牡丹皮中丹皮酚的测定方法综述
摘要：本文主要对丹皮中丹皮酚的测定方法进行详细综述。
牡丹皮中含有的丹皮酚具有镇痛、消炎、抗菌等作用，对现代医药研究与应用有着重大意义。
随着中药现代化的进展,对中药有效成分的分离提取、含量测定已成为新的热点课题。
关键词：牡丹皮丹皮酚定性和含量测定
牡丹皮为毛茛科植物牡丹的干燥根皮, 有清热凉血、活血化瘀的作用。
用于湿热发斑、吐血衄血、夜热早凉,经闭痛经、痈肿疮毒、跌打伤痛等。
其主要有效成分为丹皮酚[1]。
丹皮酚又名牡丹酚、芍药酚,化学名为“2-羟基-4-甲氧基苯乙酮”，为白色或微黄色有光泽的针状结晶，无色针状结晶（乙醇），熔点49℃-51℃，气味特殊，味微辣，易溶于乙醇和甲醇中，溶于乙醚、丙酮、苯、氯仿及二硫化碳中，稍溶于水，在热水中溶解，不溶于冷水，能随水蒸汽挥发。
丹皮酚可随水蒸气蒸馏，且在紫外光区有强烈吸收，在274nm波长处E（1% 1cm）为862，利用此性质可用紫外分光光度计进行测定。
现代药理研究证明丹皮酚具有抗炎、镇静、降压、抗氧化、保护心肌细胞及抑制血小板凝集等作用。
丹皮酚的含量高低是作为衡量牡丹皮品质优劣的一种重要指标，其含量的高低直接影响药品的疗效。
目前，丹皮酚的定性含量测定有高效液相色谱法（HPLC）、分光光度法、薄层扫描法等。
以下是对薄层扫描法，高效液相色谱法（HPLC）的简要介绍。
一、丹皮酚提取分离方法
1.蒸馏－煎煮法蒸馏-煎煮法
蒸馏－煎煮法蒸馏-煎煮法是指先蒸馏提取挥发性成分，药渣再加水提取的方法，适用于含挥发性成分药材的提取。
丹皮酚随蒸气馏出后，在冷藏状态下大量析出，滤过干燥即可用于成型，保存方便且转移率较高[2]，但其提取率远低于醇提法[3]；提取过程中选择适宜的pH范围使丹皮酚溶解，并确保溶液贮存过程中的稳定已成为丹皮酚提取液体制备过程中的关键，在蒸馏过程中可以加盐、先加碱后加酸等提高提取率，研究认为加盐蒸馏法是丹皮酚提取的最优方法；为了提高其在水中溶解度，通常采用有机溶剂、助溶剂、表面活性剂等途径来解决问题，有文献报道将其制成β-环糊精包合物来提高其稳定性和生物利用度，能降低其挥发性，增加其溶解度[4]
2 醇提法
醇提法以无水乙醇为溶剂，40℃温度下回流提取，即可将丹皮酚提取出来。
醇提法提取工艺简单，有效成分提取多，似应为牡丹皮提取的最佳方法，但问题在于醇提液的后处理困难，因丹皮酚熔点低、挥发性强，实际生产中难于仅除去乙醇而不损失较多的丹皮酚，且提取过程中受热温度越高、时间越长,丹皮酚的含量和收率就越低[5]。
3 CO2 超临界流体萃取法
应用超临界萃取法是当前中草药有效成分提取的一个发展方向，具有提取温度
低、时间短等优点。
在15 MPa ，52 ℃的提取条件下，2.5 h后其丹皮酚提取液为淡红棕色液体，冷藏后自动分层，上层为淡黄色液体，下层为淡红棕色固体[5]。
CO2 超临界流体萃取法提取的丹皮酚量少，远低于文献报道值，该方法能萃取出大量脂溶性成分。
因CO2 是非极性物质而酚苷类成分极性较大，故未能将该类萃取出来，这也是导致总提取物收率较低的一个原因[7]。
为提高丹皮酚及酚苷类成分的收率，并保持本方法的提取特点，可考虑进一步优化提取条件并加入夹带剂，这方面的工作还有待深入研究。
二、薄层色谱鉴定（定性）
样品通过薄层分离，并用适当的方法定位后的斑点，常用以下几种方法达到定性的目的。
1.斑点的Rf值
在一定条件下，化合物的Rf值应该是一个常数，但由于薄层色谱是一个开放性不连续的离线操作系统，受到温度湿度等的实验条件影响，Rf值的变化较大，因此每次进行定性时必须有随行对照品。
另一方面，即使被分离化合物与对照品的Rf值一样，也不能立即下结论，因为仅根据一种展开剂展开的Rf值作为定性的依据是不够的，需要经过两种以上不同组成的展开剂展开后的Rf值均与对照品一致时，才能认为该斑点与对照品是统一化合物。
2.斑点的显色特征
在自然光，紫外光下观察斑点的颜色，荧光，或用专属性显色剂后的颜色与对照品比较可以定性[8]。
薄层扫描法对丹皮中丹皮酚的定性测定，方法简便易行，测定结果稳定，重复性好，是一种准确可靠的定性测定方法。
尤其是在中药复方制剂中．此方法对丹皮酚的测定可较好地排除其他成分的干扰[9]。
三、高效液相色谱测定（定量）
杨洁等[10]采用HPLC法，结果显示丹皮酚在0.01～0.55 μg/ml范围内线性关系良好(r = 0.999 6) ，平均回收率99.87% ，RSD 为1.46%。
该法简便、快速，重现性好，精度高，适用于牡丹皮中丹皮酚的定量分析。
实验中试用不同体系和比例的流动相，如甲醇－磷酸，甲醇醋酸水，结果以甲醇醋酸水溶液为流动相时丹皮酚的分离效果最好。
李海燕等[11]以甲醇0. 5%磷酸(60∶40)为流动相，检测波长274 nm下应用反相高效液相色谱法对丹皮酚含量进行测定，其检测效果也较为理想。
四、小结
丹皮酚是中药材牡丹皮和其制剂所含主要成分之一。
综上所述 ,从含丹皮酚中药及其制剂分析前处理方法和测定方法来看 ,样品处理主要有两类 ,一是蒸馏法: 直接蒸馏法和水蒸气蒸馏法 ,提取液较单纯 ,适用于紫外法等无分离能
力的仪器分析;另一类是有机溶剂浸出法 ,效率较高 ,若配以超声处理 ,可大大缩短分析测定时间 ,但混入杂质较多 ,适用于具有高分离能力的色谱分析法。
鉴于丹皮酚本身具有一定的挥发性 ,在中药材及其制剂中含量均不高 ,加之中药成分的复杂性 ,在条件许可的情况下 ,毛细管气相色谱法应是中药材及其制剂中丹皮酚首选的分离分析方法。
而对丹皮酚进行定性和定量测定则分别用薄层色谱分析法和高效液相分析法，均的较为理想的检测效果
参考文献：
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[2] 杨炳火，高运军，肖红兵. 不同提取方法对徐长卿中丹皮酚含量的影响［J］.时珍国医国药,1998 :9 (5) :417。
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[9]高莹莹，孙秋，常波。
人参固本丸中丹皮酚的薄层色谱鉴别，吉林省白城市食品药品检验所，吉林白城 137000
[10］杨洁，贾国强，刘萍，等. HPLC法测定不同产地牡丹皮中丹皮酚的含量［J］.科学技术与工程,2006,6(3)：299
[11］李海燕，陈小坚. 牡丹皮中丹皮酚含量动态变化研究［J］.时珍国医国药, 2000, 11(3)：197.。
