专题 基因工程试题

利用微生物分解废纸是一种环保的方式，但废纸中的纤维素分子量大不能直接进入酵母 菌，且酵母菌无法分解利用环境中的纤维素。为解决这一难题，科学家将纤维素酶基因通过 重组质粒导入酵母菌。其所用质粒及其酶切位点如图 16，外源 DNA 上的纤维素酶基因及其 酶切位点如图 17。
酶 II 切割重组质粒，那么切割后线性片段大小应为________________。
A.大于 4.2 kb B.等于 4.2 kb
C.小于 4.2 kb D.0kb
3.（2 分）标记基因是重组质粒的重要标记，通常用来检验转化成功与否，在培育转基因 苜蓿植株过程中，应选择_______为标记基因。 A.四环素抗性基因 B.GFP 基因 C.卡那霉素抗性基因 D.LYZ 基因 4.（2 分）对该苜蓿植株进行病菌接种实验，通过观察其抗病程度可以进行个体生物学水平 的鉴定，原因是________________________________________________________。
C.联合使用时，P450/Y9 能显著增加四种菌的整体降解石油的能力
D.为达到更好的效果，最好单独使用基因工程菌 P450/Y9
六、（2018 二模嘉定）回答有关生物工程技术的问题（12 分）
凝乳酶是生产干奶酪不可缺少的制剂，主要来源是未断奶小牛的胃粘膜。现在，运用基 因工程可进行大规模生产。图 11 所示获取凝乳酶基因（N）、构建重组质粒。用两种识别切 割序列完全不同的限制酶 E 和 F 从基因组 DNA 上切下 N，并将之取代质粒 zl（3.7kb）上相
蛋白胨 酵母浸膏
NaCl
KCl
MgCl2
H2O
pH
20.0 g
5.0 g
0.5 g
0.2 g
1.0 g
1000 mL
7.0
为检测基因工程菌降解石油的能力，科研人员做了如下 4 组实验，测定不同时间各组的
石油降解率（%）
石油降解率，实验结果见右图。
80
D组
70
A 组：单独使用 Y9
C组
60
B组 A组
B 组：单独使用 P450/Y9
和 N 的大小分别为 kb， kb，
2.表 3 示 E 酶和 G 酶的识别序列和切割部位。若将 E 酶切的 DNA 末端与 G 酶切的 DNA 末端
连接，需要
酶，连接形成部位
。
A．既能被 E 也能被 G 切开 B．能被 E 但不能被 G 切开 C．能被 G 但不能被 E 切开
限制酶
识别序列及 切割位点
限制酶 识别序列及切割位点
图 22 表一
������������������������������������
������������������������������������������
-129-
������������������������������
������������������������
5.（2 分）抗病苜蓿通过植物组织培养繁殖后代，其后代全身各组织或细胞均含有的物质是
__________________。
① LYZ-GFP 基因 ②LYZ-GFP 基因 mRNA
③溶菌酶、绿色荧光蛋白1Fra bibliotekA．①
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B．①②
C．②③
D．①②③
二、（2018 青浦二模）回答下列关于基因工程的问题（10 分）
5.（2 分）图 16 中涉及的生物技术有
A．细胞融合
B.细胞核移植
（多选）。 C. 动物细胞培养
D.微生物转基因
四、（2018 闵行二模）生物工程（12 分）
天然蛋白纤维蜘蛛丝具有广泛的应用前景，但天然蜘蛛丝的产量低且难以大量收集。为 此，科学家们探索通过基因工程手段获得大量蜘蛛丝，其中转基因家蚕因具有吐丝系统而备 受关注，图 20 是相关的技术流程。
2017 年 10 月 23 日，中科院动物所联合中国农业大学的研究人员在 PNAS 发表论文，利 用 CRISPR/Cas9 技术，向猪的基因组内插入一个解耦联蛋白基因（UCP1），经过基因改造的 猪瘦肉率显著提高，比正常猪脂肪少 24%，抗寒能力也得到提高。图 22 是基因改造过程中 涉及的相关限制酶，箭头表示酶切位点。表一显示几种限制酶的识别序列及切割位点。
E
GGATCC CCTAGG
G
TGATCA ACTAGT
D．既不能被 E 也不能被 G 切开 表3
3.如凝乳酶基因（N）模板链中的 TGA 序列对应一个密码子，翻译时识别该密码子的 tRNA 上
相应的碱基序列是
4.早期生产凝乳酶主要采用大肠杆菌，因此需要先在 LB 培养基（已加入抗生素）中培养大
肠杆菌。图 12 中抑菌效果最明显的菌落是
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五、（2018 静安二模）现代生物技术（12 分）
海洋石油污染正引起广泛关注，利用基因工程菌进行生物降解具有巨大的应用潜力。 P450 是石油降解的关键酶，用 Sal I 和 Nde I 联合酶切获得的 P450 基因，与甲图所示的质 粒（pCom8）重组，导入土著菌种 Y9，获得了基因工程菌 P450/Y9。甲图中 mel 是黑色素合 成基因，其表达能使白色的菌落变成黑色，aacCl 是庆大霉素（一种抗生素）抗性基因，限 制酶 Nde I、Xho I 和 Ssp I 在原质粒上均只有一个酶切位点，数字表示酶切位点间的碱基 对数。乙图表示几种限制酶的识别序列和切割位点。
山羊乳腺细胞、烟草等不同的表达系统，但首先选择了大肠杆菌，这是因为微生物具有
_____________________________________________________的优点。（写出 2 点）
细胞工程是生物工程的重要领域。科学家制备了以蜘蛛丝蛋白为抗原的单克隆抗体，流
程如图 21 所示。
图 17
图 18 3．（2 分）据图 17、18 分析，过程④中不能（宜）使用的限制酶有
（多选）。
A. Msp Ⅰ
B. BamH Ⅰ
C. Mbo Ⅰ
D. EcoR Ⅰ
4．（2 分）将重组的大肠杆菌置于培养皿内培养，为保证获得单个菌落，适宜的接种方法
有
。
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三、（2019 长宁一模）现代生物技术（12 分）
图 16 是医学研究中制备抗体的两种技术路线模式简图。
1.（2 分）细胞 N 是
。图过程16①中，若仅考虑二个细胞间的融合，则融合后的
细胞种类有
种。
2.（4 分）通过①②获得抗体 m 的过程中，需要经过二次筛选。分析原因
图 17 示基因 J 所在的 DNA 片段，图 18 示质粒的部分碱基序列。（现有 4 种限制酶：Msp Ⅰ、BamH Ⅰ、Mbo Ⅰ、EcoRⅠ，能识别的碱基序列和酶切位点分别为 C↓CGG、G↓GATCC、 ↓GATC、G↓AATTC）
Xho I mel
Nde I
1.2kb
Ssp I
pCom8
aacCl
Sal I
GTCGAC CAGCTG
Nde I
CATATG GTATAC
Xho I
CTCGAG GAGCTC
Ssp I
AATATT TTATAA
甲
乙
1.上述基因工程中的受体细胞是________。 2.原质粒需用限制酶________________作用后，才能与________在 DNA 连接酶的作用下形成 重组质粒。 3.经测定原质粒为 7.6kb（1kb 为 1000 个碱基对），重组质粒经 Nde I、Ssp I 联合酶切后获 得了 6.0 和 1.2kb 的两个片段，则目的基因的长度为________kb。
。
图 12
5.早期生产凝乳酶主要采用大肠杆菌，现在已被酵母菌取代。与大肠杆菌比较，酵母菌作为
受体细胞的主要优势是
。
A．酵母菌繁殖快
B．酵母菌易培养
C．酵母菌细胞大，易操作
D．酵母菌能对蛋白质进行加工
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七、（2019 青浦一模）回答有关基因工程与微生物的问题。（12 分）
4.（3 分）科研人员通过________法，将重组质粒导入猪的________细胞中，然后将该细胞
送入母体内，使其生长发育成转基因猪。该转基因猪与普通雄性个体交配，所产的后代不一
定是瘦肉猪，原因是________________________________________________。
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应的 E—F 区域 (0.2kb)，成为重组质粒 czzl。
1.用 G 酶和 H 酶分别切两组重组质粒 c图zz1l1样品，G 酶切后得到 1.5 kb 和 3.0kb 两个片段；
H 酶切后得到 1.1 kb 和 3.4 kb 两个片段。根据 G 酶或 H 酶切结果，判断重组质粒 czzl
____________________两种限制酶同时酶切质粒和 UCP1 基因，后一个方法的优点在于
___________________________。
3.（2 分）图 22 中的抗生素抗性基因的作用是____________________________，为了获取
重组质粒，除了使用限制酶外，还需使用________酶。
1.（3 分）在基因工程中，将目的基因导入受体细胞所用的工具被称为________。能将目的
基因导入大肠杆菌的是________（多选）
������．质粒
������．动物病毒