显微镜的分类和用途
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显微镜物镜的分类与用途
显微镜是生物研究、医学、材料科学等领域中必不可少的仪器。
而显微镜中的物镜是显微镜的主要组成部分。
根据不同的功能和特点,物镜可以分为以下几类:
1. 平面物镜
平面物镜是一种透镜,其内部的光路是平行的。
这种物镜的主要用途是在显微镜中的照明系统中使用。
平面物镜可以使显微镜的照明系统中的光线更加均匀地分布,并消除一些光线污染。
2. 定倍物镜
定倍物镜是一种物镜,其放大倍数是固定的。
这种物镜的主要用途是在显微镜的实验中使用。
定倍物镜可以帮助实验者观察到更小的细胞和组织结构。
3. 变倍物镜
变倍物镜是一种物镜,其放大倍数可以根据需要进行调整。
这种物镜的主要用途是在显微镜的实验中使用。
变倍物镜可以帮助实验者观察到更小的细胞和组织结构,并根据需要进行放大或缩小。
4. 特殊物镜
特殊物镜是一类用于特定用途的物镜,如相差干涉显微镜、荧光显微镜等。
这种物镜的主要用途是在特殊领域的研究中使用。
特殊物镜可以帮助实验者观察到更小的细胞和组织结构,并根据需要进行调整。
显微镜物镜的分类和用途是非常广泛的,适用于不同领域的研究。
因此,在选择显微镜物镜时,应根据研究领域的不同需求,选择合适的物镜,从而更好地实现研究的目的。
光学显微镜的原理发布时间:10-05-15 来源:仪表展览网点击量:2284 字段选择:大中小将微小物体或物体的微细部分高倍放大,以便观察的仪器或设备。
它广泛应用于工农业生产及科学研究。
生物学和医学工作者在业务中也经常使用显微镜。
大致分为光学显微镜和电子显微镜。
光学显微镜即以可见光为光源的显微镜。
普通的光学显微镜在结构上可分为光学系统和机械装置两个部分。
光学系统主要包括目镜、物镜、聚光器、光阑及光源等部分。
机械装置主要包括镜筒、镜柱、载物台、镜座、粗细调节螺旋等部分(图1)。
其基本光学原理如图2,图中左边小的凸透镜代表短焦距的一组透镜,称物镜。
右边大的凸透镜代表长焦距的一组透镜,称目镜。
被观察的物体(AB)放在物镜焦点(f1)稍外的地方。
物体的光线通过物镜后在目镜焦点(f2)稍内方形成一个倒立的放大实像(B'A')。
观察者的眼睛通过目镜将该实像(B'A')进一步放大为一个倒立的虚像(B″A″)。
目镜位于显微镜筒的上方,一般由两个凸透镜构成。
它除了进一步扩大物镜所形成的实像之外,也限制了眼睛所观察的视野。
按放大率分,常用目镜有5倍、10倍和15倍三种。
物镜一般位于显微镜筒的下方,接近所观察的物体。
由8~10片透镜组成。
其作用一是放大(给物体造成一个放大的实像),二是保证像的质量,三是提高分辨率。
常用物镜可按放大率分为低倍 (4×)、中倍(10×或20×)、高倍(40×)和油浸物镜(100×)。
多个物镜共同镶在换镜转盘上,可以按需要转动转盘选择不同倍数的物镜。
显微镜的放大倍数为目镜倍数乘物镜倍数,如目镜为10倍,物镜为40倍,则放大倍数为40×10倍(放大400倍)。
优良的显微镜可放大2000倍,可分辨相距1×10-5cm的两点。
当白光通过凸透镜时,波长较短的光(蓝紫色),其折射度大于长波长的光(红橙色),因此,成像时在像周出现各色光谱围绕,并且有一圈蓝色或红色的辉光,这种颜色上的缺陷称为色差。
显微镜的主要分类、功能及应用领域一、显微镜的分类(一)、按使用目镜的数目可分为单目、双目和三目显微镜。
单目价格比较便宜,可以作为初学爱好者的选择,双目稍贵点,观察的时候两眼可以同时观察,观察得舒适些,三目又多了一目,它的作用主要是连接数码相机或电脑用,比较适合长时间工作的人员选用。
(二)、根据其用途以及应用范围分为生物显微镜、金相显微镜、体视显微镜等。
1、生物显微镜是最常见的一种显微镜,在很多实验室中都可以见到,主要是用来观察生物切片、生物细胞、细菌以及活体组织培养、流质沉淀等的观察和研究,同时可以观察其他透明或者半透明物体以及粉末、细小颗粒等物体。
生物显微镜供医疗卫生单位、高等院校、研究所用于微生物、细胞、细菌、组织培养、悬浮体、沉淀物等的观察,可连续观察细胞、细菌等在培养液中繁殖分裂的过程等。
在细胞学、寄生虫学、肿瘤学、免疫学、遗传工程学、工业微生物学、植物学等领域中应用广泛。
2、体视显微镜又称为实体显微镜、立体显微镜,是一种具有正像立体感的目视仪器,广泛的应用于生物学、医学、农林等。
它具有两个完整的光路,所以观察时物体呈现立体感。
主要用途有:①作为动物学、植物学、昆虫学、组织学、考古学等的研究和解剖工具。
②做纺织工业中原料及棉毛织物的检验。
③在电子工业,做晶体等装配工具。
④对各种材料气孔形状腐蚀情况等表面现象的检查。
⑤对文书纸币的真假判断。
⑥透镜、棱镜或其它透明物质的表面质量,以及精密刻度的质量检查等。
3、金相显微镜主要是用来鉴定和分析金属内部结构组织,是金属学研究金相的重要仪器,是工业部门鉴定产品质量的关键设备,专门用于观察金属和矿物等不透明物体金相组织的显微镜。
这些不透明物体无法在普通的透射光显微镜中观察,故金相和普通显微镜的主要差别在于前者以反射光,而后者以透射光照明。
不仅可以鉴别和分析各种金属、合金材料、非金属物质的组织结构及集成电路、微颗粒、线材、纤维、表面喷涂等的一些表面状况,金相显微镜还可以广泛地应用于电子、化工和仪器仪表行业观察不透明的物质和透明的物质。
光学显微镜分类和用途好嘞,咱们今天聊聊光学显微镜的分类和用途,听起来是不是有点高大上,但其实也没那么复杂,大家放轻松啊!光学显微镜,就像是个小小的魔法盒子,把那些肉眼看不到的东西变得清清楚楚,简直就像是给眼睛开了个挂,哈哈。
先说说光学显微镜的分类。
最常见的就是简单显微镜了。
它就像是个小朋友,简单又直白,只有一两个镜头,用起来没啥复杂的,适合初学者。
想看看植物的细胞,或者给小昆虫拍个特写,简单显微镜简直就是个“高倍近拍”的好帮手。
再来就是复合显微镜,这可是个有点“架子”的家伙,配备了多个镜头,放大倍数高得惊人。
能把细胞内部结构看得一清二楚,就像在看一部微缩版的“冰雪奇缘”,各种细胞在里面跳舞,特别有趣。
咱们得聊聊荧光显微镜。
这东西可神奇了,它能通过荧光染料来观察细胞,简直像是给细胞穿上了闪闪发光的衣服。
研究人员用它来追踪细胞的运动,搞清楚细胞是怎么工作的,像是在探险,发现了一个个隐藏的“秘密基地”。
哇,真是太酷了。
再说说相差显微镜,这玩意儿有点技术含量,但别担心,咱们简单说。
它可以在不染色的情况下观察活细胞,像是给细胞装了个“夜视镜”,可以清晰看到细胞的形态变化。
这对于研究生物学的朋友来说,简直是如获至宝。
还有电子显微镜,虽然严格意义上不算光学显微镜,但也得提一提。
它用电子束而不是光线来成像,放大倍数那是高得惊人,能看到细胞的超细微结构,真是让人惊掉下巴。
说完了分类,咱们再聊聊这些显微镜的用途。
简单显微镜适合学校的小实验,孩子们能在课堂上观察小虫子,真是乐趣无穷。
复合显微镜则是研究机构的宠儿,能用它研究疾病、细胞分裂,甚至找出病毒的“藏身之处”。
想象一下,科学家们在显微镜下,像侦探一样破案,揭开一个个医学谜团,真是让人热血沸腾!荧光显微镜在医学研究中也是个得力助手,尤其是在癌症研究上,它能帮助医生更好地观察肿瘤细胞,寻找最佳的治疗方案。
每当看到细胞在显微镜下闪闪发光,研究人员心里都乐开了花,感觉自己就是在拯救世界的超级英雄。
显微镜现在的光学显微镜可把物体放大1600倍,分辨的最小极限达0.11微米,国内显微镜机械筒长度一般是160毫米。
显微镜系统中共轭距是物镜物方焦点到目镜物方焦点的距离。
物镜通过转换器旋转式物镜是显微镜最复杂和最重要的部分,在宽光束中工作(孔径大),但这些光束与光轴的倾角较小(视场小);目镜在窄光束中工作,但其倾角大(视场大).当计算物镜与目镜,在消除象差上有很大差别。
成像原理显微镜主要由目镜和物镜来进行成像,它们都是凸透镜,焦距不同。
物镜的凸透镜焦距小于目镜的凸透镜的焦距。
物镜相当于投影仪的镜头,物镜成像规律:f<u<2f,成放大倒立实像;目镜相当于普通的放大镜,目镜成像规律:u<f,成放大正立虚像(注:这里的正立是相对于物镜所成的像)故最后成出来的像是倒立放大的。
光学显微镜是根据凸透镜的成像原理,要经过凸透镜的两次成像。
第一次先经过物镜(凸透镜1)成像,这时候的物体应该在物镜(凸透镜1)的一倍焦距和两倍焦距之间,根据物理学的原理,成的应该是放大的倒立的实像。
而后以第一次成的物像作为“物体”,经过目镜的第二次成像。
由于我们观察的时候是在目镜的另外一侧,根据光学原理,第二次成的像应该是一个虚像,这样像和物才在同一侧。
因此第一次成的像应该在目镜(凸透镜2)的一倍焦距以内,这样经过第二次成像,第二次成的像是一个放大的正立的虚像。
如果相对实物说的话,应该是倒立的放大的虚像。
反光镜用来反射,照亮被观察的物体。
反光镜一般有两个反射面:一个是平面镜,在光线较强时使用;一个是凹面镜,在光线较弱时使用,可会聚光线。
显微镜由物镜和目镜组成。
物体AB在物镜前焦面稍前处,经物镜成放大、倒立的实像A'B',它位于目镜前焦面或稍后处,经目镜成放大的虚像,该像位于无穷远或明视距离处。
对正常眼,位于上,显微镜光学筒长为。
放大倍数显微镜包括两组透镜——物镜和目镜。
显微镜的的放大倍数主要通过物镜来保证,物镜的最高放大倍数可达100倍,目镜的放大倍数可达25倍。
金相显微镜科技名词定义中文名称:金相显微镜英文名称:metallurgical microscope定义:用入射照明来观察金属试样表面(金相组织)的显微镜。
百科名片金相显微镜是将光学显微镜技术、光电转换技术、计算机图像处理技术完美地结合在一起而开发研制成的高科技产品,可以在计算机上很方便地观察金相图像,从而对金相图谱进行分析,评级等以及对图片进行输出、打印。
系统简介电脑型金相显微镜系统是将传统的光学显微镜与计算机金相显微镜(数码相机)通过光电转换有机的结合在一起,不仅可以在目镜上作显微观察,还能在计算机(数码相机)显示屏幕上观察实时动态图像,电脑型金相显微镜并能将所需要的图片进行编辑、保存和打印。
技术参数1.目镜类型放大倍数焦距(mm)视场(mm)大视野目镜10X 25 Φ18目镜倍数:10x /16x/20x(可选)2.物镜物镜类型放大倍数数值孔径工作距离(mm)平场消色差物镜(无盖玻片)5X 0.12 18.310X 0.25 8.940X 0.60 3.760X 0.85 0.2680x 0.9 0.183.光学放大倍数:50X 100X 400X 600X1000X4.系统参考放大倍数:50X-2600X5.照明系统落射照明:6V/20W卤素灯,亮度可调;220V(50Hz)透射照明:6V/20W卤素灯,亮度可调;220V(50Hz)6.载物台:大小185mm*142mm移动范围75mm*50mm7.调焦系统:带限位和调节松紧装置的同轴粗微动,微动格值0.001mm8.瞳距调节范围:53-75mm9.滤色片组:转盘式,黄色、蓝色、绿色、磨砂玻璃10.偏光装置:可插入式起偏振片和三目头内置检偏振片11.防霉:特有的防霉系统系统组成电脑型金相显微镜(GSM-C289A):1、金相显微镜2、适配镜3、摄像器(CCD) 4、A/D(图像采集) 5、计算机数码相机型金相显微镜(GSM-C289A):1、金相显微镜2、适配镜3、数码相机仪器的选购件1.金相图像测量软件COMPANY2.金相分析软件SEVENOCEAN用途GSM-C289A系列透反射金相显微镜适宜于微小和不方便倒置的试样,及需要寻找特定范围目标试样的观察研究和分析。
倒置显微镜图册进入20世纪80年代以来,光学显微镜的设计和制作又有了很大的发展,其发展趋势主要表现在,注重实用性和多功能方面的改进。
在装配设计上趋于采用组合方式,集普通光镜加相差、荧光、暗视野、DIC、摄影装置于一体,从而操作灵活,使用方便。
同样倒置显微镜也结合其他技术,下面简单介绍一些:莱卡倒置显微镜.MC006-5XB-PC金相显微镜主要用于鉴定和分析金属内部结构组织,它是金属学研究金相的重要仪器,是工业部门鉴定产品质量的关键设备,该仪器配用摄像装置,可摄取金相图谱,并对图谱进行测量分析,对图像进行编辑、输出、存储、管理等功能。
XDS-200倒置显微镜是一种载物台在物镜上面的生物显微镜,由于配有长工作距离的聚光镜,长工作距离平场消色差物镜及相衬装置,故可使用各种培养皿和培养瓶,特别适用于对活体细胞和组织,流质,沉淀物等进行显微研究,该仪器可供科研,高校,医疗,防疫,农牧等部门使用。
XDS-200C电脑型倒置显微镜是将精锐的光学显微镜技术、先进的光电转换技术、尖端的计算机成像技术完美地结合在一起而开发研制成功的一项高科技产品。
既可人工观察显微图像,又可以在计算机显示器上很方便地适时观察显微图像,并可随时捕捉记录观察图片,从而对观察图像进行分析,处理等,还可以保存或打印出高像素图像照片。
4XBC电脑型双目倒置金相显微镜是将精锐的光学显微镜技术、先进的光电转换技术、尖端的计算机图像处理技术完美地结合在一起而开发研制成功的一项高科技产品。
可以在计算机显示器上很方便地观察金相图像,从而对金相图谱进行分分析,评级等对图片进行输出、打印。
显微镜成像清晰,视野宽广,整体设计符合人机功能,适合长时间操作。
可广泛地应用在工厂或实验室进行铸件质量的鉴定。
原材料的检验或对材料处理后金相组织的研究分析等工作。
本仪器是系倒置式金相显微镜,由于试样被观察表面与工作台表面重合,因此与试样高度无关,便用方便,仪器结构紧凑,外形美观大方,仪器底座支承面积较大,弯臂坚固,使仪器的重心较低安放平稳可靠,由于目镜与支承面呈45度倾斜,使观察舒适。
显微镜的分类和用途显微镜将微小物体或物体的微细部分高倍放大,以便观察的仪器或设备。
它广泛应用于工农业生产及科学研究。
生物学和医学工作者在业务中也经常使用显微镜。
大致分为光学显微镜和电子显微镜。
光学显微镜即以可见光为光源的显微镜。
普通的光学显微镜在结构上可分为光学系统和机械装置两个部分。
光学系统主要包括目镜、物镜、聚光器、光阑及光源等部分。
机械装置主要包括镜筒、镜柱、载物台、镜座、粗细调节螺旋等部分(图1 [光学显微镜])。
其基本光学原理如图2[光学显微镜成像原理模式图],图中左边小的凸透镜代表短焦距的一组透镜,称物镜。
右边大的凸透镜代表长焦距的一组透镜,称目镜。
被观察的物体(AB)放在物镜焦点(f)稍外的地方。
物体的光线通过物镜后在目镜焦点(f)稍内方形成一个倒立的放大实像(BA)。
观察者的眼睛通过目镜将该实像(BA)进一步放大为一个倒立的虚像(BA)。
目镜位于显微镜筒的上方,一般由两个凸透镜构成。
它除了进一步扩大物镜所形成的实像之外,也限制了眼睛所观察的视野。
按放大率分,常用目镜有5倍、10倍和15倍三种。
物镜一般位于显微镜筒的下方,接近所观察的物体。
由8~10片透镜组成。
其作用一是放大(给物体造成一个放大的实像),二是保证像的质量,三是提高分辨率。
常用物镜可按放大率分为低倍(4×)、中倍(10×或20×)、高倍(40×)和油浸物镜(100×)。
多个物镜共同镶在换镜转盘上,可以按需要转动转盘选择不同倍数的物镜。
显微镜的放大倍数为目镜倍数乘物镜倍数,如目镜为10倍,物镜为40倍,则放大倍数为40×10倍(放大400倍)。
优良的显微镜可放大2000倍,可分辨相距1×10cm的两点。
当白光通过凸透镜时,波长较短的光(蓝紫色),其折射度大于长波长的光(红橙色),因此,成像时在像周出现各色光谱围绕,并且有一圈蓝色或红色的辉光,这种颜色上的缺陷称为色差。
由于光线进入(和离开)透镜镜面各部分的角度不同,从透镜四周透过的光线与从透镜中心透过的光线相比,其折射角度较大。
因此,成像时在像周出现模糊而歪曲的影像。
这种成像面弯曲的缺陷称为球面差。
一系列形状、结构和距离不同的凸和凹透镜组互相配合,便能最大限度地纠正色差和球面差,形成一个明亮、清晰而准确的影像。
这就是目镜或物镜分别由一组透镜构成的缘故。
这种透镜称为平场消色差透镜。
光线从一种介质(如空气)投射到另一种较为致密的介质(如玻璃)中时会弯向“法线”(与介质交界面垂直的一条线),如图3 [光线通过物镜时的情况]中的BOA线。
光线由致密介质(玻璃)进到不致密介质(空气)中时会偏离“法线”,如AOB线(图3a)当光线穿过聚光镜玻璃(折射率为1.51)进入空气时同样会偏离,向外折射,因此进入物镜的光量减少很多,像的分辨力也降低。
使用100倍物镜时,如果在物镜和盖玻片之间充以油液(折射率同样为1.51)以隔绝空气,则光线几乎可以不折射地进入物镜,这就增加了像的亮度和分辨率。
这种物镜称为油浸物镜(图3b)。
聚光器位于显微镜台的下方,可会聚来目光源的光线,将光量集中于标本,使标本受到光强适度的均匀照射。
聚光器的下端装有孔径光阑(光圈)以控制光束的粗细。
普通光学显微镜的照明光源位于聚光器的下方,为特制的照度均匀的强光灯泡,并且配有可变电阻,可以改变光线的强度。
由于普通光学显微镜的光源光线自镜体下方向上透射,通过聚光镜、物镜,达到目镜,因此在医学及生物学研究中必须将被观察的样品切成能透过光线的、厚约6m 的薄片,并且要进行染色以显示不同的组织和细胞等细微结构。
整个加工过程称常规组织制片技术,包括选取适当的组织材料经甲醛(福尔马林)液固定,逐级酒精脱水,石蜡包埋,用切片机将组织切成薄片裱在玻璃片上,再经苏木素―伊红染料着色,最后将组织玻片封固在光学树脂胶内。
制好的组织玻片可长期保存。
显微镜的目镜和物镜安装在镜筒的两端,它们的距离是固定的。
将组织玻片放在载物台上,旋转粗调螺旋使载物台接近物镜。
组织切片进入物镜第一焦平面,目镜内即可见标本内的组织影像。
然后用细调螺旋使目镜内的影像清晰即可进行观察。
改换放大倍数时就要调换目镜或物镜。
(一)、按使用目镜的数目可分为单目、双目和三目显微镜。
单目价格比较便宜,可以作为初学爱好者的选择,双目稍贵点,观察的时候两眼可以同时观察,观察得舒适些,三目又多了一目,它的作用主要是连接数码相机或电脑用,比较适合长时间工作的人员选用。
(二)、根据其用途以及应用范围分为生物显微镜、金相显微镜、体视显微镜等。
1、生物显微镜是最常见的一种显微镜,在很多实验室中都可以见到,主要是用来观察生物切片、生物细胞、细菌以及活体组织培养、流质沉淀等的观察和研究,同时可以观察其他透明或者半透明物体以及粉末、细小颗粒等物体。
生物显微镜供医疗卫生单位、高等院校、研究所用于微生物、细胞、细菌、组织培养、悬浮体、沉淀物等的观察,可连续观察细胞、细菌等在培养液中繁殖分裂的过程等。
在细胞学、寄生虫学、肿瘤学、免疫学、遗传工程学、工业微生物学、植物学等领域中应用广泛。
2、体视显微镜又称为实体显微镜、立体显微镜,是一种具有正像立体感的目视仪器,广泛的应用于生物学、医学、农林等。
它具有两个完整的光路,所以观察时物体呈现立体感。
主要用途有:①作为动物学、植物学、昆虫学、组织学、考古学等的研究和解剖工具。
②做纺织工业中原料及棉毛织物的检验。
③在电子工业,做晶体等装配工具。
④对各种材料气孔形状腐蚀情况等表面现象的检查。
⑤对文书纸币的真假判断。
⑥透镜、棱镜或其它透明物质的表面质量,以及精密刻度的质量检查等。
3、金相显微镜主要是用来鉴定和分析金属内部结构组织,是金属学研究金相的重要仪器,是工业部门鉴定产品质量的关键设备,专门用于观察金属和矿物等不透明物体金相组织的显微镜。
这些不透明物体无法在普通的透射光显微镜中观察,故金相和普通显微镜的主要差别在于前者以反射光,而后者以透射光照明。
不仅可以鉴别和分析各种金属、合金材料、非金属物质的组织结构及集成电路、微颗粒、线材、纤维、表面喷涂等的一些表面状况,金相显微镜还可以广泛地应用于电子、化工和仪器仪表行业观察不透明的物质和透明的物质。
如金属、陶瓷、集成电路、电子芯片、印刷电路板、液晶板、薄膜、粉末、碳粉、线材、纤维、镀涂层以及其它非金属材在金相显微镜中照明光束从物镜方向射到被观察物体表面,被物面反射后再返回物镜成像。
所以用金相显微镜来检验分析金属内部的组织结构在工业生产中是十分重要的。
体视显微镜在工业生产中也可以用到,但是它只是用来观察金属表面划伤、划痕等,放大倍数一般在10X-50X 之间,金相的放大倍数一般在40X-400X,有些可以达到800X。
(三)、按光学原理可分为偏光、相差和微差干涉对比显微镜等(四)、医学和生物学常使用的光学显微镜有下列12种:暗视野显微镜在普通光学显微镜台下配一个暗视野聚光器(图4),来自下面光源的光线被抛物面聚光器反射,形成了横过显微镜视野而不进入物镜的强烈光束。
因此视野是暗的,视野中直径大于0.3m的微粒将光线散射,其大小和形态可清楚看到。
甚至可看到普通明视野显微镜中看不见的几个毫微米的微粒。
因此在某些细菌、细胞等活体检查中常常使用。
实体显微镜由双筒目镜和物镜构成。
放大率7~80倍。
利用侧上方或下方显微镜灯照明。
在目镜内形成一个直立的放大实像,可以观察未经加工的物体的立体形状、颜色及表面微细结构,并能进行显微解剖操作,也可以观察生物机体的组织切片。
荧光显微镜在短波长光波(紫外光或紫蓝色光,波长250~400nm)照射下,某些物质吸收光能,受到激发并释放出一种能量降级的较长的光波(蓝、绿、黄或红光,波长400~800nm),这种光称荧光。
某种物质在短光波照射下即可发生荧光,如组织内大部分脂质和蛋白质经照射均可发出淡蓝色荧光,称为自发性荧光。
但大部分物质需要用荧光染料(如吖啶橙、异硫氰酸荧光素等)染色后,在短光波照射下才能发出荧光。
荧光显微镜的光源为高压汞灯,发出的紫外光源经过激发滤光片(此滤光片可通过对标本中荧光物质合宜的激发光)过滤后射向普勒姆氏分色镜分色镜将激发光向下反射,通过物镜投射向经荧光染料染色的标本。
染料被激发并释放出荧光,通过物镜,穿过分色镜和目镜即可进行观察。
目镜下方安置有屏障滤片(只允许特定波长的荧光通过)以保护眼眼及降低视野暗度(图4 [荧光显微镜光学原理])。
荧光显微镜的特点是灵敏度高,在暗视野中低浓度荧光染色即可显示出标本内样品的存在,其对比约为可见光显微镜的100倍。
30年代荧光染色即已用于细菌、霉菌等微生物及细胞、纤维等的形态观察和研究。
如用抗酸菌荧光染色法可帮助在痰中找到结核杆菌。
40年代创造了荧光染料标记蛋白质的技术,这种技术现已广泛应用于免疫荧光抗体染色的常规技术中,可检查和定位病毒、细菌、霉菌、原虫、寄生虫及动物和人的组织抗原与抗体,可用以探讨病因及发病机理,如肾小球疾病的分类及诊断,乳头瘤病毒与子宫颈癌的关系等。
在医学实验研究及疾病诊断方面的用途日益广泛。
偏光显微镜从光源发出的光线通过空气和普通玻璃时,在与光线垂直的平面内的各个方向以同一振幅进行振动并迅速向前方传递,这是光的波动性原理。
空气与普通玻璃为各向同性体,又称单折射体。
如果该光源的光通过一种各向异性体(又称双折射体)时,会将一束光线分为各只有一个振动平面的,而且振动方向互相垂直的两束光线。
这两束光线的振动方向、速度、折光率和波长都不相同。
这样只有一个振动平面的光线称偏振光。
偏光显微镜即利用这一现象而设计。
偏光显微镜内,在物镜与目镜间插入一个检偏镜片,光源与聚光器间镶有起偏镜片,圆形载物台可以作360°旋转(图5[偏光显微镜光学原理])。
起偏与检偏镜片处于正交检偏位时,视野完全变黑。
将被检物体放在显微镜台上。
若被检物为单折射体,则旋转镜台,视野始终黑暗。
若旋转镜台一周,视野内被检物四明四暗,则说明被检物是双折射体。
许多结晶物质(如痛风结节中的尿酸盐结晶、尿结石、胆结石等),人体组织内的弹力纤维、胶原纤维、染色体和淀粉样原纤维等都是双折射体,可借偏振光显微镜术检验,进行定性和定量分析。
位相显微镜又称相差显微镜或相衬显微镜。
普通光学显微镜之所以看不见未染色的组织、细胞和细菌、病毒等活机体的图像,是因为通过样品的光线变化差别(反差)很小。
标本染色后改变了振幅(亮度)和波长(颜色),影响了反差而获得图像。
但是染色会引起样品变形,也可使有生命的机体死亡。
要观察不染色的新鲜组织、细胞或其他微小活体必须使用位相显微镜。
位相显微镜的原理是两个光波因位相差而互相干涉,出现光波强弱和反差的改变而成可见影像。
点光源发出的光线可以表现为正弦波图形(图6a[位相显微镜])。