_谷氨酰转肽酶及其应用
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谷氨酰转肽酶谷氨酰氨基转移酶谷氨酰转肽酶和谷氨酰氨基转移酶是两种常见的酶类,在生物体内发挥着重要的作用。
本文将从定义、功能、结构和应用等方面详细介绍这两种酶类。
一、谷氨酰转肽酶1.定义:谷氨酰转肽酶(glutamate pyruvate transaminase),简称GPT,也称为丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase),简称ALT,是一种在细胞内自然存在的酶类,其催化作用可以使谷氨酸和丙酮酸相互转化。
2.功能:GPT在人体中分布广泛,主要存在于肝脏、肌肉、心脏等部位。
它是肝功能的指标之一,主要在肝细胞受损时会向血液中释放,因此可以用于检查肝功能和肝脏疾病的诊断。
此外,在体内还有调节碳水化合物、蛋白质和脂肪代谢等一系列作用。
3.结构:GPT是一种由两个相似亚单位组成的蛋白质,每个亚单位大约有500个氨基酸残基。
该酶类含有一个各含有一个互补的催化中心,由L-丙氨酸和谷氨酰酸组成。
4.应用:GPT可以广泛地用于肝功能的生化指标测定,为临床体液学和肝病诊断提供了重要的辅助诊断手段。
不过,由于其产生的唾液和血蔗糖的影响,测量结果需要进行一定的修正。
二、谷氨酰氨基转移酶1.定义:谷氨酰氨基转移酶(glutamate alanine transaminase),简称GOT,也称为天门冬氨基转移酶(aspartate aminotransferase),简称AST。
其作用是介导谷氨酸与丙酮酸之间的转化,将谷氨酸转化为α-酮戊二酸,同时将天门冬氨酸转化为丙酮酸。
2.功能:GOT与GPT类似,广泛存在于人体内。
由于其在肌肉、心脏、肝脏等组织中均有分布,因此也可以用于肝功能和心肌损伤的检测。
同时,还可以发挥调节与代谢等多种作用。
3.结构:GOT也是一种由两个相似的亚单位组成的蛋白质,每个亚单位也有大约500个氨基酸残基。
其分子上含有较为特殊的金属离子,它能够介导催化反应的进行。
4.应用:GOT可以用于检测肝脏和心肌功能损伤、诊断心肌梗死、急性胰腺炎等疾病。
y谷氨酰基转移酶谷氨酰基转移酶(Y-Glutamyltransferase,GGT)是一种重要的酶类,具有广泛的生理功能和临床意义。
GGT主要存在于细胞膜上,特别是胆道上皮细胞,肝细胞、肾小管上皮细胞、胆小管上皮细胞和胰腺细胞等。
GGT在生物体内参与谷氨酰肽代谢途径中重要的转移反应,将谷氨酰残基从一个分子转移到另一个分子上,从而调节和控制多种生物活性分子的代谢。
GGT是一种包含两个亚基的酶,其中一个亚基被称为齐墩果酸(Glu)亚基,另一个亚基被称为甘氨酰(Gly)亚基。
GGT的酶活性与这两个亚基之间的相互作用密切相关。
GGT可催化谷氨酰肽和其他类似物的水解反应,将谷氨酰残基转移到一个另外的分子上。
这一转移反应在多种生物过程中都起到了重要的调节作用,例如胆汁酸合成、谷胱甘肽(GSH)新生以及一些药物的代谢等。
GGT在肝脏功能评估、诊断肝疾病以及预测患者预后方面具有重要的临床意义。
在正常情况下,GGT的表达水平较低,但在肝脏和胆道疾病中,GGT的表达水平明显升高。
临床研究表明,GGT的表达水平与肝功能的损害程度、肝病的严重程度以及疾病的预后密切相关。
因此,GGT的检测成为评价肝脏功能和诊断肝疾病的重要指标之一。
除了肝脏和胆道疾病外,GGT的表达水平也受到其他疾病的影响。
例如,心血管疾病、代谢综合征、骨骼肌损伤等都可以导致GGT的升高。
因此,在临床实践中,GGT的检测不仅可以用作肝脏疾病的辅助诊断指标,还可以作为一种全身疾病的预测指标。
在临床实验室中,GGT的检测主要通过测定其酶活性来进行。
一般常用的方法是使用底物法,即将谷氨酰基双甘氨酸(Y-Glutamyl-p-nitroanilide, GGT-GPNA)作为底物,GGT与其发生反应,生成氨基苯甲酸。
随后通过测定氨基苯甲酸的吸光度来确定GGT的活性。
此外,还有其他方法可以用于GGT的检测,如电化学法、荧光法和免疫学方法等,这些方法在不同的实验条件下可以提供更准确和稳定的结果。
新型药物载体聚谷氨酸的合成及其应用[关键词]:谷氨酸,生物降解,制备,药物载体健康网讯:γ-聚谷氨酸(Polyglutamic acid,PGA)是由L-谷氧酸(L-Glu)、D-谷氨酸(D-Glu)通过肽键结合形成的一种多肽分子,在自然界或人体内能生物降解成内源性物质Glu,不易产生积蓄和毒副作用。
它的分子链上具有活性较高的侧链羧基(-COOH),易于和一些药物结合生成稳定的复合物,是一类理想的体内可生物降解的医药用高分子材料。
本文综述了PGA的制备方法及其作为药物载体和医用粘合剂的应用。
PGA的制备目前PGA的生产技术主要有化学合成法、提取法、生物聚合法。
化学合成法传统的肽合成法传统的肽合成法是将氨基酸逐个连接形成多肽,这个过程一般包括基团保护、反应物活化、偶联和脱保护。
化学合成法是肽类合成的重要方法,但合成路线长、副产物多、收率低,尤其是含20个氨基酸以上的纯多肽合成。
二聚体缩聚由L-Glu,D-Glu及消旋体(DL-Glu)反应生成α-甲基谷氨酸,后者凝聚成谷氨酸二聚体后,再和浓缩剂1-(3-二甲氨丙基)3-乙基碳亚二胺盐酸盐及1-羟苯基三吡咯(1-hy droxy benzotriazole)水合物在N,N-二甲基甲酰胺中发生凝聚,获得产率为44%~91%、相对分子质量为 5000~20000的聚谷氨酸甲基酯,经碱性水解变成γ-PGAo化学合成法难度很大,没有工业应用价值。
取取法早期,日本生产PGA大多采用提取法,用乙醇将纳豆(一种日本的传统食品)中的PGA 分离提取出来。
由于纳豆中所含的PGA浓度甚微,且有波动,因此,提取工艺十分复杂,生产成本甚高,同样难以大规模生产。
微生物的生物素合法自从1942年Bovar nick等发现芽孢杆菌属微生物能在培养基中蓄积γ- PGA以来,利用微生物生物聚合生成γ-PGA的研究十分活跃。
地衣杆菌发酵制备地衣杆菌ATCC9945a 是能够生产γ-PGA的细菌族的一种。
作者单位:河北省沧州卫生学校(侯振江 张宗英) 河北省石家庄市郊区卫生防疫站(崔建军)GGT 及其同工酶检测的临床应用侯振江 张宗英 崔建军γ-谷氨酰转移酶(GGT ,EC2131212)又称γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT ),是一种广泛分布于哺乳动物组织中的质膜结合糖蛋白。
自1950年Hanes 等首先发现以来,众多学者不断进行深入的研究,其临床价值倍受关注。
本文就GGT 及其临床应用概述如下。
1 GGT 及其同工酶的一般特性111 GGT 的一般特性 GGT 是γ-谷氨酰循环中的关键酶,常见于具有分泌和吸收功能的上皮细胞膜上,广泛存在于人体的各种组织和体液中。
以肾脏含量最高,肝和胰次之,小肠、心肌和其它组织中较低。
GGT 能催化谷胱甘肽裂解为谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸,也能把γ-谷氨酰基转移到氨基酸受体上,并在细胞内摄取氨基酸过程中起重要作用。
在体内参与谷胱甘肽的合成与分解代谢,氨基酸的转运和解毒功能。
GGT 由两个不同的亚基组成,具有亲水性的轻链有催化活性,具有疏水性的重链则与细胞膜紧密结合,以膜结合形式转变为可溶性GGT 。
肝组织中GGT 以可溶性和膜结合两种形式存在,并以膜结合形式为主。
血清中酶活性主要来源肝胆系统。
由于前列腺中该酶含量十分丰富,并能释放入血,故正常男性SGGT高于女性〔1〕。
112 GGT 同工酶的一般特性 GGT 同工酶的形成与其糖链上唾液酸的含量、种类不同有关。
不同组织的GGT 同工酶有差异,但主要酶学性质,如Km 值、最适p H 值、热稳定性及GSH 竞争性抑制方面都近似。
主要区别在于电泳表现和与植物血凝素(ConA )结合的差别,即和酶蛋白结合的糖链上唾液酸的含量不同。
聚离子和免疫沉淀法证明,低分子量属亲水型,中分子量为GGT 和HDL 组成的复合物,高分子量是由疏水型与脂类、脂蛋白X 及其它膜成分组成的复合物。
组织中GGT 以膜结合型(疏水型)和可溶性(亲水型)两种形式存在。
r-谷胺酰转肽酶(GGT)测定的标准操作程序【应用范围】体外检测血清、血浆GGT浓度测定。
【适用仪器】Olympus AU-2700全自动生化分析仪。
【程序改变】严格遵循仪器、试剂说明书及校准品使用说明。
【方法学原理】GGT催化谷氨酰基转移给受体的反应。
本法以L-γ-谷氨酰-3-羧基-4-苯基重氮酸为底物,将底物上的谷氨酰基转移至受体双甘肽,生成5-氨基-2-硝基苯甲酸盐。
在405 nm进行吸光度检测,吸光度升高的速率与标本中GGT活力成正比。
GGTL-γ-谷氨酰-3-羧基-4-苯基重氮酸 + 双甘肽5-氨基-2-硝基苯甲酸盐 + L-γ-谷氨酰双甘肽【试剂】1.在测定时各组分和浓度试剂1(R1)双甘氨肽试剂2(R2)L-γ-谷氨酰-3-羧基-4-苯基重氮酸试剂稳定性与贮存试剂避光保存于2-8℃,若无污染,可稳定至失效期。
试剂不可冰冻。
2.校准品:DiaSys TruCal U。
3. 质控品:Randox Assayed Multiseral Level 1 and Level 2。
【标本收集与准备】1.血清或血浆标本根据实验室标准采集程序采集标本,适用标本为血清或肝素抗凝血浆(肝素钠抗凝结果高0.5mmol/l),不可从正在静脉滴注手臂上采血,上机标本不能有凝块,样品采集后2天内离心标本,分离血清,血清或血浆标本室温保存4天,冷藏7天,冷冻保存6个月。
血清或血浆钠结果高于线性不建议稀释。
【操作步骤】1.仪器测定参数设置Test Name:Sample: Volume L LL LLSec. ODMethod: First LLast LReaction Slope:Measuring Last LMeasuring LastLinearity ANo-Lag-Time:Period2.试剂准备:将准备好的试剂置仪器试剂盘中(8℃)。
3.校准校准物的准备:将校准物从冰箱取出,冻干校准物按说明书加入蒸馏水复溶,轻轻颠倒混匀3次,不可用力震摇,室温放置30分钟至完全溶解;液体校准物从冰箱取出,室温放置15分钟以平衡至室温。
γ-谷氨酰转移酶,γ-谷氨酰转肽酶
γ-谷氨酰转移酶(gamma-glutamyltransferase, GGT)和γ-谷氨酰转肽酶(gamma-glutamyl transpeptidase, GGTP)是两种不同的酶。
GGT是一种酶,主要存在于肝脏细胞和胆道上皮细胞中,也存在于其他组织中,如肾脏、胰腺和胆囊等。
GGT参与肝功能代谢过程中的氨基酸转移和胆汁酸代谢,并参与细胞对外源物质的摄取和排泄。
GGT的测定可以用于评估肝功能和胆道疾病。
GGTP也是一种酶,主要存在于细胞膜上,包括肝脏、胆道系统、肾脏、脾脏、肺脏和胰腺等组织中。
GGTP广泛存在于许多细胞类型中,包括肝脏细胞和胆道上皮细胞。
其主要功能是参与谷氨酰肽的水解反应,转移谷氨酰残基。
GGTP的测定可以用于评估肝功能和胆道疾病,尤其在酒精性肝病、胆汁淤积和某些药物引起的肝损伤等方面具有重要价值。
GGT和GGTP都是与肝功能和胆道疾病相关的酶,测定这两种酶的活性可以辅助诊断和监测这些疾病的进展和治疗效果。
γ-谷氨酰转肽酶在肝脏疾病中的临床意义和新的应用价值作者:10级5班刘畅【摘要】γ-谷氨酰转肽酶简称γ-GT或GGT。
它存在于肾、胰、肝、脾、肠、脑、肺、骨骼肌和心肌等组织中,在肝内主要存在于肝细胞浆和肝内胆管上皮中。
GGT对各种肝胆疾病均有一定的临床价值。
在大多数肝胆疾病中,其活力均升高,但在不同的肝胆疾病中,其升高的程度与其他血清酶活性的相对比例不尽相同。
γ-谷氨酰转肽酶(GGT)是一种方便的、高敏感的、低花费、常用的检测酶类之一。
它作为肝脏功能异常和酗酒的标志已广泛的被临床接受,主要用于诊断肝胆疾病。
【关键词】γ-谷氨酰转肽酶(GGT),临床意义,肝脏疾病,酒精肝【前言】人体各组织均含有GGT,尤以分泌或吸收能力强的富含蛋白质的组织中最多,如胆管、肾脏、胰腺、附睾等。
人体各器官中GGT含量按下列顺序排列:肾、前列腺、胰、肝、盲肠和脑。
而在肾脏、胰腺和肝脏中,此酶的含量之比约为100:8:4(1)。
肝脏含酶丰富,酶参与肝脏复杂的代谢功能,由于肝脏病理改变,使酶含量改变,故反映在血清中酶的浓度也有变化,根据血清酶活性的增高或降低,可判断肝脏病变的性质和程度。
人血清中的γ谷氨酰转肽酶主要来自肝脏,因此具有较强的特异性。
在肝功能检查中,经常会出现γ谷氨酰转肽酶偏高的现象,为探讨引起γ谷氨酰转肽酶偏高的原因,和对肝功能的影响。
而查阅国内外各相关文献,现对γ-谷氨酰转肽酶肝脏疾病中的检测意义和临床诊断中的应用价值进行综述如下。
【正文】1.GGT检测肝功能的原理Y-谷氨酰转肽酶是在氨基酸吸收中参与谷氨酰循环的一个重要酶。
GGT酶活力变化在男性和女性方面有着显著的差别,男性GGT酶活力显著高于女性(p<0.05)。
Y-谷氨酰转肽酶是一种糖蛋白性的膜腱酶在肝内主要存在于肝细胞浆和肝内胆管上皮中.肝脏中的GGT主要分布在肝细胞毛细胆管内侧和整个胆管系统,因此GGT合成增多或胆管系统病变,胆汁排泄受阻时均可引起血清GGT升高。
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