月季的花药离体培养

课题2 月季的花药培养基础巩固1下列是被子植物花粉发育经历的各阶段排序,正确的是()A.小孢子四分体时期→双核期→单核居中期→单核靠边期→花粉粒B.小孢子母细胞→单核靠边期→单核居中期→双核期→花粉期C.小孢子母细胞→小孢子四分体时期→单核居中期→单核靠边期→花粉粒D.小孢子四分体时期→小孢子母细胞→双核期→单核期→花粉期[解析]:小孢子母细胞经减数分裂形成四个小孢子,先后经历小孢子四分体时期、单核居中期、单核靠边期、双核期,发育成花粉粒。

[答案]:C2某名贵花卉用种子繁殖会发生性状分离,为了防止性状分离并快速繁殖,可以利用该植物的一部分器官或组织进行培育,发育成完整植株。

进行离体培养时不应采用该植物的()A.茎尖B.子房壁C.叶片D.花粉粒[解析]:花粉粒是由花粉母细胞经减数分裂形成的,细胞内的遗传物质与亲本相比减少了一半,培育出的植株是单倍体。

所以利用植物组织培养技术繁殖名贵花卉时,不能用花粉粒。

[答案]:D3下列说法错误的是()A.镜检选择花药时需用醋酸洋红将花粉细胞核染成红色或用焙花青—铬矾溶液染成蓝黑色B.花期早期的花蕾营养状态及生理状态较好,可提高花粉诱导的成功率C.用于花蕾消毒的药品有体积分数为90%的酒精、无菌水及质量分数为0.1%的氯化汞溶液等D.除去消毒后的花药上的萼片和花瓣、剥离花药到将花药接种到培养基上,整个过程都需要在无菌条件下进行[解析]:用于花蕾消毒的酒精的体积分数应为70%。

[答案]:C4产生花粉植株的两种途径中,得到胚状体或愈伤组织都是通过哪个过程进行的?()A.分化B.脱分化C.再分化D.诱导[解析]:通过花药离体培养形成单倍体植株的过程中,通过脱分化得到胚状体或愈伤组织。

[答案]:B5下列关于花药接种和培养的实验操作,错误的是()A.每瓶接种花药7~10个,20~30 d后,花药开裂形成幼小植株后才给予光照B.花药培养至开裂后,将长出的愈伤组织及时转移到分化培养基上C.花药培养至开裂后,将释放出的所有胚状体整体移到新的培养基上继续培养D.对培养出来的植株作进一步鉴定和筛选[解析]:花药培养至开裂后,将释放出的胚状体尽快分开,并分别转移到新的培养基上,否则,这些植株将很难分开。

课题2 月季的花药培养一、选择题1．花药中的花粉发育为单倍体植株时，脱分化既可以形成愈伤组织也可以形成胚状体，对此起决定作用的因素是( )A．培养基中激素的种类及其浓度配比B．选取离体花药的时期C．培养基是固体培养基还是液体培养基D．培养花粉的时间长短解析：选A 通过花粉培养产生花粉植株一般有两种途径，一种是花粉通过胚状体阶段发育为植株，另一种是花粉在诱导培养基上先形成愈伤组织，再将其诱导分化成植株。

这两种途径之间本身并没有绝对的界限，主要决定因素是培养基中激素的种类及其浓度配比。

2．在花粉的发育过程中，选择下列哪个时期的花药培养成功率最高( )A．小孢子四分体时期B．单核居中期C．单核靠边期D．双核期解析：选C 单核期之前，花药质地幼嫩，容易破碎；单核期之后，花瓣开始松动，消毒困难；在单核靠边期花药培养成功率最高。

3．(2019·某某期中)下列说法错误的是( )A．被子植物的花粉发育依次经历了四分体时期、单核期、双核期B．被子植物的花粉是由花粉母细胞经有丝分裂而形成的，因而含有与体细胞中数目相同的染色体C．被子植物花粉是单倍体的生殖细胞D．被子植物花粉粒内有两个精子解析：选B 被子植物的花粉是由花粉母细胞经减数分裂而形成的，因此，花粉是单倍体的生殖细胞，含有比体细胞中数目减半的染色体。

4．下列关于花药培养产生花粉植株的两个途径，叙述错误的是( )A．花粉可通过诱导形成愈伤组织发育成植株B．花粉可通过胚状体阶段进一步分化成植株C．两种途径依据的原理都是植物细胞的全能性D．产生胚状体是花药离体培养中特有的途径解析：选D 通过花药培养产生花粉植株一般有两种途径：一是花粉通过胚状体阶段发育成植株；二是花粉在诱导培养基上先形成愈伤组织，再将其诱导分化成植株。

产生胚状体并不是花药离体培养中特有的途径。

5．(2019·鹤岗期中)将二倍体玉米的幼苗用秋水仙素处理，待其长大后用其花药进行离体培养得到了新的植株，下列有关新植株的叙述正确的是( )①是单倍体②体细胞内没有同源染色体③不能形成可育的配子④体细胞内有同源染色体⑤能形成可育的配子⑥可能是纯合子也可能是杂合子⑦一定是纯合子⑧是二倍体A．④⑤⑦⑧B．①④⑤⑥C．①②③⑥ D．①④⑤⑦解析：选B 二倍体玉米的幼苗用秋水仙素处理后得到的是四倍体，用四倍体的花药进行离体培养得到的是单倍体，但其单倍体体内含有同源染色体，可以形成可育配子，该单倍体可能是纯合子，也可能是杂合子。

（6）植物的组织培养技术——2023届高考生物一轮复习生物技术实践小题通关练【通用版】学校：___________姓名：___________班级：___________考号：___________一、单选题1、下列有关月季花药离体培养的说法，错误的是( )A.对材料的选择最常用的方法是焙花青—铬矾法，这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色B.接种花药后一段时间内不需要光照，但幼小植株形成后需要光照C.接种的花药长出愈伤组织或释放出胚状体后，要适时转换培养基，以便进一步分化成再生植株D.理论上经花药离体培养得到的植物均为单倍体2、下列有关影响植物组织培养的因素的叙述，错误的是( )A.同一种植物材料的年龄、保存时间的长短等都会影响实验结果B.无菌技术是植物组织培养能否获得成功的关键，所以外植体要进行高温灭菌C.植物激素的浓度、使用的先后顺序以及用量的比例等都会影响实验结果D.培养过程中的pH、温度、光照等条件也是影响植物组织培养的重要因素3、培养胡萝卜根组织可获得试管苗，获得试管苗的过程如图所示，下列叙述错误的是( )A. 胡萝卜根段进行组织培养可以形成试管苗，是因为植物细胞具有全能性B. 步骤③切取的组织块中要带有形成层，原因是形成层容易诱导形成愈伤组织C. 步骤⑥要进行照光培养，其作用是诱导叶绿素的形成D. 步骤⑤和步骤⑥的培养基中所需的生长素和细胞分裂素的比例不同4、某植物有甲、乙两品种。

科研人员在设计品种乙组织培养实验时，参照品种甲的最佳激素配比（见下表）进行预实验。

为确定品种乙的Ⅱ阶段的最适细胞分裂素浓度，参照表中a2（a2>2.0μmol/L），以0.5μmol/L为梯度，设计5个浓度水平的实验，其中细胞分裂素最高浓度设为M。

下列有关叙述错误的是( )B.确定品种乙Ⅱ阶段最适细胞分裂素浓度的实验中，M为a2+2μmol/LC.生长素和细胞分裂素协调促进细胞分裂的完成，表现出协同作用D.生长素和细胞分裂素的配比是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键因素5、植物组织培养技术是指将离体的植物器官、组织或细胞等,在人工配制的培养基上,给予适宜的培养条件,诱导其形成完整植株的技术。

月季花药离体培养
一、材料的选取
1、选择花药一般通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期。

2、确定花粉发育时期最常用方法：醋酸洋红法；焙花青－铬矾法。

注：花粉细胞核内有染色体，染色体主要由DNA和蛋白质组成，醋酸洋红为碱性染色剂，染色体容易被染色。

通过染色，可以确定细胞核为单核期还是双核期，是单核居中期还是单核靠边期。

一般单核靠边期的花药培养成功率最高。

二、材料的消毒
1、花蕾用V/V为70%的酒精浸泡30秒
2、无菌水清洗
3、无菌吸水纸吸干花蕾表面的水分
4、放入质量分数为0.1%的氯化汞溶液中2~4分钟（也可质量分数为1%的次氯酸钙溶液或饱和漂白粉溶液）
5、无菌水冲洗3~5次
用于培养花药，实际上多数未熟，由于它的外面有花萼、花瓣或颖片保护，通常处于无菌状态，所以只要将整个花蕾或幼穗消毒即可。

三、接种和培养
灭菌后花蕾，要在无菌条件下除去萼片和花瓣，并立即将花药接种到培养基上。

在剥离花药时，要尽量不损伤花药（否则接种后，容易从受伤部位产生二倍体的愈伤组织），同时还要彻底去除花丝，因为与花丝相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成。

通常每瓶接种花药7-10个，温度控制在25℃左右，不需要光照。

幼小植株形成后才需要光照。

一般经过20-30天培养后，会发现花药开裂，长出愈伤组织或释放出胚状体。

将愈伤组织及时转移到分化培养基上，以便进一步分化出再生植株。

人教版高中生物选修一《月季的花药培养》基础练习卷一、选择题1．被子植物花粉的发育依次经过()①双核期②四分体时期③单核居中期④单核靠边期A．①②③④B．②③④①C．②④③①D．②①③④解析被子植物花粉发育过程为：小孢子母细胞→四分体时期→单核居中期→单核靠边期→双核期营养细胞生殖细胞→两个精子答案 B2．从小孢子母细胞到形成精子，经历的分裂方式是()A．有丝分裂B．减数分裂C．先有丝分裂后减数分裂D．先减数分裂后有丝分裂解析小孢子母细胞先经过减数分裂形成4个小孢子，每个小孢子形成一个具单细胞核的花粉粒，每个花粉再经过有丝分裂形成两个精子。

答案 D3．对产生花粉植株的途径的叙述，错误的是()A．花粉通过胚状体阶段发育成植株B．花粉先形成愈伤组织再诱导分化成植株C．花粉培养产生花粉植株主要取决于培养基的激素种类及浓度配比D．花粉经脱分化形成胚状体，再分化出根，然后诱导生芽解析花粉植株形成过程中先是经脱分化形成胚状体，再分化出芽，然后诱导生根，故D错误。

答案 D4．选择月季花粉最佳时期为()A．盛开期的月季花B．略微开放的月季花C．完全未开放的花蕾D．近败时期的月季花解析不同植物的诱导成功率很不相同。

就同一植物来说，亲本植株的生理状况对诱导成功率也有直接影响。

花期早期时的花药比后期的更容易产生花粉植株。

最适合花药培养的小孢子发育时期为单核中、晚期，为了挑选到单核期花药，最好用完全未开放的花蕾。

答案 C5．下列关于花药培养的注意事项中正确的是()A．花药培养成功与否与材料选择无关B．花药培养成幼苗后，一定不能分瓶培养C．花药培养成幼苗的过程中，除了适宜的温度、pH等，还要注意照光D．一般地讲，材料选择单核期时花药培养成功率较高解析本题要从影响花药培养的因素、培养过程、培养条件等方面进行分析。

花粉植株能否培育成功受多种因素影响，其中材料的选择与培养基组成是主要影响因素；对一般植物来讲，选择单核期往往成功率最高；在花粉的幼苗阶段，由于无叶绿体，所以不需照光；当培养获得愈伤组织或幼小植株时必须分瓶培养，才能诱导愈伤组织分化或幼苗分开。

高三生物克隆技术试题答案及解析1.下图表示菊花的嫩枝和月季的花药离体培养过程，请据图回答下面的问题。

（1）对菊花来说，要选取的嫩枝来进行组织培养。

对月季来说，小孢子母细胞形成精子首先要经过“小孢子四分体时期”，这里的“四分体”是指________________。

为确定该花粉是否处于该时期，最常用的方法是。

（2）在培养嫩枝组织和花粉的培养基中都要加入一定的植物激素，常用的植物激素有。

（3）某同学在培养过程中发现培养基上感染了几种细菌。

若在以尿素为唯一氮源的培养基中加入指示剂培养几种菌后，指示剂变红就可以鉴定其中含有能够分解尿素的细菌。

为了避免微生物对培养造成的影响，所以在进行接种时应注意。

①接种室要消毒②只要戴口罩，操作时便可说话③外植体可预先用体积分数为70%的酒精浸泡，取出用无菌水冲洗后，再用0．1%的氯化汞溶液消毒，并用无菌水冲洗干净④接种操作要在酒精灯火焰旁进行⑤接种完毕应立即盖好瓶盖A．①②③④⑤B．①②③④C．①③④⑤D．②③④⑤（4）进行菊花组织培养的基本实验操作步骤是：制备MS固体培养基、________、接种、培养、移栽、栽培。

（5）不同植物对各种条件的要求往往不同，进行菊花组织培养一般将温度控制在℃，并且对光照的控制为【答案】（1）生长旺盛四个小孢子连在一起醋酸洋红法（2）细胞分裂素和生长素（3）酚红 C（4）外植体消毒（5）18-22 每天12小时光照【解析】（1）因为生长旺盛的嫩枝生理状况好，容易诱导脱分化和再分化，所以对菊花来说，要选取生长旺盛的嫩枝来进行组织培养；对月季来说，小孢子母细胞形成精子首先要经过“小孢子四分体时期”，这里的“四分体”是指四个小孢子连在一起。

确定该花粉发育时期的最常用的方法有醋酸洋红法．（2）决定植物脱分化和再分化的关键因素是植物激素的种类和比例，特别是生长素和细胞分裂素的协同作用在组织培养过程中非常重要．因此在培养嫩枝组织和花粉的培养基中都要加入细胞分裂素和生长素．（3）在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂培养几种菌后，指示剂变红就可以鉴定其中含有能够分解尿素的细菌。