植物组织培养实验室的组成、仪器设备及基本操作(精要)
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植物组织培养实验室基本设备:超净工作台;培养室、;洗涤、消毒室,卧式高压消毒锅;温室(培养大棚);常用仪器:1.蒸馏水器(学习操作),2.手提式高压消毒锅、卧式高压消毒锅(学习使用、操作),3.天平:⑴药物天平(工业天平)、粗天平、(精密度1/10)⑵分析天平(精密度1/10000),4.超净工作台(学习、使用、操作),5.电热干燥箱(烘箱),6.恒温光照培养箱(学习、操作),7.电冰箱,8.显微镜和解剖镜:①手提式解剖镜(学习、使用、操作)②立体解剖镜③普通显微镜,9.旋转培养机,10. 离心机(学习、使用、操作),11. 酸度测定仪:⑴精密PH4-7 试纸;⑵笔型袖珍酸度计。
必要的器皿:(一)玻璃器皿:1.培养器皿:①试管②三角烧瓶(锥形瓶)③圆形高形培养瓶(罐头瓶)④培养皿⑤扁身培养瓶⑥L 型和T 型管⑦凹面载玻片,2.盛装器皿:①试剂瓶②烧杯,3.计量器皿①量筒②容量瓶③吸管,4.其它器皿滴瓶、称量瓶、漏斗、玻璃管、注射器等实验室常用器皿。
(二)金属器械:1.镊子类:①20-25cm 长型镊子(接种或转移愈伤组织)②尖端弯曲“枪型”镊子(镊取较小的植物组织)③尖头钟表镊子和鸭嘴镊子(剥离表皮用)④尖端为小铲状镊子(挖取带琼脂培养基的培养物),2.解剖刀和刀类:①眼科用刀种牛痘疫苗的菱形刀(切割柔软组织中小细胞团)②解剖刀(手术刀)③双面刀片焊接在玻棒上(切取茎尖用)④锋利小刀、大刀和小铁锹,3.剪刀类:①解剖剪②眉剪③眼科剪④18-25cm 弯头剪⑤俢枝剪,4.接种针。
几种常用药剂的配制:(一)用95%尝试酒精配比不同浓度的酒精的配制。
学习配制70%和75%酒精。
(二)消毒剂:1. 20%次氯酸钠溶液:称取20g 次氯酸钠用少许水溶解,100ml 水定容。
2. 0.1%升汞(HgCl2)溶液:称取0.1g HgCl2少许水溶解,100ml水定容。
(三)洗涤剂:1. 2HCl酒精:95%酒精100ml 加入2mlHCl,2.硫酸-重铬酸钾洗液:取10g 重铬酸钾加入蒸馏水90ml,加热溶解冷却后,逐渐加入浓硫酸175ml,放入棕色玻璃瓶备用,(注意:切记不可将盛过洒精,甲醛等原剂的药品玻璃器皿直接泡入洗液在,因为重铬酸钾是一种强的氧化剂,一旦被还原氧化,洗液变绿,失去洗涤作用)。
1 实验室与基本操作(植物组织培养)第一章实验室与基本操作第一节实验室及其基本设备实验室的大小取决于工作的目的和规模:1.以工厂化生产为目的,实验室规模太小,则会限制生产影响效率。
2.在设计组织培养实验室时,应按组织培养程序来设计避免某些环节倒排,引起日后工作混乱。
植物组织培养是在严格无菌的条件下进行的。
要做到无菌的条件,需要一定的设备、器材和用具,同时还需要人工控制温度、光照、湿度等培养条件。
实验室设计标准的组织培养实验室包括:洗涤室(准备室);配置室;灭菌室;接种室;培养室;观察室等一、准备室作用:材料、培养器械的清洗、培养基准备、灭菌等的准备工作。
普通化学实验室:仪器及设备、化学药品。
纯水仪、冰箱、移液枪、过滤灭菌器、电炉、微波炉、磁力搅拌器、低速台式离心机、电脑等作用:配制培养基。
洗涤室:清洗、贮存器皿设施、鼓风干燥箱等。
作用:玻璃器皿、用具和培养材料的洗涤。
灭菌室:①高压蒸气灭菌装置:如立式、卧式和手提式灭菌器。
作用:培养基、器械、棉塞、无菌纸等灭菌消毒②细菌过滤器作用:进行植物材料分离接种的重要场所,需长期的无菌操作,对组织培养成功起关键作用。
试验设施;超净工作台;紫外灯;固定式和挪移式载物台;消毒器、广口瓶、酒精灯、酒精棉、机械支架;手术剪、解剖刀、解剖针、镊子等超净工作台(alaminarflowhood)工作原理:利用鼓风机驱动空气通过高效过滤器除去空气中的尘埃颗粒,使空气得到净化。
净化空气徐徐通过工作台面,使工作台内构成无菌环境。
作用:进行材料的培养的场所。
其大小、规模可根据工作性质设定。
以充分利用空间和节能为原则。
设备:可调控光、温、湿度等设备。
还有固定式培养架、转床、摇床。
合用于器官(芽、茎、花药等)、愈伤组织、细胞和原生质体的固体培养和液体培养。
作用:细胞学和组织学观察。
设备:需备有高倍显微镜、体视显微镜、倒置显微镜、各种相机、恒温箱、切片机、恒温水浴、滴瓶、染色缸、载玻片、盖玻片等。
植物组织培养试验《植物组织培养技术》实验指导实验一组培室设备参观及器皿的洗涤和灭菌一、目的要求:1.通过参观,了解组织培养室的几个主要组成部分和各部分应有的基本设备以及有关仪器的用途与功能。
2.通过实际操作,学会洗涤剂的配制和各种器皿的清洗和灭菌方法。
二、材料用具:高压灭菌锅、烘箱、超净工作台、双筒解剖镜、酸度测定仪、空调机、控温仪、百分之一与万分之一天平、电炉、玻璃器皿(试管、三角瓶、移液管、漏斗、烧杯、容量瓶、试剂瓶、量筒酒精灯),以及镊子、解剖刀、解剖针、手术剪,肥皂、洗衣粉、重铬酸钾、浓硫酸等。
三、说明:在进行各类具体的组培实验前,首先了解组培室的结构及主要设备的用途和性能是十分必要的,总体上的了解有利于以后各实验的进行以及正确的使用各种仪器和设备。
植物组织培养是一项十分细致的工作,为了保证植物外植体不受污染,第一关就是要对各种器皿进行清洗和消毒,使它们保持无菌状态,做这些工作同样有一套科学的方法和需要熟练的技巧,因此每个学生必须学好这套基本功。
四、方法和步骤:首先在老师带领下参观组培室,并听取讲解,然后配制洗液,称取工业用重铬酸钾40克,溶解在500ml在水中,然后徐徐加入450ml 粗制浓硫酸(或废硫酸)配好的溶液呈红色,铬酸洗液是一种强氧化剂,去污能力强,但玻璃器皿上沾有油脂、凡士林、石蜡等则用此液无效,铬酸洗液可反复使用,直到溶液呈青褐色为止。
此溶液腐蚀性强,洗涤时需注意。
每人清洗部分玻璃器皿,方法:清水洗净一泡入洗衣粉水溶液中进行洗刷f清水反复冲洗f蒸馏水淋一遍f烘干备用。
然后清洗部分较脏的玻璃器皿,方法:采用先碱后酸,即用洗衣粉洗刷后冲洗干净f晾干一侵入酪酸洗液,浸泡时间视器皿的肮脏程度而定f清水反复冲洗干净f蒸馏水淋洗一遍f烘干备用。
带有石蜡或胶布的器皿:先将其除去,再用常规洗涤,石蜡用水煮沸数次即可去掉,胶布粘着物则需用洗衣粉液煮沸数小时,再用水冲洗,凉干后浸入洗液,以后的步骤同前。
组培实验仪器配置清单植物组织培养(Planttissueculture)是以植物生理学为基础发展起来的一门新生的生物技术学,科针对此项目,托普云农特整理出组培实验仪器配置清单供新老客户参考。
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植物组培实验室设置条件及器具一、实验室组成二、基本设备三、培养器皿及实验用具四、无菌条件及创设五、无菌操作六、组培的环境条件和营养条件组织培养实验室布局的总体要求基本实验室辅助实验室实验室组成准备室缓冲室无菌操作室培养室细胞生物学实验室温室生化分析实验室基本实验室布局平面图实验台搁架培养架培养架培养架培养架药品及仪器柜无菌台无菌台搁架拉窗冰箱搁架水槽电炉门 4.5m 3.0m 3.5m 4.0m 准备室缓冲室无菌室培养室组织培养准备实验室缓冲室培养室无菌室(一)无菌室(二) 1 冰箱酸度计电炉天平纯水器培养基分装器搅拌器2、灭菌设备蒸汽压力灭菌锅、干热消毒柜、过滤灭菌装置、喷雾消毒器、紫外灯。
蒸汽压力灭菌锅干热消毒柜无菌瓶顶过滤装置喷雾消毒器(参考图)(参考图)3、无菌操作设备超净工作台无菌接种箱4、细胞培养设备摇床培养架H Z C - 2 5 0 恒温振荡培养箱1 5 0 C 2 5 0 D 光照培养箱5、细胞学鉴定设备光学研究显微镜、实体显微镜、倒置显微镜倒置显微镜光学显微镜1、玻璃器皿三、培养器皿及实验用具培养皿三角瓶培养瓶2、金属材质用具镊子解剖刀接种针无菌条件物理方法:物理灭菌干热、湿热、射线处理、物理除菌、过滤、离心、沉淀等化学方法:消毒剂、抗菌素灭菌1、灭菌方法2、灭菌(1)培养基灭菌:高温高压湿热灭菌法压力在9.8×10 4 —10.8×10 4 Pa 温度在121℃灭菌20—30min (2)玻璃器皿灭菌:蒸汽高压消毒灭菌干热消毒灭菌(3)塑料器皿灭菌:多采用高压蒸汽消毒灭菌(4)金属用具灭菌:灼烧灭菌浸入95%酒精,后置于酒精火焰上灼烧,冷却后使用(5)接种室灭菌空气消毒灭菌接种室超净工作台紫外灯照射70%—75% 的酒精擦洗培养材料的接种紫外灯照射(6)外植体灭菌流水冲洗10—20min 或更长时间70%—75% 酒精中浸泡30s 0.1%—0.2%氯化汞液中浸泡10min左右蒸馏水冲洗4—5次在10%的次氯酸钠、饱和漂白粉浸泡30min左右备用六、无菌操作实验员消毒实验室、无菌台灭菌实验器材的灭菌无菌接种消毒实验台卫生培养室培养1、消毒,更换实验服、帽子与鞋子,进入接种室。
植物组织培养实验室的组成及特点植物组织培养实验室是用于进行植物组织培养的科研实验室,主要用于研究植物生长、发育和遗传变异等方面的问题。
该实验室的组成和特点如下。
一、组成:1. 培养室:用于培养植物组织的主要场所,具备恒温、恒湿、光照等环境条件控制设备,以提供适宜的生长环境。
2. 器械室:用于存放和管理植物组织培养所需的器械、耗材和试剂等。
3. 培养箱:用于在无菌条件下培养植物组织,保证培养过程的无菌性。
4. 植物材料库:用于存放和管理各类植物材料,如种子、离体器官等。
5. 实验台:用于进行植物组织培养实验的操作台,配备显微镜、离心机、培养皿、移液器等实验器材。
6. 数据分析室:用于对实验数据进行统计和分析,以及进行相关的科研文献检索和资料整理。
二、特点:1. 无菌环境:植物组织培养实验室的一个重要特点是要保持无菌环境,以防止外界微生物的污染对实验结果的影响。
因此,实验室内需要进行严格的无菌操作,包括无菌培养箱的使用、培养基的制备和无菌操作技术的掌握等。
2. 精密控制条件:植物组织培养实验室需要精密控制培养环境的温度、湿度、光照等条件,以提供适宜的生长环境。
这样可以促进植物组织的生长和发育,并提高培养效果。
3. 多种培养方法:植物组织培养实验室可以采用多种培养方法,如组织培养、离体培养、原代培养等。
这样可以满足不同研究目的的需求,并开展多样化的实验研究。
4. 多样化的研究内容:植物组织培养实验室的研究内容涉及植物生长、发育、遗传变异、细胞学、生理学、分子生物学等多个方面。
通过培养不同植物组织或植物材料,可以对这些方面进行深入研究,为进一步理解植物的生物学特性提供重要依据。
5. 团队合作和交流:植物组织培养实验室通常由一支研究团队组成,团队成员之间需要密切合作和交流,共同解决实验中遇到的问题,提高实验效率和科研水平。
此外,实验室还需要与其他实验室、学术机构和产业界进行合作和交流,以促进学术交流和科技创新。