车前草药材的质量标准研究

车前草提取物抗菌活性的研究摘要车前草属于车前科车前属的多年生草本植物，其种子和整草被用作药物，是一种有益于健康的常用中药，具有清肝脏明目、通淋、利尿、止咳祛痰、清热解毒等功效。

研究目的：本文以研究车前草的抗菌活性、探寻抗菌活性良好的先导化合物为主要目的。

实验方法：本次研究以硅胶柱色谱法、TLC薄层色谱法、重结晶法为分离方法，并使用MIC测试法、MBC测试法对分离化合物进行抗菌活性检测。

实验结果：通过分离提取从车前草中得到五种化合物，使用理化常数测定及波谱分析，鉴定出车前草中含有油酸（I），亚麻酸甲酯(II)，亚油酸(III)，化合物(IV)、山楂酸(V)五种化合物的化学成分。

通过活性测试表明，化合物（I），化合物（III）和化合物（V）可以在较好抑制革兰氏阳性细菌，同时第五种化合物（V）可以显著抑制大肠杆菌，效果明显比对照药物硫酸链霉素更好。

化合物（I）和化合物（V）在耐药菌的抗菌活性测试中也显示出抑制特性。

在细菌耐药性测试中发现化合物（V）不容易产生耐药性。

实验结论：本文通过实验结果整理发现化合物（V）不仅表现出优异的抗菌活性，且不易产生耐药性，对细胞无损害，是一种理想的研究抗菌活性的先导化合物。

关键词：车前草提取物抗菌活性石油醚层乙酸乙酯层1.前言随着抗生素的广泛应用，细菌导致的疾病得到有效控制。

然而，目前抗生素的滥用情况普遍存在，由此出现了许多耐药性性很强的超级细菌，使得抗生素的耐药周期不断缩短，大大增加了临床治疗难度。

因此，新抗生素的研究和开发已成为世界各国药理学家和微生物学家普遍关注的热点。

车前草是车前科植物，是一种常见的中草药，最早《神农本草》中有记载：“车前子，味甘寒无毒，久服轻身耐老，一名当道”，被列为上品药材[1]。

具有清热解毒、利尿、凉血、祛痰、消肿、护肝明目、抗衰老、修复受损细胞等功效。

在临床实践中，车前草对各种感染的治疗具有积极作用。

然而，目前针对车前草中有效抗菌单体的研究较少，不能完全反映车前草的药用价值。

不同产地车前草中总苯乙醇苷和毛蕊花糖苷含量测定目的建立车前草中总苯乙醇苷和毛蕊花糖苷的含量測定方法。

方法采用紫外-可见分光光度法测定车前草中总苯乙醇苷含量。

HPLC测定毛蕊花糖苷含量，色谱柱为ODS2 C18（4.6 mm×150 mm，5 ?m），流动相为乙腈-0.1%甲酸溶液（13∶87），流速为1 mL/min，检测波长为332 nm，柱温为30 ℃，進样量为10 ?L。

结果不同产地车前草中总苯乙醇苷含量范围为 1.03%～3.47%；毛蕊花糖苷在0.006 2～1.55 mg范围内与峰面积呈良好的线性关系，加样回收率为98.9%（RSD=1.6%），不同产地车前草中毛蕊花糖苷的含量范围为0.18%～0.56%。

结论本研究建立的方法操作简单、稳定性好、重复性较好，可用于不同产地车前草中苯乙醇苷类成分及毛蕊花糖苷的含量测定，为车前草的质量控制提供了依据。

Abstract：Objective To establish a method for determination of phenylethanoid glycoside and acteoside in Plantago Herba. Methods UV-visible spectrophotometric method was used for the determination of the content of phenylethanoid glycosides compounds in Plantago Herba. HPLC method was used for the determination of acteoside in Plantago Herba. Chromatographic column with C18 ODS2 （4.6 mm ×150 mm，5 ?m）was used. Acetonitrile-0.1% formic acid （13：87）was as mobile phase；the flow rate was 1 mL/min；the detection wavelength was 332 nm；the column temperature was 30 ℃；the sample volume was 10 ?L. Results The contents of phenylethanoid glycoside in Plantago Herba from different producing areas were among 1.03%–3.47%. Acteoside with peak area over the 0.0062–1.55 mg range showed a good linear relationship；the sample recovery rate was 98.9%，and the RSD was 1.6%. The contents of acteoside in Plantago Herba from different producing areas was among 0.18%–0.56%. Conclusion The method is simple，stable and reproducible，which can be used for the determination of phenylethanoid glycoside and acteoside in Plantago Herba from different producing areas and provide experimental basis for quality control of Plantago Herba.Key words：Plantago Herba；phenylethanoid glycosides；acteoside车前草为车前科植物车前Plantago asiatica L.或平车前Plantago depressa Willd.的干燥全草，具有清热利尿通淋、凉血、解毒等功效，主要用于热淋涩痛、水肿尿少、暑湿泄泻、痰热咳嗽、吐血衄血、痈肿疮毒[1]。

XXXX药业有限公司成品质量标准及检验操作规程1 品名：1.1 中文名：车前草1.2 汉语拼音：Cheqiancao2 代码：3 取样文件编号：4 检验方法文件编号：5 依据：《中国药典》（2015年版一部）。

6 质量标准：7 检验操作规程：7.1 试药与试剂：甲醇、大车前苷对照品、乙酸乙酯、甲酸、盐酸、水、乙腈、氢氧化钠滴定液、甲基红乙醇溶液指示剂。

7.2 仪器与用具：显微镜、电子天平、超声波清洗器、水浴锅、马福炉、烘箱、硅胶G薄层板、高效液相色谱仪、紫外光灯、二氧化硫测定仪。

7.3 性状：取本品适量，自然光下目测色泽，嗅闻气味。

7.4 鉴别7.4.1取本品制片置10×10显微镜下做显微观察。

7.4.2取本品粉末1g，加甲醇10ml，超声处理30分钟，滤过，取续滤液作为供试品溶液。

另取大车前苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。

照薄层色谱法（附录7）试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲醇-甲酸-水（18：3：1.5：1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。

供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

7.5 检查：7.5.1 水分：不得过13.0%（附录15第二法）。

7.5.2 总灰分：不得过15.0％（附录17）。

7.5.3 酸不溶性灰分：不得过5.0%（附录17）。

7.5.4二氧化硫残留量照二氧化硫残留量测定法（附录58）测定，不得过150mg/kg。

7.6 浸出物：照水溶性浸出物测定法（附录19）项下的热浸法测定，不得少于14.0%。

7.7含量测定：照高效液相色谱法（附录8）测定。

色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈-0.1％甲酸溶液(17:83) 为流动相；检测波长为330nm。

理论板数按大车前苷峰计算应不低于3000。

对照品溶液的制备取大车前苷对照品适量，精密称定，置棕色量瓶中，加60％甲醇制成每1ml 含0.1mg的溶液，即得。

高效液相色谱法测定车前草中大车前苷和车前苷的含量标签：车前草;大车前苷;车前苷;高效液相色谱车前草药源丰富，价格低廉，具有清热利尿、祛痰、凉血、解毒等功效，为车前科植物车前（Planttago asiatica）或平车前（P. depressa）的干燥全草。

《中华人民共和国药典》规定车前草的专属性成分大车前苷为其主要药用有效成分及其含量标准。

大车前苷为苯乙醇苷类化合物，药理研究表明苯乙醇苷类化合物具有利尿、抗炎、解痉等功效，与车前草的功效吻合。

迄今为止，从车前草中分离鉴定的化合物还包括黄酮类、环烯醚萜类、三萜类、多糖等。

黄酮类化合物是车前草中另一主要活性成分，已建立了高效液相色谱法分析车前草中槲皮素、木犀草素、黄芩素等黄酮苷元的含量。

车前苷具有抗氧化、蛋白激酶抑制等活性，是从车前草中分离并鉴定的一个黄酮类化合物，但尚未见其含量测定的研究报道。

鉴于苯乙醇苷类和黄酮类化合物对车前草质量评价和后继开发利用的重要性，应建立高效液相色谱法测定车前草中大车前苷和车前苷的含量，为车前草药材及其临床产品的质量标准提供参考，为车前草的进一步合理开发提供依据。

一、实验部分1. 仪器与试剂安捷伦1260高效液相色谱仪（Agilent Technologies，Santa Clara，CA），包括四元泵、自动进样器、恒温箱和二极管阵列检测器。

车前草购于本地药店，大车前苷标准品购自上海同田生物有限公司，车前苷标准品购自南京安美科技有限公司。

色谱纯甲醇和醋酸购自美国Fisher公司，其他分析纯试剂均购自国药集团化学试剂有限公司，水为超纯水。

2.色谱条件色谱柱：Waters Symmetry C18色谱柱（250 mm × 4.6 mm i.d.）;预柱：菲罗门C18 （4.0 mm×3.0 mm，Phenomenex，Torrance，CA）。

流动相：溶剂A（0.4%醋酸水溶液）和溶剂B（甲醇），梯度洗脱过程为0～30 min，35%～45% B;流速：0.7 mL/min;柱溫：25℃;检测波长：330 nm;进样量：20 μL。

中药车前的研究概况【摘要】车前是一味常用中药，药源丰富。

本文从车前的化学成分、药理作用及定量分析方法方面综述了其研究概况。

【关键词】车前；化学成分；药理作用车前（Plantago asiatica L.）是车前科(Plantaginaceae) 车前属(Plantago)植物，别名车轱辘菜或车轮菜。

种子入药称“车前子”，全草入药称“车前草”。

味甘寒无毒，具有利水通小便，祛痰，凉血，解毒，除湿痹等功效[1]。

临床常用于治疗慢性气管炎。

车前草药源丰富，价格低廉，毒副作用小，是一味非常有前途的草药。

近年来，国内外学者对车前子和车前草作了一定的研究，对车前草的药理作用及临床应用作了综述，本文主要就车前草和车前子的化学研究、药理作用方面作一简单介绍。

1化学成分全草含车前草甙（plantagin），桃叶珊瑚甙（aucubin），高车前甙（homoplantagin），熊果酸，正三十烷，β-谷甾醇和豆甾醇棕榈酸酯，及车前甙类化合物(plantainosides A-F)。

种子含桃叶珊瑚甙，粘液质，D-木糖，L-阿拉伯糖。

车前酸，琥珀酸，腺嘌呤，胆碱，脂肪油还含有环烯醚萜甙京尼平酸（geniposid acid），甙（gardenoside），京尼平甙（geniposide），栀子甙,车前子甙（plantagoside）。

主要粘多糖为plantago-mucilage A。

从地上部分分得3，4－二羟基苯乙醇－6－O－咖啡酰基－β-葡萄糖甙，毛蕊花甙（acteoside, verbascoside），车前甙（plantaginin），大车前甙（plantamajoside）、3，4，7－三羟基－β-苯乙基－O－β-D吡喃葡萄糖基－（1-3）－4－O－咖啡酰基－β-D吡喃葡萄糖甙(hellicoside)。

阿魏酸，齐墩果酸，β-谷甾醇，胡萝卜甙，乌苏酸。

最近回瑞华等利用同时蒸馏－萃取装置确定了车前草的挥发性成分[2]。

标准依据：《中华人民共和国药典》（2010年版一部）、《全国中药炮制规范》(1988年版)。

原药材1【来源】本品为车前科植物车前Plantago asiatica L.或平车前Plantago depressa Willd.的干燥全草。

夏季采挖，除去泥沙，晒干。

2【性状】2.1车前根丛生，须状。

叶基生，具长柄；叶片皱缩，展平后呈卵状椭圆形或宽卵形，长6~13cm，宽2.5~8cm；表面灰绿色或污绿色，具明显弧形脉5~7条；先端钝或短尖，基部宽楔形，全缘或有不规则波状浅齿。

穗状花序数条，花茎长。

蒴果盖裂，萼宿存。

气微香，味微苦。

2.2平车前主根直而长。

叶片较狭，长椭圆形或椭圆状披针形，长5~14cm，宽2~3cm。

3【鉴别】3.1显微鉴别3.1.1车前叶的表面观：车前上、下表皮细胞类长方形，上表皮细胞具角质线纹。

气孔不定式，副卫细胞3~4个。

腺毛头部2细胞，椭圆形，柄单细胞。

非腺毛少见，2~5细胞，长100~320μm，壁稍厚，微具疣状突起。

3.1.2平车前叶的表面观：非腺毛3~7细胞，长350~900μm。

3.2理化鉴别取本品粉末1g，加甲醇10ml，超声处理30分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。

另取大车前苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。

照ZT-TS-02-004-1《薄层色谱法》试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G 薄层板上，以乙酸乙酯-甲醇-甲酸-水（18：3：1.5：1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。

供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

4【检查】4.1照ZT-TS-02-001-1《水分测定法》第一法测定，水分不得过13.0%。

4.2照ZT-TS-02-002-1《灰分测定法》测定，灰分不得过15.0%。

4.3照ZT-TS-02-002-1《灰分测定法》测定，酸不溶性灰分不得过5.0%。

5【浸出物】照水溶性浸出物测定法项下的热浸法ZT-TS-02-003-1《浸出物测定法》测定，不得少于14.0%。

车前草化学成分及其药理作用研究进展车前草为车前科植物车前或平车前的干燥全草，最早被《神农本草经》收载入药，其性味甘寒，具有清热利尿﹑祛痰、凉血、解毒的功效。

随着人们对车前草研究的不断深入，已从车前中分离出多种有效成分，并揭示其药效作用机制。

本文现对车前草化学成分和药理作用方面的研究情况进行总结，为其进一步的研究和应用提供新思路。

1化学成分车前草中化学成分复杂，主要含有多糖类、黄酮及其苷类、环烯醚菇类、苯乙酰咖啡酰糖酯类、萜类以及挥发油类等成分。

1.1多糖类成分车前草中多糖类成分含有L-阿拉伯糖、D-半乳糖、D-葡萄糖、D-甘露糖、L-鼠李糖、D-葡萄糖酸及少量D-木糖和炭藻糖，主要以β-1，4连接为主链，2和3位含侧链[1]。

1.2黄酮及其苷类车前草中的黄酮类化合物，为车前草主要有效成分之一。

主要含有高车前苷、车前子苷、车前苷、木犀草素、高车前素、胡萝卜苷、6-羟基木犀草素、芹菜素[2]、木犀草苷、大波斯菊苷、高车前素-7-葡萄糖醛酸、黄芩素、黄芩苷、高山黄芩素、野漆树苷、槲皮素、芦丁、泽兰黄酮[3]。

1.3环烯醚萜类成分主要含有齐敦果酸、桃叶珊瑚甙(aucubin)、京尼平甙酸(genipo-sidic acid)、梓醇、3，4-二羟基桃叶珊瑚甙\美利妥双苷、地黄苷D、大车前草苷、10-羟基大车前草苷、10-乙酰大车前草苷、globularinPlantarenaloside、车叶草苷、8-表马钱子苷酸、栀子酮苷、龙船花苷和6-0-β葡萄糖桃叶珊瑚甙[4]。

1.4苯乙酰咖啡酰糖酯类成分主要有3，4-二羟基苯乙醇基-6-O-咖啡醇基-β-D-葡萄糖甙、连翘酯甙(acteoside)[5]、车前草苷A、车前草苷B、车前草苷C、车前草苷D、车前草苷E、车前草苷F、大车前苷、天人草苷A、洋丁香酚苷、异洋丁香酚苷、desrhamnosyl acteoside、calceorioside B、角胡麻苷、异角胡麻苷、水苏苷、紫葳苷、咖啡酸[3]。

3 种车前科植物主要药用成分及营养成分比较研究摘要：采用紫外-可见分光光度法（UV-Vis）、高效液相色谱法（HPLC）、原子吸收法（AAS）、凯氏定氮法及索氏抽提法对3种车前科植物中有效成分和营养成分含量进行测定。

结果表明3种车前科植物中大车前苷、木犀草苷和总黄酮含量存在一定差异，车前中总黄酮类、大车前苷和Fe含量最高，分别为3.36%、0.32%和34.21μg/g；平车前中木犀草苷含量最高；大车前中粗蛋白、粗脂肪、Ca、Mg和Zn含量最高，而平车前中含量最低。

本研究可为合理开发利用车前科植物资源提供理论依据。

关键词:车前；药用成分；营养成分；UV-Vis；HPLC中图分类号：文献标识码：A 文章编号：车前科植物分布广泛，适应性强，含有黄酮类、苯乙酰咖啡糖酯类及三萜类等化学成分，有独特的药用价值和营养价值[1]；车前科车前P lantago asiatica L.及平车前P lantago depressa Willd.的干燥全草为中药车前草，为常用清热利尿药。

大车前P lantagomajor L.的干燥全草为传统藏药大车前草，但药典中未被收录于车前草药材的来源植物中[2]。

车前科植物资源丰富、价格便宜，在畜牧养殖业中无论做中兽药还是做天然植物饲料添加剂都有较好的应用前景。

本研究通过分析比较3种常见车前科植物中所含药用成分及营养成分，以期为其在畜牧养殖业中合理利用提供些许理论依据。

1材料与仪器车前全草和平车前全草均采自新郑市具茨山，大车前全草采自郑东新区白沙。

将车前、平车前及大车前置烘箱中，于105℃杀青20 min，70℃干燥1 h后冷却、粉碎，分别过二号筛，装入分装袋，进行标记，备用。

标准样品为芦丁（ID：5HKB-N91U）、大车前苷（CAS：104777-68-6上海源叶生物科技有限公司）、木犀草苷（CAS：5373-11-5上海源叶生物科技有限公司）；甲醇和乙腈为色谱纯，娃哈哈纯净水，其它试剂为分析纯。

摘要摘要车前子----中医临床常用中药之一。

本论文对车前子的化学成分、车前子的质量标准以及车前素药代动力学进行研究，对阐明中药材车前子的化学成分，建立质量标准具有重要意义；同时也阐明了车前子中车前素的药代动力学规律，为车前素的开发和物效基础的研究提供重要的科学依据。

本论文取得如下成果：1、车前子化学成分研究30kg车前子中药材经粉碎机粉碎后用75%乙醇回流提取，所得提取物分别用三氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇依次萃取。

正丁醇部位采用几种柱层析、反相中压液相、薄层色谱、制备型高效液相等方法，从中分离得到7个化合物，利用波谱解析和理化分析，确定其结构分别为：毛蕊花糖苷(1)、5,7-二羟基色原酮(2)、异香草酸(3)、异毛蕊花糖苷(4)、桃叶珊瑚苷(5)、车前素(6)、京尼平苷酸(7)，其中化合物异香草酸为首次从车前子中分离得到。

2、车前子质量标准的研究首次建立了车前子中车前素的薄层鉴别方法，以乙酸乙酯-甲醇-甲酸(10:0.5:2)为展开剂展开，碘化铋钾-碘化钾碘(1:1)试液为显色剂显色。

结果：薄层色谱法能快速鉴别检出车前素。

该方法经方法学考察，稳定性好，可用于车前子的薄层鉴别。

采用高效液相色谱法测定车前子中车前素、毛蕊花糖苷和异毛蕊花糖苷的含量。

采用CAPCELL PAK C18MGⅡS5色谱柱(250mm×4.6mm,5μm)；以甲醇(A)-水(B)为流动相，梯度洗脱(0～45min，25%A→42%A)；流速为1.0mL/min；检测波长为210nm；柱温为30℃。

结果：车前素、毛蕊花糖苷和异毛蕊花糖苷在0.04491~0.8982μg(r=0.9999)、0.2117~4.2338μg(r=0.9999)和0.01688~ 0.3376μg(r=1.0000)进样范围内与峰面积呈现良好的线性关系。

平均回收率(n =6)分别为99.3%、100.0%和99.1%，RSD分别为0.52%、0.18%和1.9%。

不同产地车前草总灰分及浸出物含量分析马灵珍;周丽娜;李月侠;陆兔林【期刊名称】《皖西学院学报》【年(卷),期】2024(40)2【摘要】为了比较不同产地的车前草以及清洗前后总灰分和浸出物含量的变化,以此为(亳州)中药饮片企业制定针对性的车前草总灰分和浸出物质量标准提供依据。

通过安徽亳州康美药材市场收集八个产地的车前草样品,按照2020版《中国药典》测定方法对其总灰分和浸出物进行测定。

结果显示:山西、河南产的车前草样品灰分含量符合要求,甘肃、贵州、四川、江苏、山东、亳州样品中灰分含量均高于药典标准,分别高出:2.43%、2.56%、5.52%、1.88%、0.36%、2.41%,清洗后均符合药典要求。

各产地浸出物含量无论清洗前后均符合药典标准,不低于14%。

不同产地的车前草样品总灰分含量范围:11.72%~20.63%;清洗后样品总灰分含量范围在:10.90%~16.00%;不同产地的车前草样品浸出物含量范围在:15.35%~32.85%;清洗后浸出物含量范围在:17.10%~28.30%。

因此,不同产地的车前草总灰分含量、浸出物含量均存在差异,清洗后总灰分变化呈下降趋势。

【总页数】11页(P79-89)【作者】马灵珍;周丽娜;李月侠;陆兔林【作者单位】安徽省中医药科学院亳州中医药研究所;亳州职业技术学院药学院;南京中医药大学药学院;亳州市永刚饮片厂有限公司【正文语种】中文【中图分类】R282.71【相关文献】1.不同产地天麻药材总灰分及浸出物含量分析2.不同产地枸杞子中水分、总灰分及铅镉砷汞含量分析3.不同产地、不同生长年限黄芩中水分、总灰分、醇溶性浸出物含量的对比4.基于质量控制分析不同产地绞股蓝的水分、灰分和浸出物含量5.不同产地使君子水分、总灰分、水溶性浸出物的含量测定因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。