食用菌菌种保藏原理和方法
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食用菌的菌种保存与菌种资源保护技术食用菌是一种富含营养的食品,不仅具有高蛋白、低脂肪的特点,还含有丰富的氨基酸、维生素和微量元素。
由于其独特的风味和药用价值,食用菌在市场上非常受欢迎。
然而,由于野生食用菌资源的减少以及消费需求的增加,菌种保存和菌种资源保护技术变得尤为重要。
菌种保存是指将优质菌株保存并用于后续繁殖和培育的技术。
常见的菌种保存方法包括冷冻、干燥、低温贮藏和液体氮贮藏。
冷冻保存是将菌种培养物在适当的添加防冻剂后,置于低温环境中,如零下80℃的超低温冷冻机中保存。
干燥保存是将菌种培养物用干燥剂吸湿后放于真空或密闭容器中保存。
低温贮藏是通过将菌种培养物置于4℃~10℃的低温环境中,利用低温抑制菌落生长来保存。
液体氮贮藏是将培养物在液氮中快速冷冻并置于液氮罐中保存。
这些方法都可以有效地延长菌种的保存时间,使其在长期保存中保持较高的活性。
除了菌种保存技术,菌种资源保护技术也非常重要。
由于采摘食用菌需要破坏菌丝体,因此需要寻找适合的方法来保护野生菌株。
目前,常见的保护野生菌株的方法包括建立菌库、菌株固定和地理信息系统。
建立菌库是指将野生优良菌株置于培养基上进行培养和保护,在一定的时间内定期传代,以获得足够的菌株数量。
菌株固定是指通过培养基成分调整或添加特殊培养物质,使野生菌株保持其特殊的形态和生理特性。
地理信息系统是指通过记录采集的野生菌株的地理位置和环境信息,以备将来重复采集。
菌种资源保护技术的目标是保护和合理利用野生菌株,确保其可持续利用。
采集时需要注意采摘的数量,避免过度采摘造成野生菌资源的枯竭。
同时,当培育食用菌时,应尽量使用保护野生菌株的方法,如在野生菌的栽培中加入野生菌株的子实体或菌丝体作为接种源来保持其遗传特性。
此外,采集时还应注意不要破坏菌丝体的基质环境,避免破坏野生菌株的自然生境。
总之,菌种保存和菌种资源保护技术对于食用菌产业的发展至关重要。
通过优化保存和保护方法,可以有效地延长菌种的保存时间,并保护和合理利用野生菌株资源,以确保食用菌产业的可持续发展。
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菌种保藏方法及复壮技术菌种保藏的原理是通过干燥、低温、缺氧、避光、缺乏营养等方法,使菌种的代谢水平降低,乃至完全停止,达到半休眠或完全休眠的状态,而在一定时间内得到保存。
需要时再通过提供适宜的生长条件使保藏物恢复活力,使菌种在较长期的保藏之后仍然保持着原有的生命力、典型的形态特征、优良生产性能。
目前常用的菌种保藏方法有以下几种。
1菌种保藏方法1.1斜面低温保藏法将需要保藏的菌种,接种在适宜的斜面培养基上,菌丝长满斜面时,用硫酸纸包扎棉塞,旋转在4℃的冰箱保藏。
由于微生物的新陈代谢活动未停止,试管内培养基易失水变干,因此,保藏时间较短,转管次数多,不适于长期保藏。
每隔六个月转管一次。
草菇菌种不耐低温,需保藏在10~12℃,或在草菇菌落上灌注3~4毫升的防冻剂(10%的甘油)。
如菌丝长满斜面后,在无菌条件下,用无菌橡皮塞代替棉塞,并用石蜡密封,即可在室温或冰箱中保藏。
这种方法可防止杂菌污染,隔绝氧气,避免培养基干燥,使用方便。
1.2液体石蜡保藏法石蜡防止培养基水分蒸发,隔绝斜面菌丝与空气接触,降低微生物代谢活性,使其处于休眠状态,因此能延长微生物的生命,保持菌种优良的种性。
一般可保藏3~5年,是一种中长期的菌种保藏方法。
液体石蜡选用化学纯的,在121℃下高温灭菌30分钟,再将液体石蜡在160℃烘箱中保温1~2小时,蒸发掉液体石蜡中的水,或将高压灭菌后的液体石蜡放置在40~60℃温箱中,使灭菌后的液体石蜡层由乳白色变成无色透明。
在无菌条件下,将灭菌除水的液体石蜡用无菌吸管罐到长满菌丝的斜面试管中,液体石蜡要高出斜面尖端1厘米左右,然后用无毒泡沫试管塞塞好,直立地放在试管架上或罐头瓶中,置于冰箱或室温中保藏。
液体石蜡灌注过多,移种时不方便;过少,时间长容易干涸。
如将棉塞齐试管中剪平,用石蜡溶封,或用无菌橡皮塞代替棉塞,可延长保藏时间。
食用菌菌种保藏技术菌种是主要的生物资源,也是食用菌生产首要的生产资料。
一个优良的菌种被选育出来以后,必须保持其优良性状不变或尽可能地少变慢变,才不至于降低生产性能,能长期在生产中使用。
因此,菌种保藏在食用菌生产上具有重要的意义。
一、菌种保藏原理菌种保藏的方法很多,但原理大同小异。
首先要挑选优良纯种。
利用微生物的孢子、芽孢及营养体;其次,根据其生理、生化性,人为创造低温、干燥或缺氧等条件,抑制微生物的代谢作用,使其生命活动降低到极低的程度或处于休眠状态,从而延长菌种生命以及使菌种保持原有的性状,防止变异。
不管采用哪种保藏方法,在菌种保存过程中要求不死亡、不污染杂菌和不退化。
二、菌种保藏的方法1、低温定期移植保藏法。
将需要保藏的菌种接种在适宜的斜面培养基上,适温培养,当菌丝健壮地长满斜面时取出,放在3-5℃低温干燥处或4℃冰箱、冰柜中保藏,每隔4-6个月时间移植转管一次,具体应根据菌种特性决定。
保藏时要注意环境温度不能太高,以防霉菌通过棉塞进入管内。
因此,若用棉塞,可用干净的硫酸纸或牛皮纸包扎棉塞,即可减少污染的机会,也可防止培养基干燥。
除草菇菌种外,其他食用菌菌种都能采用此法保藏。
2、液体石蜡保藏法。
取化学纯液体石蜡(要求不含水分、不霉变)装于三角瓶中加棉塞并包纸,在1公斤/平方厘米压力下灭菌1小时,再放入40℃恒温箱中数天,以蒸发其中水分,至石蜡油完全透明为止。
将处理好的石蜡油移接在空白斜面上,28-30℃下培养2-3天,证明无杂菌生长方可使用。
然后用无菌操作的方法把液体石蜡注入待保藏的斜面试管中。
注入量以高出培养基斜面1-1.5厘米,塞上橡皮塞,用固体石蜡封口,直立于低温干燥处保藏。
保藏时间在一年以上,在低温下,保藏时间还可延长。
3、沙土管保藏法。
取河沙用水浸泡洗涤数次,过60目筛除去粗粒,再用10%盐酸浸泡2-4小时,除去其中有机物质,再用水冲洗至流水的pH达到中性,烘干备用。
同时取贫脊土或菜园土用水浸泡,使呈中性,沉淀后弃去上清液,烘干碾细,用100目筛子过筛,将处理好的沙与土以(2-4):1混匀,用磁铁吸出其中的铁质,然后分装小试管或安瓿内,每管装量0.5-2克,塞棉塞,用纸包扎灭菌(1.5公斤/平方厘米,1小时),再干热灭菌(160℃,2-3小时)1-2次,进行无菌检验,合格后使用。
多种菌种保藏的原理和方法多种菌种的保藏是为了保持其生物特性和保存其遗传信息,以便后续研究和应用。
在微生物学研究和应用中,常见的菌种保藏方法有冷冻保藏、干燥保藏、冷冻干燥保藏、凝胶保藏和液氮保藏等。
以下将详细介绍这些保藏方法的原理和具体步骤。
一、冷冻保藏冷冻保藏是最常见的菌种保藏方法之一、其原理是通过在超低温条件下将菌株冷冻保存,阻止其新陈代谢和繁殖,从而使菌株保持低活性状态。
冷冻保存可以使用明胶冻块、甘油、液氮等不同保藏物质,具体步骤如下:1.选取新鲜的菌株,生长到对应的阶段。
2.制备保存液,通常使用明胶冻块(10%明胶+10%蔗糖+10%琼脂)、甘油(20%甘油+10%消毒水)、液氮等。
选择合适的保存液可以根据菌株的特性和使用要求进行调整。
3.微生物菌株生长到对应阶段后,用无菌工具将其移至保存液中。
4.放置在超低温冷冻箱中,通常设置在-80℃的环境下保存,避免产生晶状冰或冻伤。
可以考虑使用其他液氮冷冻方法,如液氮喷雾冷冻法等。
5.菌株保存时间根据所用保存液和保存条件而有所不同。
文献上常见的冷冻保存时间一般为6个月,但很多菌株可以保藏数年或数十年。
二、干燥保藏干燥保藏是将菌株通过脱水处理后进行保存。
此方法的原理是通过将菌株暴露在干燥条件下,除去菌体内的水分,从而抑制其活性,确保长时间保存。
常见的干燥保藏方法有真空冷冻干燥法和常温干燥法。
1.用无菌试管或无菌孢子瓶盛装菌株,通常使用液体培养基等。
2.将菌株液体培养基均匀均匀分配到无菌培养皿或钢平。
3.将培养皿置于通风恒温箱中进行干燥,可以选择真空干燥或通风干燥。
真空干燥通常在-80℃下真空干燥24小时以上,而常温干燥则需要3-7天左右。
4.干燥后的培养物使用无菌器具封装密封保存,放置在低湿、阴凉的地方,通常保存在常温下60-70%相对湿度的环境中或4℃冰箱中。
三、冷冻干燥保藏冷冻干燥保藏是将菌株进行预冷冻处理,然后在真空条件下进行干燥保存。
此方法的原理是在菌株处于冷冻状态下脱水处理,从而更好地保存菌株的生物学特性。
食用菌菌种保藏的方法保藏食用菌菌种的方法很多,常采用控制温度、水活度、氧气和营养等因素的方法,最大限度降低或抑制食用菌菌丝体的生长从而达到菌种保藏的目的。
首先要挑选优良的纯菌种,包括菌丝体和孢子;其次,根据其生理、生化特点,人为的创造低温、干燥或缺氧等条件,抑制菌丝体的代谢作用,使其生命活动降低或处于休眠状态,从而延长菌种生命以及使菌种保持原有的性状,防止变异。
1 利用菌丝体保存的方法① 琼脂斜面低温保藏将要保藏的菌种接种在PDA斜面培养基上培养,在28~32℃下培养,待菌丝体长满斜面时,把试管的棉塞换成无菌橡皮塞,并用石蜡封口,置于4℃的冰箱低温保藏,每隔2~4个月转管1次。
该种方法保藏的菌种不易老化,生命力强,接种后萌发快,能保持优良性状,但转接周期短,污染风险大,且菌株易变异,易造成菌株衰退。
② 液体石蜡常温保藏法此法亦称矿物油保藏法。
先将化学纯石蜡油(无色、透明的黏稠液体)装于三角瓶中,塞上棉塞并用牛皮纸包裹,放入高压锅中灭菌30min,然后置于40℃的恒温箱中,让水分蒸发至完全透明后备用,使用前先将石蜡油做无菌检查。
在无菌条件下,用无菌吸管将无菌石蜡油注入已长好的斜面试管中,用量以高出斜面顶端1cm为宜,目的是使菌种与空气隔绝,阻止水分蒸发,降低细胞的生长代谢活动,然后用蜡封口后,直立放入室内干燥处。
15~25℃,可以保藏菌种5年。
该方法的优点是成本较低,保藏时间较长,长达数年甚至几十年;缺点是转接培养较慢,往往需要转接培养2~3次,才能除去菌丝体上的液体石蜡,使菌种恢复正常生长。
③ 蒸馏水保藏法蒸馏水保藏方法适用于绝大多数食用菌菌种保藏。
该法是用无菌蒸馏水保存食用菌菌丝体,过程为:用移液器吸取4mL 无菌蒸馏水注入无菌安瓶中,将发育成熟的菌落用无菌接种针挑取数块放入安瓶中,加盖密封,室温保存。
据报道,真菌用蒸馏水保藏可保存1~20年,而且菌株污染少。
④ 盐水保藏法食盐溶液具有高渗透性,对杂菌孢子的萌发具有较强的抑制和杀灭作用,从而减少或避免保藏期间菌种的污染;同时,食盐中含有食用菌生长所必需的钠、镁、钙等金属离子,对菌丝的生长有促进作用,转管后,由于水势差,接种菌株吸水能力强,易恢复,成活率较高。
菌种保藏的方法菌种是国家重要的生物资源,鉴于其自身的遗传性和变异性,在菌种保藏过程中,如何降低菌种的衰亡速度,防止杂菌污染,保持菌种遗传性状不变异,使优良高产菌株长期在生产中应用,成为食用菌领域一项重要的课题。
为适应群众性生产的需要,为适应群众性生产的需要,本文介绍了几种简单易行、实用效果好的菌种保藏方法。
一、菌种保藏基本原理通过低温、干燥、缺氧和饥饿等手段来达到最大限度降低菌丝体的生理代谢。
首先要挑选优良纯菌种,包括菌丝体和它们的孢子;其次,根据其生理、生化特点,人为创造低温、干燥或缺氧等条件,抑制微生物的代谢作用,使其生命活动降低到极低的程度或处于休眠状态,从而延长菌种生命以及使菌种保持原有的性状,防止变异。
二、菌种保藏的方法试管斜面菌种系列保存方法1低温定期移植保藏法将需要保藏的菌种接种在适宜的斜面培养基上,适温培养,当菌丝健壮地长满斜面时取出,放在3~5℃低温干燥处或4℃冰箱中保藏,每隔3~6个月移植转管1次,具体应根据菌种特性决定。
保藏时要注意环境湿度不能太高,以防霉菌通过棉塞进入管内。
因此,若用棉塞,可用干净的塑料薄膜或牛皮纸包扎棉塞,也可用无菌的白胶塞,并用石蜡涂封,即可减少污染的机会,也可防止培养基干燥。
除草菇外,大多食用菌菌种都能采用此法保藏。
2液体石蜡保藏法取化学纯液体石蜡装于三角瓶中高压灭菌后,放入40℃恒温箱中,蒸发其中水分,至石蜡油完全透明为止。
将处理好的石蜡油移接在空白斜面上,28~30℃下培养2~3d,证明无杂菌生长方可使用。
然后将母种接在斜面培养基上,当菌丝在斜面上生长丰满后,将液体石蜡注在斜面上,注入量以高出斜面1cm为宜,使菌种与空气隔绝,降低其新陈代谢能力。
管口用灭过菌的白胶塞塞紧,并用石蜡涂封,直立放在室内干燥处或冰箱内保藏。
一般可保存1年以上,在低温下保藏时间还可延长。
使用时从斜面上挑取菌丝少许,移接到新鲜斜面培养基上,经培养即可。
由于菌丝体沾有液体石蜡而影响其生长,需再经1次移接才能恢复正常生长。
菌种保藏的原理菌种保藏是指将微生物菌株进行冷冻或干燥等处理,以延长其保存时间和保持其遗传特性的一种方法。
菌种保藏的原理主要包括以下几个方面:一、低温保存原理。
低温保存是目前最常用的菌种保藏方法之一。
通过将微生物菌株置于低温环境中,可以减缓细胞代谢速率,降低细胞内的化学反应速率,从而延长菌株的保存时间。
在低温条件下,微生物细胞内的代谢活动减缓,细胞内的酶活性降低,细胞膜和细胞壁的破坏减少,从而减少了微生物的死亡率,延长了菌株的保存时间。
二、干燥保存原理。
干燥保存是另一种常用的菌种保藏方法。
通过将微生物菌株置于干燥环境中,可以去除细胞内的水分,使细胞处于休眠状态,从而延长菌株的保存时间。
在干燥条件下,微生物细胞内的水分被大大减少,细胞内的生化反应受到抑制,细胞代谢活动减缓,从而延长了菌株的保存时间。
三、冷冻干燥保存原理。
冷冻干燥保存是将微生物菌株先冷冻,然后在真空条件下进行干燥处理的一种保存方法。
冷冻干燥保存结合了低温保存和干燥保存的优点,能够更好地保持菌株的遗传特性和保存时间。
四、液氮保存原理。
液氮保存是将微生物菌株置于液氮中进行保存的一种极低温保存方法。
在液氮的极低温条件下,微生物细胞内的代谢活动几乎停止,细胞内的化学反应速率大大降低,从而极大地延长了菌株的保存时间。
五、保存原理的应用。
菌种保藏的原理在微生物资源的长期保存和利用中起着非常重要的作用。
通过合理选择保存方法,可以有效地延长菌株的保存时间,保持菌株的遗传特性,为微生物资源的研究和应用提供了可靠的保障。
综上所述,菌种保藏的原理主要包括低温保存、干燥保存、冷冻干燥保存和液氮保存等方法。
这些方法通过降低微生物细胞的代谢活动,延缓细胞内的化学反应速率,有效地延长了菌株的保存时间,保持了菌株的遗传特性,为微生物资源的研究和应用提供了重要的支持。
菌种保藏原理
在菌种保藏中,主要通过冷冻和冻干技术来延长菌种的保存时间和保持其活力。
冷冻保藏是将菌株培养物中的微生物细胞在低温下迅速冷冻保存,而冻干保藏则是将菌株培养物中的水分逐渐去除,使其变成干燥的状态。
冷冻保藏的原理是通过将菌株培养物中的水分迅速冷冻,使细胞内的代谢反应减缓,防止代谢产物的积累和细胞损伤。
同时,低温下的冷冻可以防止细胞内的酶活性和酸碱平衡的改变,从而减少冻存过程中的细胞死亡率。
冻干保藏的原理则是通过将菌株培养物中的水分逐渐去除,使其转变成干燥的状态。
这种保藏方式主要通过冷冻干燥设备,将培养物缓慢冷冻至低温,然后将水分在低温下逐渐去除,最终形成干燥的菌株。
冻干保藏可以有效地减少冷冻过程中的细胞损伤,同时还能极大地减少微生物的营养需求和代谢活动,从而延长菌株的保存时间。
综上所述,菌种保藏的原理主要是通过冷冻和冻干技术来延长菌种的保存时间和保持其活力。
这些方法可以有效地减少菌株的代谢活动和细胞损伤,从而保持菌株的活力和遗传特性。
食用菌的保鲜原理以及保鲜的方法保鲜技术:食用菌采收后,由于细胞仍然具有生命力,进行着呼吸作用和各种生化反应,会出现菌盖开伞、褐变、自溶、腐烂等,严重影响了食用菌的外观和品质。
这种情况下,就需要对新鲜食用菌采取一定手段使食用菌的商品价值和食用价值得以较长时间的保持,以此来增加商品菇的市场竞争力。
一、食用菌保鲜原理及类型:(一)食用菌保鲜原理:食用菌保鲜的原理就是采取有效措施降低食用菌子实体的新陈代谢速度,抑制病原微生物繁殖,使子实体较长时间处于新鲜、品质不变的状态。
食用菌保鲜常采用冷藏、真空保鲜、气调保鲜、辐射保鲜、化学药剂保鲜、负离子保鲜等方法,通过这些方法可使代谢进程缓慢,或是抑制机体内的化学反应,或是杀灭了新鲜菇体表面病原杂菌,从而保护了食用菌机体内部营养最小限度的损耗。
(二)食用菌保鲜类型:1.冷藏保鲜:冷藏保鲜是通过冰块或机械制冷,使食用菌子实体通常处于3~5℃低温,使食用菌在该环境下生理代谢减弱,从而达到保鲜的目的。
对于一些特殊的品种应根据其特点设定冷藏的温度,如草菇通常在15℃进行保鲜。
2.气调保鲜:气体保鲜是通过增加新鲜子实体周围二氧化碳和氮气的含量,减少氧气的含量,使食用菌机体内部由于缺氧不能进行正常的生理代谢;同时子实体外部微生物由于缺氧其活性和繁殖力急剧降低,从而达到保鲜的目的。
3.辐射保鲜:辐射保鲜是通过高能量的射线,如γ-射线、钴60等,每天以一定剂量一定时间对菇体进行辐射,以减慢菇体内代谢反应速度,抑制褐变及增加持水;同时,还抑制或杀死腐败微生物或病原菌。
4.化学药品保鲜:化学药品保鲜是通过往菇体上定量喷施生长抑制剂、酶钝化剂、防腐剂、去味剂、脱氧剂、pH 值调节剂等化学药品来减慢菇体内代谢反应速度,抑制褐变及腐败等变化。
二、食用菌实用保鲜方法:(一)杏鲍菇低温保鲜:选七八分熟、未弹射孢子的杏鲍菇菇子实体,要求朵形完整、菌柄粗壮厚实、菌盖边缘平展,采前不要喷水。
采收时捏住杏鲍菇菌柄基部,利用锋利的刀片沿菌柄基部轻轻割下,尽量少带培养料。