为这可能导致引物间的结合不稳定,从而影响PCR反应的效果。
3. 特异性:确保引物与目标DNA序列的互补区域具有足够的特异性,以避免非特异性扩增。
三、试剂与材料的处理在PCR实验中,以下几点是需要注意的:1. 使用质优的试剂和材料:确保所使用的试剂和材料质量优良,避免使用过期或受污染的试剂,以免对实验结果产生负面影响。
2. 避免污染:使用无菌技术进行试剂和材料的处理,避免外源性DNA的污染。
同时避免重复使用塑料制品,以减少可能的交叉污染。
3. 根据需要冷藏保存:将PCR试剂储存在适当的温度下(通常为-20),以保持试剂的稳定性。
四、PCR反应条件设置PCR反应条件的设置对实验结果至关重要,以下几点需要注意:1. 反应体系的优化:根据实验需求,优化PCR反应的组分浓度,如引物浓度、dNTPs浓度和MgCl2浓度。
PCR操作有哪些注意事项PCR(聚合酶链式反应)是在分子生物学和遗传工程中常用的一种技术,可以扩增DNA片段。
虽然PCR操作看似简单,但是在实验过程中仍然需要注意一些重要的事项,以确保实验结果的准确性和可靠性。
1. 实验前准备在进行PCR实验之前,有几个准备工作需要提前完成: - 准备好所需的实验物质,包括DNA模板、引物、聚合酶、缓冲液等。
确保这些实验物质的质量良好,没有污染。
- 根据实验需要选择合适的PCR仪,调试好仪器参数,确保温度控制精确可靠。
- 设计合适的引物序列,确保引物能够特异性地结合到目标DNA序列上。
2. 实验操作在进行PCR操作时,需要注意以下几个关键环节: - 保持实验环境的清洁和无菌。
实验过程中,使用无菌技术操作,避免污染。
- 遵循好实验的基本原则,比如每个样本使用单独的PCR管,避免交叉污染。
- 在开始PCR反应之前,进行负对照实验,即只使用纯水或者没有模板DNA的样品作为对照,确保实验没有污染。
- 严格按照实验方案中的步骤进行操作,尽量避免实验操作的变异。
- 注意各步骤中的温度和时间控制,以确保PCR反应的有效性和效率。
3. 实验后处理实验结束后,还需要注意以下事项: - 将PCR产物进行凝胶电泳分析,验证反应结果。
如果需要定量PCR产物,可以使用荧光定量PCR技术进行分析。
- 将实验用具进行严格的清洁和消毒处理,避免实验交叉污染。
- 正确保存PCR产物,避免DNA降解。
通常可以将PCR产物保存在低温下,比如-20°C冷冻保存或制备浓缩保存。
4. 安全注意事项在进行PCR实验时,还需要注意一些实验安全措施: - 使用实验室必需的个人防护装备,比如实验手套、防护眼镜等。
- 遵循实验室中的安全操作规程,防止发生事故或暴露于有害化学物质。
- 合理储存和处理实验废液和废弃物,以保护环境和他人的安全。
综上所述,PCR操作需要注意实验前的准备、实验操作的细节、实验后的处理以及安全事项。
报批细节1、技术档案:技术人员简历表、培训档案、要求有实质性文件如每人的学历证书、上岗证、科研成果(课题)、技术文章、获奖证书等的复印件2、仪器档案:实验室所有仪器的购买、使用、校正、放置地点、出厂编号、说明书复印件等实验室所有仪器维护校正记录如:加样器、温度计、温湿度计需出具计量局校正报告文件(可每种只校正一套作为标准)。
扩增仪需有仪器厂家专业技术人员维护校正报告,和校正后的参数。
加样器的出厂编号、使用时间、校正记录。
5700维护后验证记录—用同一公司或校准试剂或用自制质控血清并记录数值3、其他细节:垃圾处理:按生物污染性制品,交医院统一处理。
仪器简单操作流程标记笔、枪头盒等一些小物品都要标明分区。
仪器的申请、采购、使用、验证程序样本采集(针对临床医护人员)、运输、收集程序样品的唯一编号原则—应区分开不同天、不同种类的标本标本的保存程序—包括处理前、刚处理后、报告发放后的原始标本(原则上至少保留一周)应有专人负责。
检测结果的保存、备份记录、质控记录保存,除电脑记录外应有相应的手抄记录(类似于基因日检测统计表类型的)。
抱怨记录—应有时间、事件(项目)、接待人、处理方法、处理结果、处理人签字确认注意事项1、回答任何问题都应与自己写的SOP文件相一致."写你所做的,做你所写的".2、SOP文件不能写的太虚,无法做到的东西不要写,比如公司版的SOP文件里的加样器的校准一般实验室就做不到.模棱两可也不要写,比如"消毒时间一到两小时"不能这样写,多少就是多少.3、处理标本要在生物安全柜内,而加样则在柜外.4、各区门口要贴有各区的工作制度,限入标志.还要准备两个登记本,一个来记录紫外消毒,一个来记录工作人员出入.区内还要有一个工作记录本,用来记录各区每天的工作内容,便于监测每天的工作全过程.5、每把枪的用途要清楚,不能弄乱.比如稀释阳模的枪和处理标本的枪不可混用.6、普通离心机处理分泌物标本时应在离心后静置20分钟才能开盖.(许斌这样认为)7、所有仪器、设备都要有档案卡.8、所有的清洁消毒要在实验结束后马上进行,尤其是仪器、设备.像扩增仪,每天都要清洁,做完的反应管决对不能留在样品槽内。
9、各区的拖把、抹布不得混用,标记清楚.10、生物防护意识要强,手套要随时更换.生物防护安全的保证要从三个方面:制度、硬件、意识。
11、爆管如何处理:立即停止实验,水浴里的水要倒掉,冲洗.所有可能污染的地方要用消毒液擦洗,紫外照射,通风排风.12、各区应有日常工作核查表,做为每天工作记录的补充.13、各区要有泡有消毒液的生物污物桶,用来处理生物垃圾.14、验收组带来的标本要按平时对待临床标本一样处理,要有接收记录,结果登记等.15、拒绝电话或代领等非正常方式发放报告单.16、存放标本的冰箱要上锁,钥匙及电脑资料的密码要由本科室人员专人保管.17、报告单上要注明试剂的检测下限,不能写成参考范围.除了有操作者,还要有核校者,且两者姓名除了电子打印还要用手签.定量结果不能有阴阳性提示,只能报数值.18、SOP文件中PE5700的温湿度要求应该为温度15-30℃、湿度为< 80%。
19、SOP中医院申报实验室注意事项专家组参观实验室回答的问题1,“你们的冰箱的铁链我可以从底下抽上来,实验室能做好保密性吗?可以的,你们能做到就行,注意保密!2,实验室需要配置冷冻离心机,生物安全柜,如果做HCV时,注意重新添置新实验室。
3,生物防护中是否有锐器的防护注意事项?4,实验室的温湿度计的放置位置?最好放在实验室内。
5,实验室中如何做好离心管抑制物的检测?而非爆管、裂管的检测!6,在做HCV时规定从抽血化验到送达实验室要几个小时要有明规定!3小时左右!7,溶血标本有何具体的判断标准?脂血呢实验室末次会议的提问1,你们单位(达安)试剂,当我们新鲜标本做HBV时,提取中40微升+40微升提取液处理,待放置过夜后,第二天加样时,有的标本特难取样,有何处理办法?2,实验室中垃圾你们如何处理的?3,实验室中阴性标准检测后变成阳性你怎么办?(我们实验室一共有三管阴性阴性对照,第一个阴性检测管是试剂什么都不加,直接上机,第二个阴性检测管是试剂中加入在实验开始时打开盖的1.5离心管带有蒸馏水的,第三个阴性检测管是与实验一起提取的阴性血清。
)4,实验中如果阳性质控,阳性梯度,标本呈阴性请分别解释?5,实验室必须配置生物安全柜,高速离心机!临床基因扩增检验实验室技术验收现场问卷(口试和/或笔试)一. 现有一个患者向你提出:“我在你们医院检测HBV DNA为阳性,但在另一家医院检测为阴性,你们医院是怎么做的检测?”,此时,你怎么办?(该题主要是考实验室人员是否知道并遵守所制定的抱怨处理程序)二.现有一个临床大夫拿着几张HBV DNA定量PCR检验报告单找到PCR实验室,说:“你们的PCR结果到底准不准,我这个病人刚开始检测,HBV DNA是5×107拷贝数/ml,用了拉米呋啶治疗后二周,再检测结果为3×107拷贝数/ml,降了不少,但再过二周检测,又变成了6×107拷贝数/ml,升高不少,这到底是怎么回事?”,如果这个大夫刚好问的是你,你怎么办?并如何解释其提出的问题?(该题除了考实验室人员是否知道并遵守所制定的抱怨处理程序外,还要求其对特定PCR检验的批间变异有充分的认识)回答思路:这两题分别对应患者和临床医生提出的抱怨。
考点为你是否按照所制定的程序来处理:无论是患者还是医生提出抱怨,我们都应该“按照”程序先记录抱怨人姓名、抱怨内容等,然后等问题解决后记录处理结果等,最后记录反馈意见等。
注意:一般问题中出现“此时,你怎么办?”,其考核的重点均为“形式”而非“内容”。
所以题目中无论病人抱怨的是服务态度不好还是结果报告不准,医生抱怨的是检测结果和临床诊断不符还是报告发放不及时,回答的方向都应该是:“我们接待他们后,先在登记表上记录抱怨的什么什么相关信息,做相应处理,解决后记录处理结果,最后填反馈表,归档总结,跟着以后改进等等等等”。
对各种具体问题的处理就按照实际情况来回答就行。
如果题目中出现要你具体“解释某某提出的问题”时,这时是具体考察某一“内容细节”了。
第二题中看你对PCR检验的批间变异有否充分的认识:一般PCR检测试剂盒存在着一定的批间甚至批内差异,而且PCR检测前处理也存在着一定的误差,分析软件相关参数的选择也会使定量结果发生变动,这是方法学造成的不可避免的事实。
同一操作人、同一仪器、同一批号试剂、同一份标本同时做多份平行管,得到的结果都会不尽相同。
所以我们都会允许结果存在一定范围的偏差,一般为一个数量级的拷贝数。
5×107、3×107和6×107均在允许的误差范围内,排除了各种影响因素后,出现这种情况很正常,这说明了该病人用药效果不佳。
若定量结果有1~2个数量级甚至更大的变化才能反映用药疗效。
三.现有一人打电话到科室,说:“我孩子在你们医院做了一项丙肝的PCR 检测,名字叫XXX,请你告诉我检测结果好吗?”。
如果是你刚好接了这个电话,你会怎样去做?(该题考的是实验室人员在患者要求以电子邮件、电话、传真等方式传递报告时,是否能按相应的程序去做)回答思路:也是考形式。
“对于这种非正常的报告发放形式,我们按照程序,是这样这样处理的。
”因为各个医院实际情况不同,所以无论你怎样处理,只要程序中体现了对患者结果的保密原则,具体细节不会太要求。
在程序中按以下几个方式写都是可以的:1、我们均不以任何非正常形式发放报告。
(最干脆!就是有点不近人情,不过对我们来说省事)2、实在有特殊情况,可以电话查结果,其它发放形式不行。
但必须确认身份,包括核对其所查询的患者姓名、性别、年龄、检测项目、送检医生、送检日期、病区床号等情况,并提供患者ID号。
3、可以通过电话、图文传真、电子邮件等形式传送结果,和上面一样,需要核实身份。
(最宽松了,不过麻烦了很多)要注意的是:这些情况均应明确告知查询者,这几种非正常形式发放的报告均仅为临床提供参考,实验的最终结果以正式检测报告单为准。
特殊情况报告发放后需详细登记,签署报告人姓名,实验室负责人签字。
“报告的正确发放”为考核重点,一般可能还会引申出“你们是如何发放检测结果报告?”之类的问题,按照程序中写的实际情况回答就行的了。
只要遵循保密原则就OK。
最简单的无非把事情都推给医院:说门诊患者报告单送至服务台门诊报告发放处,由那里的医生确认身份后发放。
(具体她们是怎么确认、确不确认这已经不关我们的事了)。
若写病人到科室领报告也行,只是“我们怎么确认病人身份”要在程序中体现:询问相关信息、根据收费单或病历唯一条形码(若医院采用计算机网络系统)确认等等。
四.现有你科室同事,拿了一份血清标本给你,说:“这是我一个熟人的标本,他要做HCV RNA检测,刚好他还做生化和免疫检测,我从生化标本分了一些出来,给你做HCV RNA。
”你觉得这样行吗?为什么?(该题主要是考实验室人员对有关标本的收集程序是否清楚并遵守)回答思路:问到了“为什么?”表示具体考到细节了。
按照我们的收集程序,做PCR 尤其是RNA项目需要独立取血,不能从其它检测的标本中分出一些来做。
而且对RNA标本的采集、保存、运输都有严格的要求。
一般验收组会对这类问题加以引申。
问你每天标本在哪儿采集?采血的人员有否经过专门培训?采集的标本如何保存?还可以顺便问你结果发放后的标本如何保存、保存在哪儿?保存多久?甚至要你把这多久多久前的标本拿出来给他们看。
五.某一天,你在做HBV DNA荧光定量PCR检测(方法的定量测定范围为103~107拷贝数/ml)中,发现有1份标本的测定Ct值超出方法的测定上限,此时你怎么办?对于没有特异扩增曲线的标本你又怎么报告结果?回答思路:此为具体问题:题目已经假设了方法的定量测定范围为103~107拷贝数/ml,我们就按照这个假设来考虑。
先看是否为特异扩增的曲线(即看曲线是否为标准的S形曲线),若为标准S形曲线表示的确为阳性标本,Ct值超出检测上限,表示未知标本HBV DNA浓度过大,不在检测线性范围内,应该进行浓度梯度稀释(1/10、1/100、1/1000……),重做实验,看哪个梯度处于线性范围内,得到原始浓度乘以相应稀释倍数即得。
若不是特异扩增的曲线(也就是常见的那种前面翘、与阈值线有交点的阴性曲线,计算机不会具体分析,见有交点就给Ct值,而且Ct值还很小,小于测定上限的Cycle数),按阴性报。
六.在PCR检测的核酸提取离心中,如发现有一管离心管出现破裂,此时你怎么办?(该题是考实验室人员对于其制定的实验室及仪器设备消毒清洁程序是否知道并遵守)回答思路:按照离心机的消毒清洁程序:必须先停止实验,将破裂管密封放入生物垃圾桶,再用75%酒精擦拭离心室消毒,用移动紫外灯照射30~60分钟后才能开始实验。