奶牛冻精的制作与利用

精液冷冻保存是将精液进行特殊处理，保存在超低温下，以达到长期保存的目的。

通常采用液氮（—１９６℃）和干冰（—７９℃）保存。

其最大优点是可长期保存，使用不受时间、地域以及种用雄性动物寿命的限制。

可充分提高公牛的利用率。

现将冷冻精液保存起来和怎样进行解冻及给母牛输精的有关技术操作介绍如下，供参考。

一、稀释液的配方：１２％的蔗糖液７５毫升、甘油５毫升、卵黄液２０毫升。

二、稀释方法：将经过检查合格的精液（活力０•６以上、精子密度中等）按１：２—５倍稀释液进行稀释，其稀释原则应保证每个颗粒精液中所含精子数不少于３０００—４０００万个，解冻后呈直线前进运行的精子不少于１５００万个。

三、冷冻：在装有液氮的容器上置一铜纱网，距液氮面２厘米左右，使温度维持在—８０℃至—１００℃。

将平衡后的精液用滴管按一定量（０•１毫升）滴于铜纱网、滴完最后一滴停３—５分钟后，当精液颗粒颜色变白时，立即浸入液氮，并将全部颗粒取下，收集于贮精瓶或纱网布袋内，并做好标记，然后立即移入液氮罐中贮存。

四、解冻：将预先配制好的２•９％柠檬酸的溶液１毫升，放入干净的小试管中，再置于４０℃左右的温水杯中，迅速取颗粒冷冻精液１粒放入试管。

轻轻摇动至化冻时，从水杯中取出试管，接着检查精液活力，不低于０•３即为合格品。

五、重视保精、快速解冻与镜检１、根据液氮罐的性能要求，定期添加液氮罐内盛装冻精的提筒不能露在液氮面外。

２、取精时，尽可能用长镊子，切勿将提筒或纱布袋提到临界线以上处（罐顶１０厘米左右）。

３、从液氮中取出细管冻精时，要轻轻甩１—２下，将塑料细管的棉塞端放入３５—４０℃的温水中，把封口端留在水外１—１•３厘米外，待管内精液融化一半时，立即取出备用。

４、解冻后的精液镜检时，精子的活力不低于０•３方可用于输精，才能确保正常受精。

简述冻精制作的工艺流程摘要：一、冻精制作的基本概念二、冻精制作的工艺流程1.采集精液2.精液处理与筛选3.冻精剂的制备4.精液冷冻5.冻精储存与运输6.冻精解冻与复苏三、冻精技术的应用与展望正文：冻精制作是现代畜牧业中的一项重要技术，它为种畜的遗传改良、品种繁育提供了有力保障。

冻精制作工艺流程复杂，要求严格，下面详细介绍冻精制作的步骤。

一、冻精制作的基本概念冻精制作是指将新鲜精液在特定条件下进行冷冻处理，使其在低温环境下保存的一种生物技术。

冻精技术的出现，为畜牧业发展带来了革命性的变革，使得种畜的遗传改良和品种繁育变得更加便捷。

二、冻精制作的工艺流程1.采集精液：首先从种畜体内采集新鲜的精液。

采集过程中要确保精液的质量和数量，以便提高冻精的成功率。

2.精液处理与筛选：对采集到的精液进行处理，去除杂质和死精子，筛选出优质精子。

这一步骤对冻精的质量至关重要。

3.冻精剂的制备：选用适合的冻精剂，按照一定比例与精液混合，形成冻精剂与精液的混合物。

冻精剂的选用和配比要根据精子特性、冷冻设备等因素综合考虑。

4.精液冷冻：将冻精剂与精液的混合物放入冷冻设备中，按照预定的程序进行降温。

冷冻过程中，要注意控制降温速度和最终温度，以保证精子质量。

5.冻精储存与运输：将冷冻后的冻精存放在适宜的低温环境中，确保其质量和活力。

在运输过程中，要保证冻精容器不受损坏，温度稳定。

6.冻精解冻与复苏：在需要使用冻精时，将其从低温环境中取出，按照规定的程序进行解冻。

解冻后的冻精要尽快进行复苏，恢复其活力。

三、冻精技术的应用与展望冻精技术在我国畜牧业中得到了广泛应用，为品种改良、遗传资源保护和养殖业发展做出了巨大贡献。

未来，随着科学技术的进步，冻精制作工艺将不断完善，为畜牧业提供更加优质、高效的冻精产品。

同时，冻精技术在人类辅助生殖领域也具有广泛应用前景。

种公牛冷冻精液的生产技术要点一、采集和保存精液：选择健康、繁殖性能好的公牛进行采精，采精前进行适当的饲养管理以提高精液的质量。

采集精液的方法主要有人工采精和电刺激采精。

采集后的精液要先进行初步的质量检测，包括测定精液的外观、颜色和排量等。

然后将精液放入离心管中，使用低温保存方法，比如3-5℃的冷藏保存。

二、精液的净化和稀释：将冷藏的精液进行净化处理，去除不良精子、污染物和其他杂质。

常用的净化方法有磷酸盐缓冲液和优质凝胶管等。

净化后的精液需要进行适当的稀释，以增加其使用寿命和受孕能力。

一般使用生理盐水、乳酸盐缓冲液或高浓度的葡萄糖溶液稀释精液。

三、冷冻过程控制：冷冻是公牛冷冻精液生产中重要的一个环节。

在冷冻过程中，应该控制好冷冻速率和温度，以确保精液的质量。

一般采用半自动或全自动的冷冻设备，设定合适的冷冻速率和温度曲线。

常见的冷冻方法有单层管冷冻法、玻璃精液器冷冻法和薄膜袋冷冻法等。

四、冷冻精液的质量检测和评估：冷冻精液的质量检测和评估是公牛冷冻精液生产中必不可少的一步。

主要包括检验精液的精活率、活动度、存活时间和留液率等指标。

检测方法一般有显微镜检测法、显微镜活力评价法和睾丸分类法等。

五、冷冻精液的保存和配送：冷冻精液的保存和配送是确保公牛冷冻精液质量的重要环节。

保存时，将冷冻精液放置在液氮罐中，保持温度在-196℃以下。

配送时，使用专用的冷冻精液运输容器，保持温度稳定，避免温度震荡和冷冻精液的泛化和过冷现象。

六、冻精的使用：冷冻精液在使用前需要经过解冻处理，一般采用暖水解冻法或暖空气解冻法。

解冻后的精液要经过活力恢复处理，使用添加剂和改良剂等，以提高受孕能力和存活时间。

然后将精液精确地注入母牛或其他接受者的生殖道中，进行人工授精或人工受孕。

七、监测和追踪：公牛冷冻精液的生产过程中需要进行监测和追踪，以确保产品质量和追溯精液来源。

监测包括食品安全监测和药物残留监测等。

追踪包括生产者的信息、精液的来源、采集时间和精液的配方等。

种公牛冷冻精液的生产技术要点随着现代农牧业的发展，种公牛冷冻精液的应用越来越广泛，以保证畜禽资源的优良性状得以保存，提高生产力和品质。

种公牛冷冻精液的生产需要经过多道精细的工艺过程，这些工艺过程是必须严格控制的，从而保证精液的质量。

本文将从种公牛冷冻精液的制备、冷冻过程、保护过程、储藏过程等方面阐述种公牛冷冻精液生产技术要点。

1.1 牛的选择牛的选择是种公牛冷冻精液制备工作的第一关键。

应选择优良品种和良好的品系，确保在行业内拥有良好的声誉和口碑。

同时，要注重牛的品种、毛色、体形、性格、生殖能力等指标，选择优质优良的种牛。

1.2 精液采集精液采集应在整个生产过程中进行，以确保精液的新鲜度和质量。

在每次采集前，应该先进行清洁消毒，以避免繁殖感染性疾病。

然后将优质种牛放入采精桶中，采集精液。

采集时间一般约为15分钟，采集量应保持在2-3毫升。

1.3 精液质量检测当采集好的精液被放到培养的容器中时，需要对精液进行各项质量检测，以确保其质量标准。

主要包括酸碱度、活跃精子数目、精子形态、精子活力等指标。

检测符合质量标准后，将精液分装成若干份，储存在液氮罐中以备后用。

二、种公牛冷冻精液的冷冻过程2.1 冷却在填充容器之前，精液需要先经过冷却过程，将温度降低至6-8℃左右以适合于储存。

冷却的方式主要有：放入冰箱或暴露在室外的地方对流通风。

2.2 稀释液的添加一般情况下，用户使用时，精液还需要稀释，以便于使用和储存。

在加入稀释液之前，应先将精液瓶摆放于冰箱中，30℃水中预温30min。

使用全部量时，搅拌均匀，以碗形液体手法加入稀释液，使用时要清洗容器。

在加入稀释液后，将精液倒入液氮罐中，进行快速冷冻。

快速冷冻的原因是，当精液温度突然下降时，水分就不会结晶，避免温度梯度产生，对精液质量造成伤害。

此外，快速冷冻还可以保证精液的新鲜度和质量，避免过多时间的损失。

3.1 保护剂当精液在液氮罐中储存时，需要添加保护剂。

保护剂可以维持液氮罐的温度和湿度，蒸发水分，防止冰晶的形成，避免对精液的伤害。

牛冷冻精液的制作牛冷冻精液的制作种公牛站作为畜牧业良种繁育体系的重要组成部分，是我国法定的冻精生产和经营单位。

某奶牛育种中心，现有来自美国、加拿大、澳大利亚等国家的优秀荷斯坦公牛188头，每年可生产冻精200多万剂，销售遍布全国28个省、市、自治区。

冷冻精液的生产流程？牛冷冻精液国家标准（GB/T4143-2008）产品技术要求GB T4143-2008欧盟国标牛冷冻精液有效精子数（万个）≥800（水牛≥1000）≥600活率≥0.35（水牛≥0.3）≥0.4畸形率（%）≤18（水牛≤20）≤20顶体完整率（%）≥40—细菌菌落数（个）≤800≤500病原微生物无无情期受胎率（%）—>50一、采精及品质检查◆按国家标准选择种公牛，经农业部鉴定并列入国家正式名录的公牛；◆采精操作要规范，采精频率要合理；◆精液品质要优良精子活率≥0.7精子密度≥8亿／mL精子畸形率≤15％。

某公牛站，2013168号公牛于5月12日采集精液10 mL ，经检查活率为0.7，密度为13.8 亿／mL 。

按国标要求制作细管冻精，试确定稀释倍数。

稀释前精子密度：13.8亿／mL细管冻精每毫升含有的有效精子数：0.08亿÷0.25mL=0.32亿／mL 细管冻精精子密度：0.32亿／mL ÷0.35=0.914亿／mL 稀释倍数：13.8亿／mL ÷0.914亿／mL ≈15（倍）GB T4143-2008规定◆细管冻精剂量0.25mL◆有效精子数≥800万◆精子活率≥0.35。

◆如何确定稀释倍数？配方：100mL12%的蔗糖75 mL卵黄20 mL 甘油 5 mL 青霉素10万IU链霉素10万IU◆冷冻精液的稀释液配方需加入哪些成分？◆如何配制稀释液？配制：12%蔗糖溶液：12 g 蔗糖溶于50 mL 蒸馏水，再加水至100 mL ，过滤、消毒； 取75mL 冷却蔗糖溶液，分别加入20 mL 卵黄、5mL 甘油、10万IU 青霉素、10万IU 链霉素，混合均匀，置于冰箱备用。

养殖技术-性控冻精的使用技术X/Y精子分离技术是通过流式细胞分离仪将公牛精液中的X、Y精子进行分离，从基因和性染色体的角度来实现性别控制，是目前最先进、最经济和生产中应用最为广泛的性别控制手段，是继冻精授配和胚胎移植之后，家畜繁殖技术的第三次革命。

美国于2000年将此项技术成功从实验室引入商业化生产，奶牛情期受胎率平均为53%，青年母牛达60%以上，母犊率高达93％；阿根廷、日本、巴西、墨西哥、英国等国家也已将此项技术应用于奶牛生产；我国主要有中国种畜进出口（天津）有限公司、新疆金牛生物股份有限公司及内蒙、河北等省从事奶牛X精液的生产销售，奶牛授配试验情期受胎率为58％—72％，平均约为65％。

该技术在现代奶牛生产中广泛应用，可实现奶牛连续产母犊的愿望，不仅能显著提高奶牛的产母率，加快奶牛群的扩繁速度，而且可有效提高奶牛的种群质量及其繁殖效益，但与常规冻精相比，其存活时间、受精能力存在差异，主要表现在保持受精能力的时间稍短（8—10小时）和情期受胎率降低（约5—10个百分点）。

因此，为了更好地使用性控冻精，收到理想效果，在奶牛生产实践中应特别注意如下操作要点。

1、选择合适的受体。

应选择营养均衡、体质健康、发情正常且无生殖疾病的育成牛和低胎次青年母牛参加配种，高胎次奶牛由于卵巢囊肿、卵巢静止、持久黄体及慢性子宫炎等生殖系统疾病相对较多，且其机体新陈代谢机能下降，激素分泌能力减弱，都会导致母牛长期不发情、卵泡发育迟缓、不排卵，最终导致母牛受胎率下降。

因此，要尽量避免有生殖道疾病和高胎次母牛使用性控冻精。

2、科学配比日粮，规范饲养。

要强化奶牛场的规范化管理，提高动物福利，做好高胎次牛、屡配不孕牛、低产牛的淘汰和疾病治疗工作，保证奶牛充足的光照和适当运动。

日粮要依据不同产奶阶段做到精、粗料合理搭配，科学配比，对缺乏的矿物质、维生素及微量元素等要适当添加，确保日粮营养全面均衡，促进奶牛正常发情和排卵。

3、准确掌握输精时机。

doi：10.19369/ki.2095-9737.2021.06.033牛冷冻精液的制作、保存和解冻方法赵力勇(黑龙江省绥棱县动物疫病预防与控制中心，黑龙江绥化152200)摘要：人工授精技术在肉牛养殖业中的应用对于提高肉牛养殖经济效益、促进肉牛养殖业的发展都有着重要的意义。

近年来，牛人工授精技术采用的精液多为冷冻精液，冷冻精液不但可以长期保存，并且可以保持较好的活性，对于实现异地配种、品种改良等都非常重要。

牛冷冻精液的制作、保存和解冻过程对于种公牛精液品质的影响很大，应注意一些事项，确保精液的話质。

关键词：肉牛；人工授精；冷冻精液；种公牛；采精;保存；解冻中图分类号：S823.3文献标识码：B近年来，牛人工授精技术在肉牛养殖中的应用广泛，是目前肉牛繁育采用的一项重要的繁殖技术。

该项技术主要是依托牛冷冻精液的保存和使用，可以显著的提高母牛的配种受胎率,还可以减少种公牛的饲养数量，有的养殖场甚至可以不饲养种公牛，通过从外场购买冻精的方式来实施人工授精，很大程度上节省了饲养成本。

牛人工授精技术对于促进肉牛养殖业的发展以及提高肉牛养殖经济效益都具有重要的意义。

其中冷冻精液的制作、保存与解冻都对精液的品质有重要的影响作用。

1种公牛的饲养要点要想获得优质的精液，需要做好种公牛的饲养管理工作，以生产量多且优质的精液。

要保持种公牛健壮的体质，保持旺盛的性欲，使生殖机能能够正常的发挥。

在饲养方式方面，要给种公年提供适宜的营养物质，保持适宜的体况，避免过肥或者过瘦，否则都会导致性欲下降，精液品质降低。

要注意日粮中各营养物质要充足，且配比均衡，尤其是要注意与性欲和精液品质相关的蛋白质、维生素和矿物质等营养元素的供应，要保证种公牛的饲料种类多样，粗饲料的品质要好，控制青贮料的供应，如果饲喂过量会使种公牛形成草腹，对配种不利。

加强种公牛的管理工作，给其提供一个清洁、安静、适宜的养殖环境。

要定期对种公牛称重，以便及时的调整饲养管理方案，保持适宜的体况。

奶牛性控冻精使用技术操作要点及注意事项性别控制是指雌性动物通过人为地干预而繁殖出人们所期望性别后代的一种繁殖新技术。

奶牛XY精子分离性别控制技术是指将牛的精液根据含X染色体和Y 染色体精子的DNA含量不同而把这两种类型的精子有效的进行分离后，将含X染色体的精子分装冷冻后，用于牛的人工授精，而使母牛怀孕产母牛犊的技术；这种根据精子X、Y染色体的不同而分装冷冻的冻精就叫性控冻精；使用我公司的牛性控冻精产品对发情母牛进行配种可以使90%以上的受配怀孕母牛产母牛犊。

一、奶牛性控冻精在生产中使用的重要意义（一）奶牛公、母犊牛的价格差一般在1000元以上，母牛同样的饲养管理成本和怀孕时间，用性控冻精冷配，可以使怀孕母牛的产犊效益显著提高。

（二）使用性控冻精可以显著的提高母牛数和群体产奶量，这是因为与常规冷冻精液配种相比，使用性控冻精，可以大量的繁殖出母牛后代，最终使母牛数和产奶量都得到提高，从而提高生产效益。

（三）使用性控冻精可繁殖出大量的优质高产的母牛后代，可以加快牛群的淘汰速度，提高生产效率。

以上三点都说明在使用性控冻精后可以显著的提高奶牛产业的生产效益，同时与胚胎工程技术的结合可以使牛的品种改良一步到位。

二、性控冻精的特点（一）解冻后精子活力要比常规冷冻精液高，其原因是死精子和部分畸形精子在分选时被筛除；（二）性控冻精细管分装精子的密度显著地低于非性控冻精（性控：230万个/0.25ml，非性控：2500万个/0.25ml）；（三）奶牛含X染色体性控冷冻精液的存活时间相对于常规冷冻精液要短。

三、使用性控冻精进行人工授精的母牛的选择按下列步骤和标准执行。

首先是品种的选择，选择中、高产奶牛及其后代做为使用对象；其次是年龄和胎次，首选初配母牛和生产三胎内母牛；最后是营养和健康，膘情适中健康无疾病和繁殖疾病史。

四、性控冻精输精技术的操作要点和注意事项（一）准确的发情观察（步骤）1、每天早晚对放牧或在运动场运动牛群进行至少半小时的观察，记录接受爬跨的牛号；2、不能放牧或不能在运动场运动的牛，等到牛吃草挤奶后静卧休息时，观察其尾部分泌物的粘性和颜色，记录牛号；3、对外阴红肿爬跨其它牛只骚动不安的牛只记录牛号；4、对上述三种情况记录的牛只在观察完成后立即查阅繁殖记录，剔除产后时间不合适、正在进行繁殖疾病治疗和其它不适合进行配种的牛只；5、对观察到上述症状的适合冷配的空怀牛只，在10-12小时后进行直肠检查，首先判断子宫的大小和质地，然后检查两侧卵巢是否正常，是否有排卵卵泡，如果有排卵卵泡，根据卵泡的大小和质地推测排卵时间，判断在8小时之内排卵并适合进行冷配的牛只立即进行配种，对适合使用性控冻精的牛只（本手册第三条）用性控冻精配种，不适合的用常规冻精配；并做好包括子宫、卵巢情况和发情时间及输精时间和部位等内容的详细记录；（二）输精操作要点1、使用性控冻精配种时，配种时间尽量控制在排卵前6小时之内或排卵后4小时之内；使用性控冻精时，尽量缩短解冻与输精之间的时间，最好是解冻一支输一支；2、解冻方法：从液氮罐中取冻精时，提漏中的冻精不可超过液氮罐口，如果10秒钟内还没有将冻精取出，应将冻精立刻沉入液氮中然后再提到罐口重复操作；单支冻精取出后在空气中先停留5秒左右，然后放入38-40摄氏度清水中10秒中后取出用干脱脂棉擦干后剪断封口，装入输精器准备输精；3、输精器最好是使用一次性外套的，输精时要保证输精器的无菌和与输精器接触的部位及器具的干净卫生；输精部位一般在排卵侧子宫角或者是采用子宫体后拉法，也就是说，如果能够准确判断出排卵侧并能使输精器顺利的放到排卵侧子宫角就采用子宫角输精，否则，采用子宫体输精器后拉发法输精，保证两侧子宫角都能有精子进入和受精。

种公牛冷冻精液的生产技术要点种公牛冷冻精液是现代畜牧业中重要的一环，它可以帮助农民提高牛群的质量，提高产量。

冷冻精液的生产技术对于保障其质量和保存效果至关重要。

下面我们来详细了解种公牛冷冻精液的生产技术要点。

一、选材1. 选择优质公牛生产种公牛冷冻精液的第一步就是要选择优质公牛。

这些公牛的基因应该是优质的，要有较高的产奶量、肉质量和疾病抵抗力等特点。

只有选择优质的公牛作为种公牛，才能保证冷冻精液的质量。

2. 严格的饲养管理种公牛的饲养管理非常重要。

要保证公牛的饲料营养均衡，定期进行体检，防止公牛受到疾病的侵害。

只有在健康的状态下，公牛的精液质量才能得到保障。

二、采集精液1. 采用人工授精为了提高种公牛的繁殖效率，通常使用人工授精的方式采集精液。

人工授精可以将优质公牛的精液与优质母牛进行结合，从而提高后代的品质。

在进行人工授精的过程中，要注意保障精液的干净和纯洁，避免受到细菌污染。

2. 采集时间精液的采集时间也非常重要。

一般来说，最佳的采集时间是在公牛处于性兴奋期的时候。

在这个时期，公牛的精液质量最好，采集的精液也更容易保存。

三、冷冻技术1. 精液稀释采集到的精液需要经过稀释处理，以便于后续的保存和使用。

在这个过程中，要严格控制精液的稀释比例和添加稀释液的质量，保证稀释后的精液质量稳定。

2. 防止冷冻损伤在冷冻的过程中，要防止精子受到冷冻损伤。

一般来说，采用逐渐降温的方法，将精液在一定时间内冷冻至所需温度。

在这个过程中，要精确控制冷冻的速度和温度，防止精子受到冷冻损伤。

3. 保存技术冷冻精液的保存技术也非常重要。

精液保存的温度和环境都会对精液的质量产生影响。

在保存精液的过程中，要选择适宜的保存容器和保存环境，保证精液的质量和保存效果。

四、质量控制1. 检测方法对于种公牛冷冻精液的质量，可以通过一些检测方法来进行检验。

比如精液的密度、粘稠度、活力和存活率等指标都可以通过专业的检测方法来进行评估，从而保证冷冻精液的质量。