大肠菌群的定义
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大肠菌群、粪大肠菌群、大肠杆菌的从属关系及介绍相互关系大肠菌群(总大肠菌群) >粪大肠菌群&耐热大肠菌群> 大肠杆菌一、大肠菌群介绍大肠菌群并非细菌学分类命名,而是卫生细菌领域的用语,它不代表某一个或某一属细菌,而指的是具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌,这些细菌在生化及血清学方面并非完全一致,其定义为:需氧及兼性厌氧、在37℃能分解乳糖产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌。
一般认为该菌群细菌可包括大肠埃希氏菌、柠檬酸杆菌、产气克雷白氏菌和阴沟肠杆菌等。
大肠菌群分布较广,在温血动物粪便和自然界广泛存在。
调查研究表明,大肠菌群细菌多存在于温血动物粪便、人类经常活动的场所以及有粪便污染的地方,人、畜粪便对外界环境的污染是大肠菌群在自然界存在的主要原因。
粪便中多以典型大肠杆菌为主,而外界环境中则以大肠菌群其他型别较多。
大肠菌群是作为粪便污染指标菌提出来的,主要是以该菌群的检出情况来表示食品中有否粪便污染。
大肠菌群数的高低,表明了粪便污染的程度,也反映了对人体健康危害性的大小。
粪便是人类肠道排泄物,其中有健康人粪便,也有肠道患者或带菌者的粪便,所以粪便内除一般正常细菌外,同时也会有一些肠道致病菌存在(如沙门氏菌、志贺氏菌等),因而食品中有粪便污染,则可以推测该食品中存在着肠道致病菌污染的可能性,潜伏着食物中毒和流行病的威胁,必须看作对人体健康具有潜在的危险性。
大肠菌群是评价食品卫生质量的重要指标之一,目前已被国内外广泛应用于食品卫生工作中。
二、总大肠菌群所谓总大肠菌群系指一群在37℃培养24小时能发酵乳酸、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌。
三、耐热大肠菌群与粪大肠菌群的比较北美国家一般使用“粪大肠菌群”概念,如AOAC、FDA。
SN中的“粪大肠菌群”概念为等同采用AOAC方法,故而使用粪大肠菌群概念;而欧洲使用“耐热大肠菌群”概念,较少使用“粪大肠菌群”。
一般欧洲学者认为,“粪大肠菌群”的提法不太科学,耐热大肠菌群的范围比粪大肠菌群范围大。
大肠菌群检验中需注意的要点母永贵(米易县疾病预防控制中心;四川攀枝花617200)一、什么是大肠菌群?大肠菌群是指某些特性相同的细菌,并不代表某一个或者某一属细菌,主要是在需氧和兼性厌氧的情况下,可以分解乳糖产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌。
大肠菌群的分布较广,主要来源人畜粪便,故以此作为粪便污染指标来评价食品的卫生质量,推断食品有污染肠道致病菌可能。
所以对于大肠菌群的检查是使用频繁的检查项目,只有在检查过程中通过对可以避免的操作或者结果进行分析和反复的检查,可以有效的提高大肠菌群的检出率,提高检查结果的有效性。
二、大肠菌群检验中需要注意的问题?大肠菌群的检查是临床中常见的实验室检查的一项常规内容,由于一些操作或者其他方面的影响很有可能导致检查结果的误差,从而出现检查结果的不准确。
所以在进行大肠菌群检验中一定要注意以下几个问题:(1)实验材料的选择:在对大肠菌群检查时,可选取糕点类或者肉类食品。
(2)抑菌剂的使用:通常在对大肠菌群检查时,对培养基中会加入一些抑菌剂,来抑制其他病原菌,但是抑菌剂中可能会对大肠菌群中的某些菌群起到轻微的抑制作用,从而导致检查结果的误差。
(3)稀释程度:由于要求对样本进行不同程度的稀释,但是很有可能因为稀释的程度而导致检测结果的偏差,从而降低检查结果的可靠性。
所以对于不同的样本在选择稀释程度时一定要选用最佳的稀释程度,避免结果的偏差。
(4)初步发酵:临床中对大肠菌群的定义是在37℃分解乳糖产酸产气,所以在初步发酵时,可以进行适当的延长培养时间,有助于大肠菌群细菌的复活和增殖,提高大肠菌群的检出率。
(5)挑选菌落:由于大肠菌群是一大类菌群的总称,在平板上呈现出不同的形态和特点,要选择典型的菌落进行检查,避免结果假阳性的出现,提高检出率。
(6)产酸产气情况:大肠杆菌可以分解乳糖产酸产气,往往在检测过程中着重于观察菌群发酵产气的情况。
由于不同的菌群其产气的能力不同,加上由于在筛选过程中,样本中所存留的大肠菌群数量的不足,很有可能在发酵初期,出现较小的气泡,但是大多数发酵管可以充满气体。
大肠菌标准一、定义和检测方法大肠菌群是指一群在37℃培养24小时能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌。
大肠菌群的检测通常采用GB4789.3-2003《食品卫生微生物学检验大肠菌群测定》中的方法,即“乳糖发酵法”和“靛基质试验”。
二、限量标准根据食品的种类和用途,大肠菌群的限量标准有所不同。
一般来说,食品中大肠菌群的限量标准不得超过100MPN/100g或100MPN/100mL。
婴幼儿配方食品和特殊医学用途配方食品中的大肠菌群限量标准不得超过10MPN/100g或10MPN/100mL。
三、采样方案采样方案应按照食品安全国家标准和相关规定执行。
一般采用随机抽样的方式,抽取样品的数量应符合统计学要求,且具有代表性。
在食品生产、加工、储存、运输和使用等过程中,应保证各环节的卫生条件,并按照规定进行清洗、消毒和除菌。
四、判定原则若食品中大肠菌群的数量超过限量标准,则判定为不合格。
对于不合格的食品,应立即停止生产和销售,并进行追溯召回。
同时,应查找原因并采取有效的纠正和预防措施,防止再次出现类似问题。
五、包装、标志和贮存要求食品的包装应符合国家相关规定,包装材料应无毒、无异味、防潮、阻光、密封性好。
食品标签上应注明生产日期、保质期、生产厂家、成分等内容。
贮存食品时应分类存放,并保证良好的卫生环境,防止交叉感染和二次污染。
六、复检规定若食品中大肠菌群的结果出现疑似阳性时,应进行复检。
复检时应对样品进行重复检测,以确认结果是否准确可靠。
若复检结果仍为阳性,则判定为不合格。
七、监测计划制定要求食品生产和监管部门应制定大肠菌群的监测计划,定期对食品进行抽检,并保证覆盖不同地区、不同品种、不同生产批次的产品。
同时,应根据食品的种类和用途,选择适当的采样方案和检测方法,以确保监测结果的准确性和可靠性。
八、风险评估和预警机制建立食品生产和监管部门应建立风险评估和预警机制,对大肠菌群超标的食品进行风险评估,并根据评估结果采取相应的预警措施。
总大肠菌群、耐热大肠菌群、大肠埃希氏菌的从属关系及介绍相互关系总大肠菌群> 耐热大肠菌群> 大肠埃希氏菌一、大肠菌群介绍大肠菌群并非细菌学分类命名,而是卫生细菌领域的用语,它不代表某一个或某一属细菌,而指的是具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌,这些细菌在生化及血清学方面并非完全一致,其定义为:需氧及兼性厌氧、在37℃能分解乳糖产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌。
一般认为该菌群细菌可包括大肠埃希氏菌、柠檬酸杆菌、产气克雷白氏菌和阴沟肠杆菌等。
大肠菌群分布较广,在温血动物粪便和自然界广泛存在。
调查研究表明,大肠菌群细菌多存在于温血动物粪便、人类经常活动的场所以及有粪便污染的地方,人、畜粪便对外界环境的污染是大肠菌群在自然界存在的主要原因。
粪便中多以典型大肠杆菌为主,而外界环境中则以大肠菌群其他型别较多。
大肠菌群是作为粪便污染指标菌提出来的,主要是以该菌群的检出情况来表示食品中有否粪便污染。
大肠菌群数的高低,表明了粪便污染的程度,也反映了对人体健康危害性的大小。
粪便是人类肠道排泄物,其中有健康人粪便,也有肠道患者或带菌者的粪便,所以粪便内除一般正常细菌外,同时也会有一些肠道致病菌存在(如沙门氏菌、志贺氏菌等),因而食品中有粪便污染,则可以推测该食品中存在着肠道致病菌污染的可能性,潜伏着食物中毒和流行病的威胁,必须看作对人体健康具有潜在的危险性。
大肠菌群是评价食品卫生质量的重要指标之一,目前已被国内外广泛应用于食品卫生工作中。
二、总大肠菌群所谓总大肠菌群系指一群在37℃培养24小时能发酵乳酸、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌。
三、耐热大肠菌群与粪大肠菌群的比较北美国家一般使用“粪大肠菌群”概念,如AOAC、FDA。
SN中的“粪大肠菌群”概念为等同采用AOAC方法,故而使用粪大肠菌群概念;而欧洲使用“耐热大肠菌群”概念,较少使用“粪大肠菌群”。
一般欧洲学者认为,“粪大肠菌群”的提法不太科学,耐热大肠菌群的范围比粪大肠菌群范围大。
生活饮用水卫生标准大肠菌群数随着人们对健康的关注不断提高,生活饮用水的质量成为人们越来越关注的话题之一。
而大肠菌群数是衡量生活饮用水卫生质量的重要指标之一。
本文将从大肠菌群数的定义、危害、检测和控制等方面进行探讨,希望能够为大家提供一些有价值的信息和建议。
一、大肠菌群数的定义大肠菌群是指肠道中的细菌群落,包括大肠杆菌、肠球菌、梭菌等多种菌种。
在生活饮用水中,大肠菌群数是指每100毫升水中含有的大肠菌群数量。
通常情况下,生活饮用水中的大肠菌群数应该是0个/100毫升,否则就会给人们的健康带来一定的风险。
二、大肠菌群数的危害大肠菌群数超标的生活饮用水会对人体健康造成很大的威胁。
具体表现如下:1.引起肠胃疾病。
生活饮用水中的大肠菌群会通过口腔、食道、胃等消化道进入人体,引起肠胃疾病,如腹泻、呕吐、腹痛等。
2.导致感染性疾病。
某些大肠菌群可以引起感染性疾病,如肺炎、尿路感染等。
3.对儿童和老年人的危害更大。
儿童和老年人的免疫系统较弱,对大肠菌群的抵御能力较差,因此更容易受到其危害。
三、大肠菌群数的检测为了保证生活饮用水的卫生质量,需要对其进行大肠菌群数的检测。
一般来说,大肠菌群数的检测应该由专业的水质检测机构进行,其检测方法主要包括膜过滤法、MPN法等。
1.膜过滤法。
该方法是将水样通过一种特殊的膜过滤器,将其中的大肠菌群过滤出来,并将其培养在含有大肠菌特异性营养物质的培养基上,最后通过计数器进行计数。
2.MPN法。
该方法是将水样分别加入多个含有大肠菌特异性营养物质的培养液中,通过观察每种培养液中的大肠菌群的生长情况,最终确定其大肠菌群数。
四、大肠菌群数的控制为了保证生活饮用水的卫生质量,需要采取一系列的控制措施,以减少大肠菌群数的污染。
具体措施如下:1.加强水源地保护。
水源地应该建立保护区,禁止污染源进入,保护水源的纯净。
2.加强水厂处理。
水厂应该对水源进行充分的处理,包括混凝、沉淀、过滤、消毒等环节,以保证水质达到标准。
大肠菌群、粪大肠菌群、大肠杆菌的定义及区分大肠菌群、粪大肠菌群、大肠杆菌的定义及区分一、大肠菌群大肠菌群并非细菌学分类命名,而是卫生细菌领域的用语,它不代表某一个或某一属细菌,而指的是具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌,这些细菌在生化及血清学方面并非完全一致,其定义为:需氧及兼性厌氧、在37℃能分解乳糖产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌。
一般认为该菌群细菌可包括大肠埃希氏菌、柠檬酸杆菌、产气克雷白氏菌和阴沟肠杆菌等。
大肠菌群是作为粪便污染指标菌提出来的,主要是以该菌群的检出情况来表示食品中有否粪便污染。
大肠菌群数的高低,表明了粪便污染的程度,也反映了对人体健康危害性的大小。
大肠菌群是评价食品卫生质量的重要指标之一,目前已被国内外广泛应用于食品卫生工作中。
二、粪大肠菌群与耐热大肠菌群北美国家一般使用“粪大肠菌群”概念,如AOAC、FDA;而欧洲使用“耐热大肠菌群”概念,较少使用“粪大肠菌群”。
一般欧洲学者认为,“粪大肠菌群”的提法不太科学,耐热大肠菌群的范围比粪大肠菌群范围大。
作为粪便污染指标菌,耐热大肠菌群与大肠菌群、大肠杆菌相似,主要以其检出情况来判断食品是否受到了粪便污染。
粪便是肠道排泄物,有健康者,也有肠道病患者或带菌者粪便,所以粪便中既有正常肠道菌,也可能有肠道致病菌(如沙门氏菌、志贺式菌、霍乱弧菌、副溶血弧菌等)和食物中毒者。
因此,食品既然受到粪便污染就有可能对食用者造成潜在的危害。
耐热大肠菌群比大肠菌群能更贴切地反应食品受人和动物粪便污染的程度,且检测方法比大肠杆菌简单地多,而受到重视。
三、大肠杆菌(E.Coli)大肠杆菌(Escherichia coli),细胞杆状,直径约1微米,长约2微米,两端钝圆,周身具鞭毛,可运动。
革兰氏染色阴性,不形成芽孢。
菌落圆形,白色或黄白色,光滑而具闪光,低平或微凸起,边缘整齐。
最适条件下培养20分钟可繁殖1代。
大肠杆菌是人和温血动物肠道内普遍存在的细菌,是粪便中的主要菌种。
大肠菌群的单位-概述说明以及解释1.引言1.1 概述大肠菌群是指存在于人体大肠内的一种微生物群落,包括了多种不同类型的菌群。
这个微生物群落主要由各种细菌组成,其中最常见的是乳酸菌、肠球菌和革兰氏阴性菌等。
大肠菌群扮演着非常重要的角色,对人体健康具有巨大的影响。
大肠菌群的单位指的是研究和评估大肠菌群的测量标准和指标。
对于人体而言,了解和监测大肠菌群的单位十分重要,因为它们可以提供关于肠道健康和整体身体状况的重要信息。
随着科学技术的进步,研究人员可以利用多种方法来衡量和描述大肠菌群的单位。
常用的方法包括通过测量菌群的种类和丰度来描述它们的组成,使用16S rRNA基因测序来揭示菌群的多样性,以及通过测量菌群的代谢产物来评估其功能。
大肠菌群的单位不仅在研究和了解人体健康方面有着重要意义,还在多个领域中得到广泛应用。
例如,在食品安全领域,测量大肠菌群的单位可以帮助评估食品中的微生物污染程度。
在环境科学领域,它们也被用来监测污水处理系统中的微生物群落的稳定性和效果。
本文将对大肠菌群的单位进行详细探讨,包括其定义、重要性以及功能。
进一步介绍大肠菌群单位的研究进展,以及未来在这一领域的展望。
通过对大肠菌群单位的研究和认识,我们可以更好地了解和保护人体健康,为相关领域的科学研究和应用提供有益的指导。
1.2文章结构文章结构:本文主要包括引言、正文和结论三个部分。
在引言中,将对大肠菌群的概述进行介绍,明确文章的目的,并概述文章的结构。
正文部分将分为三个小节进行讨论。
首先是对大肠菌群的定义进行详细说明,包括其组成成分和特点。
接下来将重点探讨大肠菌群的重要性,分析其在人体健康和疾病中的作用和影响。
最后,谈论大肠菌群的功能,包括其在营养消化、免疫调节等方面的功能和机理。
在结论部分,将强调大肠菌群的单位的重要性,并回顾当前对大肠菌群的单位的研究进展,展望未来的发展方向。
整篇文章将通过以上结构,全面、系统地介绍大肠菌群的单位,为读者提供相关知识和科学的研究成果。
几种大肠菌群检测方法的比较大肠菌群的定义:大肠菌群(coliform group)是指一大群需氧或兼性厌氧、在37℃培养24h能分解乳糖产酸产气的革兰氏阴性无芽孢杆菌。
大肠菌群不是细菌学上的分类命名,而是根据卫生学方面的要求,提出的与粪便污染有关的细菌,即作为食品、水体等是否受过人畜粪便污染的指示菌,这些细菌在生化及血清学方面并非完全一致。
根据进一步的生化试验,可将这群细菌再分为大肠艾希氏菌(俗称大肠杆菌)、弗氏柠檬酸杆菌、肺炎克雷伯氏菌和阴沟肠杆菌等。
大肠菌群的检验基于它能分解乳糖能产酸产气、革兰氏染色阴性的重要特点。
标签:大肠菌群;发酵法;平板法;产酸产气大肠菌群并非细菌学分类命名,而是卫生细菌领域的用语,它不代表某一个或某一属细菌,而指的是具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌,这些细菌在生化及血清学方面并非完全一致,其定义为:需氧及兼性厌氧、在37℃能分解乳糖产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌。
一般认为该菌群细菌可包括大肠埃希氏菌、柠檬酸杆菌、产气克雷白氏菌和阴沟肠杆菌等。
大肠菌群分布较广,在温血动物粪便和自然界广泛存在。
调查研究表明,大肠菌群细菌多存在于温血动物粪便、人类经常活动的场所以及有粪便污染的地方,人、畜粪便对外界环境的污染是大肠菌群在自然界存在的主要原因。
粪便中多以典型大肠杆菌为主,而外界环境中则以大肠菌群其他型别较多。
大肠菌群数的高低,表明了粪便污染的程度,也反映了对人体健康危害性的大小。
粪便是人类肠道排泄物,其中有健康人粪便,也有肠道患者或带菌者的粪便,所以粪便内除一般正常细菌外,同时也会有一些肠道致病菌存在(如沙门氏菌、志贺氏菌等),因而食品中有粪便污染,则可以推测该食品中存在着肠道致病菌污染的可能性,潜伏着食物中毒和流行病的威胁,必须看作对人体健康具有潜在的危险性。
1 大肠菌群检验方法由于大肠菌群指的是具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌,即:需氧及兼性厌氧、在37℃能分解乳糖产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌。
大肠菌群的定义●大肠菌群系指一群能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌。
●大肠菌群不是细菌学上的分类命名,而是根据卫生学方面的要求,提出的与粪便污染有关的细菌,即作为食品、水体等是否受过人畜粪便污染的指示菌,这些细菌在生化及血清学方面并非完全一致。
根据进一步的生化试验,可将这群细菌再分为大肠艾希氏菌(俗称大肠杆菌)、弗氏柠檬酸杆菌、肺炎克雷伯氏菌和阴沟肠杆菌等。
大肠杆菌的定义●大肠杆菌(也称大肠埃希氏菌),分类于肠杆菌科,归属于埃希氏菌属。
●大肠杆菌指革兰氏阴性无芽孢杆菌、乳糖发酵产酸产气、IMViC试验(靛基质、MR、V-P、柠檬酸盐试验)为++--或-+--的细菌。
●与人类有关的大肠杆菌统称为致泻性大肠杆菌,包括五种:肠毒素性大肠杆菌(ETEC)、致病性大肠杆菌(EPEC)、出血性大肠杆菌(EHEC)、侵袭性大肠杆菌(EIEC)、黏附性大肠杆菌(EAEC)。
卫生学意义●大肠菌群和大肠杆菌是评价卫生质量的重要指标,作为食品中的粪便污染指标。
●食品中检出大肠菌群,表明该食品有粪便污染,既可能有肠道致病菌存在,因而也就有可能通过污染的食品引起肠道传染病的流行。
大肠菌群数的高低,表明了粪便污染的程度,也反映了对人体健康危害性的大小。
●大肠杆菌在外界存活时间与一些主要肠道致病菌接近,它的出现预示着某些肠道病原菌的存在,因此该菌是国际上公认的卫生监测指示菌。
近年来,有些国家在执行HACCP管理中,将大肠杆菌检测作为微生物污染状况的监测指标和HACCP实施效果的评估指标。
大肠杆菌的生物学特性基本形态:此菌为两端钝圆的短小杆菌,一般约0.5-0.8μm*1.0-3.0 μm,多单独存在或成双,但不呈长链排列。
约50%的菌株有周生鞭毛,但多数只有1-4根,一般不超过10根,故菌体动力弱。
多数菌株有菌毛,有的有荚膜或微荚膜,不形成芽孢,对普通碱性染料着色良好,革兰氏染色阴性。
培养特性:●大肠杆菌合成代谢能力强,在含无机盐、铵盐、葡萄糖的普通培养基上生长良好。
最适生长温度为37℃,在42-44 ℃条件下仍能生长,生长温度范围15-46 ℃。
大肠菌群及大肠杆菌测定——MPN法检验流程(FDA BAM)1、检样50g+450ml稀释液2、适当十倍稀释样品3、选择3个适宜的连续稀释度的样品稀释液,每个稀释度接种三管LST肉汤(每管9mlLST肉汤并加有导管),每管接种1mL。
在35℃下,培养24 ±2h ~48 ±2h。
4、(1)没有产气管→报告阴性(2)有产气管:①接种BGLB肉汤管→查MPN表报告结果(大肠菌群)②接种EC肉汤→在44.5±0.5 ℃(水浴培养)24 ±2h ~48 ±2h。
→产气管接种EMB平板(35℃、18~24h),从EMB平板上挑取5个可疑菌转接到PCA斜面,进行革兰氏染色、IMVC生化鉴定、接种LST复检产气→查MPN表报告结果(大肠菌群)。
大肠菌群测定——MPN法检验几点说明●MPN检索表:MPN检索表只给了三个稀释度,如改用不同的稀释度,则表内数字应相应降低或增加10倍。
●初发酵和证实试验:1)两步法进行了两次乳糖发酵试验。
初发酵和证实实验所用培养基不同,但都是为了证实培养物是否符合大肠菌群的定义,即“在37℃分解乳糖产酸产气”。
2)初发酵阳性管,不能肯定就是大肠菌群细菌,经过证实试验后,有时可能成为阴性。
有数据表明,食品中大肠菌群检验步骤的符合率,初发酵与证实试验相差较大。
因此,在实际检测工作中,证实试验是必需的。
●产气量与倒管:在乳糖发酵试验工作中,经常可以看到在发酵倒管内极微少的气泡(有时比小米粒还小),有时可以遇到在初发酵时产酸或沿管壁有缓缓上浮的小气泡。
实验表明,大肠菌群的产气量,多者可以使发酵倒管全部充满气体,少者可以产生比小米粒还小的气泡。
如果对产酸但未产气的乳糖发酵如有疑问时,可以用手轻轻打动试管,如有气泡沿管壁上浮,即应考虑可能有气体产生,而应作进一步试验。
大肠杆菌测定——EMB选择性分离鉴别EMB平板典型大肠杆菌菌落特征:中心黑色或紫红色,有或无绿色金属光泽大肠杆菌测定——EMB选择性分离鉴别●EMB是一种弱选择性培养基,一些球菌也可在该培养基上生长;●高压灭菌可使得美蓝还原从而使培养基的颜色呈不均一橘黄色,轻轻摇动培养基可以恢复原有的正常紫色,倾注平板前应先摇匀;●大肠杆菌在该培养基上并不一定总是呈现绿色的金属光泽;●该培养基受可见光易使其中的成分氧化,储存及培养细菌时都应在避光条件。
大肠杆菌测定——革兰氏染色基本步骤:●将涂片在火焰上固定,滴加结晶紫染液,染1min,水洗;●滴加革兰氏碘液,作用1min,水洗;●滴加95%乙醇脱色约15~30s,直至染色液被洗掉,不要过分脱色,水洗;●滴加番红复染液,复染1min,水洗、待干、镜检。
●结果:革兰氏阳性菌呈紫色,革兰氏阴性菌呈红色。
沙门氏菌属简介1880年E. Berth首先发现伤寒沙门氏菌,1885年Salmon与Smith又分离出猪霍乱沙门氏菌,以后取Salmon氏之名为本菌属之名。
沙门氏菌属是一群符合肠杆菌科定义并与其血清学相关的革兰氏阴性、需氧性、无芽孢杆菌。
本菌属种类繁多,抗原结构复杂,现已发现2000多个血清型,我国已发现血清型近200个。
沙门氏菌属——生物学特性形态特征:革兰氏阴性,大小为1~3×0.4~0.9μm的两端钝圆的短杆菌,无芽孢,一般无荚膜,除鸡沙门氏菌和雏沙门氏菌以外,都有周身鞭毛,运动力强。
培养特性:沙门氏菌需氧或兼性厌氧,10-42 ℃都可生长,最适生长温度为37℃,最适pH 为6.8~7.8。
营养琼脂平板上:35~37℃培养18~24h,其菌落大小一般为2~3mm,光滑、湿润、无色、半透明、边缘整齐。
血平板上:中等大小的灰白色菌落。
沙门氏菌属的抗原菌体抗原(O抗原)表面抗原(K抗原):Vi抗原和M抗原鞭毛抗原(H抗原)纤毛抗原FDA BAM沙门氏菌检验流程1、前增菌:25g样+225mL乳糖肉汤(肉制品、肉副产品、动物产品),匀质2min,室温放置60 ±5min,混合均匀,测定调节PH6.8 ±0.2,在35℃下培养24 ±2h。
2、选择性增菌:(1) 0.1ml+10mlMM(RV)在,42℃下培养24h。
(水浴培养)(2)1ml+10mlTTB,①在43℃下培养24h(水浴培养)→含菌量低②在35℃下培养24h→含菌量高3、分离培养:选择含菌量高的划线接种,选择性培养基(BS、XLD、HE)在35℃下培养24~48h(BS)4、生化鉴定:(1)每个平板挑取至少2个可疑菌(包括典型和非典型各2个),接种TSI三糖铁、LIA赖氨酸铁高层斜面(LIA高层深4cm),(松盖以保持有氧条件防止产生过多H2S),在35℃下培养24±2h。
(2)尿素酶试验:①阳性:弃去。
②阴性:卫矛醇、氰化钾、丙二酸钠、吲哚试验5、血清学:血清学试验——沙门氏菌的分类6、报告结果。
ISO6579沙门氏菌检验流程1、前增菌:25g样+225mLBPW,匀质,在37±1℃下培养18 ±2h。
2、选择性增菌:(1)0.1ml+10mlRVS,在41.5 ±1℃下培养24 ±3h(水浴培养)。
(2)1ml+10mlMKTTn,在37 ±1℃下培养24 ±3h。
3、分离培养:划线接种选择性培养基(XLD和第二种选择性培养基,如BS),在37℃下培养24~48h(BS),每个平板挑取至少5个可疑菌进行纯培养和确认试验,在37℃下培养24±3h。
4、生化鉴定:TSI、尿素酶、赖氨酸脱羧酶、β-牛乳糖、V-P、吲哚试验。
5、血清学:血清学试验——沙门氏菌的分类6、报告结果。
沙门氏菌检验选择性分离培养XLD琼脂:FDA BAM——典型菌落:粉色菌落,带或不带黑色中心。
许多沙门氏菌培养物可呈现大的具光泽的黑色中心或几乎为全部黑色的菌落。
——非典型菌落:黄色带或不带黑色中心。
ISO沙门氏菌检验选择性分离培养BS琼脂:FDA BAM——典型菌落:产硫化氢菌落黑色有金属光泽、棕褐色或灰色,菌落周围的培养基通常开始呈褐色,但伴随培养时间的延长而变为黑色,并有晕环效应;——非典型菌落:有些菌株不产生硫化氢,形成灰绿色菌落,周围培养基不变色。
沙门氏菌检验选择性分离培养HE琼脂:FDA BAM——典型菌落:兰绿色至兰色,多数菌株产硫化氢,菌落带或不带黑色,中心或几乎全黑色。
——非典型菌落:乳糖阳性的菌株为黄色中心黑色或全黑色。
沙门氏菌检验生化鉴定TSI:典型反应:斜面产碱(K):红色;底部产酸(A):黄色;产H2S:黑色(少数不产)沙门氏菌检验——几点注意冷冻样品解冻需在45℃以下,有自动调温器自控的水浴锅内不断搅拌进行15min 或在2-8℃,18小时内软化。
–为保证检验的准确性,必须在选择性培养基上挑取足够数量的菌落进行生化和血清学鉴定。
进行生化反应时,应以纯培养物进行试验,如出现血清学阳性,而生化反应特征不符合时,应对接种物进行纯化,用纯化后的培养物重新进行生化试验。
–测试中应同时接种阳性对照菌株。
李斯特菌属简介《伯杰氏鉴定细菌学手册》第9版中,李斯特菌属有7个种:单核细胞增生李斯特氏菌(L. monocytogenes)、英诺克李斯特氏菌(L. innocua)、西尔李斯特氏菌(L. seeligeri)、威尔斯李斯特氏菌(L. welshimeri)、绵羊李斯特氏菌(L. ivanovvi)、格氏李斯特氏菌(L. grayi)、默氏李斯特氏菌(L. murrayi)。
单核细胞增生李斯特氏菌是李斯特氏菌病的致病菌,可引起动物的感染,也可引起人的感染。
单核细胞增生李斯特氏菌——生物学特性形态特征:革兰氏阳性短杆菌,大小为0.4~0.5×0.5~2μm,两端钝圆,常两两相串成弯曲及V形,偶尔有球状、双球状、短链状,但很少有长链状,兼性厌氧、无芽孢,一般不形成荚膜。
该菌有4根周毛和1根端毛,周毛易脱落。
20℃培养后可见到很多鞭毛。
培养特性:●生长温度为2~42℃(冷藏不能阻止该菌的生长),最适生长温度为35~37℃。
20~25 ℃培养有动力,37 ℃培养动力消失;在显微镜下观察该菌新鲜的室温肉汤培养物可见翻筋斗运动。
●在pH3.8~4.4仍能生长,在pH中性至弱碱性(9.6)、氧分压略低、二氧化碳张力略高的条件下该菌生长良好,在6.5%NaCl肉汤中也能良好生长。
●血平板上:菌落通常不大呈灰白色,刺种血平板可产生窄小的β溶血环。
FDA BAM单核细胞增生李斯特氏菌检验流程1、增菌:检样25g+EB增菌液基础225mL,在30℃下培养4h。