兔子血压测量实验报告
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北京师范大学生命科学学院
实验报告
课程:人体及动物生理学实验
Lab 10 Autonomic Control of Cardiovascular
System
指导教师:孙颖郁
实验人员:李元新(200911202909)
王红霞(200911202910)
郑蕾(200911202953)
王鑫(0810200010)
实验日期:2011年05月23日
一、摘要:
通过刺激兔子的交感神经和副交感神经,观察其对心血管活动的影响。
By stimulating the rabbit sympathetic nerve and parasympathetic nerve, observe the influence of cardiovascular events.
二、实验目的:
分析交感神经和副交感神经对心血管活动的影响。
三、实验原理:
在正常生理情况下,人和高等动物的动脉血压是相对稳定的。动脉血压的相对恒定对于保持合组织、器官正常的血液供应和物质代谢极为重要,动脉血压的剧烈变化会显著影响各组织、器官的正常活动。因而,动脉血压是心血管功能活动的综合指标。动脉血压的这种相对稳定时是通过神经和体液因素的调节而实现的,其中以颈动脉窦–主动脉弓压力感受性反射尤为重要。此反射可以是升高的血压下降,有可使降低的血压升高,故有血压缓冲反射之称谓。此外,相关的很多神经递质同样也在动脉压资助调节中扮演着重要的角色。因而通过改变神经、体液因素或施加药物,观察动脉血压的变化,可以间接反映各种因素对心血管功能的自主性调节。
四、实验材料:
1、实验动物:健康兔子一只
2、实验试剂:20%的氨基甲酸乙酯,肝素,生理盐水,3.8%柠檬酸钠,100ug/ml去甲肾上腺素,100ug/ml乙酰胆碱,500ug/ml阿托品
3、实验设备:兔箱,兔台,金属叉,金属环,绳子,毛剪,解剖刀,止血钳,玻璃分针,镊子,气管插管,静脉夹,静脉插管,动脉插管,压力换能器,动脉夹,刺激电极,刺激电极钩,记录电极
五、实验方法:
1.动物的麻醉:
(1)用右手把两耳拿在手心并抓住颈后部皮肤,提起家兔,然后用左手托住臀部,使呈坐位姿势,切忌提拿双耳。
(2)动物(家兔)称重后,固定于兔箱内,按5ml/Kg B.W.的剂量由耳缘静脉(位于动物耳背边缘)注射20%的氨基甲酸乙酯(乌拉坦Urethane)。动物被麻醉后,身体松软,疼痛感觉消失。
(3)注意事项:1)注射器内气泡排净;
2)首先从静脉的较远端(耳末梢处)确定进针位置,而不是耳朵根部,否则,注射失败后没有弥补的余地;
3)将进针处及附近的毛拔净,使血管清晰暴露,用手指弹血管(或用酒精棉擦),使血管充分膨胀;
4)针头开口朝上进针(注射器刻度方向与针头开口方向保持一致,以便掌握注射剂量),扎入血管后,针头往前送一些,以确保在血管内(如果在血管
内,则阻力很小),避免拔除;
5)注药要慢,并密切注意动物反应,如果角膜反射消失,药即使没有注完,也应停止注射(麻醉药注射太快和过多,都容易导致动物死亡)。
2.动物的固定
(1)将动物背位(腹面朝上)固定于手术台(兔台)上,保持颈部挺起,身体正直、舒展。(2)动物头部固定于兔头夹上,金属叉固定颈部,嘴部套入金属环。
(3)前肢背交叉(向后向下交叉,为使动物胸部挺起)、后肢伸展,用绳固定在兔台上。
3.手术
(1) 剪毛:用毛剪平贴皮肤剪去颈部被毛,剪毛范围尽量大一些。
(2)暴露气管、颈总动脉、迷走神经与减压神经:
a. 用手术刀沿颈部正中纵向切开皮肤3-4cm。注意避开喉头,喉头处有甲状腺,血液丰
富,如伤及,则出血不止,易造成动物死亡。
b. 用止血钳紧贴气管分离肌肉。此为钝性分离方法,不会造成出血:止血钳顶住肌肉,
撑开,反复几次,出现创口,双手食指伸进,纵向扩大创口。注意不要用手术剪。
(如果发生出血现象,用干棉花或沾生理盐水按压出血部位1-2分钟;也可用止血钳夹住出血部位止血。)
c. 肌肉分离后,暴露出气管。用手指将气管两侧的肌肉向外翻开,可见到纵向走行的
颈总动脉以及伴行的三根神经:最粗的迷走神经,最细的减压神经,以及介于之间
的交感神经。
(3)气管插管:
在动物麻醉实验中,需进行气管插管,避免分泌物堵塞致死。
a. 将玻璃分针从气管下穿过,顶起气管,在气管下穿双线。用镊子清除气管表面的结
缔组织,选择合适位置(避开喉头),用解剖刀在软骨环上横向切开(不要在肌肉
上切口,容易出血),开口要大,约气管直径的1/2(不要切断气管),再向下纵向切开0.5cm,形成“T”型切口。
b. 用小镊子缠上干棉花或用棉签伸进气管中,清除血和粘液,反复几次,务必清除干
净,避免动物发生窒息。
c. 将气管插管插入,结扎紧,避免脱出。将玻璃分针取出。
(4)分离左右颈总动脉、左右迷走神经和右侧减压神经:
将气管旁肌肉翻开,内面朝上,暴露血管和神经。用玻璃分针分别沿动脉、神经纵向划开附着的结缔组织膜,游离出一段。动脉尽量游离得长一些。分别穿双线备用,先不结扎。
(5)右侧颈静脉插管:由静脉插管向体内注射药物。
在右侧颈部肌肉浅层找到粗大的颈静脉。用小镊子将颈静脉一段与周围组织分离,穿入双线,准备插管。
a. 首先在近心端夹静脉夹(夹致静脉夹的根部,以保证夹紧),阻止静脉回流。
b. 然后将双线剪开成两根,一根在远心端结扎静脉(尽量远端,保证有足够的血管长
度来插管),一定要扎紧。血管中间这段充盈血液,便于插管。
c. 拎起结扎线,将血管提拉起,在靠近结扎处用小剪在血管上向下剪一开口,将静脉
插管(针头样,中间插有铁芯)插入(插入之前应确保其通畅,注意:插管时不要
把铁芯拔出,避免血液将管口堵塞)。整个针头部分都插进血管,如果静脉夹阻挡
住,可以将其去掉。
d. 用另一根线将静脉插管与血管壁结扎紧。
e. 拔出铁芯,按1ml/kg B.W. 注入肝素(500 单位/ml,体内抗凝剂,防止血液凝固)。
再补充1ml 生理盐水。插入铁芯(避免血液流出)
(6)左侧颈动脉插管:动脉插管与压力换能器相连,直接检测血压值。在此之前,必须将压力换能器以及动脉插管中充满3.8%柠檬酸钠(体外抗凝剂),并确保有良好的气密性(示范内容)压力换能器已经与仪器连接,各项参数都已设置好,处于工作状态。
a. 首先在远心端结扎血管(尽量远端,保证有足够的血管长度来插管)。
b. 然后在近心端夹动脉夹(尽量近端,用动脉夹根部夹住血管,确保夹紧否则
剪开血管后,由于动脉压力很大,血液会喷出)。血管中间这段鼓起。
c. 拎起结扎线,将血管提拉起,在靠近结扎处用小剪在血管上向下剪一开口,在小镊