斑马鱼Cyclin C的cDNA克隆及其在发育过程中的表达
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斑马鱼中snrpc基因的发育时序表达分析王红莹【期刊名称】《安徽农学通报》【年(卷),期】2016(022)008【摘要】为了深入研究鱼类snrpc基因的作用机制,通过分析斑马鱼snrpc的发育时序表达,来探讨snrpc基因在斑马鱼中的功能机理。
从斑马鱼的胚胎中提取RNA,进行反转录、PCR、克隆等,得到snrpc基因在胚胎发育不同时期的表达水平。
结果表明,在斑马鱼胚胎发育初期,snrpc表达量较高,随着胚胎的不断发育,snrpc的mRNA表达量有所下降,到后期表达量又上升。
因此,snrpc表达量的变化可能预示着snrpc发挥功能的关键时期,对snrpc的克隆和表达分析,为后续进一步研究其相关功能奠定了基础。
【总页数】2页(P14-15)【作者】王红莹【作者单位】中南民族大学生命科学学院,武陵山区特色资源植物种质保护与利用湖北省重点实验室,湖北武汉 430074【正文语种】中文【中图分类】S965.299【相关文献】1.白桦中一花发育相关基因BplAGL的克隆及时序表达分析 [J], 魏继承;任如意;国会艳;宗宪春;郝爱平;杨传平2.Vasa基因在斑马鱼不同发育时期的mRNA表达分析 [J], 孙冬捷;王晨;严继舟3.bach1和bach2在斑马鱼早期发育中的表达分析 [J], 张淑青;吴竞瑶;王晗4.斑马鱼内皮脂肪酶(EL)、丝氨酸磷脂酶(PLA1A)和H型脂肪酶(LH)基因的组织分布与胚胎发育表达分析 [J], 冯东;黄巧艳;刘凯;刘振辉5.Legumain基因在斑马鱼胚胎发育中的表达分析 [J], 贾小娥;朱伟;樊燕;谢伟;姜树原;石蕊;刘晓蕾;许文强;邵国因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
斑马鱼髓过氧化物酶基因的cDNA克隆及结构与功能分析作者:董超华来源:《中国现代医生》2011年第24期[摘要] 目的髓过氧化物酶(MPO)是动物中性粒细胞中的一种血红素蛋白,有多种生物活性。
本研究拟通过分析原始脊椎动物斑马鱼MPO基因的序列和结构,为研究动物MPO演化提供证据。
方法利用RACE技术和生物信息学技术从斑马鱼cDNA中鉴定了一个MPO基因并对其序列和结构进行分析。
结果通过序列比对和结构分析发现,斑马鱼MPO与哺乳动物、鸟类和其他鱼类的髓过氧化物酶基因具有高度序列和结构的相似性。
结论斑马鱼的MPO在动物MPO演化过程中处于过渡地位。
[关键词] 髓过氧化物酶;RACE;斑马鱼[中图分类号] Q78 [文献标识码] A [文章编号] 1673-9701(2011)24-08-03Cloning and Characterization of Myeloperoxidase Gene from Zebrafish (Danio rerio)DONG ChaohuaCollege of Life Sciences, Qingdao Agricultural University, Qingdao 266109, China[Abstract] Objective Myeloperoxidase (MPO) is a hemoprotein present in the animal neutrophils and it has a variety of biological activities. The objective of the present study is to provide evidences for investigating the evolution of MPO. Methods A new MPO gene was cloned and characterized using RACE technology from zebrafish. Sequence and structural analysis was performed using bioinformatics technology. Results Sequence alignment and structural analysis showed that zebrafish MPO had high sequence and structural similarities with other myeloperoxidase from mammals, birds and other fishes. Conclusion MPO identified from zebrafish is in a transitional position.[Key words] Myeloperoxidase; RACE; Zebrafish髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)是动物中性粒细胞中的一种血红素蛋白,有多种生物活性,与许多疾病的发生与发展密切相关[1-4]。
斑马鱼原肌球蛋白基因克隆表达及免疫学鉴定李荔;陈樱麟;闫浩;刘志刚【期刊名称】《水产科学》【年(卷),期】2013(32)1【摘要】克隆斑马鱼原肌球蛋白的基因并表达纯化出重组蛋白,对其免疫学特性进行鉴定.提取斑马鱼总RNA,采用RT-PCR克隆斑马鱼原肌球蛋白的全长基因,根据序列设计带有酶切位点的特异性引物,扩增斑马鱼原肌球蛋白基因的完整开放阅读框,连入载体pET-28a,在大肠杆菌BL21 (DE3)菌株中通过IPTG诱导得到重组斑马鱼原肌球蛋白.重组蛋白经Ni2+亲和层析柱纯化后进行Western-blot检测.获得斑马鱼原肌球蛋白基因,Western-blot结果显示重组蛋白具有良好的免疫活性.本研究成功克隆并表达了斑马鱼原肌球蛋白基因,经免疫学鉴定发现其具有过敏原性.【总页数】5页(P26-30)【作者】李荔;陈樱麟;闫浩;刘志刚【作者单位】深圳大学过敏反应与免疫学研究所,广东深圳 518060;深圳大学过敏反应与免疫学研究所,广东深圳 518060;深圳大学过敏反应与免疫学研究所,广东深圳 518060;深圳大学过敏反应与免疫学研究所,广东深圳 518060【正文语种】中文【中图分类】Q786【相关文献】1.灰飞虱原肌球蛋白的基因克隆、原核表达及多克隆抗体制备 [J], 徐秋芳;陈晴晴;倪海平;李硕;张金凤;周益军2.罗氏沼虾原肌球蛋白基因的克隆表达及变应原性鉴定 [J], 罗伟芝;符春荣;邬玉兰;陈献雄;刘志刚;黄海珍3.红星梭子蟹变应原原肌球蛋白基因的克隆、表达及其免疫学鉴定 [J], 吴凯威;刘志刚4.牡蛎主要过敏原原肌球蛋白的重组表达及鉴定 [J], 张江涛;李国明;方磊;刘艳;崔欣悦;鲁军5.斑马鱼ftr56基因克隆表达及功能研究 [J], 邝鸣; 刘皖蒙; 姚健; 霍诗天; 刘学芹因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
斑马鱼CFL基因的克隆、多克隆抗体的制备及分析王盼盼;彭夕洋;易珍;江志刚;邓云;吴秀山;万永奇【期刊名称】《湖南文理学院学报(自然科学版)》【年(卷),期】2013(000)004【摘要】在心脏发育过程中,相关基因的正常表达是有功能心脏形成的关键.斑马鱼CFL基因是从斑马鱼胚胎的cDNA文库中克隆出来的一个心脏发育候选基因.生物信息学分析表明:CFL基因编码278个氨基酸,含有一个CXXC结构域.为进一步研究该基因的功能,采用生物信息学结合RT-PCR的方法获得了该基因.将所得片段插入原核表达载体pET-28a载体中,经测序鉴定正确后转化入Rosetta菌株中,用IPTG诱导表达出pET-28a-CFL融合蛋白,表达的融合蛋白占菌体总蛋白的71%,融合蛋白相对分子质量约为30 kD.经包涵体纯化后,免疫新西兰大白兔制备了多克隆抗体.经验证,具有较好的特异性和较高的效价,可以用作 western-blot免疫印迹等实验分析.%The normal expression of related genes is critical in the heart development process. To explore the heart development related genes, to provide the basis to understand the pathogenesis of congenital heart disease and interventional treatment. CFL gene is a candidate gene for heart development from Zebrafish cDNA library. Bioinformatics analysis revealed that it contains CXXC domain, and encoding 278 amino acids. To further investigate the possible functions of CFL in the process of heart development, the full length of CFL gene was cloned and inserted into pET-28a vector.The His-CFL fusion protein was induced by IPTG, the expression of fusion protein accounts for 71 of totalbacteria protein. The relative molecular mass is about 30 kD. After inclusion body purification, immune the New Zealand white rabbit to prepared polyclonal antibody and was indentifited by western blot. These results demonstrate that the high titer polyclonal antibody was obtained.【总页数】5页(P24-28)【作者】王盼盼;彭夕洋;易珍;江志刚;邓云;吴秀山;万永奇【作者单位】湖南师范大学蛋白质化学及鱼类发育生物学教育部重点实验室心脏发育研究中心,湖南长沙,410081;湖南师范大学蛋白质化学及鱼类发育生物学教育部重点实验室心脏发育研究中心,湖南长沙,410081;湖南师范大学蛋白质化学及鱼类发育生物学教育部重点实验室心脏发育研究中心,湖南长沙,410081;湖南师范大学蛋白质化学及鱼类发育生物学教育部重点实验室心脏发育研究中心,湖南长沙,410081;湖南师范大学蛋白质化学及鱼类发育生物学教育部重点实验室心脏发育研究中心,湖南长沙,410081;湖南师范大学蛋白质化学及鱼类发育生物学教育部重点实验室心脏发育研究中心,湖南长沙,410081;湖南师范大学蛋白质化学及鱼类发育生物学教育部重点实验室心脏发育研究中心,湖南长沙,410081【正文语种】中文【中图分类】Q75【相关文献】1.斑马鱼Nfatc3基因多克隆抗体的制备及检测 [J], 冯德峰;屈永贵;袁佳佳;陈发;吴秀山;李永青2.斑马鱼Fbxl5基因多克隆抗体的制备与检测 [J], 盛力翔;冯德峰;罗世锋;吴秀山;戴国;莫小阳3.斑马鱼基因ATF4多克隆抗体的制备 [J], 李发祥;杨荣;陈婷芳;唐雄卓;赵碧峰;江志钢;张义;李永青;吴秀山4.斑马鱼Foxp4基因多克隆抗体的制备及检测 [J], 刘华友;朱玲;李帆;王琨;江志钢;吴秀山;李永青5.斑马鱼ANF基因的克隆及多克隆抗体的制备 [J], 李竞超;吴坚;梁艳;莫小阳;吴秀山因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
斑节对虾cyclin H基因的原核表达和蛋白纯化郭松;傅明骏;赵超;江世贵;杨其彬;彭超;李伟杰;邱丽华【摘要】cyclin H是细胞分裂周期调控中的重要因子,研究斑节对虾cyclin H对阐明斑节对虾卵巢发育机制有重要意义.构建了斑节对虾cyclinH的重组表达质粒pET21a/cyclinH,利用原核表达技术进行诱导表达获得目的蛋白,并用亲和层析技术进行纯化,用SDS-PAGE、Western blot和质谱联用分析诱导和纯化结果.结果表明,斑节对虾cyclin H重组蛋白获得了表达,纯化的蛋白经鉴定为cyclin H重组蛋白;在22℃和37℃培养条件下,重组蛋白在LA和YTGA两种培养基上均能被诱导表达;22℃条件下,部分融合蛋白为可溶性表达;在37℃培养条件下LA培养基获得较好的效果,且均以包涵体形式存在.【期刊名称】《广东农业科学》【年(卷),期】2015(042)003【总页数】6页(P125-130)【关键词】斑节对虾;细胞周期蛋白H;原核表达【作者】郭松;傅明骏;赵超;江世贵;杨其彬;彭超;李伟杰;邱丽华【作者单位】中国水产科学研究院南海水产研究所,广东广州 510300;上海海洋大学水产与生命学院,上海201306;中国水产科学研究院南海水产研究所,广东广州510300;农业部南海渔业资源开发利用重点实验室,广东广州510300;中国水产科学研究院南海水产研究所,广东广州 510300;农业部南海渔业资源开发利用重点实验室,广东广州510300;中国水产科学研究院南海水产研究所,广东广州 510300;农业部南海渔业资源开发利用重点实验室,广东广州510300;中国水产科学研究院南海水产研究所,广东广州 510300;农业部南海渔业资源开发利用重点实验室,广东广州510300;中国水产科学研究院南海水产研究所,广东广州 510300;上海海洋大学水产与生命学院,上海201306;中国水产科学研究院南海水产研究所,广东广州510300;上海海洋大学水产与生命学院,上海201306;中国水产科学研究院南海水产研究所,广东广州 510300;农业部南海渔业资源开发利用重点实验室,广东广州510300【正文语种】中文【中图分类】S917.4斑节对虾(Penaeus monodon)是世界三大对虾养殖品种之一[1-3]。
Rap1基因在斑马鱼胚胎早期发育过程中的时空表达谱研究杨小燕;何志旭;舒莉萍;金皎;黄璟;吴莎莎;马健娟【摘要】目的:选择斑马鱼作为实验动物模型,研究Rap1基因在胚胎早期发育过程中的时空表达规律。
方法从斑马鱼胚胎cDNA中克隆Rap1基因片段,将Rap1基因片段和pCS2+质粒进行体外连接重组,重组质粒经双酶切、菌落聚合酶链反应(PCR)及测序鉴定正确后,经T3RNA体外转录体系合成DIG标记的Rap1基因反义mRNA探针,采用整胚原位杂交方法检测Rap1在斑马鱼胚胎早期发育过程的表达情况。
结果在斑马鱼胚胎0.75 hpf的细胞分裂连接处、3.70 hpf和6.00 hpf的动物极、12.00~72.00 hpf的脊索神经部位均可见Rap1基因的阳性杂交信号。
结论 Rap1基因在斑马鱼脊索神经系统的早期发育过程中可能起到重要的调控作用。
%Objective To choose zebrafish as the experimental animal model for studying the spatiotemporal expression rule of rap1 gen in zebrafish embryo early development process .Methods The Rap1 gene f ragment was cloned from the zebrafish emby‐oscDNA ,then the Rap1 gene fragment and pCS2+ plasmid were performed the in vitro connetion and recombination was extracted , the combinant plasmid was correct after the double enzyme digestion ,colony PCR and sequencing identification .T3 RNA polymer‐ase in vitro transcription system was used to obtain the digoxin (DIG)‐labeled anti‐sense mRNA probe of Rap1gene .The whole mount in situ hybridization method was adopted to detect the Rap1 expression in zebrafish embryo early development process . Results The positive hybridization signal of Rap1 gene was detected at the cell division junction region of 0 .75 hpf ,animal pole of3 .70 hpf and 6 .00 hpf ,and notochord of 12 .00 -72 .00 hpf .Conclusion Rap1 gene might be involved in the early development process of notochord nervous system in zebrafish .【期刊名称】《重庆医学》【年(卷),期】2016(045)020【总页数】4页(P2748-2751)【关键词】Rap1基因;斑马鱼;原位杂交;基因表达【作者】杨小燕;何志旭;舒莉萍;金皎;黄璟;吴莎莎;马健娟【作者单位】贵州医科大学附属医院儿科 550004;贵州医科大学附属医院儿科550004; 贵州医科大学组织工程与干细胞实验中心 550004;贵州医科大学组织工程与干细胞实验中心 550004; 贵州医科大学免疫学教研室,贵阳550004;贵州医科大学附属医院儿科 550004;贵州医科大学附属医院儿科 550004;贵州医科大学附属医院儿科 550004;贵州医科大学附属医院儿科 550004【正文语种】中文【中图分类】Q132.4Rap1又称Ras相关GTP结合蛋白,是Kitayama在筛选NIH/3细胞中抑制Ras 蛋白转化功能的蛋白分子过程中发现的。
斑马鱼胚胎发育中的基因表达和动态调节机制斑马鱼是一种非常常见的观赏鱼类,它具有非常高的观赏价值。
不过除了这种独特的外貌,斑马鱼在科学研究中也扮演着非常重要的角色。
因为斑马鱼的胚胎发育过程非常短,只需要几天时间就能在卵黄中进行整个体系的发育,这使得研究人员可以非常方便地对斑马鱼的胚胎发育过程进行研究和观测。
通过对斑马鱼胚胎发育中基因的表达和动态调节机制的研究,我们能够更好地理解动物胚胎发育过程中的机制,同时也能够为后来的生物医学研究奠定基础。
在斑马鱼的胚胎发育过程中,基因表达和动态调节机制起着非常重要的作用。
在胚胎发育的过程中,基因编码的信息会被转录成RNA分子,RNA分子再被翻译成蛋白质。
这些蛋白质随后会参与到各种生物化学反应以及细胞信号传递中,最终构建出斑马鱼的体系。
因此,研究人员可以利用斑马鱼胚胎发育中基因的表达和调节机制来推导它所合成的蛋白质,以及它所参与的反应和细胞信号传递。
在斑马鱼的胚胎发育过程中,基因表达和动态调节机制发挥着非常复杂的作用。
斑马鱼的卵子中充满了各种各样的RNA分子,这些RNA分子可以参与到胚胎发育的过程中。
同时,斑马鱼的胚胎细胞中也充满了各种各样的转录因子和调控蛋白质。
这些转录因子和调控蛋白质都可以对基因的表达和调节产生影响。
通过对这些基因表达和调节机制的研究,研究人员可以逐步地揭示出斑马鱼在胚胎发育过程中所使用的机制。
例如,在斑马鱼的胚胎发育过程中,存在着一类非常关键的基因,它们被称为是胚胎轴形成基因。
这些基因可以控制胚胎发育过程中的体轴向形成。
研究人员发现,这些基因的表达和调节机制是非常精密的。
在斑马鱼的胚胎发育初期,这些基因会被不同的信号通路所调控,使它们能够被精确地表达在体轴向形成需要的位置。
在后来的发育过程中,这些基因的表达和调节机制还会发生相应的变化,以应对斑马鱼在不同发育阶段所需要的不同的身体结构。
除了基因表达和调节机制外,斑马鱼胚胎发育过程中的其他机制也是非常关键的。