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《植物组织培养实验指导》《植物组织培养实验指导》的相关说明一、本指导用于《植物组织培养概论》课程的实验教学。
二、各专业班级根据实际情况做相应调整，调整情况详见各专业班级的授课计划。
其中15个课时的内容调整如下：实验一、二、五 3学时实验六 3学时实验七 3学时实验九、实验十二 3学时实验十三 3学时实验一实验室基本设备及其用途的识别一、目的认识植物组织培养实验室的基本结构，必须的基本设备及其用途与作用方法。
二、实验室的基本结构（一）化学实验室（工作室）培养基药品称量、配制、分装、灭菌；材料预处理；培养材料的观察分析；制蒸馏水。
设备、药柜、工作台、蒸馏水器、天平、冰箱，手提高压消毒锅、显微镜、解剖镜、各种玻璃仪器、金属仪器等。
安装水、电、排气等装置。
（二）接种室①无菌操作室②接种箱③超净工作台（三）培养室（四）洗涤、消毒室；卧式高压消毒锅。
（五）温室（培养大棚）。
实验二常用仪器、必要器皿、几种主要设备的使用方法、常用几种药剂的配制一、目的认识植物组织培养必需的仪器、器皿，几种主要设备的使用方法、常用几种药剂的配制。
二、常用仪器1.蒸馏水器（学习操作）2.手提式高压消毒锅、卧式高压消毒锅（学习使用、操作）3.天平⑴药物天平（工业天平）、粗天平、（精密度1/10）⑵扭力天平（精密度1/100）⑶分析天平（精密度1/10000）4.超净工作台（学习、使用、操作）5.电热干燥箱（烘箱）6.恒温光照培养箱（学习、操作）7.电冰箱8.显微镜和解剖镜①手提式解剖镜（学习、使用、操作）②立体解剖镜③普通显微镜9.旋转培养机10.离心机（学习、使用、操作）11.酸度测定仪：⑴精密PH4－7试纸；⑵笔型袖珍酸度计。
三、必要的器皿（一）玻璃器皿1.培养器皿①试管②三角烧瓶（锥形瓶）③圆形高形培养瓶（罐头瓶）④培养皿⑤扁身培养瓶⑥L型和T型管⑦凹面载玻片2.盛装器皿①试剂瓶②烧杯3.计量器皿①量筒②容量瓶③吸管4.其它器皿滴瓶、称量瓶、漏斗、玻璃管、注射器等实验室常用器皿。
植物组织培养实训指导书班级：园林1421、1521教师：张璐璐实训一植物组织培养室参观与设计一、目的要求通过参观，使学生掌握如何组建植物组织培养实验室；同时，熟悉组培中涉及的各种仪器设备和器皿用具。
二、仪器与用具1 、仪器：超净工作台，空调机，蒸馏水发生器或纯水发生器，高压灭菌锅，低温冰箱、普通冰箱，电炉，显微镜，天平、恒温培养箱，烘箱等设备。
2 、用具：各种培养皿，分注器，各种实验器皿和各种器械用具。
三、方法步骤1 、先由指导老师集中介绍组织培养实验室守则及有关注意事项。
2 、先由指导老师讲解本次实验的目的、仪器设备和器皿用具的名称及实验步骤。
3 、指导老师逐一讲解组培实验室的构建情况，包括准备室（又称化学实验室）、缓冲室、无菌操作室、培养室、驯化室、温室等使用的各种仪器设备和器皿用具的名称用途。
1 ）准备室（化学实验室）面积：20m2 左右用途：器皿洗涤、培养基配置、分装、高压灭菌，植物材料的预处理，重蒸馏水的制备以及进行生理、生化因素的分析，试管苗出瓶，清洗及整理工作。
要求：明亮、通风设备：工作台，橱柜，水池，仪器，药品等2 ）缓冲室面积：约3-5m 2 左右用途：进入无菌室前需在缓冲室里换上经过灭菌的工作服、拖鞋，戴上口罩。
设备：1 盏紫外灯，1 个配电板，石英电力时控器等3 ）无菌操作室（无菌室，接种室）面积：10-20m 2 ，视生产规模和超净工作台数量而定。
用途：材料的灭菌接种，无菌材料的继代，丛生菌的增殖或切割，嫩枝扦插生根等，是关键的部分，关系到培养物的污染率、接种工作效率等重要指标。
要求：干爽安静、清洁明亮、墙壁光滑平整不易积染灰尘，地面平坦无缝便于清洗和灭菌。
门窗要密闭，一般用移动门窗。
设备：超净工作台、空调机，医用小平车，操作台、搁架等。
4 ）培养室面积：视培养架多少及培养物数量而定。
用途：将接种到培养瓶等器皿中的植物材料进行培养的场所。
设备：①培养架与灯光培养架数目多少视生产规模而定，年产4万—10万苗需4—6个培养架；年产10万—20万苗约需8—10个培养架。
植物组织培养实训指导书《植物组织培养技术》是生物技术及应用专业的工学结合核心课程之一。
本课程采取“项目引领，任务驱动”的教学模式，使学生掌握植物组织培养技术的职业知识和职业技能，能够在实际工作中具备实验方案设计能力、培养基制备能力、无菌操作能力、组培苗驯化移栽能力及组培苗工厂化生产能力。
实训一：实训室的灭菌与玻璃器皿的清洗一、目的要求1.通过实训，使学生了解各种洗涤液的特性；2.掌握酸液的配制方法和组织培养中常用器皿的洗涤技术；3.通过实训，培养学生良好的卫生习惯，建立组织培养的无菌意识；4.会配制新杰尔灭溶液。
二、材料用具1.灭菌用具：2%新洁尔灭、高锰酸钾、甲醛、70%酒精、洗涤剂、各种培养皿、工作服、口罩、手套、试管刷。
2.洗涤用具：肥皂液、洗衣粉、重铬酸钾粉末、1%HCL、70%酒精、瓶刷等。
三、方法步骤（一）培养室的灭菌1、地面、墙面和工作台的灭菌2、无菌室和培养室的灭菌（二）玻璃器皿的洗涤（酸洗）玻璃器皿的洗涤一般要经过浸泡、刷洗、浸酸和清洗四个步骤。
重铬酸钾洗涤（三种）液配制：重铬酸钾50g，加1L蒸馏水，加热溶化，冷却后再缓缓加入工业浓硫酸90ml。
1、新玻璃器皿的洗涤用1%HCL的溶液浸泡一昼夜，再用清水反复洗涤，最后用蒸馏水冲淋一遍，干燥后备用。
2、用过的玻璃器皿先将器皿中得残留物质除去，用清水冲洗，再用洗衣粉洗涤，最后用清水冲洗3～4遍，把字迹擦洗干净，干燥后使用。
3、污染的培养瓶的处理首先经高压蒸汽灭菌，再按（2）的步骤洗涤。
4、用过的吸管、滴管、容量瓶先放在重铬酸钾溶液浸泡2h以上，取出后经流水冲洗30min左右，干燥后使用。
四、实训报告①.植物组织培养室的灭菌方法步骤。
②.写出洗涤液的配置步骤。
③.记录各种培养瓶的洗涤方法。
实训二：组织培养工厂的设计一、目的要求通过实训，使同学们对现代组培苗生产模式有一个更为深刻的认识，能熟练的根据生产规模设计合理的厂房及工艺流程。
二、材料用具组培苗生产小工厂、绘图纸、绘图笔三、方法步骤(一) 组培工厂的参观1．参观组培实验中心2．组培工厂的组成：准备室、灭菌室、缓冲室、无菌室、培养室、驯化室3．各室内仪器设备的种类及摆放(二) 设计一200m2组培工厂，要求绘出大概的布局图。
第1篇自踏入农学的大门，我便深知理论知识与实践操作之间的紧密联系。
在我国，农业是国民经济的基础，而农学作为一门应用性极强的学科，其实践教学的重要性不言而喻。
经过一段时间的农学实践教学，我收获颇丰，以下是我的一些心得体会。
一、理论联系实际，提高动手能力在农学实践中，我深刻体会到了理论知识的重要性。
理论知识是实践操作的基石，只有掌握了扎实的理论基础，才能在实际操作中游刃有余。
在实践中，我将所学理论知识与实际操作相结合，逐步提高了自己的动手能力。
首先，我在植物栽培实验中，学习了种子萌发、植株生长、病虫害防治等知识。
通过亲自动手操作，我掌握了播种、施肥、灌溉、病虫害防治等技能。
在实践中，我学会了如何根据植物的生长特点，合理安排种植计划，提高产量。
其次，在土壤实验中，我了解了土壤的物理、化学性质及其对植物生长的影响。
通过实际操作，我学会了土壤的采样、分析、改良等方法，为农业生产提供了科学依据。
再次，在农业机械实验中，我掌握了各种农业机械的使用方法及维修技巧。
这使我能够在实际生产中，正确选择和使用农业机械，提高生产效率。
二、培养团队协作精神，提高沟通能力农学实践往往需要多人合作完成，这使我深刻体会到了团队协作精神的重要性。
在实践过程中，我学会了如何与团队成员沟通、协调，共同完成任务。
例如，在农田水利建设实验中，我们需要分工合作，完成沟渠挖掘、灌溉设施安装等工作。
在这个过程中，我学会了如何与团队成员沟通交流，明确各自的任务和责任，确保工程顺利进行。
此外，在农业技术推广实验中，我们小组需要针对某一作物，制定相应的栽培方案。
为了提高方案的可行性，我们积极向老师请教，查阅相关资料，并与其他小组进行交流。
这使我认识到了沟通能力在团队合作中的重要性。
三、树立创新意识，勇于探索农学实践不仅要求我们掌握现有技术，还要具备创新意识，勇于探索。
在实践过程中，我不断思考如何改进现有技术，提高生产效率。
例如，在植物组织培养实验中，我尝试了不同的培养基配方，通过对比实验结果，发现了一种更适合该作物生长的培养基。
植物组织培养实训指导书《植物组织培养技术》是生物技术及应用专业的工学结合核心课程之一。
本课程采取“项目引领，任务驱动”的教学模式，使学生掌握植物组织培养技术的职业知识和职业技能，能够在实际工作中具备实验方案设计能力、培养基制备能力、无菌操作能力、组培苗驯化移栽能力及组培苗工厂化生产能力。
实训一：实训室的灭菌与玻璃器皿的清洗一、目的要求1.通过实训，使学生了解各种洗涤液的特性；2.掌握酸液的配制方法和组织培养中常用器血的洗涤技术；3.通过实训，培养学生良好的卫生习惯，建立组织培养的无菌意识；4.会配制新杰尔灭溶液。
二、材料用具1.灭菌用具：2%新洁尔灭、高镒酸钾、甲醛、70%酒精、洗涤剂、各种培养血、工作服、口罩、手套、试管刷。
2.洗涤用具：肥皂液、洗衣粉、重铬酸钾粉末、1%HCL、70%酒精、瓶刷等。
三、方法步骤（一）培养室的灭菌1、地面、墙面和工作台的灭菌2、无菌室和培养室的灭菌（二）玻璃器皿的洗涤（酸洗）玻璃器血的洗涤一般要经过浸泡、刷洗、浸酸和清洗四个步骤。
重铬酸钾洗涤（三种）液配制：重铬酸钾508，加工蒸馏水，加热溶化，冷却后再缓缓加入工业浓硫酸90ml。
1、新玻璃器血的洗涤用1%HCL的溶液浸泡一昼夜，再用清水反复洗涤，最后用蒸馏水冲淋一遍，干燥后备用。
2、用过的玻璃器血先将器血中得残留物质除去，用清水冲洗，再用洗衣粉洗涤，最后用清水冲洗3—4遍，把字迹擦洗干净，干燥后使用。
3、污染的培养瓶的处理首先经高压蒸汽灭菌，再按（2）的步骤洗涤。
4、用过的吸管、滴管、容量瓶先放在重铬酸钾溶液浸泡2h以上，取出后经流水冲洗30min左右，干燥后使用。
四、实训报告①.植物组织培养室的灭菌方法步骤。
②.写出洗涤液的配置步骤。
③.记录各种培养瓶的洗涤方法。
实训二：组织培养工厂的设计一、目的要求通过实训，使同学们对现代组培苗生产模式有一个更为深刻的认识，能熟练的根据生产规模设计合理的厂房及工艺流程。
二、材料用具组培苗生产小工厂、绘图纸、绘图笔三、方法步骤（-）组培工厂的参观1.参观组培实验中心2.组培工厂的组成：准备室、灭菌室、缓冲室、无菌室、培养室、驯化室3.各室内仪器设备的种类及摆放（二）设计一 200m2组培工厂，要求给出大概的布局图。
《观赏植物组织培养实验》课程大纲一、课程概述课程名称（中文）：观赏植物组织培养（英文）：The Tissue Culture of Ornamental Plants课程编号：14371115课程学分：0.5课程总学时：15课程性质：专业选修课前修课程：园林植物遗传育种学二、课程内容简介观赏植物组织培养实验课程包括：培养基母液制备与保存、液体培养基和固体培养基的制备、植物材料的准备、接种与初代培养、植物愈伤组织诱导、继代培养和增殖、试管内生根培养、炼苗及移栽等实验内容；同时，参观一个因陋就简商业性组织培养实验室和一个现代化商业组织培养实验室，对比二者在设施、经营管理、成本与效益、技术能力等方面的差异，并讨论我国植物组织培养商业性生产的发展前景。
三、实验目标与要求通过实验课的教学，力求使学生能够对观赏植物组织培养的基本理论和概念有更加深刻的认识，激发同学们的学习兴趣，培养学生观察问题、分析问题和解决问题的能力；通过对植物细胞工程部分实验课程的学习，使学生掌握植物组织培养的基本原理，掌握组织培养的基本实验技术，了解不同外植体的灭菌及接种方法。
为进一步学习其它相关知识和从事实际操作工作奠定良好的基础。
并在实验过程中，使同学们学会有关仪器设备的使用操作，锻炼同学们的实际操作能力。
四、学时分配观赏植物组织培养实验课学时分配实验项目名称学时实验类别备注培养基母液制备与保存 2 验证性实验液体培养基和固体培养基的制备 3 验证性实验外植体的接种操作和培养观察 3 综合性实验植物愈伤组织诱导 2 设计性实验试管内生根培养、炼苗及移栽 3 设计性实验植物组织培养商品化生产的经营管理 2 综合性实验合计15注：观赏植物组织培养实验课程总计0.5学分，安排6次实验，其中验证性实验占33%，综合性、设计性实验占67%。
五、教学内容与安排实验一：培养基母液制备与保存（验证性实验 2学时）（一）实验目的（1）了解植物组织培养所需设备及必要的实验环境条件，对植物组织培养有一个总体的认识。
园林植物遗传育种学实验指导书（园林专业用）张菊平编河南科技大学林学院二○○七年六月河南科技大学学生实验守则1．实验前要认真预习实验指导书和有关基础理论，并接受实验指导人员的检查。
否则，不得参加实验。
2．学生必须按时到实验室上实验课。
进入实验室后应保持室内安静整洁，不准吸烟、随地吐痰和将赃物带入室内。
3．做实验时必须严格遵守实验室的规章制度和仪器设备的操作规程，服从教师和实验技术人员的指导。
4．爱护仪器设备、节约使用材料，未经许可不得动用与本次实验无关的仪器和其它设施，不准将室内物品带出室外。
5．实验中要细心观察，认真记录各种数据，不得马虎从事，不得抄袭他人数据，不得擅自离开操作岗位。
6．实验时必须注意安全，防止人身和设备事故的发生，若发生事故迅速采取有效措施，包括切断电源等，并注意保护现场，及时向指导人员报告。
7．实验完毕后，要将使用的仪器设备、工具等整理整齐，清扫实验场地，交检实验记录，经实验指导人员同意后方可离开。
8．凡损坏仪器设备和工具者应主动说明原因，并接受检查，填写报废单或损坏情况报告，根据具体情况进行处理。
凡不遵守操作规程或擅自动用其它仪器设备造成损坏者按有关规定进行处理。
摘自：河科大教〔２００７〕１９号河南科技大学实验设备借用与赔偿制度一、借用制度1．常规仪器设备校内互借，经所属实验室主任同意，借用方填写借用登记薄，双方严格交接手续。
校外原则上不借，特殊情况经院（系）、实验室及实验室与设备管理处三方同意并填写借用登记薄，担保人签字担保，并收押金方可借出。
2．大精设备不外借。
校内借用时，设备技术人员应随机操作或指导。
3．计量仪器不准借用。
4．私人不准借用校内各类实验仪器设备和工具。
二、赔偿制度人为造成实验设备丢失、损坏者，除追究当事人责任外，另按下列规定进行经济赔偿。
1．教职工损坏、丢失实验仪器设备，修复后不影响使用者，赔偿全部修理费。
如影响使用精度者，最低可按原价的5%赔偿。
2．外借仪器设备损坏或丢失，除按原价赔偿外，再增加20%的管理费。
植物组织培养实习心得植物组织培养实习心得1这次实习我们到达了预期目的，虽然说有点辛苦，但收获匪浅。
透过农田杂草物种调查综合实验，进行农田杂草样方调查，农田杂草物种调查;我大体上认识湛江周围的植物，尤其公园中的植物;学会了透过辨认植物的科属，进而辨认植物我们开阔了视野，巩固和深化了理论知识。
在实习中，我们开阔了视野，巩固和深化了理论知识。
培养了初步的野外工作潜力和专业技能，将所学知识在野外工作中运用，培养分析和解决实际问题的初步潜力。
同时我们还培养了吃苦耐劳，团结合作的精神，在互助中增进了友谊，锻炼了意志品质。
提高观察潜力，动手潜力以及综合分析问题的潜力，增强了环境保护意识。
我还了解到:每一种植物既有与其同科植物的共性，也有自己的特性，因为这样我们能够透过植物本身的特性来辨认它们，例如:桃金娘，水蒲桃等有自身各自特有的气味:木麻黄有退的鳞叶;对于同一科的植物则能够透过比较法来分辨，例如短长鱼尾葵可透过是否是簇生来区别:椰树树杆比假槟榔树杆光滑和节间较短等;透过对湛江植物分布的观察能够得出亚然带地区的植物埀直分布规律:阔叶林——灌木林——草甸区——水域;对于采集标本必须要以保护自然资源为前提，可持续地采集。
整个过程，我一向明确实习目的和要求，从没有把实习当作旅游，而是认真对待。
在实习时，认真听从老师指导，细心辨认植物，采集标本，作记录，不懂的同学之间相互讨论，请教老师。
采集植物回来以后认真辨认和压制标本，记好实习日记。
实习中，我认识了200多种植物，了解部分植物的用途，了解到红森林的作用:红树林由于特殊的位置、环境，注定其有特殊的作用。
(1)红树林生长茂密，根系发达，相互交错，减缓风浪对海岸的冲击，保护堤坝基围。
(2)红树林能净化水源，防止赤潮发生。
(3)丰富渔业区，这为鱼类、无脊椎动物和腐生植物带给了栖息地。
(4)药用价值:因富含单宁，它有收敛、止血等作用。
(5)食物利用:海桑果实可直接生食，其它的经处理可食用、作软饮料等。
专题2 《植物组织培养技术》一.设计思路本节课遵循《高中生物课程标准》倡导的提高生物科学素养的基本理念来设计。
植物组织培养的内容与当前生物技术热点和生产生活实际紧密相连，所以本节课应重视学生理解能力、实际应用能力的培养。
将《植物组织培养技术》的知识作为本节课的理论基础，将科学问题解决的过程作为本节课的教学主线，并通过设置一些相互衔接的问题，引导学生思考，将课堂交还给学生，让其在老师的指导下，自主地解决实际问题、获取相关知识，同时提高自身的生物学素养。
二、教学分析1、教材分析“植物细胞工程的基本技术”是人教版高中生物学教材《现代生物科技专题》(选修3)专题2“细胞工程”的内容，涉及的知识点主要有细胞的全能性、植物组织培养技术，其中植物组织培养的原理和过程是教学的重点，植物组织培养的实验是教学的难点。
2、学情分析虽然必修模块中细胞全能性、细胞分化和单倍体育种等方面的知识已为本节课的学习奠定了一定的理论基础，但是相关的实验技术难度较高、过程抽象，这就会给学生的理解带来一定的困难。
教学中应结合多媒体手段，采用创设情境、层层设疑、小组讨论等方法，让学生完成知识的自主构建，并激发他们的科学探究意识。
3、教学重点与难点分析（1）重点：细胞的全能性和植物组织培养技术（2）难点：植物组织培养技术三、教学目标1.知识目标简述细胞全能性的概念；简述植物组织培养的过程、方法和应用；2.能力目标在质疑、探究的学习过程中，培养独立思考，推理判断和创造性思维能力；通过联系农业生产实际，培养活学活用，理论联系实际的能力。
3.情感态度和价值观目标认同科学是一个不断发展的过程，激发探索生命奥秘的热情；渗透科学思想的教育，理解科学、技术、社会与环境四者之间的关系。
四、教学策略与手段本节课根据生物工程内容的特点，从引导学生从科学、技术、社会与环境四个层面进行构建，具体指导以技术操作流程为核心，在此基础上分析操作的原理（科学），分析应用（社会、环境）与技术的联系。
《植物组织培养实验指导》的相关说明实验一实验室基本设备及其用途的识别一、目的认识植物组织培养实验室的基本结构，必须的基本设备及其用途与作用方法。
二、实验内容1．实验室的基本结构（二）化学实验室（工作室）培养基药品称量、配制、分装、灭菌；材料预处理；培养材料的观察分析；制蒸馏水。
设备、药柜、工作台、蒸馏水器、天平、冰箱，手提高压消毒锅、显微镜、解剖镜、各种玻璃仪器、金属仪器等。
安装水、电、排气等装置。
（三）接种室①无菌操作室②接种箱③超净工作台（四）培养室（五）洗涤、消毒室；卧式高压消毒锅。
（六）温室（培养大棚）。
实验二常用仪器、必要器皿、几种主要设备的使用方法、常用几种药剂的配制一、目的认识植物组织培养必需的仪器、器皿，几种主要设备的使用方法、常用几种药剂的配制。
二、常用仪器1.蒸馏水器（学习操作）2.手提式高压消毒锅、卧式高压消毒锅（学习使用、操作）3.天平⑴药物天平（工业天平）、粗天平、（精密度1/10）⑵扭力天平（精密度1/100）⑶分析天平（精密度1/10000）4.超净工作台（学习、使用、操作）5.电热干燥箱（烘箱）6.恒温光照培养箱（学习、操作）7.电冰箱8.显微镜和解剖镜①手提式解剖镜（学习、使用、操作）②立体解剖镜③普通显微镜9.旋转培养机10.离心机（学习、使用、操作）11.酸度测定仪：⑴精密PH4－7试纸；⑵笔型袖珍酸度计。
三、必要的器皿（一）玻璃器皿1. 培养器皿①试管②三角烧瓶（锥形瓶）③圆形高形培养瓶（罐头瓶）④培养皿⑤扁身培养瓶⑥L型和T型管⑦凹面载玻片2. 盛装器皿①试剂瓶②烧杯3. 计量器皿①量筒②容量瓶③吸管4. 其它器皿滴瓶、称量瓶、漏斗、玻璃管、注射器等实验室常用器皿。
（二）金属器械1. 镊子类①20－25cm长型镊子（接种或转移愈伤组织）②尖端弯曲“枪型”镊子（镊取较小的植物组织）③尖头钟表镊子和鸭嘴镊子（剥离表皮用）④尖端为小铲状镊子（挖取带琼脂培养基的培养物）2. 解剖刀和刀类①眼科用刀种牛痘疫苗的菱形刀（切割柔软组织中小细胞团）②解剖刀（手术刀）③双面刀片焊接在玻棒上（切取茎尖用）④锋利小刀、大刀和小铁锹3. 剪刀类①解剖剪②眉剪③眼科剪④ 18－25cm弯头剪⑤俢枝剪4.接种针四、几种常用药剂的配制（一）用95%尝试酒精配比不同浓度的酒精的配制。
学习配制70%和75%酒精。
（二）消毒剂1. 20%次氯酸钠溶液称取20g次氯酸钠用少许水溶解，100ml水定容。
2. 0.1%升汞（HgCl2）溶液称取0.1g HgCl2少许水溶解，100ml水定容。
（三）洗涤剂1. 2HCl酒精95%酒精100ml加入2mlHCl2. 硫酸－重铬酸钾洗液称取10g重铬酸钾加入蒸馏水90ml，加热溶解冷却后，逐渐加入浓硫酸175ml，放入棕色玻璃瓶备用，（注意：切记不可将盛过洒精，甲醛等原剂的药品玻璃器皿直接泡入洗液在，因为重铬酸钾是一种强的氧化剂，一旦被还原氧化，洗液变绿，失去洗涤作用）。
这些器皿必须用自来水冲洗干净并晾干再浸入洗液。
（四） 1摩尔浓度(mg/L )NaOH 和1摩尔浓度（mg/L）HCl配制。
摩尔浓度是指用1升（1000ml）溶液中所含溶质的分子量数来表示的溶液的浓度。
用M表示。
1. NaOH摩尔浓度（M）NaOH摩尔质量=分子克数=40g1M NaOH是指1000ml溶液中含有40克摩尔质量的NaOH，现要配制100ml40×0.1＝4g称取NaOH4g，用少量溶解，定容100ml.2. HCl的摩尔浓度具体配制酸的mol浓度时，应考虑原浓酸的比重mol浓度。
要求配制的mol浓度×需配制的体积×原酸分子量V＝———————————————————————原酸的百分浓度×原酸的比重×1000配制1.0M HCl 100ml，量取38%，比重为1.19的HCl8.06ml加蒸馏水，定容至100ml。
实验三洗涤――灭菌植物组织培养能否成功重要的一环是在无菌条件下进行操作与培养，导致污染的来源主要有：⑴器皿和用具；⑵培养基；⑶培养材料；⑷工作人员本身；⑸操作时的空气。
防止污染的有效方法是将所有与培养有关的器皿，用具、培养基、接种室、培养室等进行灭菌和无菌操作。
一、洗涤（一）玻璃器皿的洗涤1. 新购置的玻璃器皿的洗涤（学习、操作）因有游离碱性物质，使用前先用1%稀盐酸浸泡一夜，然后用肥皂水洗净，清水冲洗，最后用蒸馏水冲洗一次，干后备用。
2. 已用过玻璃器皿先将残渣除去；用清水洗净，再用热肥皂水或洗衣粉洗净，清水冲洗干净，最后用蒸馏水冲洗一次，干后备用。
3. 对一些不宜刷洗的玻璃器皿如：吸管，滴管及较脏的器皿等先用去污粉和去油剂刷洗，自来水冲干净后，晾干，再浸入硫酸－重铬酸钾洗液中浸泡若干小时，用夹子取出在自来水冲洗干净，再用蒸馏水冲洗1－3遍，稍晾不滴水后置于干燥箱内烘干备用。
4. 对带有凡士林，石蜡，或胶布的器皿选用特殊方法处理后，再用常规方法洗涤。
带有凡士林的器皿须先用废纸把凡士林擦去，再用汽油擦洗干净，然后用热肥皂水煮沸半小时，刷洗后，自来水冲干净。
若带有石蜡，可在玻璃器皿下垫几层废纸，放入60－70℃温箱中1加热－2小时，待石蜡融化后，再用废纸反复擦2－3次即去石蜡再泡入洗衣粉的热水中洗干净最后用自来水冲洗，蒸馏水冲洗干净若有胶布粘着物，先用70%酒精棉球擦数遍，溶解粘胶物，并用少许去污粉刷抺，再用洗衣粉煮沸半小时，刷洗干净，自来水冲洗，晾干，再泡入洗液。
(二)金属器皿新购置金属器皿因其上有润滑油或防绣油，用蘸有四氯化碳（CCl4 ）布擦去油脂，再用湿布擦净，干燥备用。
二、灭菌（一）器皿和用具常用灭菌方法：1. 热压灭菌法（学习操作）将洗净的培养器皿，用具，用牛皮纸包好，放入高压消毒锅中，1.1压力下灭菌20－30分钟。
2. 干热灭菌法洗净的玻璃器皿置于电热干燥箱中，150℃40分钟或120℃两小时，待冷却后使用。
（二）无菌室灭菌（接种室、培养室）1.用新洁尔灭擦抺工作台，70%酒精擦拭超净工作台。
2.薰蒸（学习操作）用甲醛、高锰酸钾提前1－3天薰蒸密封房间方法1：甲醛倒入蒸发皿加热，用量10ml/m2。
方法2：甲醛（HCHO）与高锰酸钾（KMn4）以10：1比例混合。
3.接种前用70－75%酒精喷雾，使飘在空气中的尘埃沉积下来。
4.用紫外光灯进行照射灭菌（波长2650－2660A最好）接种箱及用具30－40分钟。
（三）培养基灭菌（略）（四）培养材料灭菌（略）（五）工作人员无菌操作（略）实验四培养基和培养基成分介绍一、培养基的成分是影响组织培养的最根本的外部因素。
对某种植物培养成功与否是各种条件综合影响的结果。
这些综合因素存在于每一个培养步骤。
每一个单因子都可能导致培养的失败。
影响培养效果的因素分有外因和内因，外因有培养基成分及物理状态，培养温度，光照强度，光的质及波长等等。
这五种最根本的是培养基成分，因为它是培养材料的生命之地，它若适宜。
培养则易成功，反之则失败。
二、培养基的成分（一）大量元素植物生长必须的C、H、O、N、P、 K、S、Ca、Mg九种元素在植物组成中含量较多，通常占干重或灰分的千分之几，百分之几，所以在培养基中用量较大叫大量元素，大量元素H、O两种元素主要从水中获得，C从光合作用CO2来，但离体植物或组织没有光合作用能力。
因此通过加糖提供C源，常用浓度为1－5%，常用分析纯、化学纯的蔗糖。
N常用硝态N（硝酸钾等）和铵态N（硫酸铵等）大多数以硝态N为主。
MS培养基和N6培养基既含有硝态N 又含有铵态N，P参与植物生命过程中的核酸合成，蛋白质合成，光合作用，呼吸作用及能量贮存，转化和释放等重要生理生化过程。
K在近代培养基中，用量有提高的趋势，Ca、Mg、S的需要则较少。
能提供这些元素的物质主要有磷酸二氢钾（KH2PO4），七个结晶水的硫酸镁（MgSO4.7H2O），二个结晶水的氯化钙（CaCl2.2H2O）。
（二）微量元素包括Fe 、Cu、Mo（钼）、Zn、Na、Mn、Co（钴）、B（硼）和I（碘），它们在植物组织培养基中需要量极微，体内含量常在10－3－10－5moi/L之间，培养基中添加10－7－10－5moi/L （摩/升）就可满足需要，多了就会引起植物细胞酶失活，代谢障碍，蛋白质变性及组织死亡。
Fe是用量较多的一种微量元素，对植物组织叶绿素的合成和延长生长起重要作用。
因使用Fe (SO4)3（硫酸铁）和FeCl3（氯化铁）在培养基PH为5.2以上时Fe (OH)3沉淀，植物材料无法吸收，故常用FeSO4.7H2O（硫酸亚铁）和二乙铵四乙酸二钠（Na2-EDTA）结合成螯合铁成为有机态被吸收和利用。
Cu有促进离体根生长的作用；Mo是合成活跃的硝酸还原酶的组成部分，也是固N酶的组成部分，还有防止叶绿素受破坏的作用；Mg、Zn、Na、是酶的组成部分，也是防止叶绿素被破坏的作用；Mn与植物呼吸作用、光合作用有关；B与糖的运输，蛋白质合成有关，总之，微量元素在生命活动中，多以酶系中的辅基形成起重要作用。
（三）有机营养1. 维生素类：大多数植物组织或细胞能够合成必要的维生素，但是在数量上显然是不够的，通常在培养基中补加一种或多种维生素但各标准营养培养基所用维生素组合差别较大，常使用的有：维生素B1（盐酸硫铵素）用量0.1－5.0mg·L－1维生素B6（盐酸吡哆醇）用量0.1－1.0mg·L－1维生素H（生物素）用量0.01－1.0mg·L－1烟酸用量0.1－5.0mg·L－1肌醇用量100－200mg·L－1核黄素用量0.1－1.0mg·L－1抗坏血酸用量1－100mg·L－1泛酸钙、叶酸用量0.5－2.5mg·L－12. 氨基酸：是重要的有机N源，有甘氨酸、丝氨酸、谷氨酸、天冬酰铵，水解酪蛋白（CH），水解乳蛋白（LH），它们主要作为营养提供，以利于蛋白质合成，CH和LH是近二十种氨基酸的混合物，常用量100－1000mg·L－13. 有机添加物是一些成分较复杂，大多数含氨基酸、激素、酶等的复杂化合物，它们对细胞和组织的增殖与分化有明显的促进作用，但成分大多不清楚，含量也不稳定，所以一般应尽是避免使用，特别是新的生长调节剂物质不断产生，更缩小它们的使用范围。
⑴椰乳（CM）：液体胚乳，一般浓度10－20%⑵香蕉：用量20－200g·L－1黄熟的小香蕉加入培养基后即变紫色，对PH的缓冲作用影响很大，主要于兰花组培。
⑶马铃薯，去皮去芽后用量150－200g·L－1，切碎，30煮分钟，过滤液，加入培养基，对PH有缓冲作用。
⑷其他还有酵母提取液（YE），用量约0.5%；麦芽提取液用量0.1－0.5%苹果汁、番茄汁、柑桔汁等。
