FC酚法测定总酚
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总酚的测定方法总酚是一种常用的化学指标,用于测定样品中酚类化合物的含量。
酚类化合物广泛存在于自然界和工业生产中,其测定方法的准确性和可靠性对于环境保护、药品研发和工业生产具有重要意义。
总酚的测定方法有多种,下面将介绍其中几种常用的方法。
一、分光光度法分光光度法是一种常用的总酚测定方法。
通过测量样品在特定波长下的吸光度,可以计算出其中酚类化合物的浓度。
该方法简便、快速,并且对于不同种类的酚类化合物具有较好的选择性。
二、高效液相色谱法高效液相色谱法是一种常用的总酚测定方法。
该方法利用样品中酚类化合物在固定相上的分离特性,通过检测其在流动相中的峰面积或峰高,可以计算出总酚的含量。
高效液相色谱法具有分离效果好、分析速度快的特点,广泛应用于食品、环境和药品等领域。
三、电化学法电化学法是一种常用的总酚测定方法。
该方法利用电极与样品中的酚类化合物发生氧化还原反应,通过测量电流或电势变化,可以计算出总酚的含量。
电化学法具有灵敏度高、选择性好的特点,广泛应用于环境监测和药品分析等领域。
四、发光法发光法是一种常用的总酚测定方法。
该方法利用特定荧光染料与酚类化合物发生反应产生发光信号,通过测量发光强度,可以计算出总酚的含量。
发光法具有灵敏度高、特异性好的特点,广泛应用于生物医学和环境监测等领域。
总酚的测定方法在实际应用中需要考虑多个因素,如样品的性质、测定的目的和要求等。
在选择合适的测定方法时,需要综合考虑这些因素,以确保测定结果的准确性和可靠性。
总酚的测定方法在环境保护、药品研发和工业生产中具有重要意义。
通过准确测定总酚的含量,可以评估样品的污染程度、药品的质量和工业生产的效果,为相关领域的研究和应用提供科学依据。
总酚的测定方法是化学分析领域的重要内容之一,随着科学技术的不断发展和创新,新的测定方法也在不断涌现。
这些方法的应用将进一步推动总酚分析技术的发展,为环境保护、药品研发和工业生产等领域提供更加精确和可靠的数据支持。
样本和咀嚼片总酚(total phenols,TP)的测定
一、测定意义:
酚类物质具有清除自由基,抗氧化衰老的作用,具有较高的营养价值和医疗保健作用,被广泛应用于化妆品、食品、医药等领域。
二、测定原理:
在碱性条件下,酚类物质能将钨钼酸还原,产生蓝色化合物,在760nm处有特征吸收峰,测760nm处的吸光值,即可得样品总酚含量。
三、试剂盒组成及配置:
提取液:60%乙醇
试剂一:液体6ml✖️1瓶
试剂二:液体15ml✖️1瓶
四、实验仪器:
电子天平,烘箱,量筒,试管,分光光度计
五、实验步骤:
1、提取液的配置
取30ml无水乙醇加20ml蒸馏水配置60%的乙醇提取液。
2、总酚的提取
称取0.1g研碎的试样,加入2.5ml提取液,涡旋混匀10min,静止,取上清液,用提取液定容至2.5ml,待测。
六、总酚含量计算公式:
总酚含量(mg/g)=0.178✖️(A760➖0.0012)✖️2.5✖️20➗样品质量=8.905✖️A760➗样品质量
试剂一对皮肤具有一定刺激性,请操作时注意做好防护措施。
王华. 葡萄与葡萄酒实验技术操作规范.陕西:西安地图出版社,1999单宁的测定也是参考王华,1999以没食子酸为对照品(FC酚法)总酚的含量测定方法Folin-Ciocalteu 比色法( FC酚法)一、仪器UV- 2401 PC 型紫外分光光度计;超声波清洗仪(昆山市超声仪器有限公司KQ- 2508型)恒温水浴锅二、试剂没食子酸标准品; 钨酸钠,磷钼酸, 85%磷酸, Na2 CO3, 以上试剂均为分析纯; 水为蒸馏水。
1.3 福林试剂的配制在250mL的圆底烧瓶内加入20g 钨酸钠、5g 钼酸钠、140mL 蒸馏水,85%的浓磷酸10mL 及浓盐酸20mL,充分混匀,以小火回流10h,再加入3g 硫酸锂及15mL 双氧水,开口继续煮沸15min,待双氧水完全挥发,呈亮黄色。
冷却后移入250mL 容量瓶中,定容置于棕色试剂瓶中,放入冰箱中备用。
1.4 Na2CO3溶液的配制称取40g Na2CO3,溶于200mL 蒸馏水中, 即为20%(g/L)的Na2CO3溶液。
二、方法与结果1.对照品溶液的制备并绘标准曲线精密称取没食子酸标准品0.0110g,用蒸馏水溶解并定容至100mL,得浓度为0.11mg /mL 的标准液。
准确吸取0、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6mL 置于25mL 的棕色容量瓶中,加蒸馏水至6.0mL,然后分别加入FC 试剂0.5mL,混匀,在0.5~8min内加入1.5mL 20% 的Na2CO3溶液,充分混合后定容,30℃避光放置0.5h,以不加标准液的6.0mL 蒸馏水为空白对照,760nm 下测定吸光值,每个样品平行测定三次。
2、供试品溶液的制备样品溶液总酚含量的测定: 准确量取制备好的乙醇粗提液0.5mL 于50mL 容量瓶中,加入9.5mL 蒸馏水,摇匀,再加入0.5mL 福林试剂,混匀,在0.5 ~8min 内加入1.5mL 20%的Na2CO3溶液,充分混合后定容,30℃避光放置0.5h,以没食子酸标准液为空白对照,760nm 下测定吸光值,每个样品平行测定6 次(A为6次平行测得的吸光度)。
多酚含量测定-总酚含量测定(操作流程图) 2017.10【测定方法与操作流程图】【溶液配制】(1)0.25mol/L Folin酚(福林酚)试剂的配制:取2mol/L Folin-Ciocalteu试剂1mL,加蒸馏水7mL,充分混合,得0.25mol/L的Folin-Ciocalteu试剂,共8mL。
(2)15%Na2CO3溶液的配制:取Na2CO3•10H2O溶3.0g,溶于20mL水中,混匀即得。
(3)连苯三酚1标准液的配制:精确称取连苯三酚标准品10mg.用甲醇溶解并定容到50mL,得0.2mg/mL的连苯三酚标准液。
(4)样品液的的配制:精确称取待测样品10mg.用甲醇2溶解并定容到10mL,得1mg/mL的样品液。
【连苯三酚标准曲线的绘制】1本文使连苯三酚作为标准品.当然,也可以使用咖啡酸、槲皮素、儿茶素、芦丁等作为标准品,绘制标准曲线。
2也可以用无水乙醇、95乙醇、水,视样品的溶解性而度。
1.9276670.15 0.35 1.917图Folin酚法测定多酚含量的标准曲线(以连苯三酚为例,平行测三次)(以连苯三酚为例,A = 32.16733*C + 0.06012, R=0.998,线性范围:连苯三酚0.00-0.06mg/mL,A值在0.039-1.928之间)。
【多酚含量的计算】依上述公式A = 32.16733*C + 0.06012, 由A值即可求得浓度C值。
【说明】(1)不同的分光光度计所测得的A值可能不一样,所以,同一次实验要用同一台分光光度计;(2)Folin-Ciocalteu试剂:可向试剂公司购买,一般其浓度为2 mol/L。
也可以自配方法如下:将100g钨酸钠(Na2WO4 ·2H2O), 25g钼酸钠( Na2MoO4·2H2O) ,700 mL蒸馏水,50 mL 85%磷酸及100 mL浓盐酸装入带回流装置的2000mL圆底烧瓶中,充分混合,文火缓慢回流10h,在加入150g硫酸锂(Li2SO4),50 mL蒸馏水及数滴液溴,然后将烧瓶内溶液开口煮15min,以驱除过量的溴,冷至室温后用容量瓶定容至1000mL,过滤。
福林酚法测总酚原理
《福林酚法测总酚原理大揭秘》
嘿,大家知道不,有一种特别的方法可以用来测总酚,那就是福林酚法哟!这福林酚法测总酚的原理呢,就好像我们生活中的一件小趣事一样。
就说有一次我在厨房做蛋糕吧,我想知道我做的蛋糕里到底有多少“精华”成分。
这就好比我们要知道样品里有多少总酚。
然后呢,福林酚试剂就像是一个神奇的小侦探,它能和那些酚类物质发生反应。
就像我在找蛋糕里的某种特别味道一样,它能准确地把酚类给“揪”出来。
接着呀,这个反应会产生一种颜色的变化,哇,就像蛋糕烤好后颜色变得金黄诱人一样。
我们通过观察这个颜色的深浅,就能知道总酚的含量大概有多少啦。
这整个过程是不是很有意思呀!就像我们在生活中通过一些小细节去发现大秘密一样。
福林酚法就是这样神奇地帮我们测出总酚,让我们对样品有更深入的了解呢!嘿嘿,现在大家对福林酚法测总酚原理是不是有更清楚的认识啦!。
多(总)酚含量测定法(Folin-Ciocalteu试剂法)李熙灿/Xican Li(广州中医药大学)[文献] Xican Li, Jing Lin, Yaoxiang Gao, Weijuang Han, Dongfeng Chen. Antioxidant activity and mechanism of Rhizoma Cimicifugae. Chemistry Central Journal. 2012; 6(1):140.操作图解[溶液配制]1Folin-Ciocalteu试剂(0.25mol/L)的配制取2mol/L Folin-Ciocalteu试剂1mL,加蒸馏水7mL,充分混合,得0.25mol/L的Folin-Ciocalteu试剂,共8mL。
2 15%Na2CO3溶液(W/V)的配制取Na2CO3•10H2O溶3.0g,溶于20mL水中,混匀即得。
3 标准溶液的配制(以连苯三酚为例)精确称取连苯三酚标准品10mg.用水溶解并定容到50mL,得0.2mg/mL的对照品标准溶液。
4 连苯三酚标准曲线的绘制线性范围:连苯三酚0.00-0.06mg/mL,A值在0.039-1.928之间。
5 样品溶液的配制样品母液(1mg/mL):精确称取样品2mg,用95乙醇溶解并定容到2mL,得1mg/mL样品母液。
乙醇代替0.5mLFolin-Ciocalteu试剂+即可,注意观察A值大小。
6 多酚含量的计算依上述公式A = 32.16733*C + 0.06012, 由A值即可求得浓度C 值。
7 说明7.1 不同的分光光度计所测得的A值可能不一样,所以,同一次实验要用同一台分光光度计;7.2 Folin-Ciocalteu试剂:可向试剂公司购买,一般其浓度为2 M,使用前最好稀释。
也可以自配方法如下:将100g钨酸钠(Na2WO4·2H2O), 25g钼酸钠( Na2MoO4·2H2O) ,700 mL蒸馏水,50 mL 85%磷酸及100 mL浓盐酸装入带回流装置的2000mL圆底烧瓶中,充分混合,文火缓慢回流10h,在加入150g 硫酸锂(Li2SO4),50 mL蒸馏水及数滴液溴,然后将烧瓶内溶液开口煮15min,以驱除过量的溴,冷至室温后用容量瓶定容至1000mL,过滤。
多(总)酚含量测定法(Folin-Ciocalteu试剂法)李熙灿/Xican Li(广州中医药大学)[文献] Xican Li, Jing Lin, Yaoxiang Gao, Weijuang Han, Dongfeng Chen. Antioxidant activity and mechanism of Rhizoma Cimicifugae. Chemistry Central Journal. 2012; 6(1):140.操作图解[溶液配制]1Folin-Ciocalteu试剂(0.25mol/L)的配制取2mol/L Folin-Ciocalteu试剂1mL,加蒸馏水7mL,充分混合,得0.25mol/L的Folin-Ciocalteu试剂,共8mL。
2 15%Na2CO3溶液(W/V)的配制取Na2CO3•10H2O溶3.0g,溶于20mL水中,混匀即得。
3 标准溶液的配制(以连苯三酚为例)精确称取连苯三酚标准品10mg.用水溶解并定容到50mL,得0.2mg/mL的对照品标准溶液。
4 连苯三酚标准曲线的绘制APyrogallol Concentration mg/mLA = 32.16733*C + 0.06012, R=0.998线性范围:连苯三酚0.00-0.06mg/mL ,A 值在0.039-1.928之间。
5 样品溶液的配制 样品母液(1mg/mL ):精确称取样品2mg ,用95乙醇溶解并定容到2mL ,得1mg/mL 样品母液。
试剂+即可,注意观察A 值大小。
6 多酚含量的计算依上述公式A = 32.16733*C + 0.06012, 由A值即可求得浓度C值。
7 说明7.1 不同的分光光度计所测得的A值可能不一样,所以,同一次实验要用同一台分光光度计;7.2 Folin-Ciocalteu试剂:可向试剂公司购买,一般其浓度为2 M,使用前最好稀释。
也可以自配方法如下:将100g钨酸钠(Na2WO4·2H2O), 25g钼酸钠( Na2MoO4·2H2O) ,700 mL蒸馏水,50 mL 85%磷酸及100 mL浓盐酸装入带回流装置的2000mL圆底烧瓶中,充分混合,文火缓慢回流10h,在加入150g硫酸锂(Li2SO4),50 mL蒸馏水及数滴液溴,然后将烧瓶内溶液开口煮15min,以驱除过量的溴,冷至室温后用容量瓶定容至1000mL,过滤。
王华. 葡萄与葡萄酒实验技术操作规范.陕西:西安地图出版社,1999
单宁的测定也是参考王华,1999
以没食子酸为对照品(FC酚法)总酚的含量测定方法
Folin-Ciocalteu 比色法( FC酚法)
一、仪器
UV- 2401 PC 型紫外分光光度计;
超声波清洗仪(昆山市超声仪器有限公司KQ- 2508型)
恒温水浴锅
二、试剂
没食子酸标准品; 钨酸钠,磷钼酸, 85%磷酸, Na2 CO3, 以上试剂均为分析纯; 水为蒸馏水。
1.3 福林试剂的配制
在250mL的圆底烧瓶内加入20g 钨酸钠、5g 钼酸钠、140mL 蒸馏水,85%的浓磷酸10mL 及浓盐酸20mL,充分混匀,以小火回流10h,再加入3g 硫酸锂及15mL 双氧水,开口继续煮沸15min,待双氧水完全挥发,呈亮黄色。
冷却后移入250mL 容量瓶中,定容置于棕色试剂瓶中,放入冰箱中备用。
1.4 Na2CO3溶液的配制
称取40g Na2CO3,溶于200mL 蒸馏水中, 即为20%(g/L)的Na2CO3溶液。
二、方法与结果
1.对照品溶液的制备并绘标准曲线
精密称取没食子酸标准品0.0110g,用蒸馏水溶解并定容至100mL,得浓度为0.11mg /mL 的标准液。
准确吸取0、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6mL 置于25mL 的棕色容量瓶中,加蒸馏水至6.0mL,然后分别加入FC 试剂0.5mL,混匀,在0.5~8min内加入1.5mL 20% 的Na2CO3溶液,充分混合后定容,30℃避光放置0.5h,以不加标准液的6.0mL 蒸馏水为空白对照,760nm 下测定吸光值,每个样品平行测定三次。
2、供试品溶液的制备
样品溶液总酚含量的测定: 准确量取制备好的乙醇粗提液0.5mL 于50mL 容量瓶中,加入9.5mL 蒸馏水,摇匀,再加入0.5mL 福林试剂,混匀,在0.5 ~8min 内加入1.5mL 20%的Na2CO3溶液,充分混合后定容,30℃避光放置0.5h,以没食子酸标准液为空白对照,760nm 下测定吸光值,每个样品平行测定6 次(A为6次平行测得的吸光度)。
3以没食子酸为标准品的总酚的标准曲线:Co=0.0110mg/ml。