湛江沿海五种石斑鱼线粒体DNA的RFLP分析.pdf
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基于线粒体COⅠ基因序列的DNA条形码在中国南海绯鲤属鱼类鉴定中的应用宫亚运,章群,曹艳,吕金磊,杨喜书【摘要】为探讨COⅠ基因作为DNA条形码对绯鲤属(Upeneus)鱼类鉴定的有效性,明确物种的分类地位,通过COⅠ基因5'端652 bp序列研究中国南海绯鲤属的黑斑绯鲤(Upeneus tragula)、马六甲绯鲤(Upeneus moluccensis)、纵带绯鲤(Upeneus subvittatus)、黄带绯鲤(Upeneus sulphureus)、吕宋绯鲤(Upeneus luzonius)以及条尾绯鲤(Upeneus bensasi)6个种56 ind标本的标准DNA条形码序列的种内种间遗传距离,并构建分子系统树。
研究表明:所测样品的碱基组成为T:29.2%,C:29.6%,A:21.4%,G:19.8%,A+T含量(50.6%)略高于G+C含量(49.4%),转换/颠换率为3.08。
6种绯鲤属鱼类组成5个自展支持率为100%的分支,其中黑斑绯鲤和马六甲绯鲤混杂分布于同一分支上,其余4种绯鲤独自成支;分支间平均遗传距离10.10%(8.60%~12.40%),是分支内平均遗传距离0.18%(0.00%~0.30%)的56倍。
纵带绯鲤、黄带绯鲤、吕宋绯鲤、条尾绯鲤种间平均遗传距离为10.70%(8.80%~12.40%),约为这4个种种内平均遗传距离0.125%(0.00%~0.20%)的85倍,种间遗传距离大于种内遗传距离的10倍以上,确定了它们的物种有效性。
黑斑绯鲤和马六甲绯鲤种内遗传距离分别为0.40%和0.20%,与其它4种绯鲤为同一水平;但种间遗传距离仅为0.30%,属于一般物种的种内遗传距离范围,因此推测二者或为同一物种,但还需从形态学和基因组序列分析等方面加以进一步确证,其是否受到种间杂交和近期辐射进化的影响也需要今后更多的研究。
标准的DNA条形码虽然能够有效地区分中国南海绯鲤属鱼类中的纵带绯鲤、黄带绯鲤、吕宋绯鲤和条尾绯鲤,但DNA条形码对黑斑绯鲤和马六甲绯鲤的鉴定与形态学的鉴定结果不一致,表明在物种鉴定时,母系遗传的线粒体COⅠ基因有时需要结合其它核基因分子标记或生态调查资料加以辅助。
基于线粒体CO I序列的中国沿海蓝点马鲛遗传多样性曹艳;章群;宫亚运;吕金磊;杨喜书【期刊名称】《海洋渔业》【年(卷),期】2015(000)006【摘要】Genetic diversity is essential to the long-term survival of any species to changing environmental conditions,and can provide insights into tempo-spatial pattern of germplasm diversity of wild organisms,thus studies on genetic diversity of fishes play an important role in the conservation and sustainable exploitation of fishery resources.Japanese Spanish mackerel Scomberomorus niphonius,a member of Scombridae family and Scomberomorus genus,is a pelagic carnivorous fish widely distributed in the coastal waters of China,Korean peninsula and Japan of the northwestern Pacific,it is reported to undertake long-distance migrations during spawn and overwintering.It is a commercially important species in the Northwestern Pacific countries with the main catch in China,despite some recent decline in catches,the yield is still considerably high and relatively stable,especially compared with the sharply decreased catch of other economic fishes.To effectively manage and exploit the valuable fish resources sustainably,more information of its genetic background is needed.In the present study,712 bp of the mitochondrial cytochrome oxidase subunit I in S.niphonius collected from six sites in the coastal waters of China Sea (including the Bohai Sea,the YellowSea,the East China Sea and the South China Sea ),combined with nine sequences downloaded from GenBank,were used to analyze the genetic diversity,population structure and demographic history.A total of 21 polymorphic sites,seven parsimony informative sites and 17 haplotypes were detected in 85 individuals.In addition,the content of T, C,A and G was 29.5%,29.2%,23.9% and 17.4%,respectively.Relatively high levels of haplotype diversit y (Hd =0.702 ±0.044)and low levels of nucleotide diversity (π=0.002 8 ±0.000 2)for all sites as a whole were found,of which genetic diversity of the Bohai Sea,the Yellow Sea and the East China Sea populations were obviously higher (Hd:0.695 -0.816,π:0.002 7-0.003 3)than those in the South China Sea (Hd =0.442 ±0.145,π=0.001 7 ±0.0006 ).Apart from five haplotypes shared by various populations,the remaining ones were unique to each population.Two shallow clades could be found in the Kimura 2-parameter based neighbor-joining tree,and 17 haplotypes from various locations in parsimony network were intertwined together,suggesting the absence of obvious geographicalstructure.Analysis of molecular variance of three different hierarchical levels detected no significant differentiation in all combinations of sampling sites and the resultant main sources of variation were within population variation (101.52% -106.56%).Pairwise fixation indexes Fst value among six populations ranged from -0.138 to 0.040 (P>0.05),and gene flow ranged from -81.145 to 146.559,indicating frequent gene flow among six sites,and no significant genetic differentiation was found in the coastal areas of China.Wide distribution, long-distance migrations,schoolingbehavior and strong dispersal potential of pelagic larvae of S.niphonius may account for the lack of genetic structure.Molecular variance (76.36% variation between clades), pairwise Fst(0.76,P=0)and gene flow(0.158)analyses revealed significant differentiation between two clades.Thus the lack of geographic structure in coastal waters of China may reflect a relatively recent range expansion in late Pleistocene era,a mixture of two clades and the insufficient time to approach migration-drift equilibrium.In CladeA,the significant negative values of neutral test (Tajima’s D=-1 .032,P>0.05;Fu’s Fs=-1.961,P=0.05),the Ramos-Onsins &Rozas’s R2 value was 0.098 (P=0.05),and the unimodal mismatch distribution all suggested a recent population expansion in this clade about 39,600-1 18, 700 years ago,and the similar result also revealed in CladeB (Tajima’s D=-2.134,P=0.003;Fu’s Fs=-5.840,P=0.0),about 22,700-68,100 years ago,due to the effects of glacial and interglacial cycle and the changed living space caused by fluctuation of sea level.While significant recent population expansion has occurred in CladeA and CladeB,no significant population expansion was found when all populations were analyzed as a whole,indicating that the mixture of two clades may have caused multimodal distribution presented in mismatch distribution analysis.S.niphonius in the coastal waters of China had experienced population expansion in the late Pleistocene era,their genetic diversity was relatively poor,and no significant genetic differentiation has been found among sampling sites.The genetic diversity of S.niphonius populations in the Bohai Sea,the Yellow Sea and the East China Sea was much higher thanthose in the South China Sea, and should be protected in priority.As there were some differences between different mtDNA molecular markers and morphological characteristics in determining population structure ofS.niphonius,for better protection and sustainable exploitation of wild resources of this species, larger sample size with more geographic coverage based on the same nuclear and mtDNA molecular markers,such as microsatellite,Single Nucleotide Polymorphisms, mtDNA control region etc., and combined with the physiological and morphological features are needed for a more comprehensive understanding of the genetic background of S. niphonius in the coastal waters of China.%为了解中国沿海蓝点马鲛(Scomberomorus niphonius)的遗传背景以更好地保护和开发利用种质资源,对分布于渤海、黄海、东海和南海海域的6个群体76 ind蓝点马鲛线粒体COI基因712 bp序列进行了测定,并结合GenBank中下载的9条南海蓝点马鲛序列,分析其遗传多样性、种群结构和历史动态。
应用PCR-RFLP技术鉴别区分中国沿海四种主要养殖扇贝王师;包振民;张玲玲;李宁;战爱斌;郭文波;汪小龙;胡景杰【期刊名称】《食品科学》【年(卷),期】2006(027)007【摘要】扇贝的物种鉴定,通常主要是依据形态学标准来进行.然而,当用于形态辨别的部分被去除时,对扇贝的物种鉴定工作则显得十分困难.本研究利用对扇贝核糖体ITS的PCR-RFLP分析,首次从分子水平上鉴定区分了中国沿海四种主要的养殖扇贝(栉孔扇贝、华贵栉孔扇贝、虾夷扇贝及海湾扇贝).根据四种扇贝ITS的测序结果,选取三种内切酶(SmaⅠ、MseⅠ及TaqⅠ)应用于PCR-RFLP分析.根据三种内切酶产生的酶切图谱,四种扇贝可被有效鉴别区分.酶切结果在四种扇贝各群体间的稳定性,证明了利用该技术对四种扇贝进行物种鉴定的可行性.本研究同时成功地对扇贝加工品-干贝进行了物种鉴定,证明了该技术在实践中应用的可行性.【总页数】5页(P210-214)【作者】王师;包振民;张玲玲;李宁;战爱斌;郭文波;汪小龙;胡景杰【作者单位】中国海洋大学海洋遗传与育种实验室,山东,青岛,266003;中国海洋大学海洋遗传与育种实验室,山东,青岛,266003;中国海洋大学海洋遗传与育种实验室,山东,青岛,266003;中国海洋大学海洋遗传与育种实验室,山东,青岛,266003;中国海洋大学海洋遗传与育种实验室,山东,青岛,266003;教育部海水养殖重点实验室,山东,青岛,266003;中国海洋大学海洋遗传与育种实验室,山东,青岛,266003;中国海洋大学海洋遗传与育种实验室,山东,青岛,266003【正文语种】中文【中图分类】TS207.3;Q173【相关文献】1.贝类养殖技术之六海湾扇贝大面积养殖主要技术措施 [J], 宋希和2.中国沿海帘蛤科贝类主要经济种育苗与养殖技术研究进展 [J], 刘相全;方建光;包振民;王如才3.中国沿海主要养殖贝类四种原虫病流行病学的调查研究 [J], 谢丽基;谢芝勋;庞耀珊;刘加波;邓显文;谢志勤;范晴;罗思思4.应用PCR-RFLP鉴别印度的主要传疟媒介库态按蚊复合体 [J], 樊勇5.基于GIS鉴别日本扇贝(虾夷扇贝)养殖场址 [J],因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
两种杂交石斑鱼子一代及其亲本的线粒体COⅠ基因遗传变异分析周翰林;杨森;高川;张磊;张海发;李水生;张勇;蒙子宁;刘晓春;林浩然【摘要】对两种杂交石斑鱼子一代(青龙斑和虎龙斑)及其亲本(斜带石斑鱼、棕点石斑鱼和鞍带石斑鱼)的线粒体DNA细胞色素氧化酶Ⅰ(COⅠ)基因序列进行了测序分析。
在15个样本中,同源序列片段(1551bp)中共检测到9个单倍型和249个核苷酸多态位点。
序列差异分析和遗传距离比较结果显示,核苷酸序列同源性在88.1%-100%之间,无明显遗传分化。
虎龙斑的2个COⅠ基因单倍型与母本棕点石斑鱼单倍型的同源性为99%和100%,而与父本鞍带石斑鱼的同源性均为88.1%。
青龙斑的2个单倍型与母本斜带石斑鱼的3个单倍型的同源性在99.7%-100%之间,而与父本鞍带石斑鱼的同源性分别为89.3%和89.4%,结果表明两种杂交子一代在线粒体DNACOⅠ基因上严格遵循母性遗传规律。
%In order to identify the phylogenetic relationship among two grouper hybrids ( Qinglong grouper and Hulong grouper) and their parents ( Epinephelus coioides 9, Epinephelus coioides ♀ and E. lanceolatus ♂), their mitochondrial cytochrome oxidase subunit I (CO I )gene fragments were amplified by PCR, and the 1551 base-pair nucleotide sequences of CO I were examined. The results show that all 15 sequences are grouped into 9 haplotypes and 249 nucleotide polymorphic loci in CO I gene fragments. Sequence divergences and genetic distance analysis showed all the groupers shared 88.1% to 100% similarities in nucleotide sequence, indicating there is no significant genetic difference among these groupers. The two CO I haplotypes of Hulong grouper showed 99% and100% similarities with the haplotype of the female parent E. fuscoguttatus, respectively, but only 88.1% similarity with the male parent E. lanceolatus. The two CO I haplotypes in Qinglong grouper had similarities of 99.7% to 100% with the three haplotypes of the female parent E. coioides, and only of 89.3% and 89.4% with the male parent E. lanceolatus. The results indicated that the two grouper hybrids were inherited from their maternal parent in mitochondrial CO I genes.【期刊名称】《热带生物学报》【年(卷),期】2012(003)001【总页数】10页(P1-10)【关键词】斜带石斑鱼;鞍带石斑鱼;棕点石斑鱼;杂交子代;COⅠ;遗传变异【作者】周翰林;杨森;高川;张磊;张海发;李水生;张勇;蒙子宁;刘晓春;林浩然【作者单位】中山大学生命科学学院,广东广州510275;中山大学生命科学学院,广东广州510275;中山大学生命科学学院,广东广州510275;广东省大亚湾水产试验中心,广东惠州516081;广东省大亚湾水产试验中心,广东惠州516081;中山大学生命科学学院,广东广州510275;中山大学生命科学学院,广东广州510275;中山大学生命科学学院,广东广州510275;中山大学生命科学学院,广东广州510275;中山大学生命科学学院,广东广州510275/海南大学海洋学院,海南海口570228【正文语种】中文【中图分类】Q321斜带石斑鱼(Epinepheluscoioides)、鞍带石斑鱼(Epinepheluslanceolatus)和棕点石斑鱼(Epinephelusfuscoguttatus)都隶属于鲈形目(Perciformes)、鮨科(Serranidae)、石斑鱼属(Epinephelus),在我国主要分布于台湾海峡及南海海域[1-5]。
海水养殖石斑鱼的线粒体基因组测序与分析石斑鱼(Epinephelus coioides)作为一种重要的经济鱼类,在海水养殖业中具有广泛的应用前景。
了解石斑鱼的遗传特征对于改良品种、提高养殖效益以及保护自然资源都具有重要意义。
线粒体基因组是研究鱼类遗传变异和进化关系的重要工具。
本文将重点介绍海水养殖石斑鱼的线粒体基因组测序与分析,为石斑鱼遗传研究提供参考。
线粒体基因组是细胞中的一个独立进化的遗传系统,具有高度保守性和多样性。
它由几个蛋白编码基因、转运RNA基因和核酸RNA基因组成。
线粒体基因组的测序与分析可以提供关于个体间的亲缘关系、物种起源和进化关系的重要信息。
在进行石斑鱼线粒体基因组测序前,需要提取石斑鱼的线粒体DNA样品。
可以选择鳃、肌肉、鳍、眼球等组织进行提取。
提取的DNA样品可以通过PCR扩增获得所需长度的线粒体基因组。
然后,使用高通量测序技术对扩增的线粒体基因组进行测序。
线粒体基因组数据的测序分析包括序列的拼接、基因注释、遗传多样性和进化分析等。
首先,将测序得到的片段序列拼接成完整的线粒体基因组。
接下来,使用基因注释软件对拼接序列进行注释,识别编码基因和非编码区域。
然后,可以计算线粒体基因组的总碱基对数、GC含量等测序相关信息,评估测序质量。
此外,还可以进行基因组间的比较分析,研究不同个体之间的遗传差异和多样性。
通过构建系统进化树,可以探究石斑鱼的亲缘关系和物种起源。
石斑鱼线粒体基因组测序与分析可以揭示石斑鱼的遗传特征、进化关系以及与其他物种的亲缘关系。
基于线粒体基因组的研究结果,可以为石斑鱼的遗传育种提供依据。
通过遗传多样性分析,可以评估不同种源个体的遗传差异,为养殖策略的优化提供参考。
此外,通过比较不同物种的线粒体基因组,可以进一步揭示鱼类的进化历程和系统分类学。
尽管线粒体基因组测序和分析在石斑鱼遗传研究中发挥着巨大的作用,但还有一些需要注意的问题。
首先,测序时需要选择适当的测序策略和测序深度,以确保获得具有高质量的线粒体基因组数据。
线粒体DNA的PCR-RFLP分型法医学应用研究方慧;杨庆恩;胡家伟【期刊名称】《中国法医学杂志》【年(卷),期】2005(020)002【摘要】目的建立PCR-RFLP技术检测mtDNA序列多态性的方法,调查武汉汉族人群mtDNA HV-Ⅰ区段限制性片段长度多态性,并对PCR-RFLP技术在毛干、指甲等生物检材的个体识别案件中的应用进行评估.方法应用nest-PCR技术和RFLP 技术建立检测mtDNA HV-Ⅰ区段限制性片段长度多态性的方法,调查150例武汉汉族人群无关个体,同时对实际案件中的毛干、陈旧骨骼、水浸血痕等不同种类、不同保存时间和条件的生物检材进行检测.结果RsaⅠ酶切检出4种表型,频率分别为0.760、0.167、0.066和0.007,遗传差异度(GD值)为0.393,随机匹配概率(P 值)为0.607.应用PCR-RFLP对毛干、20年陈旧骨骼、水浸血痕进行了检测以及在个体识别及母子关系亲子鉴定案例中应用.结论用PCR-RFLP法检测mtDNA序列多态性在法医物证检验中具有应用价值.【总页数】3页(P74-76)【作者】方慧;杨庆恩;胡家伟【作者单位】武汉市公安局,湖北,武汉,430019;华中科技大学同济医学院,湖北,武汉,430030;武汉市公安局,湖北,武汉,430019【正文语种】中文【中图分类】D919【相关文献】1.PCR-RFLP分析线粒体DNA细胞色素b基因用于法医学种属鉴定 [J], 冯强;陈浩;周斌;王晓娜;李楷;张博;张林2.ABO基因荧光标记复合AS-PCR分型的法医学应用研究 [J], 贾东涛;俞卫东;王林生3.同步分型16个STR位点及法医学应用研究 [J], 杨庆恩4.人线粒体DNA序列分析在法医学中的应用研究及其进展 [J], 钱海洪;胡义德5.岩牡蛎和长牡蛎的线粒体DNA PCR-RFLP快速鉴定 [J], 刘凯凯;李琪因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
湛江沿海五种石斑鱼线粒体DNA的RFLP分析
杨少闻;刘楚吾
【期刊名称】《水产学报》
【年(卷),期】2006(30)5
【摘要】石斑鱼隶属于鲈形目(Perciformes)、鮨科(Serranidae)、石斑鱼
亚科(Epinephelinae)、石斑鱼属(Epinephelus Bloch),为分布于热带和亚
热带海域的大型鱼类,少数可见于温带海域。
我国有36种,大多产于南海、东海,为名贵食用鱼类。
由于石斑鱼的市场经济价值高,致使一些地区对其进行过度捕捞;同时,近海海洋生态环境止在遭到不同程度的破坏,石斑鱼的遗传多样件正在遭受威胁,现已有将近44%被列为严重遭受威胁的种类。
【总页数】6页(P707-712)
【作者】杨少闻;刘楚吾
【作者单位】广东海洋大学水产学院,广东,湛江,524025;广东海洋大学水产学院,广东,湛江,524025
【正文语种】中文
【中图分类】S917
【相关文献】
1.4个猪种线粒体DNA D-loop区PCR-RFLP分析 [J], 张冬杰;杨国伟;刘娣
2.上海地区实验用兔线粒体DNA-RFLP分析 [J], 冯洁;谢建云;胡建华;高诚
3.南方鲇和鲇线粒体DNA 16SrRNA基因片段的RFLP对比分析 [J], 王庆容;王乾
兴;李学英;王大忠
4.东昌湖野生鲤的线粒体DNA RFLP分析 [J], 闫华超;李桂兰;张永忠
5.长江下游铜鱼线粒体DNA(mtDNA)遗传多样性的PCR-RFLP分析 [J], 张敏莹;段金荣;徐东坡;刘凯;施炜纲
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第25卷第2期 2018年4月海南热带海洋学院学报 Journal of Hainan Tropical Ocean University Vol. 25 No. 2 Apr. 2018引用本文格式!杨宁,姜芳燕,黄海,等.五种脂肪源对点带石斑鱼生长和三种免疫指标的影响[J ].海 南热带海洋学院学报,2018,25(2):6 -12.五种脂肪源对点带石斑鱼("生长和三种免疫指标的影响杨宁%,姜芳燕2,黄海2,巫火连3(1.三亚市南繁科学技术研究院,海南三亚572000;2.海南热带海洋学院生命科学与生态学院,海南省热带海洋渔业资源保护与利用重点实验室,海南三亚572022;3.三亚市节能监察中心,海南三亚572000)摘要:为了研究不同周期、不同脂肪源对点带石斑鱼生长和免疫的影响,通过用含有玉米油、鱼油、花生油、大豆油、葵花籽油的5种脂肪源饲料投喂点带石斑鱼8周,定期检测增重率、特定生长率、饲料系数和存活率共4项生长指标;定期检测血细胞呼吸爆发性、巨噬细胞杀菌活性和血清凝集效价共3种免疫指标.结果表明,脂肪源对增重率、特定生长率、存活率的作用效果不显著(->0. 05),在饲料系数指标中,花生油最高,且与对照组差异显著(-<0. 05);在血细胞呼吸爆发性实验中,第6周,大豆油、花生油、玉米油和鱼油比对照组高,其中鱼油组效果最显著(-<0. 05);在巨噬细胞杀菌活性实验中,第4周,大豆油和花生油的提高作用显著(-<0.05);血清凝集效价实验中,第2、4、6周,鱼油表现的血清凝集效最高.综合比较,5种脂肪源只有鱼油对点带石斑鱼的生长和免疫的提高作用较好,其他脂肪源对提高石斑鱼生长和免疫力有一定的影响,但影响效果不理想.关键词:脂肪源;点带石斑鱼;生长;免疫中图分类号:S965.334 文献标识码:A 文章编号:2096 -3122(2018)02 -0006 -07DOI : 10. 13307/j. issn. 2096 - 3122.2018. 02. 02〇引言石斑鱼味道鲜美、营养丰富,越来越受到广大消费者的欢迎.由于水产品质量安全问题在中国及国际市场上受到的重视程度不断提高,应用水产动物营养学原理,通过外源脂肪源的营养调节作用,提高水产动物的生长和免疫,已成为水产健康养殖研究的主要课题之一,这为石斑鱼的健康养殖提出更高的要求.点带石斑鱼(2;&/%/* $&&/),广泛分布于我国东南沿海,属于暖水性岛礁鱼类,俗称“青斑”,隶属辐鲭鱼纲,鲈形目,鯧科,石斑鱼属[1].近年来,海南省的石斑鱼养殖发展迅速,据不完全统计,海南省石斑鱼养殖面积2014年达2085. 31公顷,2015年达2400公顷[2],2016年石斑鱼产量约8万吨,占全国总产量的8成以上[3].石斑鱼产业正在从传统的低密度养殖转为高密度、集约化、工厂化养殖的模式,伴随着海区水源的污染程度加大、点带石斑鱼品种的退化、抗病力下降、病害的危害[4_6],这些都对点带石斑鱼产业的进一步扩大增加了阻力.各种食用油不仅可以为水产养殖动物提供能量,而且富含不同种类的不饱和脂肪酸,由于n -3和n -6系列的不饱和脂肪酸是鱼类生长所必需的脂肪酸,所以有关研究饲料中添加食用油对水产养殖动物生长和免疫的影响一直受到研究者的重视.潘瑜[7]研究发现饲料中添加鱼油对鲤鱼(cy ;&* c #"&)的特定生长率和饲料系数显著优于豆油组、菜油组和亚麻油组(-<〇. 05),猪油组的效果最差.王骥腾等[8]研究收稿日期:2017 -06 -15基金项目:海南省自然科学基金项目(313110);三亚市院地科技合作项目(2015YD08)第一作者:杨宁(1980—),男,三亚市南繁科学技术研究院高级工程师,硕士,研究方向为水产养殖及动物病害防治.通信作者:黄海(1974—)$男,海南热带海洋学院生命科学与生态学院研究员,博士,研究方向为水产养殖.• 6 •杨宁等:五种脂肪源对点带石斑鱼生长和三种免疫指标的影响2018年第2期鱼油、亚麻油、大豆油和菜好油对军曹鱼$)生长的影响,发现鱼油组的增重率和特定生长率效果显著$-< 0.05 ),鱼油、亚麻油、大豆油的存活率显著高于亚麻油$-< 0. 05). ?&研究发现用豆油替代部分鱼油的饲料可使斑点叉尾鮰巨噬细胞的杀菌活性降低.zyB[10]研究发现用亚麻好油或大豆油完全替代鱼油会显著降低金头鲷$#*ra)s)头肾白细胞的杀菌活性,但是以亚麻籽油和大豆油1:1混合后完全替代鱼油,对金头鲷头肾白细胞杀菌活性没有影响.本实 验以鱼油、大豆油、花生油、葵花籽油、玉米油这5种食用油作为不饱和脂肪酸的脂肪源,添加到饲料中,探 索5种脂肪源对点带石斑鱼生长和三种免疫指标的影响,为今后石斑鱼配合饲料生产和石斑鱼免疫力研 究提供理论依据.1材料与方法1.1材料1.1.1饲料和脂肪源用于实验的颗粒饲料主要由鱼粉、酵母、面粉、酪蛋白、多维等成分组成,干物质的化学组分为粗蛋白 44%,粗脂肪15V,灰分11V,糖类20V,水分8V,其他物质2%.花生油和葵花籽油选自“金龙鱼”食用 油,大豆油和玉米油选自“福临门”食用油,鱼油选自汤臣倍健股份有限公司.试验组是将鱼油、大豆油、花 生油、玉米油和葵花油以5%比例分别与颗粒饲料混合,对照组是不混合外源脂肪酸的颗粒饲料.1.1.2试验主要设备和试剂试验设备主要有麦克奥迪实业集团有限公司的BA310-T型生物显微镜;北京六一仪器厂的WD-9403E紫外分光光度计;北京普朗新技术有限公司的DNM-9602G型酶标分析仪;SIGMA公司的3K15型高 速冷冻离心机;姜堰市荣飞器械厂的96孔V型血凝板;浙江飞达金属砂筛厂的100目国家标准检验筛.试验试剂主要有广州市齐云生物技术有限公司的肝素钠;北京索莱宝科技有限公司的Perc)、氯化硝 基四氮唑蓝、二甲基甲酰胺.1.1.3 和点带石斑鱼来源于三亚简氏海水苗种繁育农民合作社,鱼体重46 ±2.8 g,选择体表无病症、摄食正常 的健康点带石斑鱼用于试验.每个试验组和对照组设平行组一个,养殖水泥池面积约5 p2,水深1.4 p,水 温28 ~ 30 °C,海水盐度30%。