超高效液相色谱–质谱法测定动物源食品中硝 基呋喃类代谢物残留量的方法验证

0引言测量不确定度是指表征合理地赋予被测量之值的分散性与测量结果相联系的参数［1］。

《检验检测机构资质认定能力评价检验检测机构通用要求》（RB/T214—2017）中要求检验检测机构应建立相应的数学模型，给出相应检测能力评定测量不确定度的案例［2］。

硝基呋喃类药物是一类广谱抗生素，广泛应用于水产养殖［3］。

硝基呋喃类药物具有遗传毒性，有可能导致基因变异，我国已于2002年颁布禁止使用硝基呋喃类抗生素的禁令。

硝基呋喃类药物原型药在动物体内虽代谢迅速，但代谢物会与蛋白质紧密结合，形成稳定的残留物。

一般判定动物源性食品中硝基呋喃类药物的残留状况都是以其硝基呋喃类代谢产物的含量作为检测依据，硝基呋喃类药物主要有呋喃唑酮、呋喃它酮、呋喃妥因、呋喃西林，其对应的代谢物分别为3-氨基-2-噁唑烷基酮（AOZ）、5-甲基-吗啉-3-氨基-2-噁唑烷基酮（AMOZ）、1-氨基-2-内酰脲（AHD）和氨基脲（SEM）。

液相色谱-串联质谱法因其灵敏度高、定性定量准确，成为目前硝基呋喃类代谢物主要的检测方法。

陈茹等［4］、吕燕［5］、蒙丽琼等［6］、林功师［7］、郭丽娜等［8］、李绪鹏等［9］、邢丽红等［10］都对液相色谱-串联质谱法测定硝基呋喃类代谢物的不确定度进行评定，但在对内标物引入的不确定度的分量上，未充分考虑内标法的特点，即内标物引入不确定度来自内标添加量的重复性。

本文根据《测量不确定度评定与表示》（JJF1059.1—2012）对《食品安全国家标准水产品中硝基呋喃类代谢物多残留的测定液相色谱-串联质谱法》（GB31656.13—2021）测定小龙虾中硝基呋喃代谢物残留量的不确定度进行评定，分析不确定度的主要来源，保证检测结果准确可靠。

1材料与方法1.1仪器与设备液相色谱-串联质谱联用仪（Xevo TQ-XS型号，配有电喷雾ESI离子源，美国Waters公司生产）；电子液相色谱-串联质谱法测定小龙虾中硝基呋喃类代谢物残留量的不确定度评定*吴祥庆，杨姝丽，吴明媛，黄鸾玉，谢宗升，蒙源，庞燕飞（广西壮族自治区水产科学研究院，广西南宁530021）摘要：文章根据《测量不确定度评定与表示》（JJF1059.1—2012），探讨采用《食品安全国家标准水产品中硝基呋喃类代谢物多残留的测定液相色谱－串联质谱法》（GB31656.13—2021）测定小龙虾中硝基呋喃代谢物残留量的不确定度，建立相应数学模型，评估不确定度的测定结果。

硝基呋喃类检测方法及标准硝基呋喃简介：硝基呋喃类（Nitrofurans）抗菌剂是一种广效性抗生素，因价格较低廉且疗效佳，广泛用于畜禽及水产养殖鱼类，用以治疗由大肠杆菌或沙门式杆菌所引起之肠炎，养殖鱼之疥疮、赤鳍病、溃疡病等，于饲料中添加或养殖药浴使用。

硝基呋喃类抗菌剂常见有以下四种药物———呋喃唑酮、呋喃它酮、呋喃西林和呋喃妥因。

危害性：长时间或大剂量应用硝基呋喃类药物均能对动物体产生毒性作用，其中呋喃西林的毒性最大。

兽医临床上经常出现有关畜禽类呋喃西林、呋喃唑酮中毒的事件,呋喃它酮为强致癌性药物，呋喃唑酮可诱导鱼的肝脏发生肿瘤。

硝基呋喃类药物在动物体内的半衰期短，代谢速度非常快，但其代谢产物能够与组织蛋白质紧密结合,以结合态形式在体内残留较长时间，且毒性更强，是硝基呋喃类药物的标记残留物，若水产品体内有大量的呋喃药物残留，会使人产生耐药性，在临床中降低此类药物的治疗效果，并且此类药物残留对人体也有致癌、致畸胎等副作用。

国内外对之重视程度：1995年起欧盟（EuropeanUnion）禁止硝基呋喃类抗菌剂在食用之畜禽及水产动物使用，并严格执行对输入之食用鱼、虾及禽类进行硝基呋喃的残留检测，2002年美国亦起而效尤；1990年7月欧盟颁布2377/90/EEC条例，将硝基呋喃类药物及其代谢产物列为A类禁用药物；我国农业部文件:农牧发[2002]1号规定食品性动物中呋喃唑酮为不得检出。

呋喃唑酮、呋喃妥因也在1995年被禁用。

科标生物检测中心拥有国际先进的检测仪器和雄厚的技术力量，可以依据多种检测标准，提供硝基呋喃类相关检测服务。

现有检测方法及标准：检测方法参考标准动物源性食品中硝基呋喃类药物代谢物残留量检测方法GB/T 21311-2007高效液相色谱/串联质谱法水产品中呋喃唑酮残留量的测定SC/T 3022-2004 高效液相色谱法畜禽肉和水产品中呋喃唑酮的测定SB/T 10387-2004 高效液相色谱法水产品中硝基呋喃类代谢物残留量的测定农业部1077号公告-2-2008高效液相色谱法水产品中呋喃唑酮、呋喃它酮代谢物的快速测定DB33/T 744-2009 酶联免疫法动物源性食品中呋喃唑酮残留标示物残留检测农业部1025号公告-17-2008酶联免疫法。

一、食品中可能违法添加的非食用物质名单（卫生部公布）二、食品中可能滥用的食品添加剂品种名单（卫生部公布）注：滥用食品添加剂的行为包括超量使用或超范围使用食品添加剂的行为三、禁止在饲料和动物饮用水中使用的药物品种目录（农业部公布）一、肾上腺素受体激动剂1．盐酸克仑特罗（Clenbuterol Hydrochloride）：中华人民共和国药典（以下简称药典）2000年二部P605。

β2肾上腺素受体激动药。

2．沙丁胺醇（Salbutamol）：药典2000年二部P316。

β2肾上腺素受体激动药。

3．硫酸沙丁胺醇（SalbutamolSulfate）：药典2000年二部P870。

β2肾上腺素受体激动药。

4．莱克多巴胺（Ractopamine）：一种β兴奋剂，美国食品和药物管理局（FDA）已批准，中国未批准。

5．盐酸多巴胺（Dopamine Hydrochloride）：药典2000年二部P591。

多巴胺受体激动药。

6．西马特罗（Cimaterol）：美国氰胺公司开发的产品，一种β兴奋剂，FDA 未批准。

7．硫酸特布他林（Terbutaline Sulfate）：药典2000年二部P890。

β2肾上腺受体激动药。

二、性激素8．己烯雌酚（Diethylstibestrol）：药典2000年二部P42。

雌激素类药。

9．雌二醇（Estradiol）：药典2000年二部P1005。

雌激素类药。

10．戊酸雌二醇（EstradiolValerate）：药典2000年二部P124。

雌激素类药。

11．苯甲酸雌二醇（EstradiolBenzoate）：药典2000年二部P369。

雌激素类药。

中华人民共和国兽药典（以下简称兽药典）2000年版一部P109。

雌激素类药。

用于发情不明显动物的催情及胎衣滞留、死胎的排除。

12．氯烯雌醚（Chlorotrianisene）药典2000年二部P919。

13．炔诺醇(Ethinylestradiol)药典2000年二部P422。

液相色谱－串联质谱法测定水产品中硝基呋喃类代谢物残留量广东省珠海市斗门区动物卫生监督所 孟轩 梁可昌【摘 要】本文介绍液相色谱-串联质谱法测定水产品中硝基呋喃类药物（呋喃唑酮、呋喃它酮、呋喃妥因、呋喃西林）代谢物残留方法。

试样中加入2-硝基苯甲醛溶液，在酸性条件下衍生，乙酸乙酯提取，涡旋离心提取，以乙酸胺和甲醇溶液进行梯度洗脱。

在浓度0.5～20.0纳克/毫升范围内，4种硝基呋喃类代谢物呈良好线性关系，相关系数均不小于0.995，检出限为0.5微克/千克。

在0.5微克/千克,1.0微克/千克,5.0 微克/千克添加水平下，目标分析物的加标回收率为82.0%～103%，相对标准偏差为0.996%～4.46%。

该方法具有操作简单、快捷、灵敏度高等特点，可用于水产品中硝基呋喃类等药物残留的批量检测。

【关键词】水产品；液相色谱-串联质谱法；硝基呋喃类硝基呋喃类药物是通过影响细菌体内的氧化还原酶体系，干扰细菌正常代谢的一类广谱抗生素，曾普遍应用于水产、畜牧业养殖等行业中疾病的预防和治疗。

后续学者陆续研究发现，该类药物对对人体具有致畸胎作用，可能诱发癌症等重大疾病。

为此，2019年12月农业农村部发布的第250号公告中将其归类为食品动物中禁止使用的药物。

硝基呋喃类常用的有４种：呋喃唑酮、呋喃它酮、呋喃妥因、呋喃西林。

硝基呋喃类药物进入鱼体后的代谢产物分别为：3-氨基-2-恶唑烷基酮（AOZ）、5-吗啉甲基-3-氨基-2-恶唑烷基酮（AMOZ）、1-氨基-2-内酰脲（AHD）、氨基脲（SEM），由于这些代谢产物与蛋白质结合而相当稳定，所以目前主要通过检测代谢物的残留量，反映硝基呋喃类药物的残留状况。

目前检测兽药残留常见的方法主要有：高效液相色谱－串联质谱法、液相色谱法、常规理化检测法、酶联免疫法、毛细管电泳法等。

本研究基于《国家标准GB31656.13-2021食品安全国家标准水产品中硝基呋喃类代谢物多残留的测定液相色谱-串联质谱法》，结合实验室设备及当地检测需求，建立了准确、高效、快速的硝基呋喃代谢残留量检测方法。

农业部公告第781号－－通过《动物源食品中氯霉素残留量的测定气相色谱－质谱法》等12项标准文章属性•【制定机关】农业部(已撤销)•【公布日期】2006.12.16•【文号】农业部公告第781号•【施行日期】2006.12.16•【效力等级】部门规范性文件•【时效性】现行有效•【主题分类】农业管理综合规定正文农业部公告（第781号）根据《兽药管理条例》的规定，《动物源食品中氯霉素残留量的测定气相色谱－质谱法》等12项标准业经专家会议审定通过，我部审查批准，现发布为中华人民共和国国家标准，自发布之日起实施。

特此公告二〇〇六年十二月十六日┌───┬────────────────────────┬────────────┐│序号│标准名称│标准代号│├───┼────────────────────────┼────────────┤│1│动物源食品中氯霉素残留量的测定气相色谱－质谱法│农业部781号公告－1-2006 │├───┼────────────────────────┼────────────┤│2│动物源食品中氯霉素残留量的测定高效液相色谱－串联│农业部781号公告－2-2006 │││质谱法││├───┼────────────────────────┼────────────┤│3│动物源食品中3－甲基喹噁啉－2－羟酸和喹噁啉－2－│农业部781号公告－3-2006 │││羟酸残留量的测定高效液相色谱法││├───┼────────────────────────┼────────────┤│4│动物源食品中硝基呋喃类代谢物残留量的测定高效液相│农业部781号公告－4-2006 │││色谱－串联质谱法││├───┼────────────────────────┼────────────┤│5│动物源食品中阿维菌素类药物残留量的测定高效液相色│农业部781号公告－5-2006 │││谱法││├───┼────────────────────────┼────────────┤│6│鸡蛋中氟喹诺酮类药物残留量的测定高效液相色谱法│农业部781号公告－6-2006 │├───┼────────────────────────┼────────────┤│7│蜂蜜中氟氯苯氰菊酯残留量的测定气相色谱法│农业部781号公告－7-2006 │├───┼────────────────────────┼────────────┤│8│蜂蜜中双甲脒残留量的测定气相色谱－质谱法│农业部781号公告－8-2006 │├───┼────────────────────────┼────────────┤│9│蜂蜜中氟胺氰菊酯残留量的测定气相色谱法│农业部781号公告－9-2006 │├───┼────────────────────────┼────────────┤│10│蜂蜜中氯霉素残留量的测定气相色谱－质谱法（负化学│农业部781号公告－10-2006│││源）││├───┼────────────────────────┼────────────┤│11│牛奶中青霉素类药物残留量的测定高效液相色谱法│农业部781号公告－11-2006│├───┼────────────────────────┼────────────┤│12│牛奶中磺胺类药物残留量的测定液相色谱－串联质谱法│农业部781号公告－12-2006│└───┴────────────────────────┴────────────┘。

硝基呋喃类药物及其代谢物检测方法的研究进展硝基呋喃类药物是一类重要的抗肿瘤药物，其代谢物检测方法对于药物代谢动力学研究和临床用药监测具有重要意义。

随着技术的不断进步，关于硝基呋喃类药物及其代谢物检测方法的研究也在不断取得新的进展。

本文将综述近年来关于硝基呋喃类药物及其代谢物检测方法的研究进展，以期为相关领域的研究提供参考。

一、硝基呋喃类药物的代谢途径硝基呋喃类药物是一类具有广泛生物活性的有机化合物，通常用于抗肿瘤治疗。

这类药物在体内主要通过代谢来实现药效。

硝基呋喃类药物的代谢途径主要包括氧化代谢、硫醇代谢、羟基代谢和葡萄糖醛酸酯代谢等。

氧化代谢是硝基呋喃类药物的主要代谢途径，通常由细胞色素P450酶系统（CYP450）介导。

在代谢过程中，硝基呋喃类药物会生成一系列的代谢物，其中包括活性代谢物和中间代谢物，这些代谢产物不仅对于药物的药效和毒性具有重要影响，同时也是药物代谢动力学研究和临床用药监测的重要标志物。

1. 质谱法质谱法是一种常用的药物及其代谢物检测方法，其高灵敏度和高特异性使其成为药物代谢动力学研究和临床用药监测的重要手段。

针对硝基呋喃类药物及其代谢物的检测，液相色谱-串联质谱联用（LC-MS/MS）是目前最常用的方法之一。

通过LC-MS/MS技术，可以对硝基呋喃类药物及其代谢物进行快速、准确的检测和定量分析，能够满足不同样本来源和复杂体液中的药物代谢产物的检测需求。

2. 高效液相色谱法3. 免疫学检测法免疫学检测法是一种常用的药物及其代谢物检测方法，其基于抗体与抗原的特异性结合原理，通过构建特异性的免疫反应体系，实现对硝基呋喃类药物及其代谢物的快速、敏感的检测。

免疫学检测法不仅具有分析简便、操作方便、样品处理快的优点，同时也具有高灵敏度和高特异性的特点，适用于不同样本来源和复杂体液中的硝基呋喃类药物及其代谢物的检测。

近年来，随着生物技术和分析化学技术的不断进步，针对硝基呋喃类药物及其代谢物检测方法的研究也在不断取得新的进展。

动物源性食品中硝基呋喃类代谢物残留量测定方法高效液相色谱串联质谱法GB/T 21311-20071衍生化试剂的配制：37.8mg 邻硝基苯甲醛溶于5mL二甲亚砜中，★现用现配。

21mol/L盐酸的配制：16.9ml浓盐酸用水定容至200mL。

★现用现配。

3 0.1mol/L KH2PO4的配制：1.74g KH2PO4用水定容到100mL。

有效期三个月。

前处理过程：衍生化1称取样品2.0g,置于50mL离心管内，分别加10mL去离子水和0.5mL1mol/L的盐酸溶液，涡旋震荡混合均匀，加入200uL 10ng/mL的混合同位素内标溶液。

加1mL衍生化试剂。

涡旋均匀，置于37℃下过夜（16小时）。

2加标回收样品分别加10mL去离子水和0.5mL1mol/L的盐酸溶液，涡旋震荡混合均匀，加入200uL 10ng/mL的混合同位素内标溶液。

再加入100uL100ng/mL 的呋喃四项混标溶液。

加1mL衍生化试剂。

涡旋均匀，置于37℃下过夜（16小时）。

3空白和10.0ppb标准点(200uL100ng/mL的呋喃四项混标溶液) 分别加10mL去离子水和0.5mL1mol/L的盐酸溶液，涡旋震荡混合均匀，加入200uL 10ng/mL 的混合同位素内标溶液。

加1mL衍生化试剂。

涡旋均匀，置于37℃下过夜（16小时）。

提取所有样品处理方法一样衍生化完毕后，加入1mL0.1mol/L的KH2PO4，用1mol/L的NaOH 溶液调节ＰＨ值约为7.4。

4000r/min离心5min，将上清液倒入离心管内，加入15mL乙酸乙酯，涡旋30s,4000r/min离心2min,取出上层的乙酸乙酯层，氮气吹干。

分别加入2mL（乙腈+0.1%甲酸溶液=2+8）溶解，涡旋30s,加入3mL正己烷除去油脂等杂质，涡旋30S,离心4000r/min3min,利用1mL注射器吸取下层溶液过膜上机。

流动相：乙腈+0.1%甲酸方法检出限1ug/kg.所有动物组织不得检出。

液相色谱-串联质谱法测定动物源性食品中硝基呋喃类代谢物多残留倪瑞敏，张玉洁，王秀丽，都　颖（威海市食品药品检验检测研究院，山东威海 264209）摘　要：在农业部781号公告—4—2006的基础上进行优化，建立一种用于测定动物源性食品中呋喃唑酮（AOZ）、呋喃西林（SEM）、呋喃妥因（AHD）和呋喃它酮（AMOZ）代谢物多残留的液相色谱-串联质谱的分析方法。

本方法将试样经盐酸水解，以2-硝基苯甲醛衍生化处理16 h，经乙酸乙酯液液萃取，电喷雾正离子多反应监测，内标法定量。

结果表明，在0.5 μg/kg、1.0 μg/kg、5.0 μg/kg 3个添加水平，AOZ、AHD、SEM及AMOZ代谢物的回收率分别为92.0%～99.2%、86.0%～96.4%、90.0%～98.4%及82.0%～93.6%，相对标准偏差为1.8%～8.8%。

本方法操作简单，结果准确，适用于批量化检测动物源性食品中硝基呋喃类代谢物多残留。

关键词：动物源性食品；硝基呋喃类代谢物；液相色谱-串联质谱Determination of Multiple Residues of Nitrofuran Metabolites in Animal-Derived Food by Liquid Chromatography-TandemMass SpectrometryNI Ruimin, ZHANG Yujie, WANG Xiuli, DU Ying(Weihai Institute for Food and Drug Inspection and Testing, Weihai 264209, China) Abstract: On the basis of the Ministry of Agriculture Announcement 781—4—2006, a new method was established for the determination of furazolidone (AOZ), furaltadone (SEM), nitrofurazone (AHD) and nitrofurantoin (AMOZ) metabolites in animal-derived food by liquid chromatography-tandem mass spectrometry. In this method, the sample is hydrolyzed by hydrochloric acid, derivatized with 2-nitrobenzaldehyde for 16 hours, subjected by liquid-liquid extraction with ethyl acetate, monitored by electrospray positive ion multiple reactions, and quantified by internal standard method. The results showed that the recoveries of AOZ, AHD, SEM and AMOZ metabolites were 92.0%～99.2%, 86.0%～96.4%, 90.0%～98.4% and 82.0%～93.6%, respectively, and the relative standard deviation was 1.8%～8.8% at three levels of 0.5 μg/kg, 1.0 μg/kg and 5.0 μg/kg. The method is simple in operation and accurate in results, and is suitable for batch detection of nitrofuran metabolites in animal-derived food.Keywords: animal-derived food; nitrofuran metabolites; liquid chromatography-tandem mass spectrometry硝基呋喃类药物是一类广谱抗生素，可以杀灭大部分病原体，而且不容易产生耐药性[1]。

T logy科技食品科技HPLC-MS/MS全称为种高效液相色谱-串联质谱技术，该技术可对多组分进行定性、定量综合分析，在应用中可以对高沸点、非挥发性等进行准确的分离鉴定。

在分离检测的过程中主要利用电喷雾电离和大气压化学电离技术将待测物中的成分分离出来，在送入质谱检测系统中进行检测，便可以较为精准地测量出母离子的特征碎片。

1　动物药物残留分析简介常用的兽药残留量检测方法有微生物法和色谱法。

前者为筛选方法，该方法的原理是抗原抗体反应，在对动物药物残留进行测定的过程中难以对同类型的药物进行区分。

对于禁用兽药（A类），如硝基呋喃等，残留限度（PED）在4%以下；而禁用兽药 （B类），如磺胺类，残留限度（PED）在3%以下。

质谱分析技术可以准确检测食品中的动物药物残留，进而为解决兽药残留问题提供有效的解决 途径。

2　液相色谱质谱联用技术在兽药残留检测中的应用β-内酰胺类在动物医疗中被广泛应用，这种抗生素可以抑制动物细菌性感染，同时还可以对动物体内的细菌细胞合成、抗革兰氏阳性菌等进行阻断隔离，其主要的代表化合物有青霉素、氨苄青霉素。

徐伟、耿士伟等利用电喷雾离子阱技术，对牛奶中7种β-内酰胺类抗生素进行了检测，用乙腈提取和沉淀蛋白质，经C18柱净化浓缩后供LC-MS/MS分析，再利用正离子模式监测，多级离子捕捉器可以提供更多的碎片离子结构信息，获得高灵敏度。

使用LC-MS/MS测量牛奶中的阿莫西林、邻氯青霉素、青霉素G等，并使用内标物d7-青霉素G，样品经高速离心脱脂后，样品过C18柱（pH值过柱时大于6），每一种药物选择3个离子来提高检测的灵敏度。

然后他们将这一方法运用到生奶检测中，以青霉素V为内标，测定了10种牛乳中β-内酰胺类抗生素的残留检测方法[1]。

郭盈岑教授在负离子扫描模式下监测牛肝、肾和肌肉中的6种青霉素含量，用LC-MS/MS测定，定量限为50 μg/kg。

通过LC-MS/MS法测定β-内酰胺、皮质激素、氯霉素等药物的实验研究发现，认为液质结合技术是解决兽药残留分析的有效手段[2]。

现代食品/XIANDAISHIPIN 91高效液相色谱法测定饲料中硝基呋喃类药物The Method for Determination of Nitrofuran Antibiotics by HPLC◎ 黄　帆1,屈晓铃2，周　苏3,李增建1（1.上海齐羿生物科技有限公司，上海　200436；2.上海天祥质量技术服务有限公司，上海　200233；3.通标标准技术服务有限公司，上海　200233）Huang　Fan 1, Qu Xiaoling 2, Zhou　Su 3, Li Zengjian 1（1.Shanghai QiYi Biological Technology Co.,Ltd., Shanghai　200436, China；2.Shanghai Intertek Quality Technical Services Co.,Ltd., Shanghai　200233, China；3.SGS-CSTC Standards Technical Service Co., Ltd., Shanghai　200233, China）摘　要：为了测定饲料中的硝基呋喃类药物，建立了一种检测饲料中6种硝基呋喃类药物的高效液相色谱检测方法。

最终结果表明，该方法在浓度范围为0.5～10 mg/L 时，线性关系良好，6种硝基呋喃类药物的线性相关系数均大于0.994 0。

关键词：高效液相色谱；硝基呋喃；饲料Abstract：In order to determine the nitro drugs in feed, a new method for the determination of 6 drugs in feed by HPLC was developed in this paper. The results show that the linear relationship between the concentration of the nitro groups and the linear correlation coe ffi cient of the 6 kinds of nitro drugs are more than 0.9940 in the concentration range of from 0.5～10 mg/L .Key words：HPLC; Nitrofuran; Feed 中图分类号：S816.17硝基呋喃类药物（Nitrofurans）是一类人工合成的具有5-硝基结构的广谱抗菌药物，是被用于治疗畜禽胃肠道疾病的药物或者饲料添加剂。

DOI：10.16661/ki.1672-3791.2017.31.088高效液相色谱-质谱联用技术对食品中兽药残留量检测分析陈敏（蚌埠产品质量监督检验研究院 安徽蚌埠 233000）摘 要:本文采用高效液相色谱，质谱联用技术法提取、净化样品，在采取0.1mol/L缓冲液以及乙腈混合溶液作为提取溶剂时，四环素兽药、喹诺酮类、磺胺类以及金刚烷胺等兽药的回收效果均较好，回收率均能达到要求，解决了四环素类兽药与喹诺酮类以及磺胺类兽药难以在同时进行提取的问题。

关键词：高效液相色谱 质谱联用技术 兽药残留量中图分类号：R917 文献标识码：A 文章编号：1672-3791(2017)11(a)-0088-02随着现代人们对于健康生活的重视，食品安全问题已经得到更多人群的关注，这对于食品检测工作机构来说，无疑是提出了更大的工作挑战，其将会面临着更大的检测工作量。

因此，如何建立一套快速的兽药残留药物检测方式显得尤为重要。

1 实验部分1.1 仪器与试剂准备的仪器有超高效液相色谱仪、高速离心机、旋涡混合器、超纯水仪以及旋转蒸发仪，准备的试剂有29种兽药，甲酸、乙腈为色谱纯、水为超纯水、吸附剂C18、NH2。

对于以上试剂分别取合适的量进行研究，对于四环素类的兽药溶解以及定容时采用甲醇，对于磺胺类的兽药溶解以及定容时采用乙腈，保存的条件在4℃以下。

分别吸取以上的标准储备液0.25m L于25m L容量瓶，用乙腈来进行稀释并定容，配制成质量浓度为1.0mg/L的混合标准工作液I；分别吸取四环素类兽药标准储备液各0.5m L，吸取金刚烷胺标准储备液0.1mL,分别吸取喹诺酮类以及磺胺类兽药标准储备液各1m L于100m L容量瓶，同样也是用乙腈来进行稀释并定容，配制混合标准工作液II，其中四环素类兽药质量浓度为0.5mg/L，金刚烷胺质量浓度为0.1mg/L，其他兽药质量浓度为1.0mg/L。

1.2 样品前处理方法在50mL离心管中加入2g的标准样品，加入3mL乙腈、2mL 0.1mol/L缓冲溶液，并进行2min旋涡、5min离心，将上清液收集起来放入其他的离心管中。