洁净区环境监测操作规程
1 目的
用于规范洁净区温湿度、压差、噪音、照度、沉降菌、浮游菌监测的操作。
2 适用范围
适用于洁净区温湿度、压差、噪音、照度、沉降菌、浮游菌观察的测定。
3 职责
3.1 质量保证部QA负责噪音、照度的检测。
3.2 生产车间人员负责温湿度、压差的观察。
3.3 生产部空调操作人员负责温湿度、压差的调控，并及时反馈信息。
3.4 设备工程部计量人员负责监控仪器、仪表的定期校验。
3.5 质量控制部人员负责洁净区的沉降菌的配制、计数、报告的完成。
3.6 质量保证部现场监控QA负责洁净区的沉降菌的监测。
3.7 生产车间配合洁净区沉降菌监测的完成。
3.8 QC人员负责浮游菌的监测。
4 内容
4.1 洁净区洁净等级划分
4.1.1 A级：指高风险操作区，如：灌装、放置胶塞桶、敞口安瓿瓶、敞口西林瓶的区域及无菌装配或连接操作的区域。通常用层流操作台（罩）来维持该区的环境状态。
4.1.2 B级：指无菌配制和灌装等高风险操作A级区所处的背景区域。
4.1.3 C级和D级：指生产无菌药品过程中重要程度较次的洁净操作区。
4.2 温湿度
4.2.1标准规定：洁净区的温度和相对湿度应与药品生产工艺要求相适应。无特殊要求时，洁净区温度为18℃～26℃，相对湿度控制在45%～65%。有特殊要求车间根据工艺控制。
4.2.2 温度观察：检查温湿度计是否完整，视线正对温湿度计水平读取显示的数据，需要记录的应立即填入表格中。
4.2.3 湿度观察：视线正对湿度表，准确读数。需记录的应立即填入表格中。
4.2.4 需要加水的湿度计，在观察前应检查在蓄水腔内是否有水，无水则需加入适量水，再观察湿度。
4.2.5 洁净区的温湿度每天至少记录两次，上午一次，下午一次。
4.2.6 设备计量人员每年至少组织校验一次监控系统的仪器设备。
4.3 静压差
4.3.1 湿度观察：标准规定：洁净区与非洁净区之间、不同等级洁净区之间的压差应不低于10帕斯卡，相同洁净度等级不同功能的操作间之间应保持2-3帕的压差梯度，以防止污染和交叉污染。
4.3.2 产尘房间与相邻房间呈相对负压。
4.3.3 洁净区的静压差以微压差计显示，每日至少记录两次，上午一次，下午一次。（包括洁净区与室外，不同洁净级别间及所有有压差指示的房间）。
4.3.4 测试时所有的空调系统和层流系统应处于连续的正常运行状态。
4.3.5 洁净室所有的门应关闭，测试时不允许有人穿越房间。
4.3.6 当发现监测结果超出标准规定的范围时，应立即检查原因，必要时对空调系统进行调整。
4.4 噪音
4.4.1 标准规定：洁净区噪音不得高于70分贝。
4.4.2 洁净区的噪音检查每年不得少于一次，在经过设备大修、厂房改造、工艺布局调整等变更的时候应在变更结束后重新检测噪音。
4.4.3 检测方法
检测点布置，当面积≤50m2时，仅测房间中心一个点；当房间面积较大时，每增加50m2增加一个点，测点距在1.2m。
4.5 照度
4.5.1 标准规定：洁净区主要操作间照度不得少于300勒克斯，一般照明的照度均匀度不应小于0.7。
4.5.2 洁净区的照度检查每年不得少于一次，在经过设备大修、厂房改造、工艺布局调整等变更的时候应在变更结束后重新检测照度。
4.5.3 检测要求：室内照度测度必须在室温已趋稳定，光源光输出趋于稳定后进行（对荧光灯必须有100h）。
4.5.4 检测方法
测点平面离地面0.85m，按间距1-2m布点，测点距墙面1m。其要求基本与洁净度的测定位置要求相同。记录实测照度值并计算总的平均照度。
照度测量一般仅测定除局部照明之外的一般照明。
4.6 沉降菌
4.6.1 方法概述：本测试方法利用沉降法，即通过自然沉降原理收集在空气中的生物粒子于培养基平皿，经若干时间，在适宜的条件下让其繁殖到可见的菌落数，以平板培养皿中的菌落数来评定洁净环境内的活微生物数，并以此来评定洁净区的洁净度。
4.6.2使用的仪器和设备
4.6.2.1 高压消毒锅：使用时应严格按照操作规程进行。
4.6.2.2 恒温培养箱：必须定期对培养箱的温度计进行检定。
4.6.2.3 培养皿
一般采用φ90mm×15mm硼硅酸玻璃培养皿。
使用前将培养皿置于121℃湿热灭菌20min。
4.6.2.4培养基：普通营养琼脂培养基。
将培养基加热熔化，冷却至约45℃在无菌操作条件下将培养基注入培养皿，每皿约
15ml。待琼脂培养基凝固后，将培养基平皿放入30～35℃恒温培养箱中培养48小时，若培养基平皿上确无菌落生长，即可供采样用，制备好的培养基平皿应在2～8℃的环境中存放。
4.6.3 测试步骤
4.6.3.1采样方法：将已制备好的培养皿放置在预先确定取样点，打开培养皿盖，使培养基表面暴露0.5h，再将培养皿盖上盖后倒置。
4.6.3.2 培养
在30～35℃培养，时间为5天。每批培养基应有对照试验，检查培养基本身是否污染，可每批选定3只培养皿作对照培养。
4.6.3.3 菌落计数：
用肉眼直接计数，然后用5～10倍放大镜检查，是否有遗漏。若培养皿上有2个或2个以上菌落重叠，可分辨时仍以2个或2个以上的菌落计数。
4.6.4 注意事项
4.6.4.1 测试用具要做灭菌处理，以确保测试的可靠性、正确性。
4.6.4.2 采取一切措施防止人为对样本的污染。
4.6.4.3 对培养基、培养条件及其他参数作详细的记录。
4.6.4.4 由于细菌种类繁多，差别甚大，计数时一般用透射光于培养皿背面或正面仔细观察，不要漏计培养皿边缘生长的菌落，必要时用显微镜鉴别。
4.6.4.5 采样前应仔细检查每个培养皿的质量，如发现变质、破损或污染的应剔除。
4.6.5 测试规则
4.6.
5.1 测试状态
➢沉降菌测试前，被测试洁净区的温湿度须达到规定的要求，静压差必须控制在规定值内。➢沉降菌测试前，被测试洁净区已经过消毒。
➢测试状态有静态和动态两种，测试状态的选择必须符合生产的要求，并在报告中注明测试状态。
4.6.
5.2 测试人员
➢测试人员必须穿戴符合环境级别的工作服。
➢静态测试时，室内测试人员不得多于2个人。
4.6.
5.3 测试时间
➢对单向流，如A级净化房间内及层流工作台，测试应在净化空调系统正常运行不少于10分钟后开始。
➢对非单向流，如B级、C级、D级以上的净化房间，测试应在净化空调系统正常运行不少于30分钟开始。
4.6.
5.4 沉降菌采样点
➢采样点数目及其布置：
最少采样点数目：沉降菌的最少采样点数可按表1确定。在满足最少测点数的同时，不宜满足最少培养皿数，见表2。
➢采样点的布置：
工作区测试点位置离地0.8～1.5m左右（略高于工作面）。可在关键设备或关键工作活动范围处增加测点，采样点的布置应力求均匀，避免采样点在某局部区域过于集中，某局部区域过于稀疏。
4.6.
5.5 记录：测试报告中应记录房间温度、相对湿度、压差、测试状态及测试数据。
