显微鉴定及显微化学反应常用试液的配制方法
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试液配制方法范文试液是科研、工业生产以及医学诊断等领域常用的实验试剂之一,通过试液的酸碱度、浓度等性质的测量,可以帮助人们进行实验分析和病症判断。
试液配制是制备试液的过程,一般包括试剂的溶解、配制和混合等步骤。
下面将介绍一种常见的试液配制方法。
试液的配制方法主要有溶液配制、体积浓度配制和稀释法配制等。
一、溶液配制溶液配制是将试剂固体溶解在溶剂中,制备出一定浓度的溶液。
以下是一种常见的溶液配制方法:1.首先,准备所需试剂和溶剂,确保试剂的纯度和溶剂的纯净度。
2.称取所需试剂的质量,注意要按照要求的摩尔比例,遵循化学反应的平衡条件。
3.准确计量所需量的溶剂,按照一定比例倒入容器中。
4.取适量的溶剂加热,使其温度升高,促进试剂的溶解。
温度一般不超过试剂的沸点,以避免试剂的不稳定。
5.慢慢将试剂加入溶剂中,同时搅拌,使溶剂中的试剂充分溶解。
6.倒入培养皿或瓶中,使用前要充分搅拌均匀。
二、体积浓度配制体积浓度配制是按照一定的比例将试剂溶液和溶剂混合,制备出一定体积浓度的溶液。
以下是一种常见的体积浓度配制方法:1.准备所需试剂和溶剂,确保试剂的纯度和溶剂的纯净度。
2.根据所需的体积浓度和配制体积计算所需试剂和溶剂的体积。
3.将试剂溶液倒入试管或容器中。
4.慢慢加入溶剂,同时搅拌,直到溶液充分混合均匀。
5.倒入培养皿或瓶中,使用前要充分搅拌均匀。
三、稀释法配制稀释法配制是将浓度较高的试液通过稀释,制备出所需浓度的试液。
以下是一种常见的稀释法配制方法:1.准备所需试剂和稀释溶剂,确保试剂的纯度和稀释溶剂的纯净度。
2.确定所需的浓度和体积,计算所需浓度的试液和稀释溶剂的体积比例。
3.将试液倒入一个容器中。
4.慢慢添加稀释溶剂,同时搅拌,直到试液充分稀释。
5.倒入培养皿或瓶中,使用前要充分搅拌均匀。
试液配制方法不同,其步骤也会有所差异。
在配制试液过程中,需要严格控制试剂和溶剂的质量和比例,确保配制出的试液符合预期要求。
试液水合氯醛试液:此液为常用封藏液,也是透化剂。
可使干缩的细胞膨胀而透明,并能溶解淀粉粒、树脂、蛋白质、叶绿素及挥发油等,加热后透化效果更为明显。
配制:取水合氯醛50g,加水15ml与甘油10ml使溶解,即得。
甘油醋酸试液(斯氏液):此液为常用封藏液。
专用于观察淀粉粒形态,可使淀粉粒保持原形,便于测量其大小。
配制:取甘油、50%醋酸与水各一份,混合,即得。
甘油乙醇试液:此液为封藏液,也是软化剂。
常用于保存植物性材料及临时切片,有软化组织的作用。
配制:取甘油、稀乙醇各一份,混合,即得。
苏丹III试液:此液可使木栓化、角质化细胞壁及脂肪油、挥发油、树脂等染成红色或淡红色。
配制:取苏丹III0.01g,加90%乙醇5ml溶解后,加甘油5ml,摇匀,即得。
本液应置棕色玻璃瓶中保存,在2个月内应用。
钌红试液:此液可使黏液染成红色。
本液应临用新制。
配制:取10%醋酸钠溶液1-2ml,加钌红适量使呈酒红色,即得。
本液应临用新制。
间苯三酚试液:此液与盐酸何用,可使木化细胞壁染成红色或紫红色。
配制:取间苯三酚0.5g,加乙醇使溶解成25ml,即得。
本品应置玻璃塞瓶中,在暗处保存。
碘试液:此液可使淀粉粒染成蓝色或紫色;蛋白质或糊粉粒染成棕色或黄棕色。
(碘滴定液)硝铬酸试液:此液为常用的“植物组织解离液”,解离浸泡时间,按样品的质地不同而异。
配制:(1)取硝酸10ml,加水100ml水中,混匀。
(2)取三氧化铬10g,加水100ml使溶解。
用时将两液等量混合,即得。
α-萘酚试液:此液可使菊糖染成紫红色,并很快溶解。
配制:取15%的α-萘酚乙醇溶液10.5%,缓缓加硫酸6.5ml,混匀后再加乙醇40.5ml及水4ml,混合,即得。
硝酸汞试液:(米隆试液)此液可使糊粉粒染成砖红色。
配制:取黄氧化汞40g,加硝酸32ml与水15ml使溶解,即得。
本品应置玻璃塞瓶中,在暗处保存。
氯化锌碘试液:此液用于检查木质化与纤维素细胞壁,前者显黄棕色,后者显蓝色或紫色。
常用试剂及配置方法(一)化学成分定性反应试剂1、5%α-萘酚试剂α-萘酚5g,加乙醇100ml溶解,如不澄清,可过滤,装棕色瓶备用;2、费林(Fehling)试剂甲液:6.92g硫酸铜结晶、溶于100ml水中。
乙液:34.6g酒石酸钾钠的结晶、10g氢氧化钠共溶于100ml水中,贮藏于带橡皮塞的试剂瓶中。
使用时取甲、乙二液等量混合。
3、10%盐酸盐酸27ml,加蒸馏水使成100ml。
4、10%氧氧化钠氢氧化钠10g,加蒸馏水使成100ml。
5、苦味酸钠试纸取滤纸条浸入苦味酸饱和水溶液中,浸透后取出晾干,再浸入10%碳酸钠水溶液中,迅速取出,晾干即得。
6、普鲁土蓝试剂(1)10%氢氧化钾试液氢氧化钾6.5g,加蒸馏水使成100ml。
(2)10%硫酸亚铁水溶液取硫酸亚铁结晶8g。
加新沸过的冷蒸馏水使成250ml。
应临用时新鲜配制。
(3)10%盐酸溶液。
(4)5%三氯化铁溶液三氯化铁5g,加适量的蒸馏水使溶解成100ml。
7、1%三氯化铁试剂三氯化铁1g,加蒸馏水使溶解成100ml。
8、1%氢氧化钠试液氢氧化钠1g,加蒸馏水使成100ml。
9、1%醋酸镁甲醇液醋酸镁1g,加甲醇100ml。
10、1%三氯化铝乙醇液三氯化铝1g,溶解于100ml乙醇中。
11、0.9%氯化钠溶液氯化钠0.09g,加水100ml。
12、1.8%氯化钠溶液氯化钠1.8g,加水100ml。
13、2%红细胞生理盐水混悬液兔血10ml,放在盛有玻璃珠的三角烧瓶中,振摇10分钟,除去纤维蛋白,把脱纤维血倒在离心管中,加生理盐水混匀后,离心,使血细胞下沉,反复2~3次,至生理盐水不再显红色,取以上红细胞2ml,加生理盐水100ml,稀释成2%的红细胞混悬液(本液须置冰相保存,存期2~3天)。
14、0.15%三氯化铁-冰醋酸溶液1%三氯化铁溶液0.5ml,加冰醋酸100ml。
15、醋酸铅试液取醋酸铅9.5g,加新煮沸过的冷蒸馏水使成100ml。
1.⼄醇制氢氧化钾试液可取⽤⼄醇制氢氧化钾滴定液(0.5mol/L)。
2. ⼄醇制氨试液取⽆⽔⼄醇,加浓氨溶液使每100ml中含NH3 9~11g,即得。
本液应置橡⽪塞瓶中保存。
3. ⼄醇制硝酸银试液取硝酸银4g,加⽔10ml溶解后,加⼄醇使成100ml,即得。
⼄醇制溴化汞试液取溴化汞2.5g,加⼄醇50ml,微热使溶解,即得。
本液应置玻璃塞瓶内,在暗处保存。
⼀氯化碘试液取碘化钾0.14g与碘酸钾90mg,加⽔125ml使溶解,再加盐酸125ml,即得。
本液应置玻璃瓶内,密闭,在凉处保存。
4. N-⼄酰-L-酪氨酸⼄酯试液取N-⼄酰-L-酪氨酸⼄酯24.0mg,加⼄醇0.2ml使溶解,加磷酸盐缓冲液(取0.067mol/L磷酸⼆氢钾溶液38.9ml与0.067mol/L磷酸氢⼆钠溶液61.6ml,混合,pH值为7.0)2ml,加指⽰液(取等量的0.1%甲基红的⼄醇溶液与 0.05%亚甲蓝的⼄醇溶液,混匀)1ml,⽤⽔稀释⾄10ml,即得。
5. ⼄醇制对⼆甲氨基苯甲醛试液取对⼆甲氨基苯甲醛1g,加⼄醇9.0ml与盐酸2.3ml使溶解,再加⼄醇⾄100ml,即得。
6. ⼆⼄基⼆硫代氨基甲酸钠试液取⼆⼄基⼆硫代氨基甲酸钠0.1g,加⽔100ml溶解后,滤过,即得。
7. ⼆硝基苯试液取间⼆硝基苯2g,加⼄醇使溶解成100ml,即得。
8. ⼆硝基苯甲酸试液取3,5-⼆硝基苯甲酸1g,加⼄醇使溶解成100ml,即得。
9. ⼆硝基苯肼试液取2,4-⼆硝基苯肼1.5g,加硫酸溶液(1→2)20ml,溶解后,加⽔使成100ml,滤过,即得。
10. ⼆⼄基⼆硫代氨基甲酸银试液取⼆⼄基⼆学易,收集整理硫代氨基甲酸银0.25g,加氯仿适量与三⼄胺1.8ml,加氯仿⾄100ml,搅拌使溶解,放置过夜,⽤脱脂棉滤过,即得。
本液应置棕⾊玻璃瓶中,密塞,置阴凉处保存。
11. ⼆苯胺试液取⼆苯胺1g,加硫酸100ml使溶解,即得。
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显微化学鉴定法
1.细胞壁性质的鉴别
(1)⽊质化细胞壁:加间苯三酚试液1~2滴,稍放置,加盐酸l滴,因⽊化程度不同,显红⾊或紫红⾊。
(2)⽊栓化或⾓质化细胞壁:加苏丹Ⅲ试液,稍放置或微热,显橘红⾊⾄红⾊。
(3)纤维素细胞壁:加氯化锌碘试液,或先加碘试液湿润后,稍放置,再加硫酸溶液(33→50),显蓝⾊或紫⾊。
(4)硅质化细胞壁:加硫酸⽆变化。
2.细胞内含物性质的鉴别
(1)淀粉粒:①加碘试液,显蓝⾊或紫⾊。
②⽤⽢油醋酸试液装置,置偏光显微镜下观察,未糊化的淀粉粒显偏光现象;已糊化的⽆偏光现象。
(2)糊粉粒:①加碘试液,显棕⾊或黄棕⾊。
②加硝酸汞试液,显砖红⾊。
(3)脂肪油、挥发油或树脂①加苏丹Ⅲ试液,显橘红⾊、红⾊或紫红⾊。
②加90%⼄醇,脂肪油不溶解(蓖⿇油及巴⾖油例外),挥发油则溶解。
(4)菊糖:加10%α-萘酚⼄醇溶液,再加硫酸,显紫红⾊并很快溶解。
(5)黏液:加钌红试液,显红⾊。
(6)草酸钙结晶:①加稀醋酸不溶解,加稀盐酸溶解⽽⽆⽓泡发⽣。
②加硫酸溶液(1→2),逐渐溶解,⽚刻后析出针状硫酸钙结晶。
(7)碳酸钙结晶(钟乳体):加稀盐酸溶解,同时有⽓泡发⽣。
(8)硅质:加硫酸不溶解。
101. 硫酸钙试液本液为硫酸钙的饱和⽔溶液。
硫酸钛试液取⼆氧化钛0.1g,加硫酸100ml,加热使溶解,放冷,即得。
102. 硫酸钾试液取硫酸钾1g,加⽔使溶解成100ml,即得。
103. 硫酸铜试液取硫酸铜12.5g,加⽔使溶解成100ml,即得。
104. 硫酸铜铵试液取硫酸铜试液适量,缓缓滴加氨试液,⾄初⽣的沉淀将近完全溶解,静置,倾取上层的清液,即得。
本液应临⽤新制。
105. 硫酸镁试液取未风化的硫酸镁结晶12g,加⽔使溶解成100ml,即得。
106. 稀硫酸镁试液取硫酸镁2.3g,加⽔使溶解成100ml,即得。
107. 氰化钾试液取氰化钾10g,加⽔使溶解成100ml,即得。
108. 氯试液本液为氯的饱和⽔溶液。
本液应临⽤新制。
109. 氯化三苯四氮唑试液取氯化三苯四氮唑1g,加⽆⽔⼄醇使溶解成200ml,即得。
110. 氯化亚锡试液取氯化亚锡1.5g,加⽔10ml与少量的盐酸使溶解,即得。
本液应临⽤新制。
111. 氯化⾦试液取氯化⾦1g,加⽔35ml使溶解,即得。
112. 氯化钙试液取氯化钙7.5g,加⽔使溶解成100ml,即得。
113. 氯化钡试液取氯化钡的细粉5g,加⽔使溶解成100ml,即得。
114. 氯化钴试液取氯化钴2g,加盐酸1ml,加⽔溶解并稀释⾄100ml,即得。
115. 氯化铂试液取氯化铂2.6g,加⽔使溶解成20ml,即得。
116. 氯化铵试液取氯化铵10.5g,加⽔使溶解成100ml,即得。
117. 氯化铵镁试液取氯化镁5.5g与氯化铵7g,加⽔65ml溶解后,加氨试液35ml,置玻璃瓶内,放置数⽇后,滤过,即得。
本液如显浑浊,应滤过后再⽤。
118. 氯化锌碘试液取氯化锌20g,加⽔10ml使溶解,加碘化钾2g溶解后,再加碘使饱和,即得。
本液应置棕⾊玻璃瓶内保存。
119. 氯亚胺基-2,6-⼆氯醌试液取氯亚胺基-2,6-⼆氯醌1g,加⼄醇200ml使溶解,即得。
附录一显微鉴定及显微化学反应常用试液的配制方法1.水合氯醛试液:取水合氯醛50 g,加蒸馏水l 5m1与甘油10m1使溶解,即得。
此为常用的透化剂,能使细胞组织透明清晰,能溶解淀粉粒,蛋白质。
挥发油、树脂、叶绿素等,但不溶解草酸钙或碳酸钙晶体等.它亦有使皱缩的细胞膨胀而恢复原状的作用。
2.稀甘油试液:取甘油33ml,加蒸馏水10ml,再加樟脑少许或液化苯酚1滴,即得。
本品为临时切片的常用封藏液之一。
经水合氯醛透化的显微标本滴加稀甘油封藏,可防止水合氯醛结晶析出而避免干扰观察。
3.甘油醋酸试液(斯氏溶液):取甘油、50%醋酸、蒸馏水各等分,混合,即得。
此为常用的一种封藏剂,能在较长时间内保持淀粉粒的形状、大小,防止淀粉粒崩解,以便于显微观察和测量大小.4.间苯三酚试液:取间苯三酚1g,加95%乙解100ml使溶解,即得。
置棕色瓶内,在暗处保存。
样品加本试液2—3分钟后,再加浓盐酸或浓硫酸1滴,木质化细胞壁显红色,红色的深度与木质化的程度有关。
5.苏丹Ⅲ试液:取苏丹Ⅲ0.01g加90%乙醇5m1,溶解后,加甘油5m1,摇匀,即得。
应置棕色瓶中保存,在2个月内应用。
此液能使木栓化或角质化的细胞壁及脂肪油树脂等染成红色或桔红色。
6.氯化锌碘试液:取碘化钾8g,加水8.5ml使溶解,再加无水氯化锌2.5g溶解后,加适量碘使达饱和状态,即得。
本试液置棕色玻璃瓶内保存。
用于鉴别纤维素细胞壁和木化细胞壁,前者显蓝色或蓝紫色,后者呈黄色或棕色。
7.铜氨试液:取硫酸铜0.5g,加蒸馏水适量,置乳钵中研磨,再加浓氨水10ml 使溶解,即得。
本试液在使用时配制,贮存时间一般不得超过2个月。
能使纤维素细胞壁染成浅蓝色,并逐渐膨胀而溶解:半纤维素细胞壁与纤维素细胞壁反应同,但前者遇水强烈膨胀。
8.稀碘液:取碘化钾0.5g溶少量蒸馏水中,加碘lg,溶解后加水至100ml,即得,使用时,通常还要稀释至谈棕色或淡棕黄色。
置棕色玻璃瓶内保存。
常用试液及配制方法硫代乙酰胺试液取硫代乙酰胺4g,加水使溶解成100ml,置冰箱中保存。
临用前取混合液[由1mol/L氢氧化钠溶液15ml、水及甘油20ml组成],加上述硫代乙酰胺溶液,置水浴上加热20秒钟,冷却,立即使用。
硫代硫酸钠试液可取用硫代硫酸钠滴定液L)。
硫氰酸汞铵试液取硫氰酸铵5g与二氯化汞,加水使溶解成100ml,即得。
硫氰酸铵试液取硫氰酸铵8g,加水使溶解成100ml,即得。
硫酸汞试液取黄氧化汞5g,加水40ml后,缓缓加硫酸20ml,随加随搅拌,再加水40ml,搅拌使溶解,即得。
硫氰酸铬铵试液取硫氰酸铬铵,加水20ml,振摇1小时后,滤过,即得。
本液应临用新制。
配成后48小时即不适用。
硫酸亚铁试液取硫酸亚铁结晶8g,加新沸过的冷水100ml使溶解,即得。
本液应临用新制。
硫酸苯肼试液取盐酸苯肼60mg,加硫酸溶液(1→2)100ml使溶解,即得。
硫酸钙试液本液为硫酸钙的饱和水溶液。
硫酸钛试液取二氧化钛,加硫酸100ml,加热使溶解,放冷,即得。
硫酸钾试液取硫酸钾1g,加水使溶解成100ml,即得。
硫酸铜试液取硫酸铜,加水使溶解成100ml,即得。
硫酸铜铵试液取硫酸铜试液适量,缓缓滴加氨试液,至初生的沉淀将近完全溶解,静置,倾取上层的清液,即得。
本液应临用新制。
硫酸镁试液取未风化的硫酸镁结晶12g,加水使溶解成100ml,即得。
稀硫酸镁试液取硫酸镁,加水使溶解成100ml,即得。
氰化钾试液取氰化钾10g,加水使溶解成100ml,即得。
氯试液本液为氯的饱和水溶液。
本液应临用新制。
氯化三苯四氮唑试液取氯化三苯四氮唑1g,加无水乙醇使溶解成200ml,即得。
氯化亚锡试液取氯化亚锡,加水10ml与少量的盐酸使溶解,即得。
本液应临用新制。
氯化金试液取氯化金1g,加水35ml使溶解,即得。
氯化钙试液取氯化钙,加水使溶解成100ml,即得。
氯化钡试液取氯化钡的细粉5g,加水使溶解成100ml,即得。
101.硫酸钙试液本液为硫酸钙的饱和水溶液。
硫酸钛试液取二氧化钛0.1g,加硫酸100ml,加热使溶解,放冷,即得。
102.硫酸钾试液取硫酸钾1g,加水使溶解成100ml,即得。
103.硫酸铜试液取硫酸铜12.5g,加水使溶解成100ml,即得。
104.硫酸铜铵试液取硫酸铜试液适量,缓缓滴加氨试液,至初生的沉淀将近完全溶解,静置,倾取上层的清液,即得。
本液应临用新制。
105.硫酸镁试液取未风化的硫酸镁结晶12g,加水使溶解成100ml,即得。
106.稀硫酸镁试液取硫酸镁2.3g,加水使溶解成100ml,即得。
107.氰化钾试液取氰化钾10g,加水使溶解成100ml,即得。
108.氯试液本液为氯的饱和水溶液。
本液应临用新制。
109.氯化三苯四氮唑试液取氯化三苯四氮唑1g,加无水乙醇使溶解成200ml,即得。
110.氯化亚锡试液取氯化亚锡1.5g,加水10ml与少量的盐酸使溶解,即得。
本液应临用新制。
111.氯化金试液取氯化金1g,加水35ml使溶解,即得。
112.氯化钙试液取氯化钙7.5g,加水使溶解成100ml,即得。
113.氯化钡试液取氯化钡的细粉5g,加水使溶解成100ml,即得。
114.氯化钴试液取氯化钴2g,加盐酸1ml,加水溶解并稀释至100ml,即得。
115.氯化铂试液取氯化铂2.6g,加水使溶解成20ml,即得。
116.氯化铵试液取氯化铵10.5g,加水使溶解成100ml,即得。
117.氯化铵镁试液取氯化镁5.5g与氯化铵7g,加水65ml溶解后,加氨试液35ml,置玻璃瓶内,放置数日后,滤过,即得。
本液如显浑浊,应滤过后再用。
118.氯化锌碘试液取氯化锌20g,加水10ml使溶解,加碘化钾2g溶解后,再加碘使饱和,即得。
本液应置棕色玻璃瓶内保存。
119.氯亚胺基-2,6-二氯醌试液取氯亚胺基-2,6-二氯醌1g,加乙醇200ml使溶解,即得。
稀乙醇取乙醇529ml,加水稀释至1000ml,即得。
植物细胞的结构紫色洋葱细胞碘化铋钾的配制:直接用碘化铋钾0.85g,加冰醋酸10ml与水40ml溶解后,摇匀,即得。
水合氯醛的配制:稀甘油配制:稀碘液配制:碘-碘化钾溶液配制:临时装片的制作方法操作步骤口诀:擦、滴、取、展、盖、染、吸。
1、准备擦——用洁净的纱布把载玻片和盖玻片擦拭干净滴——把载玻片放在实验台上,用吸管在载玻片上滴一滴蒸馏水2、制片取(撕、刮、切、挑)——用镊子从洋葱鳞片叶内表皮上撕取一小块方形透明薄膜放(展、抹)——将撕下的洋葱鳞片叶内表皮浸入载玻片上的水滴中,用镊子轻轻展平盖——用镊子轻夹盖玻片的一边,使盖玻片另一边先接触载玻片上的水滴,而后慢慢地把盖玻片轻轻盖在材料上,尽量避免气泡产生。
如有气泡,可用镊子从盖玻片的一侧掀起,然后再慢慢重新盖上。
如有水溢出盖玻片,用吸水纸吸干净3、染色染——滴一滴染液(中性红试液、碘化钾试液)在盖玻片一侧,用吸水纸在另一侧吸引,直至染液浸润到标本的全部,如有染液溢出,用吸水纸吸干净洋葱内表皮细胞注意识别下列各部分:(1)细胞壁为植物细胞所特有。
为细胞的最外层,比较透明。
调节细调焦螺旋可见两细胞间实际上为三层;两侧为相邻两个细胞的细胞壁;中间是两个细胞共有的胞间层。
(2)细胞质:为无色透明的胶状物,紧贴在细胞壁以内,被中央大液泡挤成一薄层,仅细胞两端较明显。
(3)细胞核:埋在细胞质内;贴近细胞侧壁的只见其窄蔺,呈扁圆形,贴在上、下整的可见其宽面,呈球形。
仔细观察,可见包在细胞核外面的核膜,细胞核内有1—3个发亮的颗粒,即核仁。
(有的细胞看不见细胞核是因为该细胞被撕破,只剩一半了)(4)液泡:位于细胞中央,占细胞体积的大部分,由于澈泡内充满细胞液;所以比细胞质更透明。
植物细胞后含物1.观察马铃薯淀粉粒淀粉粒在形成时,先从一个点(脐点)开始,向外层层沉积,形成许多同心的层次——层纹(直链淀粉和支链淀粉交替沉积而成)。
切取马铃薯一小块,用刀片刮少许混浊液,置于载玻片上,或用马铃薯块直接涂片,加蒸馏水一滴,盖上盖玻片。
附录一显微鉴定及显微化学反应常用
试液的配制方法
1.水合氯醛试液:
取水合氯醛50 g,加蒸馏水l 5m1与甘油10m1使溶解,即得。
此为常用的透化剂,能使细胞组织透明清晰,能溶解淀粉粒,蛋白质。
挥发油、树脂、叶绿素等,但不溶解草酸钙或碳酸钙晶体等.它亦有使皱缩的细胞膨胀而恢复原状的作用。
2.稀甘油试液:
取甘油33ml,加蒸馏水10ml,再加樟脑少许或液化苯酚1滴,即得。
本品为临时切片的常用封藏液之一。
经水合氯醛透化的显微标本滴加稀甘油封藏,可防止水合氯醛结晶析出而避免干扰观察。
3.甘油醋酸试液(斯氏溶液):
取甘油、50%醋酸、蒸馏水各等分,混合,即得。
此为常用的一种封藏剂,能在较长时间内保持淀粉粒的形状、大小,防止淀粉粒崩解,以便于显微观察和测量大小.
4.间苯三酚试液:
取间苯三酚1g,加95%乙解100ml使溶解,即得。
置棕色瓶内,在暗处保存。
样品加本试液2—3分钟后,再加浓盐酸或浓硫酸1滴,木质化细胞壁显红色,红色的深度与木质化的程度有关。
5.苏丹Ⅲ试液:取苏丹Ⅲ0.01g加90%乙醇5m1,溶解后,加甘油5m1,摇匀,即得。
应置棕色瓶中保存,在2个月内应用。
此液能使木栓化或角质化的细胞壁及脂肪油树脂等染成红色或桔红色。
6.氯化锌碘试液:
取碘化钾8g,加水8.5ml使溶解,再加无水氯化锌2.5g溶解后,加适量碘使达饱和状态,即得。
本试液置棕色玻璃瓶内保存。
用于鉴别纤维素细胞壁和木化细胞壁,前者显蓝色或蓝紫色,后者呈黄色或棕色。
7.铜氨试液:
取硫酸铜0.5g,加蒸馏水适量,置乳钵中研磨,再加浓氨水10ml 使溶解,即得。
本试液在使用时配制,贮存时间一般不得超过2个月。
能使纤维素细胞壁染成浅蓝色,并逐渐膨胀而溶解:半纤维素细胞壁与纤维素细胞壁反应同,但前者遇水强烈膨胀。
8.稀碘液:
取碘化钾0.5g溶少量蒸馏水中,加碘lg,溶解后加水至100ml,即得,使用时,通常还要稀释至谈棕色或淡棕黄色。
置棕色玻璃瓶内保存。
用于淀粉粒及糊粉粒之检查。
直链淀粉遇此液呈蓝色;支链淀粉则显紫红色。
与糊粉粒作用显暗黄色或黄棕色。
9.氯化汞—溴酚蓝试液:
取氯化汞10g,溴酚蓝0.001g,加蒸馏水100ml溶解,即得。
此试液用于检识糊酚粒.将含糊粉粒之切片加此溶液中5分钟后,依次用0.5%醋酸冲洗除去多余的试剂,再用水洗3分钟,用稀甘油装片镜捡,糊粉粒显蓝色。
10.亚甲蓝试液:
(1)醇溶液:取亚甲蓝0.1g,溶于95%乙醇25ml中;
(2)甘油溶液: 取亚甲蓝0.1g ,溶于95%乙醇5m1及甘油25m1。
镜检粘液时,先前加(1)液1—2滴于材料,加盖玻片,过1—2分钟之后再从盖玻片边缘滴加(2)液,粘液显天蓝色;果胶质里紫色。
11.钌红试液:
取10%醋酸纳溶液1—2ml ,家钌红适量使呈酒红色,即,应临用时配制。
12稀盐酸:
取盐酸23.4ml ,加蒸馏水释至100ml ,即得。
本液含HCl 应为9.5%—10.5%。
与小檗碱反应形成黄色针簇状盐酸小檗碱结晶。
能溶解草酸钙结晶而不产生气泡,溶解碳酸钙结晶(钟乳体)而产生气泡;不溶解硅质块。
13.稀醋酸:
取冰醋酸6ml ,加蒸馏水至100ml ,即得。
此为较常用试液。
不溶解草酸钙晶体,但能溶解碳酸钙晶体(钟乳体)而产生气泡,故常以此作显微化学反应。
14.稀硫酸:
取蒸馏水约50m1,加浓硫酸5.7ml ,搅拌,再加蒸馏水稀释至100ml ,即得。
本液含H 2S04应为9.5%—10.5%。
能溶解草酸钙晶体,并析出针状硫酸钙结晶。
15.稀硝酸:
取硝酸10.5m1,加蒸馏水稀释至100ml ,即得。
本液合HNO 3。
应为9.5。
10.5%;30%硝酸与小檗碱反应形成黄色硝酸小檗碱针晶簇结晶。
16.氢氧化钠(氢氧化钾)试液:
取氢氧化钠5g,加蒸馏水溶解成100ml,即得。
17.擦镜液:
取乙醚70m1,加无水乙醇30ml,混合摇匀,即得。
用于擦拭显微镜的镜头等光学部分。
附录二制作生药显微标本片常用试液配制
1.福尔马林—醋酸—酒精混合液(FAA固定液):
取福尔马林5ml,冰醋酸5mml,50%或70%酒精90ml,混合即得。
此为较常用的固定液和保存液,能固定一般植物组织(单细胞体及丝状藻类除外),也适合昆虫、甲壳类的固定,但不适于作细胞学研究的固定。
固定时间最短需十几小时,可作无限期保存,久置对制片并无影响。
柔软的材料用50%酒精为好,坚硬的材料用70% 酒精为好。
易于收缩的材料可稍增加冰醋酸。
2.脱水剂:
为50%、70%、80%、90%、95%、100%乙醇。
用法:生药制片中的脱水剂.用量为材料的2—3倍,各级2—24小时,但材料在无水酒精中不能放置过长,否则组织过硬、过脆,造成切片困难。
在95%酒精及无水酒精中时,最好多换一次新液,更有利于脱水。
3.透明剂:
分四级。
二甲苯:纯酒精(1:2;1:1;2:1;纯二甲苯)。
用于生药制片中脱水后材料的透明,各级约30分钟。
纯二甲苯中应更换2次。
4.渗蜡剂:
分四级。
二甲苯;石蜡(3:1;1:1;1:3;纯石蜡)。
用于生药石制片中的渗蜡,每级2—3小时。
5.染色剂:
(1)番红染色剂
取番红1g,溶于100ml50%酒精中,即得。
可使木质化细胞壁染成红色。
(2)固绿染色剂
取固绿0.5g,溶于100ml95%酒精中,即得。
与番红染色液配合用作生药切片的二重染色,可使纤维化细胞壁染成绿色。
6.封藏剂:
(1)加拿大树脂封藏剂
取加拿大树脂适量,溶于适量的二甲苯中,配成适当浓度(以玻璃棒一端形成小滴滴下,而不成丝状物为度),加入几粒豆粒大小的大理石(中和树胶因放置产生的酸性,以免使切片褪色),即得。
使用时注意:
(1)溶液宜现配现用。
(2)此液放置时因溶剂挥发会逐渐变稠,用时需用二甲苯稀释,否则不仅浪费树脂,而且易混进气泡;稀释时不可加热,以免树脂变质发黑。
(3)用特制的树脂瓶盛树脂溶液。
如无特制的树脂瓶,可用普通玻璃瓶代替,但不可用软木塞塞,而要另外罩上适当大小的玻璃试管。
以免塞子打不开。
(2)品红甘油明胶溶液
取粉末状明胶1g,加水6ml,浸1—6小时,使溶解,加甘油7ml,轻轻搅匀,,用纱布过滤,加入适量的碱性品红溶液,即得。
用于半永久制片的封藏。
碱性品红溶液的配制:碱性品红0.01g,加入无水乙醇60ml、樟油8m,溶解即得。
7.组织解离液:
(1)硝铬酸
取硝酸20ml,加入100ml水中,混匀;另取三氧化铬20g,溶于100ml水中,用时将上述二液等量混合均匀即可。
用于木化组织较多、较硬的材料的解离。
(2)5%氢氧化钠(氢氧化钾)试液:
取氢氧化钠5g,加蒸馏水溶解成100ml,即得。
用于组织较柔软的材料的组织解离。